检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2008年第10期24卷 1328-1330页

作者：李丹露王丽艳陈立朋张秀菊刘艳杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室.省部共建国家重点实验室培训基地黑龙江哈尔滨150086

目的观察M3受体激动剂胆碱和毛果芸香碱对氯化钡诱发Wistar大鼠心律失常的保护作用。方法舌下静脉注射氯化钡诱发Wistar大鼠心律失常,分别给予胆碱和毛果芸香碱以及M3受体特异阻断剂4-二苯乙酰氧-N-甲基哌啶甲碘化物(4-DAMP)干预,观察... 详细信息

目的观察M3受体激动剂胆碱和毛果芸香碱对氯化钡诱发Wistar大鼠心律失常的保护作用。方法舌下静脉注射氯化钡诱发Wistar大鼠心律失常,分别给予胆碱和毛果芸香碱以及M3受体特异阻断剂4-二苯乙酰氧-N-甲基哌啶甲碘化物(4-DAMP)干预,观察大鼠心律失常的发生和发展情况。结果氯化钡4mg·kg-1可诱发大鼠出现明显的双向性室性心律失常,胆碱10mg·kg-1和毛果芸香碱0.2mg·kg-1均能推迟双向性室性心律失常的出现,并使心律失常的持续时间缩短(P<0.01)、严重程度减轻(P<0.01)。胆碱和毛果芸香碱的上述作用又被M3受体阻断剂4-DAMP0.12μg·kg-1部分阻断(P<0.05)。结论胆碱和毛果芸香碱通过激动心肌M3受体,对氯化钡诱发Wistar大鼠心律失常的发生和发展具有保护作用。

关键词： M3受体激动剂胆碱毛果芸香碱 4-DAMP 氯化钡心律失常

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三氧化二砷对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响

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中国药学杂志 2008年第24期43卷 1867-1870页

作者：孙宏丽董德利李磊乔国芬刘艳初文峰杨宝峰哈尔滨医科大学大庆校区药理教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨150081 哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第五医院骨科黑龙江大庆163316

目的研究三氧化二砷(arsen ic trioxide,As2O3)对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨As2O3诱导QT间期延长的离子靶点。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术深入研究As2O3对豚鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、... 详细信息

目的研究三氧化二砷(arsen ic trioxide,As2O3)对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨As2O3诱导QT间期延长的离子靶点。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术深入研究As2O3对豚鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(IK1)的影响。结果As2O350和100μmol.L-1分别使APD50从对照组的(273±78)m s增加到(456±35)m s(P<0.01)和(513±41)m s(P<0.01),使APD90从对照组的(286±82)m s增加到(468±36)m s(P<0.01)和(524±40)m s(P<0.01);实验电压为+70 mV时,50和100μmol.L-1As2O3分别使IK从对照组的(6.7±1.7)pA/pF减少至(4.9±1.6)pA/pF(P<0.05)和(4.5±1.8)pA/pF(P<0.05);在实验电压为-120 mV时,As2O350和100μmol.L-1分别使IK1从对照组的(-20±5)pA/pF减少至(-13±3)pA/pF(P<0.05)和(-11±2)pA/pF(P<0.05)。结论As2O3诱导QT间期延长的离子机制可能与其扰乱了心肌细胞膜离子通道间的平衡,抑制IK和IK1,从而导致APD延长有关。

关键词：三氧化二砷心室肌细胞钾电流

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缝隙连接蛋白43在脑心综合症中的作用研究

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中国药理学通报 2008年第4期24卷 526-530页

作者：潘国聘王玲孙丽华张勇张高小杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室、黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081

目的检测缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)在脑心综合症模型大鼠心室肌中的表达及分布,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉制备脑心综合症模型,检测心电图,电镜下观察心肌细胞的亚显微结构,采用West... 详细信息

目的检测缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)在脑心综合症模型大鼠心室肌中的表达及分布,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉制备脑心综合症模型,检测心电图,电镜下观察心肌细胞的亚显微结构,采用Westernblot和免疫组织化学的方法,检测心室肌中Cx43表达和分布的改变。结果电镜显示脑缺血后,心肌组织闰盘内桥粒和缝隙连接结构及分布改变,与正常对照组相比,Western blot和免疫组织化学结果均显示脑缺血后2h心室肌中Cx43的表达水平明显降低,而缺血后24h心室肌中Cx43的表达增加(P<0·05)。心电图显示,发生心律失常之前10个心动周期的心电QT间期较脑未梗死前延长(P<0·01)。结论大鼠右侧局灶性脑缺血所引起的心律失常可能与心室肌Cx43蛋白表达异常并导致的QT间期延长有关。

