检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2013年第3期43卷 256-260页

作者：潘佳亮高利相文华戚亭郭巍东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001

为了建立可特异性地检测血清中非洲马瘟病毒抗体的方法,优化并合成非洲马瘟病毒VP7蛋白基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,目的蛋白获得了高效表达,且有... 详细信息

为了建立可特异性地检测血清中非洲马瘟病毒抗体的方法,优化并合成非洲马瘟病毒VP7蛋白基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,目的蛋白获得了高效表达,且有特异的免疫学活性。用纯化的重组蛋白作为检测抗原,建立了检测血清中非洲马瘟病毒抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA的抗原包被量、血清稀释度、封闭液的选择等反应条件进行了优化。所建立的间接ELISA方法可以鉴别血清中的非洲马瘟病毒抗体,具有良好的特异性和灵敏性,与标准竞争ELISA试剂盒的符合率达100%。表明本研究建立的检测血清中非洲马瘟病毒抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性和灵敏性。

关键词：非洲马瘟病毒 VP7蛋白间接酶联免疫吸附试验

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内皮-单核细胞激活多肽对人U118胶质瘤细胞自噬的影响及机制

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中国药理学通报 2013年第7期29卷 922-926页

作者：刘丽波孟繁杰薛一雪刘云会中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110004

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对人U118脑胶质瘤细胞自噬的影响及可能机制。方法 EMAP-Ⅱ处理人U118胶质瘤细胞后,采用MTT检测细胞活力;用免疫荧光法检测自噬标记物微管相关蛋白轻链-3(LC3)在U118细胞的分布;Western blot方... 详细信息

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对人U118脑胶质瘤细胞自噬的影响及可能机制。方法 EMAP-Ⅱ处理人U118胶质瘤细胞后,采用MTT检测细胞活力;用免疫荧光法检测自噬标记物微管相关蛋白轻链-3(LC3)在U118细胞的分布;Western blot方法检测LC3-Ⅱ、自噬降解底物p62/SQSTM1和自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,0.05 nmol.L-1剂量以上的EMAP-Ⅱ可明显抑制人U118胶质瘤细胞的活力,降低线粒体膜电位(MMP),在EMAP-Ⅱ作用0.5 h时效果最明显;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)能够阻断EMAP-Ⅱ的作用,使细胞活力和线粒体膜电位基本恢复;EMAP-Ⅱ作用0.5 h后自噬标记物LC3在胞质内呈点状分布,荧光表达明显增强,并且LC3-Ⅱ的蛋白表达水平明显上调;同时伴有自噬降解底物p62/SQSTM1的表达下降;此外,自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达水平明显上调。结论 EMAP-Ⅱ能明显抑制人U118胶质瘤细胞活力,诱导U118细胞发生自噬,其机制可能与自噬相关蛋白Beclin1上调有关。

关键词：内皮-单核细胞激活多肽人U118胶质瘤细胞自噬 LC3 p62/SQSTM1 Beclin1

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抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定

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中国兽医科学 2013年第10期43卷 1035-1039页

作者：赵世华戚亭郭巍田志革朱超相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(M... 详细信息

为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA反应后,针对表位序列11 ASFRNGRRRQPTSYND26,进一步通过合成短肽对2株MAbs进行精确定位;结果表明,2B3识别的抗原表位为18 RRQPTSYND26,2B9针对的抗原表位为18 RRQPTSYND26。本研究结果为建立EVA的血清学检测方法及研究N蛋白的结构和功能奠定了基础。

关键词：马动脉炎病毒单克隆抗体肽扫描表位

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DNA损伤修复调控因子与肿瘤耐药的研究进展

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现代肿瘤医学 2013年第11期21卷 2608-2612页

作者：赵欣楠魏敏杰赵琳中国医科大学中国医科大学药学院药理教研室辽宁沈阳110001

DNA分子是生物细胞中易受辐射损伤的敏感分子,亦称靶分子。多种理化因素如紫外线、电离辐射、化学诱变剂等导致细胞DNA损伤,同时生物体内本身又存在修复体系。肿瘤细胞DNA修复能力与化疗药物敏感性密切相关。本文综述DNA损伤修复机制-... 详细信息

DNA分子是生物细胞中易受辐射损伤的敏感分子,亦称靶分子。多种理化因素如紫外线、电离辐射、化学诱变剂等导致细胞DNA损伤,同时生物体内本身又存在修复体系。肿瘤细胞DNA修复能力与化疗药物敏感性密切相关。本文综述DNA损伤修复机制-碱基切除修复、核苷酸切除修复、错配修复、DNA双链断裂修复等研究进展以及与肿瘤耐药之间的联系。

关键词： DNA损伤修复肿瘤细胞耐药性

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FANCF基因与肿瘤发生和耐药性形成的研究进展

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现代肿瘤医学 2013年第7期21卷 1629-1632页

作者：王俊赵琳何苗魏敏杰中国医科大学中国医科大学药学院药理教研室辽宁沈阳110001

范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)是一种罕见的常染色体遗传病。FA复合体可通过FA/BRCA通路参与细胞周期调控、细胞凋亡、DNA修复等生命信号转导与调控。范可尼贫血相关基因F(Fanconi anemia complementation group F,FANCF)作为关键因子... 详细信息

范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)是一种罕见的常染色体遗传病。FA复合体可通过FA/BRCA通路参与细胞周期调控、细胞凋亡、DNA修复等生命信号转导与调控。范可尼贫血相关基因F(Fanconi anemia complementation group F,FANCF)作为关键因子,参与FA复合体稳定、FANCD2泛素化及FA/BRCA通路生物学功能调控。研究表明,FANCF在肿瘤的发生和耐药性形成发挥重要作用。本文对该方面的相关研究进行综述。

