检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2007年第9期23卷 1174-1176页

作者：王振华薛一雪中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物教研室辽宁沈阳110001

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶... 详细信息

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。

关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-1β 血肿瘤屏障

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北方汉族人群醛固酮合成酶基因多态性与高血压的关系

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 329-335页

作者：牛文全王建炳李素洁周文郁赵景波邱长春中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 哈尔滨医科大学公共卫生学院流行病学教研室哈尔滨150086 黑龙江省电力医院体检科哈尔滨150081

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限... 详细信息

目的探讨北方汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区C-344T和第三外显子K173R多态性位点与原发性高血压的关系。方法在哈尔滨报社人群中分别选取182例原发性高血压患者和189例正常对照者进行病例-对照研究,采用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序技术检测C-344T和K173R的基因型。结果各位点基因型分布在男性和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。C-344T位点的基因型和等位基因频率以及K173R的等位基因频率在整个群体和按性别分组后亚群体的分布在高血压组和对照组间差异均没有显著性(P≥0.05)。而K173R位点的基因型频率在整个群体中具有边缘统计学意义(P=0.0500),且在女性组中更为明显(P=0.0038),并以显性方式遗传,这种遗传方式在对混杂因素进行校正后更加明显。同时K173R与女性的收缩压显著相关。结论在北方汉族人群中,CYP11B2 K173R多态性位点与女性高血压的易感相关联。

关键词：原发性高血压醛固酮合成酶基因基因多态性

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钙离子在15-烷基二十碳四烯酸介导的肺动脉平滑肌收缩中的作用

钙离子在15-烷基二十碳四烯酸介导的肺动脉平滑肌收缩中的作用

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中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议

作者：梁淑俊郑晓东唐晓波朱大岭哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室

目的研究15-羟基二十碳四烯酸（15-HETE）与钙信号的相互关系,更好的阐述缺氧引起肺动脉收缩和肺血管重构,以及最终引起致死性不可逆性肺动脉高压的发病机制,以期找到治疗肺动脉高压的靶点药物。方法利用组织浴槽血管环检测肺动脉环的... 详细信息

目的研究15-羟基二十碳四烯酸（15-HETE）与钙信号的相互关系,更好的阐述缺氧引起肺动脉收缩和肺血管重构,以及最终引起致死性不可逆性肺动脉高压的发病机制,以期找到治疗肺动脉高压的靶点药物。方法利用组织浴槽血管环检测肺动脉环的血管张力,共聚焦显微镜扫描成像技术观测钙通道阻断药和无钙液对肺动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。结果 2 μmol·L 15-HETE 引起肺动脉血管环张力增加（张力从0．30 g 增加到0．36 g,n=7,P＜0．05）,1 μmol·L15- HETE 使肺动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度升高,升高趋势表现为时间依赖性的瞬时上升期和继发的缓慢上升期或者平台期。L-型钙通道阻断药硝苯地平(5 μmol·L)和非选择性钙通道阻滞药 La (30 μmol·L)可以明显阻断2 μmol·L15-HETE 引起的肺动脉血管环张力增加（n=5,P＜0．05）及肺动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的升高,但仅阻断了15-HETE(1 μmol·L)引起的效应曲线的缓慢上升期或平台期,而对瞬时上升期没有影响。无钙液环境下15-HETE 仍然可以引起细胞内钙荧光强度升高（n=10,P＜0．05）。结论 15-HETE 可以引起细胞内钙库的快速释放和继发的细胞膜上钙离子通道的开放,最终引起胞浆内钙离子浓度升高,触发一系列钙信号而导致缺氧肺动脉的收缩。

关键词： 15-羟基二十碳四烯酸钙离子肺动脉的收缩

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15-HETE抑制低氧性肺动脉平滑肌细胞Kv1．5通道的表达与全细胞钾电流

15-HETE抑制低氧性肺动脉平滑肌细胞Kv1．5通道的表达与全细胞钾...

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中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议

作者：褚晓杰郭蕾唐晓波朱大岭哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室

目的证明亚急性低氧通过15-HETE 对 Kv1．5通道的抑制作用导致肺动脉血管收缩。方法使用15-LO 的阻断药(5μmol·LCDC、30 μmol·LNDGA),组织浴槽血管环,逆转灵-聚合酶链反应（RT-PCR）,Western-blot 以及 Patch-claMp 等方法... 详细信息

