检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏省遗传学会2013年学术研讨会

作者：乔凤昌张坤苏献伟王玲吴华彰公丕海樊红 "发育与疾病相关基因"教育部重点实验室东南大学生命科学研究院哈尔滨医科大学附属第三医院(哈尔滨医科大学附属肿瘤医院) 东南大学医学院

PITX1为同源盒基因家族的成员,参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,PITX1与一些肿瘤的发生发展有一定的关系。PITX1在胃癌中的调控机制及参与胃癌发生发展的作用并不清楚,对其研究将为胃癌发病机制的探讨和胃癌... 详细信息

PITX1为同源盒基因家族的成员,参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,PITX1与一些肿瘤的发生发展有一定的关系。PITX1在胃癌中的调控机制及参与胃癌发生发展的作用并不清楚,对其研究将为胃癌发病机制的探讨和胃癌的分子治疗提供实验基础。本研究在胃癌临床病例中的表达分析结果发现,Pitx1在肿瘤组织中低表达,但胃癌细胞系的研究未检测到该基因的低表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的影响。进一步应用mi RNAmicroarray筛查及靶标基因的预测,获得可能调控Pitx1的候选mi RNA:mi R-30a/b-5p、mi R-19a/b-3p。q PCR检测mi R-30a/b-5p在胃癌组织中的表达及与PITX1表达的相关性,发现mi R-30a/b-5p与Pitx1的表达水平无相关性或呈正相关,未提示mi R-30a/b-5p与Pitx1存在可能的靶向关系。双荧光素酶报告系统分析了获选mi RNA分子mi R-19a/b-3p与PITX1的靶向关系,结果显示mi R-19a-3p能靶向结合PITX1的3’-UTR区而影响PITX1的表达,而mi R-19b-3p靶向结合PITX1的能力较弱。mi R-19a-3p靶向结合PITX1下调了其在m RNA和蛋白水平的表达,提示mi R-19a-3p在转录及翻译水平均能抑制Pitx1表达。为了探讨Pitx1在胃癌中低表达的生物学意义,本研究进一步分析了PITX1对胃癌细胞系恶性增殖的影响。结果表明,PITX1的导入明显抑制了胃癌细胞系的细胞增殖,且导致癌细胞G1/S期阻滞,随后48hr细胞出现明显的凋亡现象。ChIP-seq的结果显示PITX1可能作为转录因子结合一些凋亡相关的基因并调控其表达,引起细胞凋亡。以上研究结果将为PITX1参与胃癌凋亡信号通路的研究提供新的观点,并为胃癌的治疗提供新的靶点。

关键词：胃癌 PITX1 mi RNA 细胞凋亡

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G蛋白偶联受体激酶活性调控及其在恶性肿瘤中的作用

G蛋白偶联受体激酶活性调控及其在恶性肿瘤中的作用

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2013年（第三届）中国药物毒理学年会暨药物非临床安全性评价研究论坛

作者：吴晶晶孙妩弋胡姗姗刘道芳魏伟安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药理学教育部重点实验室安徽安科生物工程(集团)股份有限公司

G蛋白偶联受体(GPCR),是一类重要的细胞表面受体。G蛋白偶联受体激酶(GRK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,其亚型广泛存在与各种组织,能够特异性地使活化的GPCR发生磷酸化及脱敏,从而终止GPCR介导的信号转导通路。新的研究还发现,GRK不... 详细信息

G蛋白偶联受体(GPCR),是一类重要的细胞表面受体。G蛋白偶联受体激酶(GRK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,其亚型广泛存在与各种组织,能够特异性地使活化的GPCR发生磷酸化及脱敏,从而终止GPCR介导的信号转导通路。新的研究还发现,GRK不仅作用于GPCR,也可以通过使非GPCR磷酸化或通过非磷酸化作用参与信号转导。GRK不仅能够调节GPCR和非GPCR,其自身活性也可受到多种因素的调节。本文结合GRK的多种功能作用和GRK活性调控,对GRK在脑、内分泌、生殖系统、消化系统及黑色素肿瘤中的作用做简要综述。

关键词： G蛋白偶联受体激酶磷酸化非磷酸化作用活性调控恶性肿瘤

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钙敏感受体通过PI3K信号通路介导缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1549-1553页

作者：李光伟李波康美佳徐斐翔邢文婧徐长庆齐齐哈尔医学院病理生理教研室黑龙江齐齐哈尔161006 哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150086 齐齐哈尔市第一医院胸心外科黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江生物医药工程重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的信号转导途径。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠PASMCs。通过缺氧培养箱内(93%N2、2%O2、5%CO2)培养24 h的方法复制细胞缺氧模型。应用Western blottin... 详细信息

