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解剖学报 2006年第1期37卷 6-11页

作者：李国营汪华侨胡金家林贤徐杰姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室

目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组，9月龄时开始分别接种相应的疫苗，间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度；... 详细信息

目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组，9月龄时开始分别接种相应的疫苗，间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度；免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积；Morris水迷宫测试行为学变化；组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化。结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生，抗体滴度随接种次数的增加而增加。停止接种，抗体滴度下降。脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体；疫苗接种6个月后，Aβ42、Aβ1-15和Aβ36-42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少（P〈0．01），其认知能力显著高于对照组（P〈0．01）。Aβ1-15组和Aβ42组相比差异无显著性（P〉0．05），但优于Aβ36-42组（P〈0．01）；各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化。结论邯亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化，未发现不良反应。提示用Aβ1-15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗，值得进一步研究。

关键词：老年性痴呆 β-淀粉样蛋白疫苗淀粉样斑块认知行为免疫组织化学 Tg576鼠

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β淀粉样蛋白亚单位疫苗免疫反应的量效关系

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中国药理学通报 2006年第12期22卷 1470-1473页

作者：杨志勇汪华侨谢瑶袁群芳姚志彬江南大学医学系人体解剖学教研室江苏无锡214064 中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室广东广州510080

目的探讨Aβ亚单位疫苗诱发体液免疫反应的量效关系和时程。方法采用C57BL小鼠,依据滴入Aβ15的量将其分为50、25、12.5μg3个组,每周1次经鼻粘膜滴入Aβ15亚单位疫苗,观察1年之中鼠血清中抗Aβ抗体水平的变化;取脾细胞培养,加入不同浓... 详细信息

目的探讨Aβ亚单位疫苗诱发体液免疫反应的量效关系和时程。方法采用C57BL小鼠,依据滴入Aβ15的量将其分为50、25、12.5μg3个组,每周1次经鼻粘膜滴入Aβ15亚单位疫苗,观察1年之中鼠血清中抗Aβ抗体水平的变化;取脾细胞培养,加入不同浓度的Aβ15,用MTT法观察脾细胞增殖情况。结果3组小鼠的外周血内均有抗Aβ抗体产生。25μg组和12.5μg组产生抗体较50μg组早,3组峰浓度抗体水平分别为1∶6720、1∶6222和1∶3565。脾细胞增殖实验表明0.5μg和5μg的Aβ15具有较强的刺激脾细胞增殖的作用,而50μg的Aβ15对脾细胞增殖的刺激作用反而下降(P=0.042;P=0.021)。结论Aβ15亚单位疫苗诱导体液免疫反应的能力因接种的剂量不同而异。高浓度的Aβ15可以引起免疫耐受,使抗Aβ抗体产生减少。

关键词：阿尔采末病抗β-淀粉样蛋白抗体疫苗

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Aβ不同片段肽疫苗免疫鼠后血清对Aβ_(42)诱导细胞毒性作用的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第2期25卷 102-104,109页

作者：李国营胡金家林贤徐杰汪华侨姚志彬中山大学基础医学院人体解剖学教研室脑研究室广东广州510080

【目的】探讨Aβ42及其亚单位疫苗免疫鼠后其血清对Aβ42诱导的细胞毒性作用的影响,为其体内应用提供依据。【方法】①用间接ELISA法测定Aβ42和K7Aβ36-42疫苗接种鼠后的血清中抗体滴度;②将不同浓度的Aβ42和K7Aβ36-42加入培养有PC1... 详细信息

【目的】探讨Aβ42及其亚单位疫苗免疫鼠后其血清对Aβ42诱导的细胞毒性作用的影响,为其体内应用提供依据。【方法】①用间接ELISA法测定Aβ42和K7Aβ36-42疫苗接种鼠后的血清中抗体滴度;②将不同浓度的Aβ42和K7Aβ36-42加入培养有PC12细胞的96孔培养板中,检测其对PC12细胞的毒性作用;③用不同浓度的Aβ42及K7Aβ36-42疫苗免疫鼠血清加入含Aβ42的培养基中,与PC12一起孵育培养,7d后用MTT法和酶标仪测定存活细胞的A值。【结果】①Aβ42和K7Aβ36-42疫苗接种后血清的平均抗体滴度分别为1∶6800和1∶4600;②10mg/L和20mg/LAβ42组细胞的存活率与空白组相比差异有显著性(P<0.01);③各浓度K7Aβ36-42组与空白组相比差异均无显著性(P>0.05)。在浓度为20mg/LAβ42的培养基中加入Aβ42疫苗或K7Aβ36-42疫苗免疫鼠血清,各浓度的免疫鼠血清组和阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。【结论】Aβ42疫苗和Aβ亚单位疫苗免疫鼠后,其血清均能在体外抑制Aβ42对细胞产生的毒性作用。

