检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2007年第2期23卷 173-177页

作者：谢晓利刘云会薛一雪中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第二医院神经外科辽宁沈阳110003

目的探讨七叶皂苷钠(***-1.d-1)抗大鼠脑出血后脑水肿的作用及其机制。方法采用♂Wistar大鼠右侧基底核注入50μl自体全血的方法建立模型,并在模型建立后6,24,48或72h处死大鼠。应用干湿重法、酶学方法、免疫组化法和Western blot法,测... 详细信息

目的探讨七叶皂苷钠(***-1.d-1)抗大鼠脑出血后脑水肿的作用及其机制。方法采用♂Wistar大鼠右侧基底核注入50μl自体全血的方法建立模型,并在模型建立后6,24,48或72h处死大鼠。应用干湿重法、酶学方法、免疫组化法和Western blot法,测定各组大鼠脑组织含水量,Na+,K+含量,神经胶质原纤维蛋白(GFAP)阳性细胞和紧密连接相关蛋白occludin表达的变化。结果与假手术组比,模型组出血同侧脑组织含水量,Na+含量和GFAP阳性细胞均明显增加(P<0.05),K+含量和occludin的表达明显减少(P<0.05);与模型组比,治疗组出血同侧脑组织含水量,Na+含量和GFAP阳性细胞明显减少(P<0.05),K+含量和occludin的表达则明显增加(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可减轻和(或)延缓脑出血后脑水肿的发生,进而改善脑出血的预后。

关键词：脑出血脑水肿 occludin 七叶皂苷钠

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磺脲受体1基因外显子16-3c/t多态性与格列齐特降血糖的关系

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中国临床药理学杂志 2007年第5期23卷 369-371页

作者：张慧娟刘晓民匡洪宇孙宏邢厚恂哈尔滨医科大学第一临床医院内分泌科哈尔滨医科大学公共卫生学院安徽省生物医学研究所

目的研究磺脲类药物受体1(SUR1)基因多态性与格列齐特降糖疗效的关系。方法用Taqman-PCR技术检测119例2型糖尿病患者SUR1基因型,分析基因型与血糖变化的关系。结果SUR1基因16外显子-3c/t位点的突变纯合子tt基因型患者,其基线空腹胰岛素... 详细信息

目的研究磺脲类药物受体1(SUR1)基因多态性与格列齐特降糖疗效的关系。方法用Taqman-PCR技术检测119例2型糖尿病患者SUR1基因型,分析基因型与血糖变化的关系。结果SUR1基因16外显子-3c/t位点的突变纯合子tt基因型患者,其基线空腹胰岛素水平高于野生纯合子cc基因型患者(P<0.05)。格列齐特治疗后,各基因型空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数下降幅度均无显著性差异。结论16外显子-3c/t多态性与格列齐特降糖疗效无关。

关键词： 2型糖尿病基因多态性格列齐特

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番鸭呼肠孤病毒S基因组的克隆与序列分析

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中国兽医科学 2007年第4期37卷 305-311页

作者：耿宏伟郭东春刘明胡奇林张云东北农业大学生命科学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 福建农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350003

对番鸭呼肠孤病毒S12和S14毒株S基因组（S1-4）中σA、σB、σNS和σC蛋白基因进行了克隆和测序。序列分析表明：鸭呼肠孤病毒（DRV）与禽呼肠孤病毒（ARV）的σA和σNS基因的核苷酸同源性分别为76．0％～77．1％和78．4％～79．6％，... 详细信息

对番鸭呼肠孤病毒S12和S14毒株S基因组（S1-4）中σA、σB、σNS和σC蛋白基因进行了克隆和测序。序列分析表明：鸭呼肠孤病毒（DRV）与禽呼肠孤病毒（ARV）的σA和σNS基因的核苷酸同源性分别为76．0％～77．1％和78．4％～79．6％，氨基酸同源性分别为89．5％～91．2％和91.6％～92．7％；而具有诱导群特异性和型特异性中和抗体的σB和σC基因的核苷酸同源性分别为60．3％～64．4%和2．7%～9．9％，氨基酸同源性分别为61．4％～62．0％和22．6％～26．7％；DRV和ARV抗原性存在差异。而DRVS12／S14与法国89026株σA、σB、σNS和σC基因的核苷酸同源性分别为90．0％、93．6％、87．9％～88．0％和93．1%，氨基酸同源性分别为97．1%、94．3%、95．7%～95．9%和93．7％。进化树分析表明，DRV与ARV形成不同的分支，DRV是正呼肠孤病毒属中不同于ARV的一种新的呼肠孤病毒。

