检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2011年第5期41卷 541-545页

作者：王征郭巍姬媛媛卢刚相文华曲娟娟东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163319

介绍了3类马鼻肺炎疫苗的制备工艺、自身特点,分析比较了各类型疫苗的优缺点,并对其商品化进行了可行性分析,指出传统疫苗(灭活疫苗、减毒疫苗)是目前传染病防治的主要产品。虽然新型疫苗(病毒活载体疫苗)还处在研究阶段,但终将成为马... 详细信息

介绍了3类马鼻肺炎疫苗的制备工艺、自身特点,分析比较了各类型疫苗的优缺点,并对其商品化进行了可行性分析,指出传统疫苗(灭活疫苗、减毒疫苗)是目前传染病防治的主要产品。虽然新型疫苗(病毒活载体疫苗)还处在研究阶段,但终将成为马鼻肺炎疫苗未来发展的主要方向。

关键词：马鼻肺炎灭活疫苗减毒疫苗病毒活载体疫苗

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MicroRNA在肿瘤干细胞中的调控作用研究进展

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现代肿瘤医学 2011年第7期19卷 1422-1425页

作者：赵琳魏敏杰中国医科大学药学院药理教研室辽宁沈阳110001

肿瘤干细胞(CSCs)是导致肿瘤复发、转移和耐药的根源之一。microRNA(miRNAs)是一类小分子非编码RNA,可与靶mRNA的3'UTR区域结合而导致该mRNA分子的翻译受到抑制,参与多种生物功能的调节。最近的研究发现,miRNAs参与CSCs的分化、自... 详细信息

肿瘤干细胞(CSCs)是导致肿瘤复发、转移和耐药的根源之一。microRNA(miRNAs)是一类小分子非编码RNA,可与靶mRNA的3'UTR区域结合而导致该mRNA分子的翻译受到抑制,参与多种生物功能的调节。最近的研究发现,miRNAs参与CSCs的分化、自我更新等生物学特性的调控。miRNAs可以作为CSCs研究的一个新的切入点。本文就近年来该方面的研究进展做简要综述。

关键词：微小RNA 肿瘤干细胞分化自我更新

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甲型H1N1流感病毒A/Sichuan/01/2009株反向遗传操作系统的建立

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中国兽医科学 2011年第5期41卷 448-452页

作者：张乾义张莹胡永浩娄慧姜永萍李雁冰田国斌邓国华施建忠关云涛杨焕良陈化兰甘肃农业大学甘肃兰州730070 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150001

选取甲型H1N1流感病毒A/Sichuan/01/2009(SC/01)株为亲本毒株,构建了SC/01的八质粒反向遗传操作系统,并获得了甲型H1N1流感病毒救获株Rescue-A/Sichuan/01/2009(R-SC/01)。对救获毒株R-SC/01进行全基因序列测定,证明救获毒株与亲本毒株... 详细信息

选取甲型H1N1流感病毒A/Sichuan/01/2009(SC/01)株为亲本毒株,构建了SC/01的八质粒反向遗传操作系统,并获得了甲型H1N1流感病毒救获株Rescue-A/Sichuan/01/2009(R-SC/01)。对救获毒株R-SC/01进行全基因序列测定,证明救获毒株与亲本毒株的核苷酸序列完全一致。R-SC/01的小鼠半数感染量及受体结合特性与亲本野毒SC/01一致。SC/01反向遗传操作系统的成功建立为进一步开展甲型H1N1流感病毒的生物学特性研究,特别是跨宿主传播机制研究奠定了基础。

关键词：甲型H1N1流感病毒反向遗传操作系统受体结合能力

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马流感病毒NP单克隆抗体的制备及特性鉴定

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 610-613页

作者：姬媛媛郭巍王征赵立平李红梅相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

利用原核表达的马流感病毒(EIV)核蛋白(NP)为免疫原,经腹腔接种4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经4次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得了3株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株2G11、3E10和4A1,并对它们进行了亚类... 详细信息

