检索结果-内蒙古大学图书馆

水产学报 2010年第8期34卷 1182-1189页

作者：胡雪松李池陶徐伟曹顶臣贾智英石连玉中国水产科学研究院黑龙江水产研究所中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

利用电子标记跟踪同期孵化、同池饲养的黑龙江鲤(YL)、德国镜鲤选育系(JL)及荷包红鲤抗寒品系(HL)的生长过程。在135d(越冬前)、325d(越冬后)、385d及445d测定相关生长性状,评估3种鲤生长性能,并探讨越冬体重损失同越冬前体重的关系及... 详细信息

利用电子标记跟踪同期孵化、同池饲养的黑龙江鲤(YL)、德国镜鲤选育系(JL)及荷包红鲤抗寒品系(HL)的生长过程。在135d(越冬前)、325d(越冬后)、385d及445d测定相关生长性状,评估3种鲤生长性能,并探讨越冬体重损失同越冬前体重的关系及其对越冬后生长的影响。结果显示,JL的特定增重率仅在1～135d显著高于YL和HL(P<0.05);YL体长的特定增长率在1～135d和325～385d显著高于JL和HL(P<0.05);3种鲤品种内个体间生长差异较大,体重的变异系数在各测定时段均超过20%;在445d时,3种鲤的性腺重和性腺成熟系数均为雄性显著高于雌性(P<0.05),但同一品种(系)雌鱼和雄鱼在各测定时段的生长无明显差别。越冬体重损失率与越冬前体重呈显著的正相关(P<0.01),但越冬前相同体重范围个体的越冬体重损失率存在一定差别,可细分为低体重损失(LWL)和高体重损失(HWL)两个群体;LWL群体的越冬前体重显著低于HWL群体(P<0.05),但在越冬后各测定时段的体重均显著高于HWL群体(P<0.05),LWL群体体长在各测定时段均显著高于HWL群体(P<0.05);越冬体重损失率同325～385d及385～445d的特定增重率无明显相关,但与385d及445d的体重呈显著的负相关(P<0.01)。以上结果表明,JL(体重)和YL(体长)的生长优势主要表现在早期(1龄);3种鲤的生长性能均具有较大的选育空间,但同一品种(系)雌雄个体在445d前的生长无明显差别;越冬体重损失不影响后期的生长速度,而通过决定越冬结束时的体重来影响生长。

关键词：黑龙江鲤德国镜鲤选育系荷包红鲤抗寒品系生长性能越冬体重损失

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鲤胰岛素样生长因子结合蛋白-2和-3基因启动子克隆与序列分析

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水产学报 2010年第10期34卷 1469-1477页

作者：陈文波李文笙林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室河南理工大学资源环境学院

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)系统对鱼类的生长和繁殖有着重要的作用。利用PCR方法克隆获得了鲤胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)-2和-3基因的上游启动子部分序列,... 详细信息

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)系统对鱼类的生长和繁殖有着重要的作用。利用PCR方法克隆获得了鲤胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)-2和-3基因的上游启动子部分序列,长度分别是1142bp和1067bp。Igfbp-2启动子区域没有TATA框和CAAT框。同时,Igfbp-3中只含有TATA框,但没有CAAT框。研究结果表明,二者启动子不具备典型的启动子特征,同时,在二者启动子上还发现了cAMP应答元件和肝细胞核因子结合位点,以及Pit-1、Oct-1、RXR和GR等结合位点。研究认为,鲤Igfbp-2和-3基因的表达受到潜在的多因子调控。

关键词：鲤胰岛素样生长因子结合蛋白启动子序列分析

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半胱胺盐酸盐(CSH)对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长及生长轴相关基因表达的影响

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海洋与湖沼 2010年第2期41卷 240-245页

作者：马细兰张勇刘晓春周立斌林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 惠州学院生命科学系生物技术研究所惠州516007

为了分析半胱胺盐酸盐(CSH)对尼罗罗非鱼生长调节的作用,设计了长期和短期2个实验,采用腹腔注射(剂量100μg/g体重)方法,分析CSH对尼罗罗非鱼绝对生长率、特定生长率、肝体系数和肥满度的影响,并应用荧光实时定量PCR方法检测在注射CSH... 详细信息

为了分析半胱胺盐酸盐(CSH)对尼罗罗非鱼生长调节的作用,设计了长期和短期2个实验,采用腹腔注射(剂量100μg/g体重)方法,分析CSH对尼罗罗非鱼绝对生长率、特定生长率、肝体系数和肥满度的影响,并应用荧光实时定量PCR方法检测在注射CSH后不同时段(6h,12h,24h,2周)尼罗罗非鱼垂体GH、肝脏GHR和肝脏IGF-I基因的表达变化。结果表明,CSH组尼罗罗非鱼的绝对生长率、特定生长率、肝体系数、肥满度均显著高于对照组(P<0.05);注射CSH后12h、24h垂体GH和肝脏GHRmRNA表达水平均显著升高(P<0.05),2周后恢复到对照组水平;注射CSH后6h肝脏IGF-ImRNA表达水平显著升高(P<0.05),12h恢复到对照组水平,24h和2周表达水平极显著上升(P<0.01)。以上结果提示,CSH可显著上调尼罗罗非鱼生长轴相关基因的表达,从而促进鱼类的生长。

