检索结果-内蒙古大学图书馆

高等学校化学学报 2011年第8期32卷 1838-1844页

作者：袁晓辉王迎晨曲章义任家毅王靖飞郭莹莹王雅贤华东吴晓敏杨志伟高虹中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所北京100730 哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室哈尔滨150081 黑龙江中医药大学基础医学院微生物与免疫学研究室哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室哈尔滨150040

为实现对人腺病毒六邻体家族蛋白进行快速准确的结构建模,发展了一种新的基于进化树的预测蛋白质家族中一系列分子三维空间结构的快速建模方法.首先利用邻接法对7株D亚属人腺病毒的六邻体序列构建了基于距离的进化树,并根据进化树所提... 详细信息

为实现对人腺病毒六邻体家族蛋白进行快速准确的结构建模,发展了一种新的基于进化树的预测蛋白质家族中一系列分子三维空间结构的快速建模方法.首先利用邻接法对7株D亚属人腺病毒的六邻体序列构建了基于距离的进化树,并根据进化树所提供的信息确定最佳六邻体家族蛋白渐进式建模路径,然后利用Modeler与Charmm程序实现六邻体家族蛋白的快速建模.新的建模方法与传统方法相比,需要的计算量大大减少,经过结构评估以及与传统方法建模所得到的结构进行比较,证实基于进化树的快速建模结果是可靠的.人腺病毒六邻体家族蛋白的快速建模对于实现快速高通量的表位预测及开发多价人腺病毒疫苗与腺病毒分型诊断试剂都具有重大的意义.

关键词：同源建模进化树人腺病毒六邻体家庭蛋白

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miR-101a通过抑制FOS/TGFβ1通路抑制心肌纤维化

miR-101a通过抑制FOS/TGFβ1通路抑制心肌纤维化

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：潘振伟王宁吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理教研室省部共建生物医药国家重点实验室教育部心血管研究重点实验室

目的心肌纤维化是慢性心肌梗死患者心肌重构、心功能逐渐恶化的一个重要原因。microRNAs是一类新的心血管疾病调控分子,同时也在心肌纤维化的发生发展过程中其关键调控作用。本研究拟探讨miR-101a在心肌纤维化中的作用与机制。方法采用... 详细信息

目的心肌纤维化是慢性心肌梗死患者心肌重构、心功能逐渐恶化的一个重要原因。microRNAs是一类新的心血管疾病调控分子,同时也在心肌纤维化的发生发展过程中其关键调控作用。本研究拟探讨miR-101a在心肌纤维化中的作用与机制。方法采用冠状动脉结扎法建立的大鼠心肌梗死模型和离体成纤维细胞培养模型,应用定量PCR、Western blot、组织学检测、超声、心功能检测以及腺病毒在体转染等技术和手段评价miR-101对心肌纤维化的影响。结果在结扎大鼠冠状动脉四周后,定量PCR检测发现其心肌组织中miR-101a和miR-101b的表达量明显降低。向培养的新生大鼠心肌成纤维细胞中加入血管紧张素Ⅱ后,miR-101a和miR-101b的表达量也明显降。向培养的新生大鼠心肌成纤维细胞中转入miR-101a后,其细胞数与胶原合成均受到抑制;同时转入AMO-101a(miR-101的抑制剂,为其反义序列)后,miR-101a的抑制作用消失。同时,过表达miR-101a显著抑制了其靶蛋白c-Fos及其c-Fos下游蛋白TGFβ1的表达。应用siRNA技术干扰掉c-Fos或表达载体过表达c-Fos蛋白后,miR-101a对成纤维细胞增殖的影响消失。我们应用腺病毒载体将miR-101a过表达至心肌梗死大鼠的心脏。四周后,超声与血流动力学检测表明miR-101a治疗组大鼠的心脏功能明显改善,表现为射血分数、短轴缩短率增加,心室变化速率加大。另外,miR-101a治疗组大鼠梗死边缘区间质纤维化明显减弱,胶原量降低;c-Fos和TGFβ1的表达明显受到抑制。结论本研究表明,miR-101a的表达下调是慢性心肌梗死大鼠间质纤维化的原因之一,其机制与抑制c-Fos和TGFβ1通路有关;过表达miR-101a能够改善心肌梗死大鼠的心功能。