关键词：番鸭呼肠孤病毒 σA基因 σB基因 σNS基因 σC基因进化树

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牛分枝杆菌融合基因hsp65-esat6的原核表达及产物的纯化

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中国兽医科学 2007年第3期37卷 223-226页

作者：迟磊刘思国宫强王春来赵昆王勇刘建东刘慧芳周媛媛常月红云孟克赵福广中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118

以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板扩增hsp65和esat6基因,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得了融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,以I... 详细信息

以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板扩增hsp65和esat6基因,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得了融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导(终浓度为1 mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析。以Ni2+亲和层析柱纯化表达的融合蛋白和Western-blot分析该融合蛋白的免疫活性。结果表明:Hsp65-ESAT6融合蛋白以包涵体形式表达。表达的融合蛋白裂解为两部分,即58 ku和30ku,二者相加与预测大小88 ku相符。纯化的融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应。

关键词：牛分枝杆菌融合基因原核表达纯化

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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达

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中国药理学与毒理学杂志 2007年第4期21卷 265-270页

作者：宋慧张学荣周元聪江涛舒雨雁广西医科大学化学教研室蛇毒研究所广西南宁530021 广西医科大学蛇毒研究所广西南宁530021 中国科学院上海生化与细胞研究所上海200031 中国科学院生物物理研究所北京100101

目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(***)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在*** BL21(DE3... 详细信息

目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(***)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在*** BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。

关键词：眼镜蛇蛇毒神经生长因子蛋白表达

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各种心律失常模型中心肌M3受体表达与心律失常的关系

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中国药理通讯 2007年第3期24卷 29-29页

作者：刘艳高阳陈立朋李丹露杜娟吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨150086

目的：探讨各种心律失常模型心肌M3受体的变化及其与心律失常的关系。方法：30只大鼠随机分为3组，乌头碱，氯化钡和缺血组。分别注射乌头碱、氯化钡及结扎冠脉诱发大鼠心律失常，记录lh心电图的变化。Western blot检测心肌M3受体的表达... 详细信息

目的：探讨各种心律失常模型心肌M3受体的变化及其与心律失常的关系。方法：30只大鼠随机分为3组，乌头碱，氯化钡和缺血组。分别注射乌头碱、氯化钡及结扎冠脉诱发大鼠心律失常，记录lh心电图的变化。Western blot检测心肌M3受体的表达（24h）。结果：各组均可诱发心律失常，乌头碱组心律失常和室性心动过速的持续时间较其余两个模型组明显延长。Western blot显示，各组模型大鼠心肌M3受体的表达均上调，分别为正常组的2．3，1．4和1．3倍，其中乌头碱组心肌M3受体的含量明显升高。心肌M3受体蛋白的表达和心律失常的持续时间呈正相关关系。结论：心律失常能诱导心肌M3受体的表达上调，且不同心律失常模型心肌M3受体上调的幅度不同，其机制可能和心律失常的严重程度呈正相关关系。

关键词：心肌M3受体心律失常鸟头碱氯化钡

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人4-1BBL胞外区蛋白的生物学活性研究

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滨州医学院学报 2007年第1期30卷 1-3页

作者：姜文国李欣张树平熊冬生滨州医学院药理学教研室滨州市256603 滨州市人民医院中国协和医科大学中国医学科学院实验血液学国家重点实验室

目的研究人4-1BBL胞外区蛋白与4-1BB表达阳性细胞的结合与激活活性。方法采用酶联免疫吸附分析人4-1BBL胞外区蛋白与A549细胞的结合活性,并进一步采用免疫组化分析人4-1BBL胞外区蛋白与4-1BB阳性细胞的结合活性,然后研究人4-1BBL胞外区... 详细信息

目的研究人4-1BBL胞外区蛋白与4-1BB表达阳性细胞的结合与激活活性。方法采用酶联免疫吸附分析人4-1BBL胞外区蛋白与A549细胞的结合活性,并进一步采用免疫组化分析人4-1BBL胞外区蛋白与4-1BB阳性细胞的结合活性,然后研究人4-1BBL胞外区蛋白对Jurkat细胞IL-2释放的影响。结果4-1BBL胞外区蛋白能与4-1BB表达阳性的A549细胞系以及激活的Jurkat细胞特异性结合,并能维持激活的Jurkat细胞释放IL-2。结论所获得的人4-1BBL胞外区蛋白具有结合与激活双重活性,在肿瘤及其他免疫性疾病的治疗中具有潜在的应用前景。

