检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学会制药工业专业委员会第十二届学术会议、中国药学会应用药理专业委员会第二届学术会议、2006年国际生物医药及生物技术论坛（香港）

作者：江振洲王涛周卫丁建花张陆勇中国药科大学新药筛选中心中国药科大学新药筛选中心江苏省药物研究所南京医科大学中国药科大学新药筛选中心

目的在进行长期毒性研究的同时伴随进行毒代动力学研究,与普通制剂羟喜树碱注射剂(HCPT)相比较,观察单次与多次iv羟喜树碱脂质体(LHCPT)后Beagle犬血中羟喜树碱浓度时程变化,计算药动学参数,综合评价LHCPT的毒代动力学特征,为其临床研... 详细信息

目的在进行长期毒性研究的同时伴随进行毒代动力学研究,与普通制剂羟喜树碱注射剂(HCPT)相比较,观察单次与多次iv羟喜树碱脂质体(LHCPT)后Beagle犬血中羟喜树碱浓度时程变化,计算药动学参数,综合评价LHCPT的毒代动力学特征,为其临床研究提供参考依据。方法在建立对全血中羟喜树碱的 HPLC-UV检测方法后,长期毒性研究中LHCPT 2、1、0．5 mg／kg组和HCPT 2 mg／kg组各Beagle犬分别

关键词：羟基喜树碱脂质体羟基喜树碱注射剂 Beagle犬毒代动力学

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心脏基因工程研究对一级康复的干预作用:构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白候选基因疫苗诱导体液免疫的评估

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中国临床康复 2005年第27期9卷 48-50,F0003页

作者：郭宏田野曲秀芬李为民孟繁超哈尔滨医科大学第一临床医院心内科黑龙江省哈尔滨市150001

目的:探讨心脏基因工程研究中构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白侯选基因疫苗,并评价其诱导体液免疫的效果。方法:实验于2003-05/12在中国农业科学院国家生物重点实验室哈尔滨兽医研究所生物二室完成。采用反转录聚合酶链反应技术扩增柯萨奇B2... 详细信息

目的:探讨心脏基因工程研究中构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白侯选基因疫苗,并评价其诱导体液免疫的效果。方法:实验于2003-05/12在中国农业科学院国家生物重点实验室哈尔滨兽医研究所生物二室完成。采用反转录聚合酶链反应技术扩增柯萨奇B2病毒的主要中和抗原毒粒蛋白基因,通过分子克隆构建pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒。选择3周龄BALB/c雄性小鼠30只,随机分成3组,pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组:对小鼠进行pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白免疫;空载体对照组对小鼠进行pcDNA3免疫;磷酸盐缓冲液组:对小鼠进行磷酸盐缓冲液免疫,每组10只。每组免疫时间和接种量、接种方法相同。采用酶联免疫吸附法测定pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白、pcDNA3、磷酸盐缓冲液免疫小鼠后2,4,6,8周柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平。结果:①获得pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒,可在HeLa细胞中表达。②免疫后6,8周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于免疫后4周(A450:0.153±0.013,0.150±0.011,0.142±0.014,P<0.01,0.05);免疫后4周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于空载体对照组和磷酸盐缓冲液组(0.120±0.007,0.119±0.009,P<0.01)。结论:pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白可诱导小鼠产生体液免疫,做为候选基因疫苗,以基因免疫的角度参与心脏基因工程研究,有望为该病毒性心肌炎的发生起到一级预防作用。

关键词：基因疫苗柯萨奇病毒感染

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中国六群体MSY2小卫星位点的遗传学研究(英文)

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广东药学院学报 2005年第3期21卷 304-306,314页

作者：张咏莉薛雅丽陈峰张贵寅李璞傅松滨广东药学院生物教研室广东广州510006 哈尔滨医科大学遗传教研室黑龙江哈尔滨150086

目的研究中国回族、四川省汉族、福建省汉族、锡伯族、蒙古族、赫哲族群体MSY2小卫星位点的遗传多态性。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳检测方法,对上述六群体334份男性血样本的遗传多态性进行分析。结果MSY2位点有三拷... 详细信息

目的研究中国回族、四川省汉族、福建省汉族、锡伯族、蒙古族、赫哲族群体MSY2小卫星位点的遗传多态性。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳检测方法,对上述六群体334份男性血样本的遗传多态性进行分析。结果MSY2位点有三拷贝和四拷贝两种等位基因型。其中各群体中的大多数成员呈现四拷贝等位基因型,而三拷贝等位基因型频率较低且在各个群体中频率分布是呈现多样。结论根据MSY2位点等位基因频率的分布可评估出六个群体之间的遗传距离,对研究六群体之间的遗传关系和遗传结构具有重要意义。

关键词： MSY2 等位基因频率遗传距离聚类关系

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人ICOS-Linker-Ig真核表达载体构建及二级结构分析

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哈尔滨医科大学学报 2005年第6期39卷 479-482页

作者：刘巍李为民高成王秀荣李冬梅王政张瑞红哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科哈尔滨医科大学第一临床医学院神经外科中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

