检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2008年第1期24卷 72-75页

作者：李丽池沛冬孟锐杨滨燕吴长有中山大学基础医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广东广州510080

目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系。方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测。结果:... 详细信息

目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系。方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测。结果:体外刺激PBMC 48 h后,可见T细胞有BrdU掺入,但随着时间的延长,掺入率没有明显增加。对比分析BrdU掺入与活化分子表达的关系表明,CD69在刺激后8 h达高峰,而CD25则需要24 h后达到高峰。另外,BrdU掺入与细胞因子表达没有明显关系,当PBMC刺激后8 h,即有大量IFN-γ的表达,而当培养时间延长到24、48和72 h后,IFN-γ的表达没有明显改变。OKT3+antiCD28刺激T细胞后BrdU的阳性率高于PMA+Ionomycin刺激的T细胞,CD8+T细胞掺入率高于CD4+T细胞。结论:利用FCM检测BrdU+细胞可以用于评价T细胞的增殖反应,但在多克隆刺激的条件下,只有少数细胞发生增殖,并且BrdU掺入率受刺激剂种类和时间的影响,BrdU掺入与活化分子和细胞因子的表达均没有明显关系。

关键词： BrdU 增殖流式细胞仪细胞活化

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卡介苗刺激后CD8^+T细胞活化、增殖及其调节

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中国免疫学杂志 2011年第3期27卷 195-199页

作者：李丽乔丹李琴吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

目的:探讨卡介苗(BCG)刺激后,结核菌素试验阳性(PPD+)正常人外周血单个核细胞(PBMCs)中CD8+T细胞的活化、增殖、细胞因子产生及调节性T细胞(Treg)对其调节作用。方法:体外用BCG刺激PPD+正常人PBMCs,检测CD8+T细胞的细胞因子产生、活化... 详细信息

目的:探讨卡介苗(BCG)刺激后,结核菌素试验阳性(PPD+)正常人外周血单个核细胞(PBMCs)中CD8+T细胞的活化、增殖、细胞因子产生及调节性T细胞(Treg)对其调节作用。方法:体外用BCG刺激PPD+正常人PBMCs,检测CD8+T细胞的细胞因子产生、活化和增殖。纯化后获得调节性T细胞(Treg)和CD25-细胞,检测Treg对CD8+T细胞增殖的调节作用。结果:BCG诱导CD8+T细胞表达CD69和CD25等活化分子。在低剂量IL-2存在的条件下,BCG诱导CD8+T细胞发生增殖,且增殖的CD8+T细胞大部分表达Granzyme-B。体外BCG短期刺激PBMCs后,CD8+T细胞几乎不产生IFN-γ、IL-2和TNF-α。此外,调节性T细胞抑制CD8+T细胞增殖。结论:BCG诱导CD8+T细胞活化、增殖和表达颗粒酶,Treg抑制CD8+T细胞增殖。

关键词： BCG Th1细胞因子增殖调节

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多功能T细胞的检测及其意义

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中国免疫学杂志 2009年第2期25卷 99-102页

作者：李丽吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

近年来,在对小鼠实验和人体免疫的研究中发现,疫苗的保护效果和病人的预后及转归与多功能性T细胞的数量和质量密切相关。以往仅仅检测某种或少数几种效应T细胞的功能,远远不能代表机体的特异性免疫状态。在单个细胞水平上,同时产生两种... 详细信息

近年来,在对小鼠实验和人体免疫的研究中发现,疫苗的保护效果和病人的预后及转归与多功能性T细胞的数量和质量密切相关。以往仅仅检测某种或少数几种效应T细胞的功能,远远不能代表机体的特异性免疫状态。在单个细胞水平上,同时产生两种或以上效应功能,包括细胞因子、趋化因子及杀伤功能的细胞被称为多功能性T细胞。多功能性T细胞与疾病的保护效果密切相关。为此,功能性T细胞的检测,能更准确、完整地反映机体特异性细胞免疫应答,尤其对于疫苗的设计和保护效果评价具有十分重要的意义。

关键词：多功能性T细胞疫苗细胞因子

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人γδ T细胞表型与功能特征的探讨

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免疫学杂志 2008年第6期24卷 609-612,617页