关键词：尼罗罗非鱼半胱胺盐酸盐(CSH) 生长基因表达

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罗非鱼ActRIIB cDNA克隆和表达,及其抗体在中对肌肉作用

罗非鱼ActRIIB cDNA克隆和表达,及其抗体在中对肌肉作用

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第十一届全国水产青年学术年会

作者：邝中雷汤治国陈军张艳红李文笙有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学生命科学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510006

ActRⅡB(activin receptor type ⅡB),一种丝氨酸/苏氨酸激酶,是肌肉生长抑制素(Myostatin)的一种受体,和Myostatin有很高亲和力,Myostatin-ActRⅡB-Smad信号途径对肌肉生长其重要的负调控作用.且有报道称ActRⅡB的缺失对肌肉生长的促...

ActRⅡB(activin receptor type ⅡB),一种丝氨酸/苏氨酸激酶,是肌肉生长抑制素(Myostatin)的一种受体,和Myostatin有很高亲和力,Myostatin-ActRⅡB-Smad信号途径对肌肉生长其重要的负调控作用.且有报道称ActRⅡB的缺失对肌肉生长的促进作用要比myostatin缺失的作用更为显著.在本研究中,用3'和5'RACE(Rapid Amplification of cDNA End)的方法从罗非鱼中分别克隆得到ActRⅡB的cDNA两端序列,并克隆出全长ORF.罗非鱼ActRⅡB的ORF全长为1545bp.去除ActRⅡB信号肽序列后,构建出表达载体,利用比赤酵母真核表达系统表达该重组ActRⅡB蛋白.

关键词：

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人工诱导花鳗鲡的精巢发育成熟及其精子的生物学特性

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水产学报 2009年第1期33卷 53-59页

作者：周雯伊黄海尹绍武齐鑫张勇刘晓春陈国华林浩然海南大学海洋学院暨热带生物资源教育部重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

用肌肉注射HCG的处理方式(剂量为500 U/kg体重,每周注射1次,注射时间为6周)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,成熟率达80.0%。对人工催熟花鳗鲡精子的生物学特性研究结果表明:花鳗鲡精子头部长径为(3.81±0.69)μm,短径为(1.24±0.15... 详细信息

用肌肉注射HCG的处理方式(剂量为500 U/kg体重,每周注射1次,注射时间为6周)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,成熟率达80.0%。对人工催熟花鳗鲡精子的生物学特性研究结果表明:花鳗鲡精子头部长径为(3.81±0.69)μm,短径为(1.24±0.15)μm;尾部长度为(24.83±3.05)μm;精液pH为7.3~7.5,精子密度每毫升1.02×1010尾。精子的适宜盐度为15~20,其中盐度为15时,精子激活比率最高,快速运动时间以及精子的寿命最长。精子的pH适宜范围为6.0~8.0,pH值过高或过低都会影响精子的活力与寿命。另外,4种金属离子(Mg2+、Ca2+、Na+和K+)对花鳗鲡精子活力与寿命的影响趋势基本一致,金属离子浓度过高或过低都会抑制精子的活力、缩短快速运动时间和寿命。而MgCl2、CaCl2、KCl、NaCl溶液浓度为0.4~0.6 g/mL时,精子活力最好,最高激活比率为3级(41.0%~60.0%)。

关键词：花鳗鲡人工诱导精巢精子活力

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不同饥饿时段对黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)ghrelin基因表达的影响

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海洋与湖沼 2009年第3期40卷 313-318页

作者：马细兰张勇刘云黄卫人刘晓春周立斌中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 惠州学院生命科学系惠州516007

设计了黑鲷ghrelin基因的特异性引物,提取胃组织总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了ghrelin基因荧光实时定量PCR检测方法,以准确分析ghrelin基因... 详细信息

设计了黑鲷ghrelin基因的特异性引物,提取胃组织总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了ghrelin基因荧光实时定量PCR检测方法,以准确分析ghrelin基因在黑鲷摄食调节中的作用。运用建立的荧光实时定量PCR方法检测了不同饥饿时段(2天、7天)黑鲷胃、肠、下丘脑组织中ghrelin mRNA的表达变化。结果表明,饥饿2天(短期饥饿),黑鲷胃、肠组织中ghrelin mRNA表达显著上升(P<0.05),下丘脑ghrelin mRNA表达无显著变化(P>0.05);饥饿7天(长期饥饿),黑鲷胃、肠组织ghrelin mRNA表达比饥饿2天显著下降,但仍显著高于对照组,下丘脑ghrelin mRNA表达逐渐升高(P<0.05);在同一饥饿时间内不同组织ghrelin mRNA表达存在显著差异(P<0.05)。黑鲷不同组织ghrelin基因的表达随不同饥饿时段呈现出不同的变化趋势,推测ghrelin基因参与了黑鲷摄食调节的生物学过程。