目的:探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的信号转导途径。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠PASMCs。通过缺氧培养箱内(93%N2、2%O2、5%CO2)培养24 h的方法复制细胞缺氧模型。应用Western blotting分析不同处理情况下细胞周期素D1(cyclin D1)及磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)在PASMCs中的表达;采用流式细胞术检测不同处理因素对细胞增殖周期及增殖指数的影响,应用BrdU掺入法分析不同处理因素对细胞DNA合成的影响。结果:缺氧引起PASMCs的cyclin D1及p-Akt表达水平上调,增加BrdU掺入量、S期细胞数量和细胞增殖指数,GdCl3能够放大缺氧的作用,但上述效应可以被LY294002抑制。结论:CaSR通过PI3K/Akt信号通路参与缺氧诱导的大鼠PASMCs增殖。

关键词：受体,钙敏感肺动脉平滑肌细胞缺氧信号转导

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胃癌中Pitx1低表达的miRNA调控机制研究

胃癌中Pitx1低表达的miRNA调控机制研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：乔凤昌张坤王玲胡姣姣陆森樊红 “发育与疾病相关基因”教育部重点实验室东南大学生命科学研究院哈尔滨医科大学附属第三医院(哈尔滨医科大学附属肿瘤医院) 南京医科大学第一附属医院东南大学医学院遗传与发育生物学系

Pitxl为同源盒基因家族的成员,在个体发育过程中参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,Pitxl与一些肿瘤的发生发展有一定的关系,尤其在膀胱癌、前列腺癌组织(细胞)、肝癌、肺癌细胞中Pitxl为低表达模式,提示其在... 详细信息

Pitxl为同源盒基因家族的成员,在个体发育过程中参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,Pitxl与一些肿瘤的发生发展有一定的关系,尤其在膀胱癌、前列腺癌组织(细胞)、肝癌、肺癌细胞中Pitxl为低表达模式,提示其在肿瘤发生中的重要作用。我们的研究发现Pitxl在胃癌组织中低表达率达43.75%,Pitxl的低表达与其启动子区DNA甲基化无关。Pitxl基因的导入能明显抑制胃癌细胞的增殖,并阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡。作为候选的抑痛基因,研究其在胃癌中的表达模式、失活机制将对胃癌的发生发展机制有更深入的认识。近年研究发现,在肿瘤的发生、发展中除了蛋白质功能紊乱、DNA突变之外,还存在着大量RNA的异常,包括异常的microRNA(miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,IncRNA)、循环RNA等。miRNA参与个体发育的时序调控、细胞增殖与分化、凋亡、器官发育、脂肪代谢、神经系统的发育的调控,并与包括肿瘤等多种疾病的发生密切相关。本研究结合miRNA靶标预测软件TargetScan、PicTar、miRanda及胃癌组织miRNA microarray,获得可能调摔Pitxl的候选miRNA:miR-30a-5p、miR-30b-5p、miR-19a-3p和miR-19b-3p。实时定量PCR检测miR-30a/b-5p在胃癌组织中表达及与PITXl表达的相关性,结果显示miR-30a-5p的低表达率为60%,与Pitxl的表达水平没有明显的相关性:miR-30b-5p的低表达率为61.2%,与Pitxl的表达呈正相关;胃癌细胞系中miR-30a/b-5p与PITX1表达的相关性的结果与胃癌组织中所获结果一致。基于miRNA与靶基因的靶向负调控关系,本研究结果未提示miR-30a/b-5p与Pitxl存任靶向关系。双荧光素酶报告系统分析了候选miRNA分子miR-19a/b-3p与PITXl的靶向关系。分别构建PITXl的3'-UTR区及突变体的载体,转染胃癌细胞系并测定荧光素酶活性,结果显示miR-19a-3p能靶巴向结合PITXl的3'-UTR区使荧光素酶活性明显降低。qPCR/western blot检测Pitxl mRNA和蛋白水平的表达发现miR-19a-3p能明显降低Pitxl的mRNA和蛋白水平的表达,提示miR-19a-3p不仅在转录水平降解了Pitxl的mRNA,同时在翻译水平亦抑制其蛋白表达。miR-19b-3p靶向结合PITXl的3'-UTR区能力较弱,提示miR-19b-3p不能单独抑制Pitxl的表达。本研究发现Pitxl在胃癌中低表达且与DNA甲基化无关,与miR-19a-3p的表达有关。双荧光素酶报告系统分析显示miR-19a-3p参与调控胃癌中Pitxl的表达,这一结果尚需在大样本胃癌病例中进一步验证。