关键词：缝隙连接蛋白43 脑心综合症心律失常 QT间期

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枳壳醇提物对大鼠离体胸主动脉环的收缩作用与机制

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中国药理学通报 2008年第6期24卷 810-814页

作者：庄须国潘振伟刘晓丹李国玉牛慧莉吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室、省部共建生物医药国家重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨枳壳醇提物(FAE)对大鼠离体胸主动脉的收缩作用与机制。方法制备Wistar大鼠胸主动脉环,采用离体血管实验方法,经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化。结果FAE能够浓度依赖性的提高主动脉环张力,对去除内皮血管环的最... 详细信息

目的探讨枳壳醇提物(FAE)对大鼠离体胸主动脉的收缩作用与机制。方法制备Wistar大鼠胸主动脉环,采用离体血管实验方法,经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化。结果FAE能够浓度依赖性的提高主动脉环张力,对去除内皮血管环的最大收缩幅度为(74±4.9)%,明显强于对内皮完整血管环的作用(44±3.4)%(P<0.01)。预孵一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(300mmol.L-1)后,FAE对内皮完整的血管环的最大收缩幅度明显提高,达到(77±5.3)%(P<0.01)。在去除内皮的血管环上,维拉帕米(10-5mol.L-1,VER)及无钙液孵育均可明显阻断FAE的收缩作用,其最大收缩幅度分别降低(52±3.8)%和(49±3.7)%(P<0.01);激光扫描共聚焦检测细胞内钙的结果表明,FAE浓度依赖性(0.16、0.32g.L-1)的增加静息状态平滑肌细胞胞质内钙浓度。结论FAE能够浓度依赖性收缩大鼠胸主动脉,其作用机制可能与激活血管平滑肌上的电压依赖性钙通道,促使胞外Ca2+内流有关;同时,FAE也作用于血管内皮细胞,促进一氧化氮的释放,部分抵消其缩血管作用。

关键词：枳壳醇提物血管收缩钙通道一氧化氮胸主动脉环激光扫描共聚焦

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猪IFN-γ mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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中国兽医科学 2009年第2期39卷 168-172页

作者：韦天超田志军周艳君安同庆肖燕彭金美姜一峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 中国农业科学院上海兽医研究所上海200232

为建立一种检测猪γ-干扰素（IFN-γ）的荧光定量RT—PCR方法，针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A（CyPA）的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针，以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18T-CyPA为标准品，进行实时荧光定... 详细信息

为建立一种检测猪γ-干扰素（IFN-γ）的荧光定量RT—PCR方法，针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A（CyPA）的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针，以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18T-CyPA为标准品，进行实时荧光定量RT-PCR检测，并构建猪IFN-γ mRNA和CyPA的荧光定量RT—PCR标准曲线。结果表明，建立的方法在1×10^1～1×10^7copies／μL模板范围内具有良好的线性关系，相关系数产均高达0．999，扩增效率均高于99．0％；可检测至少为100 copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点，可应用于临床样品的检测。

关键词：猪 IFN-γ 荧光定量RT-PCR TaqMan荧光探针

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槐果碱对HERG钾通道电生理功能的影响

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药学学报 2008年第1期43卷 44-49页

作者：戚志平史珊珊赵学玲赵文晓白云龙吕延杰李宝馨杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

HERG(human ether-a-go-go-related gene)钾通道在心律失常的发生及治疗中具有重要作用,因此已成为近些年来的研究热点。本研究应用全细胞膜片钳技术记录在HEK(human embryonic kidney)293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线... 详细信息

HERG(human ether-a-go-go-related gene)钾通道在心律失常的发生及治疗中具有重要作用,因此已成为近些年来的研究热点。本研究应用全细胞膜片钳技术记录在HEK(human embryonic kidney)293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线(激活、失活、复活和去活化)来研究不同浓度槐果碱对HERG电流及动力学曲线的影响,以了解槐果碱抗心律失常的作用机制。结果表明,槐果碱浓度依赖性地抑制HERG时间依赖性电流(Istep)及其尾电流(Itail)。在0 mV时,10、30、100及300μmol.L-1槐果碱对Istep的抑制率分别为(10.7±2.8)%、(11.3±5.5)%、(47.0±2.3)%及(53.7±2.5)%,对Itail的抑制率分别为(1.1±3.0)%、(17.1±3.3)%、(32.7±1.9)%(P<0.05,n=12)及(56.0±2.4)%(P<0.05,n=13)。100μmol.L-1槐果碱作用后失活时间常数减小,失活速率变快;复活时间常数在大部分指令电压下明显减小(P<0.01,n=12),复活速度加快;瞬时失活时间常数减小(P<0.05,n=12);稳态激活、去活化无明显改变。由此可看出,槐果碱通过影响通道的失活过程抑制HERG钾电流,使得心肌细胞复极时间延长,改善快速性心律失常。

