检索结果-内蒙古大学图书馆

水生生物学报 2009年第3期33卷 546-551页

作者：马细兰刘晓春周立斌陈勇智张勇中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室、水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 惠州学院生命科学系惠州516007

摘要: 1999年日本学者Kojima, etal. 1 在大鼠胃组织中首次发现了一种多肽, 当这种多肽与生长激素促分泌素受体(Grow th horm one secretagogue receptor, GHS-R) 结合后, 能刺激生长激素(Grow th hormone, GH) 的分泌, 因此将其命名为... 详细信息

摘要: 1999年日本学者Kojima, etal. 1 在大鼠胃组织中首次发现了一种多肽, 当这种多肽与生长激素促分泌素受体(Grow th horm one secretagogue receptor, GHS-R) 结合后, 能刺激生长激素(Grow th hormone, GH) 的分泌, 因此将其命名为ghrelin (ghre 即grow 之意) 。

关键词：鱼 Ghrelin 生理功能

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雄尼罗罗非鱼肝脏2种生长激素受体基因表达的发育性变化

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中国水产科学 2009年第1期16卷 1-7页

作者：马细兰张勇刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 惠州学院生命科学系广东惠州516007

选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰... 详细信息

选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰度。结果表明,30～110日龄,雄鱼特定生长率呈不断上升趋势,至80～110日龄达到最高,之后开始下降;雄鱼肝脏中2种GHR基因表达的发育性变化趋势不相同,30～110日龄,GHR1mRNA表达逐渐上升,110日龄达到最高,随后开始下降,其发育性变化与特定生长率显著正相关(R=0.96,P<0.01);GHR2mRNA表达在60日龄达到最高,80日龄急剧下降,之后又缓慢上升,其发育性变化与特定生长率无相关性。提示尼罗罗非鱼生长激素可能主要通过与肝脏中GHR1受体的结合启动其促生长机制,肝脏中GHR1mRNA表达具有显著的年龄依赖性,其表达对尼罗罗非鱼的生长有重要影响。

关键词：尼罗罗非鱼生长激素受体基因表达实时定量PCR 发育性变化

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荧光实时定量PCR检测尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因方法的建立及初步应用

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中山大学学报（自然科学版） 2009年第3期48卷 74-79页

作者：马细兰易诗白张勇李云黄卫人刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室／／水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 惠州学院生命科学系广东惠州516007 上海海洋大学生命学院上海200090

为了准确分析尼罗罗非鱼生长激素(growth hormone,GH)、生长激素受体(growth hormone receptors,GHRs)和胰岛素样生长因子I(Insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)在早期发育阶段的作用,实验设计了尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因的特异性引物,提取垂体或肝脏总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了GH、GHR、IGF-Ⅰ基因荧光实时定量PCR检测方法。运用建立的荧光实时定量PCR检测了尼罗罗非鱼GH、GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化。结果表明在早期发育阶段,尼罗罗非鱼GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2的mRNA表达存在一定的互补关系;GH的表达与GHR1的表达呈显著正相关,提示GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2在尼罗罗非鱼早期发育的不同阶段起主导作用,且GH可能主要通过与GHR1的结合起作用。

关键词：尼罗罗非鱼荧光实时定量PCR GH GHR IGF-Ⅰ 发育性变化

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花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRH基因克隆与表达分析

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水生生物学报 2009年第2期33卷 214-221页

作者：黄海张勇刘晓春尹绍武杨丽萍朱培齐兴柱林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室海口570228

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库。经检测,文库的滴度为4.3×106cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43—3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp。以文库... 详细信息

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库。经检测,文库的滴度为4.3×106cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43—3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp。以文库为模板,克隆获得花鳗鲡两种类型的促性腺激素释放激素(mGnRH和cGnRH-II)cDNA序列。序列分析表明,花鳗鲡mGnRHcDNA开放阅读框(ORF)包含276个碱基,编码91个氨基酸,其中包括22个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1—22位氨基酸)、mGnRH十肽(23—32位氨基酸)、一个三肽裂解位点(33—35位氨基酸)和56个氨基酸的GnRH相关肽(36—91位氨基酸);花鳗鲡cGnRH-IIcDNA开放阅读框包含264个碱基,编码87个氨基酸,其中包括24个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1—24位氨基酸)、cGnRH-II十肽(25—34位氨基酸)、一个三肽裂解位点(34—36位氨基酸)和50个氨基酸的GnRH相关肽(37—87位氨基酸)。序列同源性分析表明,花鳗鲡mGnRH、cGnRH-IIcDNA与日本鳗鲡之间的相似性率高达98%;与鲑形目、鲈形目、鲽形目鱼类的相似率为73%—78%;而与鲤形目鱼类的相似性相对较低(63%—67%)。采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在花鳗鲡雌雄个体中的表达,结果表明两基因在雌雄个体的组织表达模式无明显差异;但mGnRH基因在雌雄个体内表达部位多于cGnRH-II的。

