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- 1 篇 教育学
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6 篇 有害生物控制与资...
4 篇 水生经济动物研究...
4 篇 广东省番禺国家级...
4 篇 国家淡水渔业工程...
4 篇 广东省海洋渔业试...
4 篇 水生经济动物研究...
3 篇 广州大学
3 篇 华南师范大学
3 篇 有害生物控制与资...
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2 篇 河南理工大学
2 篇 广东广州
2 篇 中山大学有害生物...
2 篇 广东海洋大学
2 篇 广东广州

作者

130 篇 林浩然
101 篇 张勇
62 篇 刘晓春
45 篇 李水生
35 篇 李文笙
19 篇 刘云
16 篇 卢丹琪
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12 篇 马细兰
12 篇 王庆
11 篇 彭诚
11 篇 蒙子宁
11 篇 陈嘉兴
10 篇 张海发
9 篇 吴金英
8 篇 赵密
8 篇 舒琥
8 篇 王翔
8 篇 周立斌
7 篇 黄文

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171 篇 中文

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斜带石斑鱼黑色素浓集激素三种受体MCHRs基因的克隆表达及信号通路分析

斜带石斑鱼黑色素浓集激素三种受体MCHRs基因的克隆表达及信号通...

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：李伟萍彭诚唐霖唐驻景陈嘉兴叶智峰张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

由于斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)是我国当代水产行业重要的经济养殖鱼类,所以针对其快速、健康地生长和繁育的研究具有重要的意义.研究发现黑色素浓集激素(Melanin concentrating hormone,MCH)在许多生理内分泌活动中具有重要的...

由于斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)是我国当代水产行业重要的经济养殖鱼类,所以针对其快速、健康地生长和繁育的研究具有重要的意义.研究发现黑色素浓集激素(Melanin concentrating hormone,MCH)在许多生理内分泌活动中具有重要的调控作用,包括调节动物摄食行为、体重变化、能量平衡、睡眠觉醒、情绪压抑、攻击行为以及鱼类体色变化等功能.MCH主要通过与其受体(Melanin concentrating hormone receptor, MCHR)结合后引发不同的下游反应来发挥调控作用.本文通过对斜带石斑鱼转录组数据和基因组数据的研究分析并结合基因克隆技术,发现与哺乳类不同,斜带石斑鱼具有三个不同受体的亚型基因：MCHR1a、MCHR1b和MCHR2.其中MCHR1a与MCHR1b的同源性较高为73％,其与MCHR2的同源性分别为37％和34％.通过在线网站TMHMMServer v.2.0对斜带石斑鱼这三个受体基因进行了跨膜结构域分析,发现MCHR1a、MCHR1b和MCHR2的结构相似,都具有7次跨膜结构,均属于G蛋白偶联受体超家族.为了研究斜带石斑鱼神经肽MCH1和MCH2与这三种受体的相互作用及其所调控的生理内分泌功能,我们用真核表达载体pcDNA3.1成功表达了斜带石斑鱼的MCHR1a、MCHR1b和MCHR2蛋白,并运用脂质体转染法将这三种pcDNA3.1-MCHRs真核表达载体导入HEK-293T细胞中稳定表达,然后用化学合成的成熟的斜带石斑鱼神经肽MCH1和MCH2分别以不同的梯度浓度刺激培养已稳定转染三种pcDNA3.1-MCHRs载体的293T细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测信号通路中cAMP反应元件(CRE)和血清反应元件(SRE)的表达变化情况,分析斜带石斑鱼MCH与这三种受体MCHRs结合所介导的信号通路类型.结果显示：斜带石斑鱼神经肽MCH1作用于MCHR1a、MCHR1b和MCHR2后对SRE都具有激活作用,并且作用于MCHR2后抑制了CRE的表达水平;神经肽MCH2作用于MCHR2后改变了SRE的表达水平,而对CRE的作用无明显变化.由此表明,斜带石斑鱼的三种黑色素浓集激素受体MCHR1a、MCHR1b和MCHR2均参与了机体内分泌活动的调控,为进一步研究MCH与MCHR的生理内分泌调控功能奠定了基础.

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石斑鱼基因组的研究与应用

石斑鱼基因组的研究与应用

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：张勇李水生刘云卢丹琪夏军红蒙子宁刘晓春林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

基因作为生命信息的承载体,包含着每个生命的全部奥密.基因组的研究,已经成为全面解读一个物种的重要突破口.石斑鱼是我国南方沿海广东、海南、福建等省的重要海水养殖鱼类之一,经济价值巨大.我们选取了斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides...

基因作为生命信息的承载体,包含着每个生命的全部奥密.基因组的研究,已经成为全面解读一个物种的重要突破口.石斑鱼是我国南方沿海广东、海南、福建等省的重要海水养殖鱼类之一,经济价值巨大.我们选取了斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)、棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)、鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)和赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)为代表,开展了基因组的研究工作,进行了全基因组测序、基因注释、基因进化和功能分析以及转录组和表达谱的分析.完成了斜带石斑鱼高密度遗传图谱和全基因组序列图谱绘制(基因组覆盖率为89.7％,Contig N50为22.6kb,Scaffold N50为1,083kb,注释的基因总数为23,879个),将84.33％的组装序列定位到了染色体上.以石斑鱼全基因组精细图谱为基础,进行了转录组和表达谱分析,开展生殖、生长、免疫和抗性等主要经济性状功能基因研究,解析石斑鱼的基因调控网络及其作用机理.开展石斑鱼个体的重测序,获取石斑鱼全基因组水平的高密度SNP分子标记,分析SNP分子标记与主要11个经济性状的遗传关联,精细的定位了体长和体重等一批重要经济性状的QTLs,为快速培育抗病、抗逆、优质、高产的优良品种奠定重要基础.