关键词：槐果碱 HERG 膜片钳技术

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肥胖大鼠血脂和体脂肪变化及心室肌细胞内钙离子强度与心律失常发生的关系

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中国地方病学杂志 2008年第6期27卷 632-635页

作者：郎临川姜兴郝艳坤白云龙吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室 150081 省部共建生物医药国家重点实验室

目的观察高脂饮食诱导肥胖（DIO）大鼠血脂和体脂肪变化，探讨心室肌细胞内钙离子强度与心律失常发生的关系。方法健康雄性SD大鼠60只，体质量200～250g。将大鼠按体质量随机分为对照组（15只）和高脂饮食组（45只），高脂饮食组采用高... 详细信息

目的观察高脂饮食诱导肥胖（DIO）大鼠血脂和体脂肪变化，探讨心室肌细胞内钙离子强度与心律失常发生的关系。方法健康雄性SD大鼠60只，体质量200～250g。将大鼠按体质量随机分为对照组（15只）和高脂饮食组（45只），高脂饮食组采用高脂饮食诱导法建立肥胖大鼠模型。喂养12周后，在高脂饮食组筛选体质量增加明显的大鼠进入肥胖组（15只）。两组各选8只大鼠舌下注射0．1mg／kgBaCl2，诱导心律失常，应用标准Ⅱ导联心电图连续监测1h，评价大鼠心律失常发生率及严重程度。采集两组大鼠腹主动脉血，分离血清，测血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇。分离大鼠肾周脂肪、睾周脂肪和肠系膜脂肪，称重、计算体脂比。酶解法分离大鼠单个心室肌细胞，应用激光共聚焦技术记录细胞内钙离子强度（[Ca^2＋]i）。结果肥胖组大鼠体脂比[（7．71±0．74）％]明显高于对照组[（4．69±0．37）％]，两组比较差异有统计学意义（t=3．650，P〈0．05）；血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平，肥胖组[（1．26±0．04）、（0．58±0．10）、（0.51±0．04）mmol／L]与对照组[（0．92±0．08）、（0．29±0．03）、（0．31±0．04）mmo]／L]比较显著增高（z值分别为3．801、2．778、3．536，P〈0．05）；肥胖组大鼠心律失常发生率高于对照组（χ^2=5．333，P〈0．05），心律失常评分肥胖组（2．5±0．6）高于对照组（0）；肥胖组大鼠心室肌细胞内钙离子强度（247．96±20．03）明显高于对照组（174．25±23．13），两组比较差异有统计学意义（t=2．409，P〈0．05）。结论肥胖大鼠心律失常发生率增加，血脂升高，心肌细胞内钙离子积聚是引发肥胖源性心律失常的主要机制之一。

关键词：肥胖心律失常细胞内钙离子激光扫描共焦显微镜

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锦灯笼水提物对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制

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中草药 2008年第11期39卷 1709-1712页

作者：刘晓丹潘振伟庄须国李国玉牛慧莉吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理教研室省部共建生物医药国家重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的观察锦灯笼水提物对大鼠离体胸主动脉环的舒血管作用并探讨其作用机制。方法采用大鼠胸主动脉环张力测定法。结果在内皮完整及去内皮血管上,锦灯笼水提物均浓度(0.5～64g/L)依赖性地降低苯肾上腺素(1.0×10-5mol/L)及氯化钾(6.0... 详细信息

目的观察锦灯笼水提物对大鼠离体胸主动脉环的舒血管作用并探讨其作用机制。方法采用大鼠胸主动脉环张力测定法。结果在内皮完整及去内皮血管上,锦灯笼水提物均浓度(0.5～64g/L)依赖性地降低苯肾上腺素(1.0×10-5mol/L)及氯化钾(6.0×10-2mol/L)预收缩血管的张力;一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对锦灯笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);钾通道阻断剂TEA、4-氨基吡啶(4-AP)、格列苯脲对锦竹笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);但在无钙环境下,锦灯笼水提物对苯肾上腺素预收缩血管的舒张作用明显减弱,与有钙液相比,差异显著(P<0.01)。此外,锦灯笼水提物对PDBu预收缩的血管有明显的舒张作用(P<0.01)。结论锦灯笼水提物的舒张血管作用表现为非内皮依赖性,其舒张作用可能有与其抑制外钙内流,以及抑制PKC信号传导通路有关。

关键词：锦灯笼水提物胸主动脉环舒张外钙内流

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细胞定位表达的新城疫病毒HN基因真核重组质粒的构建和抗肿瘤作用研究

细胞定位表达的新城疫病毒HN基因真核重组质粒的构建和抗肿瘤作用...