关键词： 4-1BBL IL-2 肿瘤免疫治疗

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三磷酸肌醇信号途径参与血小板激活因子诱导豚鼠心室肌细胞钙浓度增高

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中国药理学与毒理学杂志 2006年第1期20卷 48-52页

作者：初文峰孙宏丽乔国芬朴闲美董德利杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药学院药理学教研室

目的观察血小板激活因子(PAF)是否影响心室肌细胞钙离子浓度([Ca^(2+)]i)以及通过哪条信号转导通路起作用。方法采用酶法分离豚鼠心室肌细胞,用PAF刺激细胞;用Fluo-3/AM和共聚焦显微镜观察细胞[Ca^(2+)]i;用2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)... 详细信息

目的观察血小板激活因子(PAF)是否影响心室肌细胞钙离子浓度([Ca^(2+)]i)以及通过哪条信号转导通路起作用。方法采用酶法分离豚鼠心室肌细胞,用PAF刺激细胞;用Fluo-3/AM和共聚焦显微镜观察细胞[Ca^(2+)]i;用2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)和雷诺定(ryanodine)分别阻断IP3和雷诺定信号通路。全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)。结果无论在有钙还是无钙台氏液,PAF(1pmol·L-1~10nmol·L-1)都能增加心肌细胞[Ca^(2+)]i,其作用能够被2-APB2μmo·lL-1阻断,而不能被雷诺定200μmol·L-1阻断。PAF1nmol·L-1对ICa-L没有明显影响,对照组和实验组电流密度分别为-(11.0±1.9)和-(10.5±1.3)pA·pF-1。结论PAF能增加豚鼠心室肌细胞[Ca^(2+)]i,IP3信号通路可能参与了这一过程。

关键词：血小板激活因子信号传导心肌钙,细胞内 2-氨乙基硼酸二苯酯肌醇1,4,5-三磷酸膜片钳技术,全细胞

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大鼠心室肌M_3受体与间隙连接蛋白43作为抗心律失常药物靶点的综合研究

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药学学报 2006年第5期41卷 395-400页

作者：张勇岳朋肖静于海雁潘振伟林道红吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M3受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用,并为其作为筛选药物靶点提供依据.方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜,及免疫沉淀与免疫印迹技术,研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关... 详细信息

目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M3受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用,并为其作为筛选药物靶点提供依据.方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜,及免疫沉淀与免疫印迹技术,研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关系.结果证实了大鼠心室肌细胞膜蛋白中M1～M5等5个亚型的存在;观察到大鼠单个心肌细胞膜上M3受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位;发现M受体各亚型与间隙连接蛋白43均存在结构整合,且一定浓度离子型去垢剂可破坏M3受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系,并进一步发现参与M3受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式.结论大鼠心室肌M受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在结构性共定位关系,且可被一定浓度离子型去垢剂破坏.

关键词：心室肌细胞膜 M受体间隙连接蛋白43 结构整合

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大明胶囊对大鼠心肌梗死预防性保护作用的研究

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中国药理学通报 2006年第9期22卷 1140-1144页

作者：孙冰吴玲米彦军初文峰潘振伟乔国芬杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室.黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的观察大明胶囊对大鼠心肌梗死的预防性保护作用。方法对大鼠预防性给予大明胶囊1wk后,结扎其左冠脉前降支造成心肌梗死。通过测量心肌梗死面积,观察心肌酶学指标、病理形态学和组织超微结构的改变,评价大明胶囊对心肌梗死的预防性保... 详细信息

目的观察大明胶囊对大鼠心肌梗死的预防性保护作用。方法对大鼠预防性给予大明胶囊1wk后,结扎其左冠脉前降支造成心肌梗死。通过测量心肌梗死面积,观察心肌酶学指标、病理形态学和组织超微结构的改变,评价大明胶囊对心肌梗死的预防性保护作用。结果心梗染色面积和心肌酶学指标显示(与模型组相比),大明胶囊灌胃后心肌梗死面积减少(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量降低(P<0.05)。心肌形态学和超微结构显示,大明胶囊减轻了左冠脉前降支结扎所造成的心肌损伤。结论通过心梗面积、心肌酶学指标、形态学和超微结构的观察,大明胶囊能预防性保护心肌梗死所造成的损伤。这提示大明胶囊可能应用于心肌梗死治疗。

关键词：大明胶囊心肌梗死心肌缺血电子显微镜病理学乳酸脱氢酶肌酸激酶

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