利用原核表达的马流感病毒(EIV)核蛋白(NP)为免疫原,经腹腔接种4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经4次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得了3株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株2G11、3E10和4A1,并对它们进行了亚类鉴定、间接ELISA检测和特性鉴定。结果显示,单抗2G11为IgG1亚型,3E10为IgG2a亚型,4A1为IgM亚型,轻链均为κ链。单抗2G11、3E10和4A1的细胞上清液及腹水效价分别为1∶640、1∶640、1∶320和1∶409 600、1∶204 800、0。这3株单抗均能特异性识别EIV NP重组蛋白,并且能够与天然EIV结合;获得的3株单抗与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马乙型脑炎病毒均不发生交叉反应。亲和力试验结果显示,单抗2G11和3E10与EIV的亲和力常数分别为4.39×106 M-1和2.20×106 M-1。

关键词：马流感病毒核蛋白单克隆抗体特性鉴定

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过表达外源ST3Gal Ⅰ增加MCF-7细胞与胞外基质粘附和侵袭能力

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第4期27卷 370-376页

作者：崔红霞岳丽玲刘吉成齐齐哈尔医学院药理教研室医药研究所齐齐哈尔161006 黑龙江中医药大学哈尔滨150040

为探讨过表达外源α2,3-唾液酸转移酶(ST3GalⅠ)对乳腺癌MCF-7细胞粘附和侵袭能力的影响,构建pEGFP-N1-ST3Gal I真核表达载体.采用GenEscortTMⅡ包裹后转染MCF-7细胞.MCF-7细胞为3组:未转染组(M)、转染空质粒组(P)和转染ST3Gal Ⅰ组(ST... 详细信息

为探讨过表达外源α2,3-唾液酸转移酶(ST3GalⅠ)对乳腺癌MCF-7细胞粘附和侵袭能力的影响,构建pEGFP-N1-ST3Gal I真核表达载体.采用GenEscortTMⅡ包裹后转染MCF-7细胞.MCF-7细胞为3组:未转染组(M)、转染空质粒组(P)和转染ST3Gal Ⅰ组(ST3);荧光显微镜观察融合蛋白EGFP-ST3Gal Ⅰ的表达.采用半定量RT-PCR、Western印迹法分析转染后MCF-7细胞ST3GalⅠ基因mRNA水平和蛋白表达水平;流式细胞术分析ST3GalⅠ下游产物细胞表面α2,3-唾液酸含量;采用细胞粘附实验及transwell小室检测转染前后细胞与基质胶Matrigel粘附、迁移和侵袭运动能力的变化.结果表明,荧光显微镜下P组细胞内绿色荧光呈弥散分布,而ST3组绿色荧光主要集中在细胞质中,RT-PCR与Western印迹也证实了外源ST3GalⅠ基因mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05),其下游产物细胞表面α2,3-唾液酸含量明显增加(P<0.05);与M、P组相比,ST3组表现为粘附、迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05).利用转染技术可明显提高外源ST3GalⅠ在MCF-7细胞表达,明显增加MCF-7细胞与胞外基质(ECM)粘附、迁移和侵袭能力,可形成肿瘤入侵表型,将有望成为治疗乳腺癌转移的新靶点.

关键词： α 2,3-唾液酸转移酶转染乳腺癌粘附和侵袭

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降低胞内氯浓度促进内皮炎症反应及其机制

降低胞内氯浓度促进内皮炎症反应及其机制

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2012年中美临床和转化医学国际论坛心脑血管病分会论坛（延吉）暨第十二届全国心血管药理学术会议和中俄药理国际研讨会

作者：周家国关永源杨慧汤勇波吕晓飞刘捷中山大学中山医学院药理教研室中山大学中山医学院心脑血管研究中心

我们前期研究发现ClC-3氯通道参与调控了缸管平滑肌细胞的增殖和凋亡过程,该通道的活性与高血压脑血管重构进程呈正相关。对ClC-3氯通道的抑制作用足他汀类药物逆转高血压脑血管重构的重要机制。但ClC-3氯通道发挥上述功能的具体机制并... 详细信息

我们前期研究发现ClC-3氯通道参与调控了缸管平滑肌细胞的增殖和凋亡过程,该通道的活性与高血压脑血管重构进程呈正相关。对ClC-3氯通道的抑制作用足他汀类药物逆转高血压脑血管重构的重要机制。但ClC-3氯通道发挥上述功能的具体机制并不清楚。本研究中我们观察到:1)在内