作者：李丽吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

目的比较观察人外周血PBMCs和CBMCs中αβT和γδT细胞的表型与功能特征,进一步了解γδT细胞在免疫应答中的作用。方法分离正常人PBMCs及脐带血CBMCs,检测表面分子的表达。PMA+Ionomycin刺激PBMCs或CBMCs后,利用流式细胞术(FCM)检测其... 详细信息

目的比较观察人外周血PBMCs和CBMCs中αβT和γδT细胞的表型与功能特征,进一步了解γδT细胞在免疫应答中的作用。方法分离正常人PBMCs及脐带血CBMCs,检测表面分子的表达。PMA+Ionomycin刺激PBMCs或CBMCs后,利用流式细胞术(FCM)检测其细胞因子的产生以及初始/记忆细胞标记的表达。结果与αβT细胞相比,γδT细胞高表达CD45RO,低表达CD25和CCR7;与CBMCs中γδT细胞相比,PBMCs中γδT细胞表达CD45RO升高,CD45RA与CD25降低。细胞因子表达的结果表明,与αβT细胞相比,γδT细胞分泌大量IFN-γ和TNF-α,较少分泌IL-2,且IFN-γ+细胞主要为CD45RA-CD62L-CCR7-;与PBMCs中γδT细胞不同,体外刺激CBMCs中γδT细胞后,表达IFN-γ数量较低,且IFN-γ+细胞主要为CD45RA+CD62L-CCR7-/+。结论PBMCs与CBMCs中αβT和γδT细胞的表型与功能均存在差别,记忆性γδT细胞的增加可能与其活化和免疫应答的作用相关。

关键词： γδ T细胞表型细胞因子

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CD107a/b分子用于评价SARS-CoV/S抗原特异性免疫应答

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免疫学杂志 2009年第2期25卷 161-164页

作者：黄俊吴长有中山大学基础医学院免疫学教研室传染病教育部重点实验室广州医学院基础医学院病原学教研室

目的观察抗原刺激以后CD4+和CD8+T细胞表面CD107a/b分子的表达与效应性细胞因子的产生之间的关系。方法正常Balb/c小鼠脾细胞经多克隆刺激剂刺激或者SARS-CoV/SDNA疫苗免疫小鼠脾细胞经S抗原多肽刺激以后,使用流式细胞仪检测CD4+和CD8+... 详细信息

目的观察抗原刺激以后CD4+和CD8+T细胞表面CD107a/b分子的表达与效应性细胞因子的产生之间的关系。方法正常Balb/c小鼠脾细胞经多克隆刺激剂刺激或者SARS-CoV/SDNA疫苗免疫小鼠脾细胞经S抗原多肽刺激以后,使用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞表面CD107a/b分子的表达与IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子的表达之间的关系。结果经抗原多肽刺激后,抗原特异性CD4+和CD8+T细胞表面均表达CD107a/b。约80%的CD8+IFN-γ+细胞同时表达CD107a/b;约25%～40%的CD8+TNF-α+细胞表达CD107a/b;而大部分分泌IL-2的抗原特异性T细胞均不表达CD107a/b。结论可以通过对抗原特异性T细胞表面CD107a/b分子的检测来鉴定抗原特异性T细胞。同时检测效应性细胞因子,可以提高检测的准确性和灵敏度。

关键词： CD107a/b 严重急性呼吸综合征 S抗原多肽细胞因子

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环孢素A对LPS诱导的早期炎症反应的影响

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免疫学杂志 2010年第12期26卷 1022-1024,1029页

作者：黄俊吴长有中山大学基础医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080 广州医学院基础医学院病原学教研室 510182

目的研究环孢素A(cyclosporin A,CsA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠早期炎症反应的影响。方法小鼠腹腔内注射LPS诱导炎症反应,静脉注射不同浓度的CsA。6h后取血清,使用ELISA方法观察炎性因子IFN-γ和IL-6的含量;取脾细胞... 详细信息