关键词： miR-101 心脏纤维化

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骨髓间充质干细胞对心肌细胞K+电流的影响

骨髓间充质干细胞对心肌细胞K+电流的影响

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：吕延杰蔡本志艾静杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理教研室省部共建生物医药国家重点实验室教育部心血管研究重点实验室

目的骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有向多种组织分化的潜能,在多种疾病的治疗取得了很大的进展。如在梗死性心脏疾病,BMSCs能明显改善心脏的功能。本研究的目的为BMSCs是否能够对心肌细胞的电生理产生影响。方法共培养大鼠BMSCs和新生乳... 详细信息

目的骨髓间充质干细胞（BMSCs）具有向多种组织分化的潜能,在多种疾病的治疗取得了很大的进展。如在梗死性心脏疾病,BMSCs能明显改善心脏的功能。本研究的目的为BMSCs是否能够对心肌细胞的电生理产生影响。方法共培养大鼠BMSCs和新生乳鼠心肌细胞;采用冠状动脉前降支结扎建立大鼠心肌梗塞模型;全细胞膜片钳记录心肌细胞的动作电位和膜电流;蛋白印迹法检测离子通道蛋白的表达;超声心动图评价心脏功能。结果骨髓间充质干细胞表达钙激活钾电流,(K),瞬时外向钾电流(I),内向整流钾电流(I);同干细胞培养6 d,9 d时,乳鼠心肌细胞的动作电位时程（APD）明显缩短,无论是APD还是APD;共培养后,心肌细胞I电流增加,并且通道的激活、失活及通道的恢复时间有所改变;干细胞分泌高浓度的bFGF和IGF,并且bFGF能够增加I（to）电流的表达;干细胞移植后,明显改善了心肌梗死心脏的心脏重量指数、左心室重量指数、室壁运动、和厚度;干细胞移植明显改善了梗死心肌中Kv1.5,Kv2.1,Kv4.2,Kv4.3,Kir2.1通道蛋白的表达。结论干细胞移植改善了梗死心肌的心功能并且能够使降低的Kv1.5,Kv2.1,Kv4.2,Kv4.3,Kir2.1的表达明显恢复,干细胞通过分泌bFGF增加了乳鼠心肌细胞I的表达并参与了APD调解。

关键词：骨髓间充质干细胞心肌细胞心功能 K通道电流

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橙皮苷对小鼠急性肝衰竭的保护作用及其机制

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中国生物制品学杂志 2011年第2期24卷 125-129页

作者：蒋远明万敬员龚霞刘颖菊孙文娟高丽佳四川省遂宁市中心医院四川遂宁629000 重庆医科大学药理教研室重庆400016 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院重庆400016

目的观察橙皮苷对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)联合D-氨基半乳糖(D-Galactosamine,D-GalN)所致小鼠急性肝衰竭(Acute hepatic failure,AHF)的保护作用及其机制。方法小鼠腹腔注射LPS(50μg/kg)和D-GalN(800 mg/kg),复制急性肝衰竭模型,分别用橙皮苷(200 mg/kg)或橙皮苷(200 mg/kg)联合锌原卟啉IX(Zinc protoporphyrin IX,ZnPP)(45 mg/kg)干预。造模后6 h检测肝损伤程度和炎症反应强度,48 h统计小鼠死亡率。结果橙皮苷使AHF小鼠血清转氨酶(ALT和AST)水平下降,肝损伤减轻,生存率提高;血清白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)水平和肝内血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)的表达较AHF小鼠明显增加,肝内HO-1酶活性明显增高;同时,使血清肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平、肝组织中Caspase-3蛋白酶和髓过氧物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性较AHF小鼠明显降低。ZnPP不影响橙皮苷促进肝内HO-1酶表达,但通过抑制HO-1酶活性,使橙皮苷抗炎和肝损伤保护作用显著降低。结论橙皮苷主要通过诱导HO-1蛋白表达,使HO-1酶活性增强,从而使炎症反应和肝损伤减轻,对LPS联合D-GalN诱导的AHF产生保护作用。