关键词：炎症反应氯通道磷酸化单核细胞内皮细胞

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鸭瘟病毒疫苗株在免疫SPF鸭体内的生长动力学检测

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中国兽医科学 2011年第5期41卷 514-518页

作者：张新富胡永浩柳金雄陈普成邬丽姜永萍陈化兰甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了研究鸭瘟病毒疫苗株在免疫SPF鸭脑、胸腺、脾、肾、肝、法氏囊中的动态分布规律,根据GenBank中鸭瘟病毒的UL6基因设计引物RTF和RTR,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量方法,建立了特异性强、敏感性高、重复性好的标准曲线。利用建立的标... 详细信息

为了研究鸭瘟病毒疫苗株在免疫SPF鸭脑、胸腺、脾、肾、肝、法氏囊中的动态分布规律,根据GenBank中鸭瘟病毒的UL6基因设计引物RTF和RTR,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量方法,建立了特异性强、敏感性高、重复性好的标准曲线。利用建立的标准曲线对采集组织中鸭瘟病毒DNA的拷贝数进行定量。结果显示,免疫后在脑、胸腺、肝、肾、脾、法氏囊均能检测到鸭瘟病毒DNA,且免疫后第1天至第3周,肝、脑、肾中病毒DNA的拷贝数较其他受检组织中鸭瘟病毒DNA的拷贝数高。免疫后至第9周,鸭瘟病毒DNA检出不稳定。试验结束时,除肾、法氏囊外,其他组织中病毒DNA的拷贝数均下降至1×105copies以下。表明鸭瘟病毒疫苗株对SPF鸭组织具有泛嗜性,其主要分布于SPF鸭脑、肝、肾中。

关键词：鸭瘟病毒疫苗株标准曲线动态分布

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传染性喉气管炎病毒WG株糖蛋白gD基因主要抗原区的表达

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中国兽医科学 2011年第2期41卷 188-192页

作者：魏秀英石星明张晶王玫赵妍胡顺磊崔红玉全炎铭闫帅陈洪岩王云峰东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为表达传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白,根据GenBank中登录的ILTV全基因组序列(EU675324)设计了1对引物,进行gD全基因的PCR扩增,产物经纯化后连接至pGEM-T Easy载体,进行序列测定,采用DNAStar软件分析gD蛋白的抗原性,选择抗原性强的第25... 详细信息

为表达传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白,根据GenBank中登录的ILTV全基因组序列(EU675324)设计了1对引物,进行gD全基因的PCR扩增,产物经纯化后连接至pGEM-T Easy载体,进行序列测定,采用DNAStar软件分析gD蛋白的抗原性,选择抗原性强的第256～405aa的编码片段设计引物并进行PCR扩增,结果获得截短的gD基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a中,并转化*** BL21(DE3)。经IPTG诱导后,获得大小为43.5ku的重组蛋白,命名为r-gD。Western-blot分析结果表明,r-gD具有较强的抗原性。

关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白D 序列分析蛋白质免疫印迹

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柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响

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中国药理学通报 2011年第5期27卷 677-681页

作者：武密山赵素芝任立中王茹白霞韩红伟李彬河北医科大学中医学院方剂学教研室河北石家庄050091 石家庄市桥东区医院河北石家庄050041 河北医科大学第一医院骨科河北石家庄050031 河北医科大学生物化学教研室河北石家庄050017

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞... 详细信息

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphos-phatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05)。结论低浓度柚皮苷(0.1μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的。

关键词：柚皮苷骨质疏松成骨细胞细胞增殖 c-fos c-jun

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原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

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中国医科大学学报 2011年第7期40卷 580-583页

作者：熊建军周英妹干丽君龚帧林玲九江学院基础医学院药理教研室江西九江332000 江西省高等学校系统生物学临床应用重点实验室江西九江332000

目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增(5′RACE)方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点在内的-2828^+52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载... 详细信息

目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增(5′RACE)方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点在内的-2828^+52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2与Hela细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5′端非编码区2880bp序列正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22promoter转染HepG2细胞和Hela细胞后,检测到荧光素酶的高表达(P<0.05)。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。

关键词： USP22基因启动子报告基因

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