关键词：黑鲷 ghrelin 实时定量PCR 饥饿

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鱼类ghrelin研究进展

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水生生物学报 2009年第3期33卷 546-551页

作者：马细兰刘晓春周立斌陈勇智张勇中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室、水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 惠州学院生命科学系惠州516007

摘要: 1999年日本学者Kojima, etal. 1 在大鼠胃组织中首次发现了一种多肽, 当这种多肽与生长激素促分泌素受体(Grow th horm one secretagogue receptor, GHS-R) 结合后, 能刺激生长激素(Grow th hormone, GH) 的分泌, 因此将其命名为... 详细信息

摘要: 1999年日本学者Kojima, etal. 1 在大鼠胃组织中首次发现了一种多肽, 当这种多肽与生长激素促分泌素受体(Grow th horm one secretagogue receptor, GHS-R) 结合后, 能刺激生长激素(Grow th hormone, GH) 的分泌, 因此将其命名为ghrelin (ghre 即grow 之意) 。

关键词：鱼 Ghrelin 生理功能

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雄尼罗罗非鱼肝脏2种生长激素受体基因表达的发育性变化

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中国水产科学 2009年第1期16卷 1-7页

作者：马细兰张勇刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 惠州学院生命科学系广东惠州516007

选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰... 详细信息

选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰度。结果表明,30～110日龄,雄鱼特定生长率呈不断上升趋势,至80～110日龄达到最高,之后开始下降;雄鱼肝脏中2种GHR基因表达的发育性变化趋势不相同,30～110日龄,GHR1mRNA表达逐渐上升,110日龄达到最高,随后开始下降,其发育性变化与特定生长率显著正相关(R=0.96,P<0.01);GHR2mRNA表达在60日龄达到最高,80日龄急剧下降,之后又缓慢上升,其发育性变化与特定生长率无相关性。提示尼罗罗非鱼生长激素可能主要通过与肝脏中GHR1受体的结合启动其促生长机制,肝脏中GHR1mRNA表达具有显著的年龄依赖性,其表达对尼罗罗非鱼的生长有重要影响。

关键词：尼罗罗非鱼生长激素受体基因表达实时定量PCR 发育性变化

来源：评论

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荧光实时定量PCR检测尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因方法的建立及初步应用

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中山大学学报（自然科学版） 2009年第3期48卷 74-79页

作者：马细兰易诗白张勇李云黄卫人刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室／／水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 惠州学院生命科学系广东惠州516007 上海海洋大学生命学院上海200090

为了准确分析尼罗罗非鱼生长激素(growth hormone,GH)、生长激素受体(growth hormone receptors,GHRs)和胰岛素样生长因子I(Insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)在早期发育阶段的作用,实验设计了尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因的特异性引物,提取垂体或肝脏总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了GH、GHR、IGF-Ⅰ基因荧光实时定量PCR检测方法。运用建立的荧光实时定量PCR检测了尼罗罗非鱼GH、GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化。结果表明在早期发育阶段,尼罗罗非鱼GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2的mRNA表达存在一定的互补关系;GH的表达与GHR1的表达呈显著正相关,提示GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2在尼罗罗非鱼早期发育的不同阶段起主导作用,且GH可能主要通过与GHR1的结合起作用。

关键词：尼罗罗非鱼荧光实时定量PCR GH GHR IGF-Ⅰ 发育性变化

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花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRH基因克隆与表达分析

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水生生物学报 2009年第2期33卷 214-221页

作者：黄海张勇刘晓春尹绍武杨丽萍朱培齐兴柱林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室海口570228

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库。经检测,文库的滴度为4.3×106cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43—3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp。以文库... 详细信息

以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库。经检测,文库的滴度为4.3×106cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43—3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp。以文库为模板,克隆获得花鳗鲡两种类型的促性腺激素释放激素(mGnRH和cGnRH-II)cDNA序列。序列分析表明,花鳗鲡mGnRHcDNA开放阅读框(ORF)包含276个碱基,编码91个氨基酸,其中包括22个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1—22位氨基酸)、mGnRH十肽(23—32位氨基酸)、一个三肽裂解位点(33—35位氨基酸)和56个氨基酸的GnRH相关肽(36—91位氨基酸);花鳗鲡cGnRH-IIcDNA开放阅读框包含264个碱基,编码87个氨基酸,其中包括24个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1—24位氨基酸)、cGnRH-II十肽(25—34位氨基酸)、一个三肽裂解位点(34—36位氨基酸)和50个氨基酸的GnRH相关肽(37—87位氨基酸)。序列同源性分析表明,花鳗鲡mGnRH、cGnRH-IIcDNA与日本鳗鲡之间的相似性率高达98%;与鲑形目、鲈形目、鲽形目鱼类的相似率为73%—78%;而与鲤形目鱼类的相似性相对较低(63%—67%)。采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在花鳗鲡雌雄个体中的表达,结果表明两基因在雌雄个体的组织表达模式无明显差异;但mGnRH基因在雌雄个体内表达部位多于cGnRH-II的。

关键词：花鳗鲡 cDNA文库促性腺激素释放激素克隆基因表达

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