关键词：橙皮苷肝功能衰竭,急性血红素加氧酶-1

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Urantide干预下转化生长因子-β_1对动脉粥样硬化大鼠羟脯氨酸表达的影响

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中国老年学杂志 2011年第24期31卷 4839-4841页

作者：赵娟宋鸿儒王红石燕任立群承德医学院病理生理学教研室河北承德067000 吉林职工医科大学实训中心吉林大学药学院实验药理与毒理学教研室

目的研究在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂Urantide干预下,转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠动脉粥样硬化(AS)胸主动脉中的表达情况,探讨在AS时TGF-β1与羟脯氨酸(HYP)之间的关系。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射VD3损伤动脉内膜的方法建... 详细信息

目的研究在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂Urantide干预下,转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠动脉粥样硬化(AS)胸主动脉中的表达情况,探讨在AS时TGF-β1与羟脯氨酸(HYP)之间的关系。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射VD3损伤动脉内膜的方法建立大鼠AS模型,随机分为4组:对照组、模型组、氟伐他汀组、Urantide组,生物化学方法检测血清及尿液中HYP含量;免疫组织化学法检测主动脉壁内TGF-β1的表达水平。结果 Urantide组血清中HYP在给药3 d后即明显低于模型对照组,7 d进一步降低,14 d时血清中HYP含量降低接近于阳性药对照组(P<0.01)。在胸主动脉内膜及中膜斑块内,Urantide各给药组TGF-β1阳性染色强度和范围较模型对照组明显增强(P<0.01)。结论随Urantide给药时间的增加,TGF-β1使动脉壁内的胶原蛋白分泌减少,缓解大鼠AS症状。

关键词：尾加压素Ⅱ Urantide 血管平滑肌细胞转化生长因子-β1 羟脯氨酸动脉粥样硬化

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改良透射电镜方法观察小鼠ICSI胚胎核仁超微结构

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中国细胞生物学学报 2011年第2期33卷 154-158页

作者：郑重胡丽丽文刚张宝东雷蕾哈尔滨医科大学基础医学院组胚教研室哈尔滨150081

小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球... 详细信息

小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球细胞核的内部,难以定位,因而给核仁的超微结构观察带来很大的困难。本实验探索了透射电镜观察小鼠植入前胚胎核仁的方法:先用琼脂对小鼠胚胎进行预包埋,在经过常规的透射电镜样品制备流程后,将整个胚胎先切成半薄切片;经过甲苯胺蓝染色后,选取含核仁结构的切片进行重包埋;最后再对回收来的半薄切片进行超薄切片,醋酸铀染色后上电镜观察;最终成功获得小鼠胚胎植入前发育不同时期核仁清晰的透射电镜图像。

关键词：小鼠胚胎核仁透射电镜超微结构重包埋

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表达绿色荧光蛋白的重组人偏肺病毒的构建及其中和抗体检测方法的应用

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中国预防兽医学报 2011年第9期33卷 665-670页

作者：李晓艳葛金英哈斯苏荣王琪焦丽红王永步志高内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150081 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

人偏肺病毒(hMPV)是最新发现的与呼吸道疾病有关的病原体。为构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的B型重组hMPV,本研究利用反向遗传学技术,以表达EGFP的hMPV NL/1/99株全长cDNA质粒重组pPS-hMPV-EGFP,及其4种辅助重组质粒pCITE-N、pCITE-... 详细信息