关键词：胃癌 Pitx1 miRNAs DNA甲基化

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腾冲嗜热厌氧杆菌EndoTT体内功能研究

腾冲嗜热厌氧杆菌EndoTT体内功能研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：王川靳春雷谭华荣中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室温州医科大学检验医学院生命科学学院

单链DNA结合蛋白（single strand DNA-binding proteins）是专门负责与单链DNA结合的一种蛋白质,在DNA复制、重组和修复过程中起重要作用。腾冲嗜热厌氧杆菌（Thermoanaerobacter tengcongensis MB4）中有三个单链结合蛋白,其中的Tte082... 详细信息

单链DNA结合蛋白（single strand DNA-binding proteins）是专门负责与单链DNA结合的一种蛋白质,在DNA复制、重组和修复过程中起重要作用。腾冲嗜热厌氧杆菌（Thermoanaerobacter tengcongensis MB4）中有三个单链结合蛋白,其中的Tte0829被本实验室在体外实验证实不仅具有结合单链DNA的活性,而且具有内切单链DNA的活性,将其命名为EndoTT（NucleicAcids Research,38:3709-3720,2010）。为了阐明EndoTT的体内功能,我们构建了EndoTT的阻断突变株和过表达株。发现在60℃下EndoTT的阻断突变株和过表达株生长速度比野生株快,利用Illumina平台的高通量测序技术比较60℃生长的野生株、EndoTT的阻断突变株和过表达株的转录组,结果显示:腾冲嗜热厌氧杆菌2588个CDS中有2455个CDS有表达,野生株与EndoTT阻断突变株相比,有360个基因表达上调,401个基因表达下调;野生株与EndoTT过表达株相比,有129个基因表达上调,117个基因表达下调;其中145个基因在EndoTT阻断突变株和过表达株都发生了变化。Pathway分析表明:EndoTT的阻断或过表达导致ABC转运,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸合成途径,氨基苯甲酸酯降解,叶酸合成途径等改变。有关EndoTT阻断突变株和野生株蛋白组学研究正在进行中。

关键词：腾冲嗜热厌氧杆菌 EndoTT 体内功能 RNA-seq

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中国正常成人中脑体积的高分辨力MRI的测量与分析

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中国医学影像技术 2012年第1期28卷 23-27页

作者：孙黎陈楠王星王丹卓彦陈霖李坤成申宝忠哈尔滨医科大学附属第四医院影像科黑龙江哈尔滨150001 首都医科大学宣武医院放射科北京100053 中国科学院生物物理研究所脑与认知科学国家重点实验室北京100101

目的测量中国健康汉族成人中脑体积,并建立正常值参考范围,分析中脑体积与年龄及性别的关系,为建立中国正常人标准脑提供基础数据。方法选取18~70岁健康成年志愿者1000名,按年龄18~30、31~40、41~50、51~60、6l^70分为共5组,标记为A、B... 详细信息

目的测量中国健康汉族成人中脑体积,并建立正常值参考范围,分析中脑体积与年龄及性别的关系,为建立中国正常人标准脑提供基础数据。方法选取18~70岁健康成年志愿者1000名,按年龄18~30、31~40、41~50、51~60、6l^70分为共5组,标记为A、B、C、D、E,每组共计200名,男、女各100名。对所有受试者行全脑容积MR扫描,用3D体积分析软件进行中脑体积测量。分析年龄与中脑体积的相关性。结果男性中脑平均体积[(8087.89±1177.43)mm3]大于女性[(7763.87±1007.44)mm3,t=-4.68,P<0.001]。男性A^E组中脑体积分别为(8857.65±980.12)mm3、(8691.22±913.56)mm3、(8072.26±1024.78)mm3、(7688.33±981.91)mm3、(7129.98±1059.98)mm3,女性A^E组中脑体积分别为(8290.68±995.41)mm3、(8034.79±1000.00)mm3、(7767.43±907.28)mm3、(7619.18±836.72)mm3、(7107.29±889.09)mm3。A^C组男性中脑体积均大于女性(P均<0.05),D、E组男、女差异则无统计学意义。男性除A组与B组外,其余各组间差异均有统计学意义(P均<0.05);女性除A组与B组、C组与D组外,其余各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。男性和女性中脑体积均与年龄相关(r=-0.55、-0.38,P均<0.001)。结论正常中国成人中脑体积存在性别差异,男性中脑体积总体上大于女性;18~50岁男性中脑体积大于女性,51~70岁男女间无显著差异。中脑体积及其性别间差异均随年龄增大而减小。