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：隋红李曦张永欣李乐静白玉贤哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪病研究室

目的构建定位表达于细胞不同部位的新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(HN)基因,初步研究它们在抗肿瘤作用中的差异和机制。方法应用现代分子生物学技术,以新城疫病毒D90株RNA为模板,将克隆的HN基因片段经双酶切后定向插入真核表达质粒pcDNA3.... 详细信息

目的构建定位表达于细胞不同部位的新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(HN)基因,初步研究它们在抗肿瘤作用中的差异和机制。方法应用现代分子生物学技术,以新城疫病毒D90株RNA为模板,将克隆的HN基因片段经双酶切后定向插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,经过定向插入组织凝血酶原激活物(tPA)的前导序列和/或A型流感病毒血凝素(HA)基因跨膜区(TM)片段进行修饰分别构建胞浆型、跨模型和分泌型DNA质粒。经脂质体转染人肺癌细胞系A549,通过MTT和WST-1检测细胞活力,流式细胞仪和电镜检测凋亡差异。皮下注射A549细胞构建荷瘤小鼠,瘤内注射三种质粒,检测三种质粒对荷瘤小鼠肿瘤生长和抗肿瘤免疫反应的影响。结果体外转染人肺癌A549细胞系,经间接免疫荧光和WESTEN-BLOT检测正确表达于胞浆,胞膜和细胞外。应用MTT法和WST-1补充实验发现,三种质粒对A549细胞系的生长抑制率存在差异,表现在:24h以内,跨膜型质粒对A549生长抑制率最高(32.31%),同胞浆型,分泌型和空载体相比有统计学差异(P<0.01)。48h以内,分泌型质粒对A549生长抑制率最高(52.75%),同胞浆型,和空载体相比有统计学差异(P<0.05)与跨模型无统计学差异。72h以后,三种定位表达质粒对A549生长抑制率无差异。流式细胞仪检测胞浆型、分泌型和跨模型质粒能够诱导A549细胞出现凋亡,24h内早期凋亡的比率分别为30.13%,39.29%和49.59%,72h总凋亡比率分别为48.27%,94.2%和54.56%。并且通过电镜和AO/PI双染激光共聚焦显微镜分别可检测到凋亡小体和死亡细胞。体外实验发现,从首次瘤内注射开始15天内,瘤内注射HN蛋白胞浆型、跨模型和分泌型DNA质粒和空质粒在控制肿瘤生长上无显著差异,在第18天和21天时跨模型质粒的抗肿瘤作用最强,同胞浆型、分泌型DNA质粒和空质粒相比具有统计学差异(P<0.05),收集小鼠脾淋巴细胞,经淋巴细胞增殖实验和CTL检测,发现HN蛋白的跨模型质粒组淋巴细胞增殖指数最高和效靶比为75:1时CTL活性最高,同胞浆型、分泌型DNA质粒和空质粒相比具有统计学差异(P<0.05)。结论定位表达于细胞膜上的HN蛋白即跨模型HN蛋白具有更高的细胞免疫优势,跨模型HN蛋白有望成为肺癌生物治疗的有效途径。

关键词：抗肿瘤作用分泌型瘤内注射定位表达重组质粒生长抑制率新城疫病毒细胞定位

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细胞内钙在脑心综合征心律失常中作用研究

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中国药理学通报 2008年第12期24卷 1607-1610页

作者：张高小王玲李超孙丽华潘国聘杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室省部共建国家重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的通过研究脑心综合征心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化及其来源,以探讨其与脑心综合征心律失常的关系。方法线栓法建立脑心综合征模型,监测心电图,酶法分离心肌细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察心室肌[Ca2+]i的变化及其途径。... 详细信息

目的通过研究脑心综合征心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化及其来源,以探讨其与脑心综合征心律失常的关系。方法线栓法建立脑心综合征模型,监测心电图,酶法分离心肌细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察心室肌[Ca2+]i的变化及其途径。结果模型组QT间期较正常组和假手术组明显延长(P<0.01);在正常台氏液中,KCl诱发模型组心肌[Ca2+]i升高幅度高于假手术组(P<0.01),用1μmol·L-1和10μmol·L-1维拉帕米预孵育模型组后,10μmol·L-1维拉帕米明显降低KCl诱发的心肌[Ca2+]i升高幅度(P<0.01);在无钙台氏液中,caffeine诱发模型组心肌[Ca2+]i升高幅度高于假手术组(P<0.01)。结论通过心肌细胞L-型钙通道和肌浆网雷诺定受体介导的内钙异常升高可能是脑心综合征心律失常的原因之一。

关键词：脑心综合征激光扫描共聚焦显微镜心律失常钙

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