目的证明亚急性低氧通过15-HETE 对 Kv1．5通道的抑制作用导致肺动脉血管收缩。方法使用15-LO 的阻断药(5μmol·LCDC、30 μmol·LNDGA),组织浴槽血管环,逆转灵-聚合酶链反应（RT-PCR）,Western-blot 以及 Patch-claMp 等方法,在肺动脉平滑肌组织及细胞中观察。结果亚急性低氧以及15-HETE 都可以减少 Kv1．5通道的表达。在亚急性低氧的肺动脉组织以及肺动脉平滑肌细胞中,阻断15-HETE 的产生后,Kv1．5通道的表达量在蛋白质和 mRNA 水平与15-HETE 未阻断组比较均增加,电压门控性通道钾电流也明显增加。在低氧肺动脉平滑肌细胞中,阻断15-HETE 产生后,外源性15-HETE(1 μmol·L)明显恢复 Kv1．5通道的表达（n=4,P＜0．05）。结论血管环、 Western-blot 和膜片钳实验的结果表明低氧对 Kv1．5通道的抑制作用是通过内源性15-HETE 调节。

关键词： 15-HETE 低氧,亚急性钾电流

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细胞治疗对脊髓前角运动神经元保护作用的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2007年第5期21卷 497-501页

作者：刘明辉杨志明唐洁金连宏贾继峰李秀群哈尔滨医科大学附属第一临床医院创伤外科哈尔滨150001 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室西南科技大学生命科学与工程学院黑龙江省卫生厅

目的研究注射不同的异体细胞于大鼠失神经靶肌肉对脊髓前角运动神经元的保护作用。方法雌性6周龄SD大鼠36只,体重120～150g;随机分为四组,每组9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,7d... 详细信息

目的研究注射不同的异体细胞于大鼠失神经靶肌肉对脊髓前角运动神经元的保护作用。方法雌性6周龄SD大鼠36只,体重120～150g;随机分为四组,每组9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,7d注射1次,共4次。A组注射1×106/ml单纯雪旺细胞1ml、B组注射1×106/ml雪旺细胞加成肌细胞1ml(雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1)、C组注射1×106/ml混合细胞提取液1ml(雪旺细胞∶成肌细胞∶肾内皮细胞为1∶1∶1)、D组无血清培养液1ml作对照。术后3个月进行脊髓前角运动神经元内C-Jun表达及酶组织化学观察。结果术后3个月,A、B及C组的C-Jun阳性表达脊髓前角运动神经元的形态均较D组好,神经元数目明显多于D组。各组脊髓前角运动神经元内C-Jun活性表达:A组128.591±0.766,B组116.729±0.778,C组100.071±2.017,D组144.648±2.083;D组与A、B及C组比较,差异有统计学意义(P<0.01);A、B组间及B、C组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。脊髓前角运动神经元内酶组织化学观察:A、B及C组神经元胞体轮廓清楚,胞体饱满,D组神经元胞体轮廓模糊,胞浆和细胞核界限不清晰。各组脊髓前角运动神经元酶活性比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论雪旺细胞、雪旺细胞加成肌细胞、混合细胞提取液均有保护脊髓前角运动神经元的作用,混合细胞提取液优于雪旺细胞及雪旺细胞加成肌细胞。

关键词：雪旺细胞成肌细胞肾内皮细胞运动神经元脊髓前角

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猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型抑制消减杂交文库的构建和分析

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中国兽医科学 2007年第7期37卷 553-556页

作者：王勇刘思国王春来宫强刘建东刘慧芳周媛媛常月红云孟克李广兴中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

为了研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）不同血清型之间的差异表达基因,采用抑制消减杂交（SSH）法,以APP血清7型DNA作为测试方（Tester）、APP血清1型DNA作为驱动方（Driver）,进行2轮杂交和2轮选择PCR扩增,将PCR扩增产物连接pMD18-... 详细信息

为了研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）不同血清型之间的差异表达基因,采用抑制消减杂交（SSH）法,以APP血清7型DNA作为测试方（Tester）、APP血清1型DNA作为驱动方（Driver）,进行2轮杂交和2轮选择PCR扩增,将PCR扩增产物连接pMD18-T载体,筛选阳性克隆后进行测序和序列比对.结果显示,15个阳性克隆中的13个为已知序列,其同源性为88%～100%,2个为未知序列,其结构和功能还需进一步研究.首次构建了APP7的抑制消减杂交文库,为APP感染和致病机制的研究奠定了基础.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌血清7型抑制消减杂交 DNA文库

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细胞治疗促进周围神经再生的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2007年第6期21卷 571-576页

作者：刘明辉杨志明金连宏贾继峰李秀群唐洁哈尔滨医科大学附属第一临床医院创伤外科哈尔滨150001 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室西南科技大学生命科学与工程学院黑龙江省卫生厅

目的研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉,对神经再生的促进及防止运动终板变性、促进肌肉功能恢复的作用。方法取1周龄SD乳鼠400只,体重20.0±2.3g,制备雪旺细胞、成肌细胞和肾内皮细胞。将SD成年雌性大鼠36只,体重120～150g,... 详细信息