关键词：中脑磁共振成像人体测量术

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高分辨力MRI测量中国汉族正常成人豆状核

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中国医学影像技术 2012年第1期28卷 15-18页

作者：王国坤陈楠王星卓彦陈霖李坤成王丹申宝忠哈尔滨医科大学附属第四医院影像科黑龙江哈尔滨150001 首都医科大学宣武医院放射科北京100053 中国科学院生物物理研究所脑与认知科学国家重点实验室北京100101

目的测量中国汉族正常成人豆状核体积,为建立中国成人数字标准脑提供基础数据。方法采用多中心临床研究形式,选取18~80岁健康志愿者1000名,按照年龄18~30、31~40、41~50、51~60、61~80岁进行分组,每组男、女各100名。采用三维磁化强度... 详细信息

目的测量中国汉族正常成人豆状核体积,为建立中国成人数字标准脑提供基础数据。方法采用多中心临床研究形式,选取18~80岁健康志愿者1000名,按照年龄18~30、31~40、41~50、51~60、61~80岁进行分组,每组男、女各100名。采用三维磁化强度预备梯度回波T1 W序列扫描获取图像,应用三维体积分析软件手工勾绘ROI,测量豆状核的体积,探讨豆状核体积与年龄的相关关系。结果 1000名正常成人左、右侧壳核体积分别为（4811.59±588.99）mm3和（4763.11±587.59）mm3,左侧壳核体积大于右侧（t=10.134,P〈0.0001）;左、右侧苍白球体积分别为（1591.31±226.81）mm3、（1627.28±235.06）mm3,左侧苍白球体积小于右侧（t=-9.877,P〈0.0001）。男性左、右侧壳核体积和苍白球体积分别为（4962.72±598.49）mm3、（4909.83±600.54）mm3、（1623.24±234.16）mm3和（1663.18±243.56）mm3;女性左、右侧壳核及苍白球体积分别为（4663.65±540.49）mm3、（4619.28±537.59）mm3、（1560.00±215.04）mm3、（1592.09±221.06）mm3,男性体积均大于女性（P均〈0.0001）。左、右侧壳核及左、右侧苍白球体积均随年龄增长而减低。结论正常成人豆状核中,壳核体积左侧大于右侧,苍白球体积右侧大于左侧;男性豆状核体积大于女性。豆状核体积均随年龄增大而减小。

关键词：豆状核磁共振成像人体测量术

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mIgY,一种新型的抗体及抗体药物研发平台

mIgY,一种新型的抗体及抗体药物研发平台

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：张小莺陈红秀江雪梅仇华吉西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

目的：通过构建猪IFN-γ的噬菌体展示禽源scFv抗体文库,制备高特异性的scFv抗体.方法：1、构建猪IFN-γ的禽源噬菌体展示抗体文库.免疫SPF鸡4次后,提取SPF鸡脾脏mRNA,反转录为cDNA后,以cDNA为模板扩增抗体重链可变区和轻链可变区基因,... 详细信息

目的：通过构建猪IFN-γ的噬菌体展示禽源scFv抗体文库,制备高特异性的scFv抗体.方法：1、构建猪IFN-γ的禽源噬菌体展示抗体文库.免疫SPF鸡4次后,提取SPF鸡脾脏mRNA,反转录为cDNA后,以cDNA为模板扩增抗体重链可变区和轻链可变区基因,并进一步经融合PCR扩增单链抗体(scFv)基因.scFv与pCATAB5E均通过SfiI/NotI酶切后,scFv克隆至pCATAB5E噬菌粒载体,构建噬菌体展示抗体文库,随机挑取的10个克隆;2、抗体基因的大量表达.将随机挑取的10个克隆的抗体基因克隆至原核表达载体pET30a,优化诱导表达条件,并用Ni+柱进行纯化.结果：在噬菌体展示抗体文库中随机挑取的10个克隆,反应性均很高;诱导表达结果显示20℃,0.4mM IPTG,10h为最佳表达条件;可溶性scFv抗体的终浓度为5mg/mL,经ELISA、Western blot和间接免疫荧光检测反应性良好,与鼠源单抗平行比较发现,鸡scFv反应性较鼠源单抗高.结论：本研究构建了猪IFN-γ的噬菌体展示鸡源scFv抗体文库,并制备高特异性的scFv抗体;同时与鼠源单抗进行比较,初步确认了禽源单抗的特殊优势;这些研究结果支持了构建禽源单克隆抗体研发平台的设想,不失为一种有效的抗体研发替代途径.