关键词：花鳗鲡 cDNA文库促性腺激素释放激素克隆基因表达

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斑鳠血清促性腺激素的季节变化和埋植甲基睾酮对斑鳠促性腺激素分泌的影响

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中山大学学报（自然科学版） 2009年第5期48卷 103-107页

作者：周立斌刘晓春马细兰林浩然李大疆陈焜慈李恒颂邬国民中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室//水生经济动物研究所和广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 惠州学院生命科学系和生物技术研究所广东惠州516007 中国水产科学研究院珠江水产研究所广东广州510380

采用鲤鱼GtHβ-亚基(cGtHβ)的标准品和抗血清建立了斑鳠异源的促性腺激素(Gonadotropin,GtH)放射免疫测定技术,并对斑鳠性腺指数(Gonadosomatic index,GSI)和GtH分泌的季节变化,以及埋植甲基睾酮(17α-methyl-testosterone,MT)对斑鳠GtH分泌的影响进行了研究。结果表明:斑鳠雌雄鱼GSI值分别在5月份和6月份达到最高,与其他月份相比有显著性提高(P<0.05);斑鳠雌鱼血清GtH水平在6月份达到最高,与10月和12月相比有显著性提高(P<0.05),斑鳠雄鱼血清GtH水平在6月份达到最高,4月、10月和12月相比有显著性提高(P<0.05);雌雄鱼血清GtH水平表现出基本相同的变化趋势,并且血清GtH水平差异不显著(P>0.05);埋植MT对斑鳠雌雄鱼血清GtH水平有一定影响,在性腺发育初期能提高雌雄鱼血清GtH水平,而在性腺成熟和排卵期能降低雌雄鱼血清GtH水平。上述结果表明在斑鳠的人工繁殖中可以采用埋植MT的方法对斑鳠进行催熟和催产。

关键词：斑鳠促性腺激素季节变化 MT

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鲟鱼GtH放射免疫测定方法的建立及催产前后史氏鲟血清GtH含量的变化

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水产学报 2008年第6期32卷 817-824页

作者：胡红霞刘晓春朱华张勇国家淡水渔业工程技术研究中心(北京)暨北京市水产科学研究所中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

用蛋白质快速液相层析（FPLC）分离俄罗斯鲟鱼脑垂体促性腺激素（GtH）,共获得GtH纯化蛋白4.6mg。用SDS-PAGE变性胶电泳图谱初步分析纯化蛋白,用反相高效液相色谱（rpHPLC）分离出两个亚基,质谱测定α亚基分子量:15 603ku,两个β亚基分... 详细信息

用蛋白质快速液相层析（FPLC）分离俄罗斯鲟鱼脑垂体促性腺激素（GtH）,共获得GtH纯化蛋白4.6mg。用SDS-PAGE变性胶电泳图谱初步分析纯化蛋白,用反相高效液相色谱（rpHPLC）分离出两个亚基,质谱测定α亚基分子量:15 603ku,两个β亚基分子量分别为14 338ku和14 694ku。制备了鲟鱼GtH的兔抗血清多克隆抗体,采用氯胺T法用125I标记抗原,用羊抗兔γ球蛋白做二抗,建立鲟鱼GtH的放射免疫测定方法。测定了催产前后不同时间史氏鲟血清中GtH含量的变化,统计分析表明成功排卵的雌鱼比未排卵和阴性对照组在催产后12h和16h GtH分泌量升高显著,最高达到***-1;催产效应时间与催产后血清中GtH的含量紧密相关。

关键词：史氏鲟俄罗斯鲟促性腺激素放射免疫测定催产

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斜带石斑鱼生长激素释放激素(GHRH)及其受体的cDNA克隆、序列分析及表达分布

斜带石斑鱼生长激素释放激素(GHRH)及其受体的cDNA克隆、序列分析...