关键词： β淀粉样蛋白疫苗免疫血清细胞毒性老年性痴呆细胞毒性间接ELISA法老年斑

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淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的保护作用(英文)

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中国临床康复 2005年第13期9卷 184-186页

作者：胡金家李国营汪华侨李少兵袁群芳谢瑶姚志彬中山大学基础医学院人体解剖学教研室脑研究室广东省广州市510080

背景:研究表明,淀粉样β蛋白42疫苗接种可以诱导阿尔茨海默病转基因小鼠产生特异性抗淀粉样β蛋白42抗体,清除其脑内的淀粉样β蛋白沉积,改善其学习记忆能力,在对阿尔茨海默病的防治中具有良好的应用前景。目的:研究淀粉样β蛋白42及其... 详细信息

背景:研究表明,淀粉样β蛋白42疫苗接种可以诱导阿尔茨海默病转基因小鼠产生特异性抗淀粉样β蛋白42抗体,清除其脑内的淀粉样β蛋白沉积,改善其学习记忆能力,在对阿尔茨海默病的防治中具有良好的应用前景。目的:研究淀粉样β蛋白42及其亚单位肽疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的影响。设计:以动物为研究对象,完全随机分组实验。单位:一所大学医学院人体解剖学教研室脑研究室。材料:实验于2003-04/2004-02在中山大学实验动物中心和人体解剖学教研室脑研究室进行。5月龄APPSWE转基因小鼠32只,购自美国Taconiccompany,在本室繁育成功。实验随机分成对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1-15组和淀粉样β蛋白36-42组,每组8只。干预:淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗配伍MF59佐剂,基础接种采用皮下注射,加强接种采用鼻黏膜免疫,共接种8个月。疫苗接种前用Y迷宫作行为学测试,接种后用Morris水迷宫作行为学测试。主要观察指标:空间学习记忆能力,平均逃避潜伏期,穿过平台次数,第一象限游泳距离百分率,20%边缘区游泳距离百分率。结果:疫苗接种前对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1-15组和淀粉样β蛋白36-42组APPSWE转基因小鼠Y迷宫作行为学测试10次中正确反应的次数分别为7.50±0.81,7.06±0.

关键词：阿尔茨海默病淀粉样β蛋白疫苗免疫性小鼠转基因

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阿尔茨海默病患者脑白质损害与认知功能的关系

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中华神经科杂志 2006年第2期39卷 76-79页

作者：段金海汪华侨陈少琼徐杰林贤康庄姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室广州510080 中山大学附属第三医院MR室

目的用磁共振扩散张量成像(DTI)研究阿尔茨海默病(AD)患者脑白质损害的特点及其与认知功能改变的相关性。方法对16例AD患者和12名年龄及性别相当的健康老年人行DTI、T1液体衰减反转恢复序列(FLAIR)及T2-FLAIR检查,测量胼胝体膝部和压部... 详细信息

目的用磁共振扩散张量成像(DTI)研究阿尔茨海默病(AD)患者脑白质损害的特点及其与认知功能改变的相关性。方法对16例AD患者和12名年龄及性别相当的健康老年人行DTI、T1液体衰减反转恢复序列(FLAIR)及T2-FLAIR检查,测量胼胝体膝部和压部、内囊前肢和后肢、额颞顶枕叶白质的部分各向异性分数值(FA)和平均弥散度(MD),分析FA、MD值与简易精神状态量表(MMSE)评分之间的相关关系。结果AD患者胼胝体压部、额叶、顶叶、颞叶FA值分别为0.602±0.043、0.270±0.034、0.294±0.043、0.302±0.032,与健康老人组相比显著下降(P<0.05),且与MMSE评分呈正相关关系,而内囊前后肢、枕叶、胼胝体膝部的FA值则无明显变化(P>0.05);胼胝体压部、顶叶白质的MD值分别为(0.918±0.029)、(0.826±0.015)×10-9m2/s,与健康老人组相比显著升高(P<0.01),且与MMSE评分呈负相关,而内囊前后肢、额叶、颞叶、枕叶和胼胝体膝部的MD值则无明显变化(P>0.05)。结论AD患者表现为脑白质的选择性损害,且损害程度与认知功能密切相关;这种选择性损害反映了AD病理机制中皮质-皮质及皮质-皮质下联系的丢失;DTI技术可以用来监测疾病的进展情况及评价AD治疗药物的临床疗效。

关键词：阿尔茨海默病认知障碍磁共振成像,弥散

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铝佐剂Aβ_(42)及其亚单位疫苗可有效诱导大鼠产生特异性抗体

