检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2014年第6期44卷 583-588页

作者：白帆李媛吴金迪汪洋刘素丽周玉梅赵权辛九庆吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室东北黑龙江哈尔滨150001 农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为鉴定山羊支原体山羊肺炎亚种的黏附相关蛋白,通过对山羊支原体山羊肺炎亚种基因组编码的假定的膜蛋白基因(0297)进行扩增,并连接到pET-32a(+)载体,转化于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导获得了以可溶形式表达的重组蛋白,大小约为43ku... 详细信息

为鉴定山羊支原体山羊肺炎亚种的黏附相关蛋白,通过对山羊支原体山羊肺炎亚种基因组编码的假定的膜蛋白基因(0297)进行扩增,并连接到pET-32a(+)载体,转化于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导获得了以可溶形式表达的重组蛋白,大小约为43ku,将该重组蛋白命名为P0297。用纯化的P0297免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体。利用激光共聚焦显微镜观察到蓝色的细胞核周围有重组蛋白的绿色荧光存在,其外形与细胞膜的红色荧光基本重合,表明P0297对山羊气管上皮细胞有明显的黏附作用。夹心ELISA结果显示,重组蛋白P0297的黏附作用与蛋白浓度成正比,并且黏附作用可被多克隆抗体阻断,说明该重组蛋白的黏附为特异性黏附。上述结果表明,P0297蛋白是山羊支原体山羊肺炎亚种的一个黏附相关蛋白。

关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种黏附因子特性

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犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型转移载体的构建及真核表达

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中国兽医科学 2014年第8期44卷 829-832页

作者：郭焕平张守发高洋贾洪林贾立军延边大学农学院动物医学系吉林延吉133002 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室美国密西根州立大学天然免疫联合实验室黑龙江哈尔滨150001

为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒pBS-TK-NcAMA1,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,扩增犬新孢子虫AMA1基因,并将其亚克隆至重组质粒pBS-TK。通过转染试剂PEI将pBS-TK-NcAMA1转移载体转染至293... 详细信息

为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒pBS-TK-NcAMA1,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,扩增犬新孢子虫AMA1基因,并将其亚克隆至重组质粒pBS-TK。通过转染试剂PEI将pBS-TK-NcAMA1转移载体转染至293T细胞,以制备的小鼠抗犬新孢子虫AMA1蛋白的特异性抗体为一抗,应用间接免疫荧光试验和Western-blot对基因的表达情况进行鉴定。结果显示,构建的病毒转移载体pBS-TK-NcAMA1可以在293T细胞内获得表达,表达蛋白的分子质量为68ku。这一研究成果为犬新孢子虫AMA1基因的重组猫疱疹病毒1型载体疫苗的研制奠定了基础。

关键词：犬新孢子虫 NcAMA1基因猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒表达

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隐丹参酮抗肿瘤转移的研究进展

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中国药理学通报 2014年第7期30卷 893-896页

作者：叶欢阮君山王少明福建省立医院药学部福建医科大学省立临床医学院福建省立医院中医药分子生物学实验室福建福州350001

隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)作为活血化瘀药丹参脂溶性成分中的代表性成分,其在心血管疾病、抗肿瘤及神经退行性疾病等方面显示出很好的前景,使其逐渐成为人们关注的对象。大量实验与临床研究证明,CPT主要通过抑制肿瘤细胞增殖、诱... 详细信息

隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)作为活血化瘀药丹参脂溶性成分中的代表性成分,其在心血管疾病、抗肿瘤及神经退行性疾病等方面显示出很好的前景,使其逐渐成为人们关注的对象。大量实验与临床研究证明,CPT主要通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成及抑制肿瘤细胞的侵袭黏附,从而在一定程度上阻碍肿瘤细胞侵袭和防止其向远处转移。该文主要对CPT抗肿瘤转移作用的研究进展做一综述。

关键词：隐丹参酮肿瘤转移整合素凋亡抑制增殖侵袭

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化合物T44的抗肿瘤活性研究

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河北医科大学学报 2014年第5期35卷 517-521页

作者：张晶张智慧刘伟陈云雨王艳宏司书毅中国医学科学院医药生物技术研究所国家新药(微生物)筛选实验室北京100050 黑龙江中医药大学药学院药剂教研室黑龙江哈尔滨150040

目的评估化合物1-[4'-((3R,5R)-金刚烷基)苯基)]正丁胺盐酸盐(T44)的体外抗肿瘤活性,并初步探索可能的分子机制,为这种化合物的综合应用提供实验依据。方法四甲基偶氮唑蓝比色法检测T44对细胞的体外生长抑制作用;细胞形态观察法研究... 详细信息