目的研究环孢素A(cyclosporin A,CsA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠早期炎症反应的影响。方法小鼠腹腔内注射LPS诱导炎症反应,静脉注射不同浓度的CsA。6h后取血清,使用ELISA方法观察炎性因子IFN-γ和IL-6的含量;取脾细胞,使用流式细胞仪观察CD4+和CD8+T细胞表面的活化分子CD69表达;并使用细胞内细胞因子染色的方法,观察CD4+和CD8+T细胞IFN-γ和IL-4的产生水平。结果 CsA可以明显降低LPS诱导的小鼠血清中IFN-γ的水平,抑制CD4+和CD8+T细胞表面CD69分子的表达,抑制T细胞IFN-γ和IL-4的产生,均表现为剂量依赖性抑制关系。结论 CsA剂量依赖性抑制LPS诱导的小鼠早期炎症反应。

关键词：环孢素A 脂多糖早期炎症反应 T细胞

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环孢素A对小鼠Th17细胞分化的影响

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中国免疫学杂志 2008年第8期24卷 675-678,684页

作者：王俨吴长有中山大学中山医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

目的:观察在抗CD3单克隆抗体(mAb)+rIL-23刺激的条件下,环孢素A(CsA)对Th17细胞分化的影响。方法:小鼠脾淋巴细胞分别使用抗CD3 mAb、抗CD3 mAb+rIL-23及抗CD3 mAb+rIL-23+不同浓度的CsA刺激后,用ELISA检测IL-17和IFN-γ的水平,并用流... 详细信息

目的:观察在抗CD3单克隆抗体(mAb)+rIL-23刺激的条件下,环孢素A(CsA)对Th17细胞分化的影响。方法:小鼠脾淋巴细胞分别使用抗CD3 mAb、抗CD3 mAb+rIL-23及抗CD3 mAb+rIL-23+不同浓度的CsA刺激后,用ELISA检测IL-17和IFN-γ的水平,并用流式细胞仪在单个细胞水平上检测产生IL-17的T细胞亚群。结果:单独抗CD3 mAb能诱导少量的IL-17产生,加入IL-23后呈剂量依赖的方式明显增加IL-17的产生。CsA对抗CD3 mAb+rIL-23诱导的Th17细胞分化呈剂量依赖性的抑制作用。CsA不仅抑制早期Th17的分化,当细胞激活48小时后,CsA对Th17细胞的分化仍有抑制作用。CsA除了抑制Th17细胞分化外,对IFN-γ和IL-2的产生也有抑制作用。此外,T细胞亚群分析的结果表明IL-17主要由CD4+T细胞产生,而CD8+T细胞几乎不产生IL-17。结论:CsA可以抑制Th17细胞的分化,进一步阐明了CsA免疫抑制及抗炎作用的机制,为临床上应用CsA提供科学理论和实验依据。

关键词：环胞素A Th17 IFN-γ

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人外周血NKT细胞亚群表型及生物学特征

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中国免疫学杂志 2011年第2期27卷 110-114页

作者：李子涛杨滨燕吴长有中山大学中山医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

目的:观察正常人周围血NKT细胞的频率、表型特征及功能,进一步了解NKT细胞在免疫应答中的作用。方法:分离正常成年人PBMCs,利用流式细胞术(FCM)检测TCRvβ11、CD4、CD8、CD45RA、CD62L、CCR7等表面分子的表达;PMA+Ionomycin刺激PBMCs后... 详细信息

目的:观察正常人周围血NKT细胞的频率、表型特征及功能,进一步了解NKT细胞在免疫应答中的作用。方法:分离正常成年人PBMCs,利用流式细胞术(FCM)检测TCRvβ11、CD4、CD8、CD45RA、CD62L、CCR7等表面分子的表达;PMA+Ionomycin刺激PBMCs后,检测细胞因子的产生。结果:正常成年人周围血CD3+TCRvβ11+NKT细胞的平均频率为0.35%,其范围为0.11%～1.20%。根据CD4和CD8分子的表达,可将CD3+TCRvβ11+NKT细胞分为CD4+、CD8+、CD4-CD8-三个亚群,分别为56.24%、25.82%、16.47%。此外多数CD3+TCRvβ11+NKT细胞表达CD45RA,近半数细胞表达CD62L,少数细胞表达CCR7。细胞因子表达的结果显示,经PMA和Ionomycin刺激后,近30%的CD3+TCRvβ11+NKT细胞分泌IFN-γ,6.9%的细胞分泌IL-4。CD4+NKT细胞产生IL-4的量要明显高于CD8+NKT细胞,但IFN-γ的表达二者没有明显差别。重要的是初始和记忆性NKT细胞都能产生细胞因子,以记忆性NKT细胞为主。结论:正常人周围血中CD3+TCRvβ11+NKT细胞的频率很小,但其表型复杂,产生细胞因子IFN-γ和IL-4的频率高,参与免疫调节及免疫应答的过程。