人偏肺病毒(hMPV)是最新发现的与呼吸道疾病有关的病原体。为构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的B型重组hMPV,本研究利用反向遗传学技术,以表达EGFP的hMPV NL/1/99株全长cDNA质粒重组pPS-hMPV-EGFP,及其4种辅助重组质粒pCITE-N、pCITE-P、pCITE-L、pCITE-M2.1为基础,共转染BHK-21细胞进行重组病毒的拯救。鉴定结果表明拯救的重组病毒rhMPV-NL-EGFP高效表达外源基因EGFP。rhMPV-NL-EGFP与亲本病毒株具有相似的生物学特性,生长滴度可达106.7 TCID50/mL。rhMPV-NL-EGFP在细胞中连续传代10代仍然维持外源基因的高效和稳定表达,病毒滴度于室温条件下可维持长时间稳定。分别利用亲本病毒株和重组病毒rhMPV-NL-EGFP进行免疫小鼠血清中和抗体检测,结果显示两种方法具有较好的相似性(p>0.05)。本研究为病毒中和抗体的检测提供了更为快捷的新方法,同时为hMPV感染发病机制及疫苗研究奠定了基础。

关键词：人偏肺病毒反向遗传技术病毒拯救绿色荧光蛋白

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Boosting方法在高维数据分析中的应用

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中国医院统计 2011年第1期18卷 1-5页

作者：贾慧珣刘晋李康哈尔滨医科大学公共卫生学院统计教研室黑龙江省哈尔滨市150081

目的随着现代基因组学、蛋白组学和代谢组学等研究兴起,产生了大量的高维组学数据.对高维组学数据的分析,其重要任务是对样品进行分类及筛选出具有生物学意义的特征标志物.本项研究针对这一问题,采用目前公认效果较好的Boosting方法进... 详细信息

目的随着现代基因组学、蛋白组学和代谢组学等研究兴起,产生了大量的高维组学数据.对高维组学数据的分析,其重要任务是对样品进行分类及筛选出具有生物学意义的特征标志物.本项研究针对这一问题,采用目前公认效果较好的Boosting方法进行高维数据分析,并探讨Boosting算法在高维数据研究中的应用条件和效果.方法通过多次迭代,Boosting能够将基础弱分类器（决策树）形成优效分类器.模拟试验研究和验证了在含有大量无差异变量情况下对分类及变量重要性度量的效果,并通过实际基因表达数据进一步考核其应用效果.结果模拟试验显示,应用Boosting方法与决策树所建的组合模型对分类具有较高的准确性,并对噪声变量的干扰具有一定的抵抗能力.分类的同时能够对变量的重要性进行有效的评价;在保留了所有基因的情况下,对结肠癌真实基因表达数据的分类效果甚为理想,并为医学研究中结肠癌致病基因的发现提供了线索.结论基于决策树所构造的Boosting组合分类模型,可以有效地应用于高维数据的判别分类及变量重要性评价的问题.Boosting算法在解决小样本、多噪声的高维问题中表现出许多潜在的优势,与目前使用的其他方法相比,对于具有复杂结构高维数据,Boosting算法有其明显的自身特点,如运算速度快,适用性更强,软件实现相对容易等,是一种值得推荐和进一步研究的方法.

关键词： Boosting 高维数据分类研究特征筛选

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牛霉形体免疫相关性蛋白P51的筛选与鉴定

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中国兽医科学 2011年第5期41卷 490-495页

作者：李媛陈维呼太飞刘洋宋志强孙文静辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省勃利县动物卫生监督所黑龙江勃利154500

为了筛选免疫原性蛋白,建立牛霉形体的快速诊断方法,利用二维凝胶(2-D)电泳、Western-blot分析及蛋白质谱分析,筛选出一个免疫相关性蛋白P51。以牛霉形体中国分离株Hubei-1为模板,扩增了p51基因,并克隆到原核表达载体pET32a上。结果显示... 详细信息