目的评估化合物1-[4'-((3R,5R)-金刚烷基)苯基)]正丁胺盐酸盐(T44)的体外抗肿瘤活性,并初步探索可能的分子机制,为这种化合物的综合应用提供实验依据。方法四甲基偶氮唑蓝比色法检测T44对细胞的体外生长抑制作用;细胞形态观察法研究T44对细胞形态的影响;流式细胞仪法检测T44作用下肿瘤细胞周期和凋亡率的变化;蛋白印迹法检测T44对不同周期蛋白表达的影响;细胞划痕实验检测T44对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果 T44对检测的11株肿瘤细胞的增殖均有抑制效果,对正常细胞人胚肺成纤维细胞也具有一定的增殖抑制作用,半数抑制浓度值为(16.58±3.49)μmol/L,高于受测的大部分肿瘤细胞;T44能导致肿瘤细胞凋亡和周期阻滞;T44能影响周期蛋白的表达并能降低HCT116细胞的迁移能力。结论 T44主要通过促进细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用。

关键词：抗肿瘤药细胞增殖细胞周期细胞凋亡

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鸡组蛋白去乙酰化酶3的重组表达与结构信息学分析

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中国兽医科学 2014年第10期44卷 1066-1072页

作者：路义鑫刘兵马雪婷殷昊龚振兴宋铭忻袁金钱蔡建平东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为比较柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)与鸡的组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3,HDAC3)蛋白质序列和结构差异,以发现和筛选*** HDAC3(EtHDAC3)的特异性抑制物。用RTPCR方法从杂交黄羽肉鸡的肠上皮细胞克隆ChHDAC3基因,以原核表... 详细信息

为比较柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)与鸡的组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3,HDAC3)蛋白质序列和结构差异,以发现和筛选*** HDAC3(EtHDAC3)的特异性抑制物。用RTPCR方法从杂交黄羽肉鸡的肠上皮细胞克隆ChHDAC3基因,以原核表达载体pMAL-C2X构建重组质粒pMAL-C2X-ChHDAC3,经双酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌Transetta,进行IPTG诱导表达。使用Swiss-Model对ChHDAC3和EtHDAC3进行同源建模,比较分析ChHDAC3和EtHDAC3的活性位点。利用Autodock 4.2进行分子对接,研究抑制剂Apicidin与ChHDAC3、EtHDAC3结合模式的差异。结果显示,克隆的ChHDAC3基因的ORF由1 287个核苷酸组成,编码428个氨基酸,能在大肠杆菌中进行可溶性表达。构建的ChHDAC3和EtHDAC3的三维模型均由8个串联的β折叠和11个α螺旋组成,其活性位点高度保守,仅在表面识别区有1个氨基酸的差异。Apicidin与EtHDAC3有更低的结合能,提示Apicidin对EtHDAC3具有更强的抑制活性和选择性。

关键词：鸡 HDAC3 同源建模分子对接

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新型网状聚乙烯亚胺衍生物基因载体的构建及体外评价

新型网状聚乙烯亚胺衍生物基因载体的构建及体外评价

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第十二届全国青年药学工作者最新科研成果交流会

作者：丁学芳王伟王玉周建平中国药科大学药剂教研室南京医科大学药理教研室

目的:以聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)为骨架材料,合成了依普罗沙坦(eprosartan,ES)-聚乙烯亚胺偶联物(eprosartan-g-PEI conjugate,ESP),并考察其作为基因载体的可行性。方法:采用酰胺合成原理制备ESP,核磁共振氢谱对ESP的结构进... 详细信息

目的:以聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)为骨架材料,合成了依普罗沙坦(eprosartan,ES)-聚乙烯亚胺偶联物(eprosartan-g-PEI conjugate,ESP),并考察其作为基因载体的可行性。方法:采用酰胺合成原理制备ESP,核磁共振氢谱对ESP的结构进行表征;在此基础上考察了ESP的质子缓冲能力和细胞毒性,ESP对pDNA的包裹能力,ESP/pDNA复合物的粒径、zeta电位和形态。结果;ESP的缓冲能力明显高于PEI-1.8K,且与PEI-25K的缓冲能力相当;N/P≥4时,ESP能很好的包裹pDNA;当N/P≥12时,ESP/pDNA复合物的粒径稳定在150～170nm,zeta电位稳定在18～20 mV;细胞实验表明ESP的毒性远远小于PEI-25K。结论:ESP有希望成为一种具有良好的应用前景的高效低毒的基因载体。

关键词：基因载体依普罗沙坦聚乙烯亚胺

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循环microRNAs在心血管疾病中的功能研究进展

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中国临床药理学杂志 2013年第3期29卷 231-233页