关键词： NKT细胞亚群表型细胞因子

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结核胸液中ESAT-6多肽特异性多功能CD4^+ T细胞数量及功能分析

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第1期27卷 26-28,32页

作者：李丽乔丹李琴张贤兰劳穗华吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广东广州510080 广州市胸科医院广东广州510095

目的:检测ESAT-6多肽刺激后,结核性胸膜炎患者胸液细胞中CD4+ T细胞细胞因子产生及多功能CD4+ T细胞频率,了解ESAT-6特异性CD4+ T细胞在结核局部细胞免疫应答中的作用。方法:分离结核性胸膜炎患者胸液细胞(PFCs),ESAT-6混合多肽刺激后检... 详细信息

目的:检测ESAT-6多肽刺激后,结核性胸膜炎患者胸液细胞中CD4+ T细胞细胞因子产生及多功能CD4+ T细胞频率,了解ESAT-6特异性CD4+ T细胞在结核局部细胞免疫应答中的作用。方法:分离结核性胸膜炎患者胸液细胞(PFCs),ESAT-6混合多肽刺激后检测CD4+ T细胞细胞因子分泌、细胞亚群、多功能性CD4+T细胞频率及细胞因子平均荧光强度。结果:BCG、ESAT-6混合多肽和ESAT-6重组蛋白刺激PFCs后,主要是CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-γ、IL-2和TNF-α),而CD8+ T细胞几乎不产生细胞因子。进一步分析ESAT-6混合多肽刺激PFCs后Th1细胞的亚群组成,依据细胞因子分泌的类型及数量,该特异性Th1细胞可以分为7个不同亚群,且各亚群所占比例不同,其中多功能性T细胞亚群(同时分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α)比例较高。细胞因子荧光强度分析表明,依据细胞因子分泌类型的增加,单个细胞水平上不同Th1亚群中各细胞因子表达的量也逐渐增加,即3+>2+>1+细胞。结论:ESAT-6混合多肽刺激结核性胸膜炎患者胸液细胞后,主要诱导CD4+ T细胞分泌细胞因子,且Th1亚群中包含多功能性CD4+ T细胞,该细胞在单细胞水平上分泌细胞因子的类型和数量也显著高于其他亚群,可能在结核局部感染中发挥关键保护性作用。

关键词： CD4+T细胞多功能性T细胞细胞因子

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人外周血初始B细胞和记忆性B细胞亚群的特征和功能

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国际免疫学杂志 2010年第3期33卷 184-187页

作者：冯敛吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080

B淋巴细胞是免疫系统的重要免疫成份，主要功能是介导体液免疫应答。在人外周血中，按照B淋巴细胞的发育阶段及功能的不同，可将B淋巴细胞分为初始成熟B细胞、记忆B细胞和浆细胞。记忆B细胞又可分为IgM记忆B细胞和类型转换的记忆B细胞... 详细信息

B淋巴细胞是免疫系统的重要免疫成份，主要功能是介导体液免疫应答。在人外周血中，按照B淋巴细胞的发育阶段及功能的不同，可将B淋巴细胞分为初始成熟B细胞、记忆B细胞和浆细胞。记忆B细胞又可分为IgM记忆B细胞和类型转换的记忆B细胞。近年来的研究表明，B淋巴细胞的亚群远比人想象中的复杂，因此对人B细胞各亚群的起源、发育和功能进行更深入的研究，将有助于治疗自身免疫性疾病，在慢性感染性疾病的治疗过程中找到新的策略，并指导研发安全有效的疫苗。

关键词：初始成熟B细胞 IgM记忆B细胞类型转换的记忆B细胞浆细胞

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