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第五届广东、湖南、江西、湖北四省动物学学术研讨会

作者：钱越华李文笙林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

生长激素释放激素(growth hormone release hormone)通过生长激素释放激素受体(GHRHR)在垂体水平对生长激素的合成和释放起重要调节作用。用RT-PCR的方法从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的下丘脑和垂体中分别克隆到编码GHRH和GHRHR... 详细信息

生长激素释放激素(growth hormone release hormone)通过生长激素释放激素受体(GHRHR)在垂体水平对生长激素的合成和释放起重要调节作用。用RT-PCR的方法从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的下丘脑和垂体中分别克隆到编码GHRH和GHRHR的cDNA。结果表明:1)斜带石斑鱼GHRH开放读码框长423bp,编码141个氨基酸,其中信号肽18个氨基酸,

关键词：斜带石斑鱼生长激素释放激素克隆组织分布胚胎发育期

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斜带石斑鱼垂体腺苷酸环化酶激活多肽在毕赤酵母中表达

斜带石斑鱼垂体腺苷酸环化酶激活多肽在毕赤酵母中表达

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第五届广东、湖南、江西、湖北四省动物学学术研讨会

作者：欧阳静李文笙林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase activating polypeptide),简称PACAP,是38个氨基酸的小肽.自1989年被发现以来,随着对其越来越深入的研究,表叫PACAP作为一个神经肽类激素,对中枢神经系统和周围神经系统都有着重... 详细信息

垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase activating polypeptide),简称PACAP,是38个氨基酸的小肽.自1989年被发现以来,随着对其越来越深入的研究,表叫PACAP作为一个神经肽类激素,对中枢神经系统和周围神经系统都有着重要的调控作用.由于其广泛的生物活

关键词：斜带石斑鱼垂体腺苷酸环化酶激活多肽毕赤酵母表达

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半胱胺对斜带石斑鱼生长调控研究

半胱胺对斜带石斑鱼生长调控研究

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2008年全国海水养殖学术研讨会

作者：李云张勇刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室，水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室，广州 510275 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室，水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室，广州 510275

鱼类生长和生长激素(GH)分泌活动的调控是通过刺激性和抑制性因子的双重作用来实现的。实验证明促生长激素释放因子(GRF)是鱼类GH释放的主要刺激性因子。合成的鲤鱼GRF(cGRF)能使离体金鱼脑垂体碎片释放GH，而注射cGRF也使金鱼血液中GH... 详细信息

鱼类生长和生长激素(GH)分泌活动的调控是通过刺激性和抑制性因子的双重作用来实现的。实验证明促生长激素释放因子(GRF)是鱼类GH释放的主要刺激性因子。合成的鲤鱼GRF(cGRF)能使离体金鱼脑垂体碎片释放GH，而注射cGRF也使金鱼血液中GH含量明显增加。本文以重要海水经济鱼类斜带石斑鱼(Orange-spotted grouper, Epinephelus co-ioides)为研究对象，初步研究了CSH对斜带石斑鱼生长激素及其受体mRNA水平的影响以及作用机理;建立了斜带石斑鱼GH及2种GHR基因的Real-time PCR定量检测方法，为从分子水平研究斜带石斑鱼的生长规律与内分泌调控打下基础。

关键词：半胱胺斜带石斑鱼生长调控生长激素

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斑鳠血清促性腺激素的季节变化和埋植甲基睾酮对斑鳠促性腺激素分泌的影响

斑鳠血清促性腺激素的季节变化和埋植甲基睾酮对斑鳠促性腺激素分...

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2008年中国水产学会学术年会

作者：周立斌刘晓春马细兰林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所和广东省水生经济动物良种繁育重点实验室惠州学院生命科学系

本研究采用鲤鱼GtHβ-亚基(cGtHβ)的标准品和抗血清建立了斑鳠异源的促性腺激素(Gonadotropin,GtH)放射免疫测定技术,并对斑鳠性腺指数(Gonadosomatic index,GSI)和GtH分泌的季节变化,以及埋植甲基睾酮(17α-methyl-testosterone,MT)... 详细信息

本研究采用鲤鱼GtHβ-亚基(cGtHβ)的标准品和抗血清建立了斑鳠异源的促性腺激素(Gonadotropin,GtH)放射免疫测定技术,并对斑鳠性腺指数(Gonadosomatic index,GSI)和GtH分泌的季节变化,以及埋植甲基睾酮(17α-methyl-testosterone,MT)对斑鳠GtH分泌的影响进行了研究。结果表明:斑鳠雌雄鱼GSI值分别在5月份和6月份达到最高,与其他月份相比有显著性提高(P<0.05);斑鳠雌鱼血清GtH水平在6月份达到最高,与10月和12月相比有显著性提高(P<0.05),斑鳠雄鱼血清GtH水平在6月份达到最高, 4月、10月和12月相比有显著性提高(P<0.05):雌雄鱼血清GtH水平表现出基本相同的变化趋势,并且血清GtH水平差异不显著(P>0.05):埋植MT对斑鳠雌雄鱼血清GtH水平有一定影响,在性腺发育初期能提高雌雄鱼血清GtH水平,而在性腺成熟和排卵期能降低雌雄鱼血清GtH水平。上述结果表明在斑鳠的人工繁殖中可以采用埋植MT的方法对斑鳠进行催熟和催产。

关键词：斑鳠促性腺激素季节变化 MT

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