为了筛选免疫原性蛋白,建立牛霉形体的快速诊断方法,利用二维凝胶(2-D)电泳、Western-blot分析及蛋白质谱分析,筛选出一个免疫相关性蛋白P51。以牛霉形体中国分离株Hubei-1为模板,扩增了p51基因,并克隆到原核表达载体pET32a上。结果显示,重组蛋白pET32a-p51与牛霉形体阳性血清的Dot-blotting试验结果为阳性,而Western-blotting试验结果为阴性。以pET32a-p51重组蛋白为包被抗原的ELISA试验表明其能与自然感染和人工感染牛霉形体的阳性血清发生特异性反应,而与灭活疫苗免疫的阳性血清不发生特异性反应,与牛传染性胸膜肺炎的阳性血清没有交叉反应。表明P51可能是牛霉形体特有的一种构象依赖性免疫相关蛋白,是一种有前景的诊断用抗原。

关键词：牛霉形体牛传染性胸膜肺炎二维凝胶电泳质谱

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MAPK/SRF/microRNA—丹参酮ⅡA心肌保护作用新机制

MAPK/SRF/microRNA—丹参酮ⅡA心肌保护作用新机制

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第八届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：单宏丽张莉张勇潘振伟李雪连吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室省部共建生物医药国家重点实验室、心血管药物研究教育部重点实验室

目的中药丹参酮ⅡA具有良好的血管扩张作用,目前临床上广泛用以治疗心肌梗死等缺血性心脏病,且疗效较好,但其具体作用位点及分子机制尚不清楚。微小RNA-1(miR-1)作为抗心律失常的新靶点,在心梗患者及缺血大鼠心肌明显升高,并下调心肌离... 详细信息

目的中药丹参酮ⅡA具有良好的血管扩张作用,目前临床上广泛用以治疗心肌梗死等缺血性心脏病,且疗效较好,但其具体作用位点及分子机制尚不清楚。微小RNA-1(miR-1)作为抗心律失常的新靶点,在心梗患者及缺血大鼠心肌明显升高,并下调心肌离子通道的表达,干扰心肌电活动,加剧心肌损伤,但其升高的调控机制目前尚不清楚。方法本课题采用左冠状动脉前降支结扎诱发大鼠心肌缺血模型和培养的乳鼠心肌细胞缺氧模型,应用基因转染技术、RT-PCR、Western blot和膜片钳技术检测心肌缺血组织中miR-1、相关信号转导通路蛋白表达和心肌离子通道电流的变化。结果丹参酮ⅡA(20 mg/kg/d)能明显降低心梗后心律失常的发生率,减少室速和室颤的发生及持续时间,显著降低心梗大鼠的死亡率。MI模型心肌组织miR-1的水平升高达3.7倍,明显抑制了其下游靶蛋白Cx43及Kir2 1的表达。丹参酮IIA治疗3个月后,miR-1的水平显著降低,Cx43及Kir2.1蛋白表达恢复至正常水平,有效抑制p38 MAPK的活性及SRF和MEF2蛋白的表达。进一步研究揭示:丹参酮IIA预处理能够减轻心肌细胞缺氧损伤程度,提高细胞存活率并降低细胞的凋亡,抑制细胞缺氧诱导的miR-1的升高,同时,降低信号通路p38 MAPK的活性,恢复SRF和MEF2的表达。p38 MAPK特异性抑制剂SB203580(10μM)抑制缺氧诱导的miR-1的升高,恢复Cx43,SRF和MEF2蛋白的表达,从而起到保护缺氧培养的心肌细胞的作用。结论丹参酮IIA通过MAPKs和SRF调节miR-1改善心肌离子通道失衡,从而发挥心肌保护作用。揭示丹参酮IIA通过抑制miR-1的表达发挥心肌保护作用,为临床应用提供更直接的理论依据。

关键词：丹参酮ⅡA 心肌保护 microRNA-1

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