关键词：禽源单克隆IgY抗体药物开发猪干扰素-γ 噬菌体展示技术

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芒果苷对氧嗪酸钾所致慢性高尿酸血症大鼠尿酸及肝肾功能的影响

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中国药理学通报 2012年第11期28卷 1578-1581页

作者：牛艳芬高丽辉刘旭林华张媛李玲昆明医科大学生物医学工程研究中心昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500

目的研究芒果苷对氧嗪酸钾所致慢性高尿酸血症大鼠尿酸及肝肾功能的影响。方法连续灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(2.5 g·kg-1体重)复制慢性高尿酸血症大鼠模型。以苯溴马隆和别嘌醇为阳性对照,研究芒果苷灌胃给药5周对高尿酸血症大鼠血尿... 详细信息

目的研究芒果苷对氧嗪酸钾所致慢性高尿酸血症大鼠尿酸及肝肾功能的影响。方法连续灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(2.5 g·kg-1体重)复制慢性高尿酸血症大鼠模型。以苯溴马隆和别嘌醇为阳性对照,研究芒果苷灌胃给药5周对高尿酸血症大鼠血尿酸(uric acid,UA)、肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、谷草转氨酶(AST)等水平的影响。结果芒果苷(1.55和3.13 mg·kg-1)灌胃给药能剂量依赖性地降低氧嗪酸钾所致的慢性高尿酸血症大鼠的血清尿酸水平,其效价弱于别嘌醇,但不亚于苯溴马隆;对肌酐、尿素氮和尿量的影响不明显,对血清AST、GGT水平亦无明显影响,但可改善慢性高尿酸血症大鼠的血清ALT水平。结论芒果苷可降低氧嗪酸钾所致慢性高尿酸血症大鼠的尿酸水平,对肝肾功能无明显影响。

关键词：芒果苷高尿酸血症尿酸肌酐尿素氮谷丙转氨酶 γ-谷氨酰转肽酶谷草转氨酶

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日本七鳃鳗RGD毒素肽Lj-RGD2的克隆、表达及其抗血管新生活性

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第3期28卷 254-260页

作者：王继红刘洋吕莉宁淑香刘欣李庆伟辽宁师范大学生命科学学院大连116029 辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室大连116029 大连医科大学药学院药理教研室大连116044

日本七鳃鳗口腔腺分泌蛋白Lj-RGD2毒素肽分子质量为8 kD,是含有2个RGD(Arg-Gly-Asp)模体序列的多肽.为了探讨其是否具有RGD毒素蛋白的功能,对其基因进行了克隆和表达,并对其重组蛋白进行了抗血管新生活性研究.从日本七鳃鳗口腔腺中提取m... 详细信息

日本七鳃鳗口腔腺分泌蛋白Lj-RGD2毒素肽分子质量为8 kD,是含有2个RGD(Arg-Gly-Asp)模体序列的多肽.为了探讨其是否具有RGD毒素蛋白的功能,对其基因进行了克隆和表达,并对其重组蛋白进行了抗血管新生活性研究.从日本七鳃鳗口腔腺中提取mRNA,以自行设计的引物进行RT-PCR扩增,以获得Lj-RGD2基因;将获取的目的基因与pET23b载体连接,经转化、克隆、阳性转化子的筛选鉴定;将含组氨酸标签的pET23b-Lj-RGD2转化BL21菌中诱导表达;经亲和层析纯化,获得可溶性重组rLj-RGD2蛋白,并对重组rLj-RGD2蛋白的抗血管新生功能进行了研究.结果显示,rLj-RGD2蛋白的IC50为1.77μmol/L,并以剂量依赖方式抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖;rLj-RGD2蛋白还能抑制ECV304细胞对人工基质膜Matrigel的黏附、以BFGF(basicfibroblast growth factor)为趋化剂的迁移及侵袭.鸡胚绒毛尿囊膜CAM(chick chorioallantoic membrane)血管新生实验结果表明,rLj-RGD2蛋白能以剂量依赖方式抑制BFGF诱导的CAM血管新生.由此可见,rLj-RGD2蛋白具有RGD毒素肽的活性特征,其有望成为一种抗血管新生基因工程新药.

关键词：日本七鳃鳗 RGD毒素蛋白细胞黏附迁移及侵袭血管新生

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