关键词： FANCF FA BRCA通路肿瘤耐药

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土壤中食线虫真菌的分离与鉴定

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中国兽医科学 2013年第9期43卷 881-887页

作者：朱海关贵全任巧云李有全刘爱红马米玲殷宏路义鑫宋铭忻罗建勋东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采用线虫诱导培养方法,自甘肃、青海、新疆、陕西、河南等五省(区)采集的234份土壤样品中分离获得了食线虫真菌23株,形态学分类研究表明,它们分属于9属22个种(包括:节丛孢属9个种、隔指孢属2个种、单顶孢属4个种、镰刀菌属2个种、钩丝孢... 详细信息

采用线虫诱导培养方法,自甘肃、青海、新疆、陕西、河南等五省(区)采集的234份土壤样品中分离获得了食线虫真菌23株,形态学分类研究表明,它们分属于9属22个种(包括:节丛孢属9个种、隔指孢属2个种、单顶孢属4个种、镰刀菌属2个种、钩丝孢属2个种、轮枝孢属1个种、被孢霉属1个种和茎点霉属1个种)和1株未定种。本研究为开展家畜线虫病的生物防治研究奠定了基础。

关键词：食线虫真菌分离鉴定线虫

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淫羊藿生品及不同炮制品小鼠药代动力学特征的比较研究

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中国中药杂志 2013年第10期38卷 1614-1617页

作者：崔莉孙娥钱浅樊宏伟邹建军贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 南京中医药大学药学院江苏南京210046 南京医科大学附属南京第一医院临床药理实验室江苏南京210006

淫羊藿生品及不同炮制品的提取物对小鼠体内药代动力学特征参数的影响不同。为探索其炮制用药的合理性,作者分别灌胃给小鼠淫羊藿生品、加热品以及羊脂油制品提取液,以超氧化物歧化酶(SOD)升高量为指标,采用药理效应法得到时间-体存生... 详细信息

淫羊藿生品及不同炮制品的提取物对小鼠体内药代动力学特征参数的影响不同。为探索其炮制用药的合理性,作者分别灌胃给小鼠淫羊藿生品、加热品以及羊脂油制品提取液,以超氧化物歧化酶(SOD)升高量为指标,采用药理效应法得到时间-体存生物相当药量的关系。由DAS 2.0软件分析,比较其药代动力学参数。结果表明,三者的达峰浓度Cmax、药时曲线下面积AUC等药动学特征参数均具有显著性差异,油制品>加热品>生品。从而得出淫羊藿经加热后生物利用度提高,而辅料羊脂油进一步促进其体内吸收这一结论。

关键词：淫羊藿炮制药代动力学药理效应法

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腺嘌呤核苷受体介导肿瘤坏死因子-α开放血肿瘤屏障的作用及其机制

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中国药理学通报 2013年第9期29卷 1248-1251页

作者：秦丽娟谷艳婷王艳蕾张田贾永森王小君孙娜薛一雪河北联合大学基础医学院河北唐山063000 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院生理学教研室辽宁沈阳110016 河北联合大学中医学院河北唐山063000 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的明确肿瘤坏死因子-α(TNF-α)开放血肿瘤屏障的作用及其可能机制。方法构建体外血肿瘤屏障模型,给予TNF-α后不同时间点,免疫组织化学法和Western blot法动态检测胶质瘤细胞的热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)和腺嘌呤核... 详细信息

目的明确肿瘤坏死因子-α(TNF-α)开放血肿瘤屏障的作用及其可能机制。方法构建体外血肿瘤屏障模型,给予TNF-α后不同时间点,免疫组织化学法和Western blot法动态检测胶质瘤细胞的热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)和腺嘌呤核苷受体(adenosine A1receptor,A1R)的表达水平;荧光分析法检测体外血肿瘤屏障模型的通透性改变。结果给予TNF-α后,胶质瘤细胞内HSP70表达增加,于30 min时含量最多。C6细胞内A1R的表达水平也在给予TNF-α后明显增加,并于120 min达高峰后逐渐减少。其血肿瘤屏障的通透性亦于给予TNF-α后120 min达最大后减少。结论经TNF-α作用后的胶质瘤细胞HSP70表达增加,增加的HSP70可能是通过某种内在机制提高A1R的表达水平,进而增加了血肿瘤屏障的通透性。

关键词： TNF-α胶质瘤血脑屏障血肿瘤屏障热休克蛋白 70 腺嘌呤核苷受体

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马疱疹病毒1型抗体间接ELISA检测方法的建立

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中国兽医科学 2013年第9期43卷 915-918页

作者：田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 新疆农业大学动物医学院新疆乌鲁木齐830052

以原核表达的具有型特异性抗原表位的马疱疹病毒1型(EHV1)gG蛋白作为检测抗原,经条件优化,成功建立了检测EHV1抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性及重复性试验。结果表明:重组EHV1gG蛋白仅与EHV1阳性血清发生反应,不与EHV4阳... 详细信息

以原核表达的具有型特异性抗原表位的马疱疹病毒1型(EHV1)gG蛋白作为检测抗原,经条件优化,成功建立了检测EHV1抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性及重复性试验。结果表明:重组EHV1gG蛋白仅与EHV1阳性血清发生反应,不与EHV4阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测结果比较,两者的阳性和阴性符合率均达到90%以上。表明,建立的间接ELISA方法可以用于检测EHV1抗体。

关键词：马疱疹病毒1型 gG蛋白间接ELISA 检测

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东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析

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中国兽医科学 2013年第2期43卷 208-212页

作者：李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性... 详细信息

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%～99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%～98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%～90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。

关键词：野生鸟类 B亚群禽白血病流行病学调查序列分析

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