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第1期25卷 39-44页

作者：胡金家汪华侨林贤曲怀刚徐杰姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室广东广州510080

[目的]探讨铝佐剂AB42及其C端亚单位肽Aβ36-42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗Aβ42抗体。[方法]24只SD大鼠随机分为Aβ42肽疫苗、Aβ36-42肽疫苗和对照组,每组8只。将Aβ42肽疫苗及Aβ36-42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于S... 详细信息

[目的]探讨铝佐剂AB42及其C端亚单位肽Aβ36-42疫苗接种大鼠能否产生特异性抗Aβ42抗体。[方法]24只SD大鼠随机分为Aβ42肽疫苗、Aβ36-42肽疫苗和对照组,每组8只。将Aβ42肽疫苗及Aβ36-42与七聚赖氨酸耦联制成的亚单位疫苗分别接种于SD大鼠,对照组用等体积PBS加铝佐剂。用间接ELISA法检测大鼠血清和脑匀浆上清液中特异性抗体的滴度;用Morris水迷宫测试大鼠的行为学变化;用HE染色观察大鼠的脑、肝、脾和肾组织学变化;用接种后血清与老年性痴呆患者的脑片作免疫组织化学染色。[结果]第3次接种后ABβ42和Aβ36-42组鼠的血清均开始有抗Aβ42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增多而增高,第6次接种后两组鼠血清的抗ABβ42抗体滴度均达到1:1 600以上,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗Aβ42抗体,血和脑匀浆的抗体滴度与对照组相比,差异有显著性(P<0.01);对照组、Aβ42组和Aβ36-42组鼠逃避潜伏期分别为54.81±17.06、43.18±18.70和52.27±15.13,差异均无显著性(P>0.05);对照组、Aβ42组和Aβ36-42组鼠平台象限游泳距离占总游泳距离百分比分别为59.78±5.68、65.14±4.98和61.34±4.19,各组间差异也无显著性(P>0.05);3组鼠的脑、肝、脾和肾均未出现病理性变化;Aβ42组鼠的血清能结合AD患者脑组织中的老年斑,?

关键词： 13-淀粉样蛋白疫苗铝佐剂老年斑老年性痴呆

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国人外周血抗β-淀粉样蛋白抗体水平的依龄性变化

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第2期26卷 125-128页

作者：杨志勇汪华侨张革林贤谢瑶袁群芳姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室广东广州510080

【目的】主动和被动免疫可以显著改善阿尔茨海默病(AD)的病理和临床过程,抗A8抗体在AD预防和治疗中的作用已得到肯定,测定健康人群外周血中的抗Aβ抗体的水平将有助于了解AD发病机制。【方法】收集1～89岁共210例健康人群的血清标本,以1... 详细信息

【目的】主动和被动免疫可以显著改善阿尔茨海默病(AD)的病理和临床过程,抗A8抗体在AD预防和治疗中的作用已得到肯定,测定健康人群外周血中的抗Aβ抗体的水平将有助于了解AD发病机制。【方法】收集1～89岁共210例健康人群的血清标本,以10岁为一个年龄组,共9组。采用间接ELISA法测定所收集人群的血清中抗Aβ抗体的相对滴度,并用Western blot法检测其抗Aβ抗体的特异性。【结果】健康人外周血中普遍存在抗AB抗体,并且随年龄血清中抗Aβ抗体水平逐渐增加,回归分析呈现线性关系;在60岁以上年龄组,抗体水平显著高于60岁以下的各年龄组(P<0.01)。Western blot的结果显示抗Aβ抗体可以识别β-淀粉样蛋白。【结论】健康人群血清中存在着特异性的抗Aβ抗体,抗体的滴度呈依龄性增加。

关键词： β-淀粉样蛋白自身抗体阿尔茨海默病中国人

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成年大鼠基底前脑nestin阳性神经元的性别差异

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神经解剖学杂志 2005年第3期21卷 233-237页

作者：郭灵袁群芳谢瑶汪华侨姚志彬中山大学基础医学院解剖学教研室脑研究室

为了探讨成年雌雄大鼠基底前脑nestin阳性神经元的性别差异及其意义,本实验应用免疫组织化学方法对正常成年雌雄SD大鼠及去势2周和4周的雌雄SD大鼠基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及斜角带水平支(hDB)的nestin阳性神经元的... 详细信息