目的构建人重组ICOS-Linker-Ig真核表达载体并预测其二级结构及Linker的合理性。方法扩增人I-COS胞外域及IgG Fc段,设计一段柔性Linker将二者连接。经测序分析得到融合基因序列。应用核酸和蛋白质序列分析软件EditSeqTM对融合基因及Lin... 详细信息

目的构建人重组ICOS-Linker-Ig真核表达载体并预测其二级结构及Linker的合理性。方法扩增人I-COS胞外域及IgG Fc段,设计一段柔性Linker将二者连接。经测序分析得到融合基因序列。应用核酸和蛋白质序列分析软件EditSeqTM对融合基因及Linker部位翻译后二级结构水平的一些生物学特性,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等加以预测分析。结果ICOS-Linker-Ig融合基因的氨基酸序列经软件分析,并分别与ICOS和IgG单独分析结果比较,发现在二级结构水平未出现新的抗原性,同时Linker部位具有很低的抗原性,亲水性无改变,Linker部位呈中性且柔性良好,不影响两端蛋白质二级结构和融合蛋白空间构象。ICOS和Ig具有各自原来的表位特征,无新表位出现。结论本研究构建的ICOS-Linker-Ig能够保留ICOS和Ig各自生物活性和功能,计算机分析表明翻译后不影响蛋白质空间结构的形成,适合融合蛋白功能的发挥。

关键词：诱导性共刺激分子免疫球蛋白计算机模拟

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四川省汉族群体Y染色体DYS19位点的基因组扫描研究

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热带医学杂志 2005年第3期5卷 260-263页

作者：张咏莉薛雅丽傅松滨哈尔滨医科大学基础学院生物教研室广东药学院基础学院生物教研室广州510224

目的对中国四川省汉族代表性人群的DYS19(DNAYchromosomemicrosatellite19)位点进行遗传多态性研究。方法基因组DNA的提取采用传统的酚-氯仿抽提法。DYS19位点的遗传多样性分析采用ABIPrismTM310遗传分析仪及扫描分析系统的微卫星基因... 详细信息

目的对中国四川省汉族代表性人群的DYS19(DNAYchromosomemicrosatellite19)位点进行遗传多态性研究。方法基因组DNA的提取采用传统的酚-氯仿抽提法。DYS19位点的遗传多样性分析采用ABIPrismTM310遗传分析仪及扫描分析系统的微卫星基因组扫描分析。结果在四川省汉族群体中共发现拷贝数13～17五种等位基因型,其等位基因频率分布为4.9%,26.2%,47.6%,16.4%,4.9%。经统计学软件分析显示四川省汉族群体总的基因多样性(GD)值为0.6811。结论研究结果证实四川省汉族群体内部呈现非常显著的遗传异质性,探讨中国不同人群间遗传变异的分布特征和追溯各人群间遗传进化的关系奠定基础。

关键词：微卫星位点 DYS19 基因多样性等位基因频率基因组扫描

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Lewis Y寡糖在小鼠胚泡表面的表达受α1,2-岩藻糖基转移酶基因的反馈调控

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中国药理学与毒理学杂志 2005年第5期19卷 368-372页

作者：葛常辉王玉华王晓琦曾国庆朱正美大连医科大学生物化学教研室糖生物学研究所辽宁大连116027 大连医科大学组织胚胎学教研室辽宁大连116027 中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室北京100081

目的探讨胚泡的LewisY寡糖合成关键酶α1,2岩藻糖基转移酶基因FUT1及α1,3岩藻糖基转移酶基因FUT4的表达和其表面LewisY寡糖抗原表达间的关系。方法以寡糖特异性单克隆抗体封闭体外培养的胚泡表面LewisY抗原,应用RTPCR和间接免疫荧光方... 详细信息

目的探讨胚泡的LewisY寡糖合成关键酶α1,2岩藻糖基转移酶基因FUT1及α1,3岩藻糖基转移酶基因FUT4的表达和其表面LewisY寡糖抗原表达间的关系。方法以寡糖特异性单克隆抗体封闭体外培养的胚泡表面LewisY抗原,应用RTPCR和间接免疫荧光方法检测胚泡的LewisY寡糖合成关键酶α1,2岩藻糖基转移酶基因FUT1和α1,3岩藻糖基转移酶基因FUT4及其表面LewisY抗原的表达。结果在胚泡表面LewisY寡糖被抗体封闭后,其FUT1的表达迅速升高,FUT4的表达则未见明显变化,而胚泡表面的LewisY寡糖在除去抗体后一直到再培养约21h后才重新出现,在约30h几乎全部复现。结论着床前胚泡表面的LewisY寡糖的表达主要受胚泡α1,2岩藻糖基转移酶FUT1的反馈调节。

关键词： Lewis Y 寡糖抗原胚泡岩藻糖基转移酶类

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人宫颈癌组织环加氧酶2mRNA剪接异构体的表达(英文)

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中国临床康复 2005年第42期9卷 188-189页

作者：龚霞万敬员叶笃筠吴萍张力周歧新重庆医科大学解剖学教研室重庆市400016 重庆医科大学药理学教研室重庆市400016 华中科技大学同济医学院病理生理学系湖北省武汉市430030