作者：石长春牛慧芳张荣哈尔滨医科大学药学院药理教研室

microRNAs(miRNAs)是一类真核生物内源性小分子单链RNA,通过与靶mRNA特异性结合来调节基因表达。miRNA除了在细胞内有作用,体液中稳定表达的miRNA在心血管疾病、肿瘤发生等过程中也起了重要作用,循环miRNA可作为潜在的生物标志物用于疾... 详细信息

microRNAs(miRNAs)是一类真核生物内源性小分子单链RNA,通过与靶mRNA特异性结合来调节基因表达。miRNA除了在细胞内有作用,体液中稳定表达的miRNA在心血管疾病、肿瘤发生等过程中也起了重要作用,循环miRNA可作为潜在的生物标志物用于疾病的诊断。本文对血液中几个重要的循环miRNA亚型在心血管疾病发病机制中的作用进行了系统的综述。

关键词：循环microRNA 心血管疾病生物标志物

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脂肪分化障碍引起的胰岛素抵抗、脂肪肝及高胆固醇血症小鼠模型研究

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中药新药与临床药理 2014年第1期25卷 96-101页

作者：李凤霞李金磊荣向路王春怡雷燕郭姣广州中医药大学临床药理研究所广东广州510405 广州中医药大学中药学院广东广州510006 广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室广东广州510006 中国中医科学院医学实验中心北京100700 广东药学院广东广州510006

目的观察aP2-SREBP-1c转基因小鼠糖脂代谢生物特征,探讨其在糖脂代谢紊乱性疾病研究中的应用。方法动物分为aP2-SREBP-1c转基因小鼠及其同窝野生型小鼠2组,均为雌性,观察两组小鼠体质量、进食量、进水量,不禁食及禁食12 h血中TG、TC、LD... 详细信息

目的观察aP2-SREBP-1c转基因小鼠糖脂代谢生物特征,探讨其在糖脂代谢紊乱性疾病研究中的应用。方法动物分为aP2-SREBP-1c转基因小鼠及其同窝野生型小鼠2组,均为雌性,观察两组小鼠体质量、进食量、进水量,不禁食及禁食12 h血中TG、TC、LDL-C、Glu水平,肝脏、肌肉脂质含量,口服糖耐量、胰岛素及瘦素,稳态胰岛素(HOMA-IR),脂肪、肝脏病理组织学变化。结果与野生型比较,aP2-SREBP-1c转基因小鼠肾周、性腺周围、皮下脂肪均明显减少(P<0.01),褐色脂肪明显增加(P<0.01),肝脏切片显示明显脂肪肝病理变化,肝脏质量明显增加(P<0.01),血中胰岛素、葡萄糖水平及HOMA-IR明显增加(P分别<0.01、0.05、0.001),瘦素明显下降(P<0.01),禁食状态血中TC、LDL-C水平均显著升高(P<0.05,P<0.01),显示存在明显的脂肪分化障碍、胰岛素抵抗、高胆固醇血症和脂肪肝。结论 aP2-SREBP-1c转基因小鼠可用于糖尿病、脂肪肝、高胆固醇血症等糖脂代谢紊乱疾病的研究。

关键词： aP2-SREBP-1c转基因小鼠动物模型糖脂代谢紊乱脂肪分化障碍胰岛素抵抗脂肪肝高胆固醇血症

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弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达

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中国兽医科学 2014年第1期44卷 73-77页

作者：路静张念章田维鹏殷铭阳王瑞爱周东辉朱兴全翁亚彪华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。... 详细信息

为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约46ku的重组融合蛋白,在37℃、IPTG浓度为1.0mmol/L、诱导6h的情况下表达效果最好。重组蛋白经纯化后进行的Western-blot分析证实,表达、纯化的弓形虫RH株HSP40蛋白具有良好的反应原性,与弓形虫基因Ⅰ型的RH株、基因Ⅱ型的PRU株以及基因型为ToxoDB9的TgC7株和GJS株的阳性血清均可发生特异性反应,预期可作为弓形虫病ELISA诊断方法的候选抗原。本研究结果为弓形虫病新型诊断方法的建立奠定了基础。

关键词：弓形虫 HSP40蛋白克隆原核表达反应原性

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β-内酰胺酶抑制剂研究进展

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中国抗生素杂志 2013年第11期38卷 805-809页

作者：蔡文辉张文莉付英梅张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江省医学科学院细菌学研究室哈尔滨150086 黑龙江中医药大学微生物与免疫学教研室哈尔滨150040

β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β... 详细信息

β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β-内酰胺酶,常与阿莫西林联合应用,可使阿莫西林对某些细菌的MIC值降低。随着抗生素的大量使用以及具有β-内酰胺酶相关的耐药性的细菌的增加,许多β-内酰胺酶抑制剂相继被发现。根据β-内酰胺酶抑制剂的结构,主要将其分为含有β-内酰胺环结构的抑制剂和不含β-内酰胺环结构的抑制剂。本文就目前国内外β-内酰胺酶抑制剂的研究现状进行综述。

关键词： β-内酰胺酶酶抑制剂细菌耐药

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