为了探讨成年雌雄大鼠基底前脑nestin阳性神经元的性别差异及其意义,本实验应用免疫组织化学方法对正常成年雌雄SD大鼠及去势2周和4周的雌雄SD大鼠基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及斜角带水平支(hDB)的nestin阳性神经元的变化进行了比较研究。结果显示正常雌雄大鼠MS、vDB及hDB的nestin阳性神经元数十分接近(P>0.05);而去睾丸2周大鼠组MS、vDB、hDB的nestin阳性神经元数则明显高于去卵巢2周大鼠组(P<0.05,P<0.01);去睾丸4周大鼠组vDB、hDB的nestin阳性神经元数依然明显高于去卵巢4周大鼠组(P<0.05),但两组MS间的nestin阳性神经元数差别不大(P>0.05);各组大鼠的nestin阳性神经元的胞体和树突均相似。以上结果表明,正常成年雌雄大鼠基底前脑的nestin阳性神经元数不存在性别差异,无论去势与否,nestin阳性神经元的形态始终不存在性别差异;而去势后nestin阳性神经元数却存在着明显的性别差异。提示基底前脑nestin阳性神经元的性别差异不仅与雌激素和雄激素在雌雄个体中所发挥的不同作用密切相关,而且还可能是促使学习记忆出现性别差异的形态学基础。

关键词：成年大鼠基底前脑 nestin阳性神经元性别差异免疫组织化学激素巢蛋白

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钳夹损伤后轴突再生对脊髓前角神经元脂褐素含量的影响

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中山医科大学学报 2003年第1期24卷 16-18,34,I002页

作者：李欣袁群芳汪华侨姚志彬中山大学中山医学院人体解剖学教研室脑研究室广东广州510080

[目的]研究神经元轴突损伤后再生过程中对神经元胞体内脂褐素生成和累积的变化,了解神经再生对衰老进程的影响。[方法]钳夹法损伤Wistar大鼠右侧C_5～T_1神经根,按钳夹次数和存活时间分为6组,观察损伤侧脊髓前角神经元内脂褐素变化,用... 详细信息

[目的]研究神经元轴突损伤后再生过程中对神经元胞体内脂褐素生成和累积的变化,了解神经再生对衰老进程的影响。[方法]钳夹法损伤Wistar大鼠右侧C_5～T_1神经根,按钳夹次数和存活时间分为6组,观察损伤侧脊髓前角神经元内脂褐素变化,用图像分析系统进行定量分析。[结果]12月龄大鼠脊髓前角神经元胞浆内已有脂褐素分布,自发出黄或黄绿色荧光,呈散在细小颗粒,含量呈随增龄而增加,且呈团块状堆积在核周围。钳夹侧的脂褐素含量较正常侧的脂褐素含量均有明显减少(P<0.05);二次钳夹后脂褐素含量较一次钳夹更为减少,但二者之间无明显差异(P>0.05)。直线相关回归分析显示正常侧、一次钳夹侧和二次钳夹侧脂褐素累积均随存活时间而增加,呈正相关关系(γ分别为0.967、0.994和0.995,P< 0.05),回归系数分别为0.0783、0.0548和0.0377。钳夹侧小于正常侧,表明损伤后再生使胞体内脂褐素累积速度减慢。[结论]轴突损伤后再生可以使神经元内脂褐素的累积较正常情况下减少,提示轴突再生可减缓神经元衰老进程。

关键词：脂褐素轴突再生钳夹脊髓神经元动物实验

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当归芍药散加味方及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞增殖的影响

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中国中西医结合杂志 2003年第11期23卷 841-844页

作者：何宏文王传恩谢瑶姚志彬广州中山大学中山医学院人体解剖学教研室脑研究室广州510089

目的:研究当归芍药散加味方(DSS)及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞功能的影响。方法:选用中老年大鼠(18月龄),分组灌服DSS全方及其拆方水煎液,3周后,各组大鼠脾细胞分别加入ConA、异丙肾上腺素(ISO)、心得安或DSS大鼠血清诱导淋巴细胞增殖... 详细信息

目的:研究当归芍药散加味方(DSS)及其拆方对中老年大鼠淋巴细胞功能的影响。方法:选用中老年大鼠(18月龄),分组灌服DSS全方及其拆方水煎液,3周后,各组大鼠脾细胞分别加入ConA、异丙肾上腺素(ISO)、心得安或DSS大鼠血清诱导淋巴细胞增殖,用四氮唑蓝比色法比较各组大鼠淋巴细胞增殖(A值)变化。结果:全方组、君臣药组、佐药组大鼠淋巴细胞增殖的A值与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);加入ISO后全方组各ConA浓度A值明显减少(P<0.01),再加入心得安或DSS大鼠血清后,A值又恢复到未加ISO水平。结论:DSS及其拆方均可促进老年大鼠淋巴细胞增殖,DSS可拮抗ISO的抑制淋巴细胞增殖作用。

关键词：当归芍药散加味方拆方中老年大鼠淋巴细胞增殖淋巴细胞增殖

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