背景:宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关。目的:探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义。设计:非随机对照实验。单位:重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,... 详细信息

背景:宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关。目的:探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义。设计:非随机对照实验。单位:重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院妇产科。对象:选择13例重庆医科大学附属第一医院妇产科2002-03/2002-04宫颈癌住院患者的癌组织及正常组织。方法:设计一对全新引物,并采用反转录聚合酶链反应技术,从宫颈癌组织中分离环加氧酶2mRNA,然后对电泳条带进行克隆、测序和分析。主要观察指标:①观察癌组织与正常组织反转录聚合酶链反应琼脂糖电泳结果。②分析癌组织与正常组织电泳条带测序结果。结果:①正常宫颈组织未发现环加氧酶2目的条带(252bp),而宫颈癌组织则出现两条条带,除环加氧酶2目的条带外,还有一新的电泳带(534bp),经克隆和测序证实,该新条带除目的条带的环加氧酶2DNA的第7、8外显子序列外,还包含第7、8外显子间的内含子序列,即保留的内含子(282bp)。②根据阅读框推测,在保留的内含子第48～50碱基出现终止密码。结论:发现宫颈癌组织中存在环加氧酶2基因的选择性剪接异构体(Genbankaccessionnumber:BU493602),其所编码蛋白可能较已报道的环加氧酶2酶蛋白小。

关键词：宫颈肿瘤剪接体异构酶类

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传染性喉气管炎病毒王岗株gB基因gC基因和gD基因的真核表达

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中国兽医科技 2005年第7期35卷 520-524页

作者：王利丽王云峰智海东王玫步志高冉多良童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

将传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗(WG)株的gB、gC、gD基因分别克隆到真核表达载体pCAGGS的EcoRⅠ位点,经过酶切、测序分析,筛选鉴定出含有gB、gC、gD基因的重组质粒,分别命名为pCAGGgB、pCAGGgC、pCAGGgD。用质粒纯化试剂盒对重组质粒进... 详细信息

将传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗(WG)株的gB、gC、gD基因分别克隆到真核表达载体pCAGGS的EcoRⅠ位点,经过酶切、测序分析,筛选鉴定出含有gB、gC、gD基因的重组质粒,分别命名为pCAGGgB、pCAGGgC、pCAGGgD。用质粒纯化试剂盒对重组质粒进行了纯化,将纯化后的质粒转染293T细胞,用间接免疫荧光技术检测了目的蛋白的表达情况。检测结果表明,目的蛋白得到了真实的表达。

关键词：传染性喉气管炎病毒 gB基因 gC基因 gD基因真核表达

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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

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中国兽医科技 2005年第8期35卷 585-589页

作者：杨涛刘明张云刘春国杜绍范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒(AIV)A/Goose/HLJ/p46/2003(H5N1)的NS1基因,将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上,转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析,表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE... 详细信息

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒(AIV)A/Goose/HLJ/p46/2003(H5N1)的NS1基因,将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上,转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析,表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示,重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后,经0.3mmol/L的IPTG诱导,融合蛋白MBP-NS1得到大量表达,融合蛋白以可溶形式存在,分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明,融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应,而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法,为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。

关键词：禽流感病毒 NS1基因原核表达酶联免疫吸附试验

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A-NK细胞培养和活化方法的改进

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中国免疫学杂志 2005年第6期21卷 431-434页

作者：王志华王贺元张彦吴长有哈尔滨医科大学肿瘤防治研究所生物治疗研究室哈尔滨150040 吉林大学第三临床医学院长春130021 美国国立健康研究所

目的:比较A-NK细胞在完全培养基(CM)和无血清培养基(AIMV)中体外扩增及杀伤肿瘤细胞作用,同时探讨IL-12对于A-NK/IL-2治疗的辅助作用及其杀伤的形态学观察。方法:用MTT法比较不同培养条件下的A-NK细胞体外增殖能力,并测定细胞体外杀伤... 详细信息

目的:比较A-NK细胞在完全培养基(CM)和无血清培养基(AIMV)中体外扩增及杀伤肿瘤细胞作用,同时探讨IL-12对于A-NK/IL-2治疗的辅助作用及其杀伤的形态学观察。方法:用MTT法比较不同培养条件下的A-NK细胞体外增殖能力,并测定细胞体外杀伤肿瘤细胞的活性。通过做扫描和透射电镜,对A-NK细胞杀伤的肿瘤细胞进行形态学观察。结果:不同培养条件下的A-NK细胞均可在短期内大量扩增(P<0.05),且均有很强的杀伤肿瘤的活性(P<0.05)。被A-NK细胞杀伤的肿瘤细胞的死亡形式是溶解坏死(necrosis)和凋亡(apoptosis)。结论:AIMV可替代CM用于A-NK细胞的培养。联合应用IL-12和IL-2激活A-NK细胞优于单独使用IL-2,可减轻高剂量IL-2带来的副作用。此研究为A-NK细胞的实验室研究和将来临床应用推广奠定了新的实验基础。

关键词： A-NK AIMV IL-12 MTT

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