目的研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉,对神经再生的促进及防止运动终板变性、促进肌肉功能恢复的作用。方法取1周龄SD乳鼠400只,体重20.0±2.3g,制备雪旺细胞、成肌细胞和肾内皮细胞。将SD成年雌性大鼠36只,体重120～150g,随机分为四组,每组9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,每7天注射1次,共4次。A组注射1×106/ml单纯雪旺细胞1ml,B组注射1×106/ml雪旺细胞加成肌细胞1ml（雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1）,C组注射1×106/ml混合细胞提取液1ml（雪旺细胞∶成肌细胞∶肾内皮细胞为1∶1∶1）,D组注射无血清培养液1ml作对照。术后行大体观察,术后3个月取材行靶肌肉的组织形态学观察,行单位面积运动终板个数检测、单位面积靶肌肉Actin阳性肌纤维个数检测,以及酶组织化学观察。于神经缝合口近、远端检测神经鞘细胞密度和再生神经纤维面积的观察。结果术后1~3个月A、B、C组大鼠患肢由不同程度的足踝部溃疡逐渐愈合,肿胀消退,恢复正常行走;D组患侧下肢肌肉萎缩,足踝溃疡、肿胀,足趾挛缩明显,拖行。术后3个月,单位面积靶肌肉运动终板个数、Actin阳性细胞数、失神经肌肉各种酶活性和再生神经的组织学改变,C组优于A、B组（P〈0.01）。A、B、C组实验结果均明显优于D组（P〈0.01）。结论雪旺细胞、雪旺细胞加成肌细胞、混合细胞提取液均有促进神经再生及防止运动终板变性、促进肌肉功能恢复的作用,混合细胞提取液作用优于雪旺细胞及雪旺细胞加成肌细胞移植。

关键词：雪旺细胞成肌细胞肾内皮细胞靶肌肉注射周围神经再生

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猪泛素基因与PRRSV GP5基因融合表达质粒的构建及其免疫效果

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中国兽医科学 2007年第5期37卷 413-418页

作者：侯艳红周艳君闫丽萍田志军杨汉春童光志中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室北京100094 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

构建了泛素(ubiquitin,Ub)基因与密码子优化的PRRSV GP5蛋白(optiGP5)基因融合表达质粒pIR-Ub-optiGP5。间接免疫荧光和Western-blot分析表明,重组质粒转染293T细胞后能够瞬时表达。将pIR-optiGP5和pIR-Ub-optiGP5两种质粒DNA肌肉注射免疫BALB/c小鼠后,分别检测小鼠血清中抗GP5抗体、T淋巴细胞的增殖能力以及CTL活性。结果显示,pIR-optiGP5质粒免疫组在二免后可以检测到荧光抗体,而pIR-Ub-optiGP5质粒免疫组一直未检测到抗GP5抗体,但该免疫组的T淋巴细胞增殖指数及针对GP5的特异性CTL反应数值明显高于pIR-optiGP5质粒免疫组。这表明泛素与GP5的融合表达可增强细胞免疫反应。

关键词：泛素 PRRSV GP5 密码子优化 DNA免疫

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茨城病毒VP7蛋白基因的克隆表达及间接ELISA方法的建立

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中国兽医科学 2007年第11期37卷 960-963页

作者：张文龙刘光亮王君伟吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

采用RT-PCR方法扩增出了茨城病毒(IBAV)No.2株编码VP7蛋白的S7全长基因,并克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,在***21中表达。经Western-blot检测,表达的重组VP7蛋白具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测IBA... 详细信息

采用RT-PCR方法扩增出了茨城病毒(IBAV)No.2株编码VP7蛋白的S7全长基因,并克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,在***21中表达。经Western-blot检测,表达的重组VP7蛋白具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测IBAV血清抗体的间接ELISA方法。

关键词：茨城病毒 S7基因表达纯化间接ELISA

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多发性硬化症与EB病毒关系的研究进展

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中国基层医药 2007年第5期14卷 865-866页

作者：孙艳张春晶孙艳影钟照华齐齐哈尔医学院医学技术系黑龙江省齐齐哈尔161042 黑龙江省哈尔滨医科大学微生物教研室

多发性硬化症（multiple sclerosis，MS）是一种中枢神经系统的脱髓鞘性疾病，病变累及的部位为脑和脊髓。特点为病灶多发，常有缓解和复发，病残性大。表现为多种神经系统的症状和体征。有复发缓解型、继发进展型、原发进展型、复发进... 详细信息

多发性硬化症（multiple sclerosis，MS）是一种中枢神经系统的脱髓鞘性疾病，病变累及的部位为脑和脊髓。特点为病灶多发，常有缓解和复发，病残性大。表现为多种神经系统的症状和体征。有复发缓解型、继发进展型、原发进展型、复发进展型和良性MS等数种类型，多见于欧洲及北美国家，在西方社会MS是造成青壮年神经性残疾中仅次于外伤的第二大因素。

关键词：多发性硬化症 EB病毒中枢神经系统脱髓鞘性疾病进展型西方社会缓解型复发

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