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杂交石斑鱼生长相关miRNA转录组研究

杂交石斑鱼生长相关miRNA转录组研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：唐驻景唐霖余泽庶陈嘉兴刘云张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

miRNA通过与mRNA靶分子互补结合,在细胞增殖、凋亡、新陈代谢等生命活动中起到重要调控作用.棕点石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus,俗名老虎斑)和鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus,俗名龙趸)经过人工培育已成功获得杂交子一代虎龙斑....

miRNA通过与mRNA靶分子互补结合,在细胞增殖、凋亡、新陈代谢等生命活动中起到重要调控作用.棕点石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus,俗名老虎斑)和鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus,俗名龙趸)经过人工培育已成功获得杂交子一代虎龙斑.miRNA的调控作用可以揭示石斑鱼的遗传特性,并且高通量测序能更准确地鉴定非保守、以及低表达量的miRNA.我们取老虎斑,龙趸,虎龙斑的脑组织为样品,用高通量测序技术构建3个文库,注释出保守miRNA,并且预测未知miRNA.老虎斑,龙趸,虎龙斑的miRNA数量分别为344,351,359.计算miRNA的表达量,分析三个物种之间有显著差异的miRNA.接着预测miRNA调控的靶基因.老虎斑,龙趸,虎龙斑的靶基因数量分别为5575,6798,7031.接着对靶基因进行GO功能注释和KEGG信号通路分析.结果显示,在老虎斑,龙趸和虎龙斑的遗传过程中,miRNA有很高的保守性.通过构建靶基因的网络关系,预测dre-miR-122与能量代谢有密切的关系.

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人工养殖条件下赤点石斑鱼的激素变化研究

人工养殖条件下赤点石斑鱼的激素变化研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：吴永丽周立斌肖玲王翔李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

在自然条件下，赤点石斑鱼为雌雄同体、雌性先熟种类，从发生性别分化开始时表现为雌性性别，当雌鱼发育到一定年龄及大小时，才发生性逆转。但在养殖条件环境下，有一定比例的原发性雄鱼出现。本研究以人工养殖条件下赤点石斑鱼为研究...

在自然条件下，赤点石斑鱼为雌雄同体、雌性先熟种类，从发生性别分化开始时表现为雌性性别，当雌鱼发育到一定年龄及大小时，才发生性逆转。但在养殖条件环境下，有一定比例的原发性雄鱼出现。本研究以人工养殖条件下赤点石斑鱼为研究对象，研究一龄和二龄赤点石斑鱼激素的变化。我们通过常规组织学方法研究赤点石斑鱼性腺的变化，实验结果表明：一龄赤点石斑鱼性腺部分为Ⅱ期性腺、兼性性腺和雄性性腺;二龄赤点石斑鱼性腺发育时期有Ⅱ期性腺、Ⅲ期卵巢、Ⅳ期卵巢、Ⅵ期卵巢以及兼性性腺和雄性性腺。进一步测量血清中雌二醇(E2)和11-酮基睾酮(11-KT)含量，发现E2主要在卵巢成熟期的鱼血清中浓度较高，而11-KT在性腺为兼性和雄性的鱼血清中浓度较高。此外，本研究将进一步探讨赤点石斑鱼生殖轴相关基因及雌、雄激素受体(ERα、ERβ1、ERβ2和AR)基因的表达。

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斜带石斑鱼超声检测技术的建立

斜带石斑鱼超声检测技术的建立

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：叶智锋陈嘉兴王晶陈枭李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

超声检测技术现已广泛用于医学领域，是一项非常成熟的无损伤检测技术。国内外已将超声检测技术引用至水产养殖领域，主要用于无损性别鉴定和体内器官识别，且已在欧洲大比目鱼，中华鲟，西伯利亚鲟等鱼类中得到有效应用。石斑鱼是雌雄...

超声检测技术现已广泛用于医学领域，是一项非常成熟的无损伤检测技术。国内外已将超声检测技术引用至水产养殖领域，主要用于无损性别鉴定和体内器官识别，且已在欧洲大比目鱼，中华鲟，西伯利亚鲟等鱼类中得到有效应用。石斑鱼是雌雄同体，先雌后雄鱼类。实际操作中，为了确定石斑鱼的性别，常采用组织学切片法和激素检测法。两种方法对石斑鱼皆有较大损伤，不利于实际生产和科学研究，因而亟需建立无损的检测方法。本研究以四龄到六龄斜带石斑鱼为研究对象，通过体外超声检测和剖腹检查对比，总结性腺和主要器官的超声图像特征，并辅以组织学切片法确认性腺时期和类型，建立起斜带石斑鱼的鳔、胃、脊柱、肠道、眼部、四期卵巢的检测技术，还将进一步建立各时期卵巢和精巢、心脏、食道等器官的识别技术。本研究建立的无损性腺鉴定和体内器官识别技术为超声检测在斜带石斑鱼上的应用提供了重要依据。

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斜带石斑鱼granulin基因克隆及其功能初步分析

斜带石斑鱼granulin基因克隆及其功能初步分析

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：赵密郭银陈慧敏肖玲刘晓春张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转...

石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转转录组中发现了三种granulin基因,分别命名为granulin1,granulin2和granulin3.其中granulin1和granulin2基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的三十多倍,granulin3基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的0.5倍,表明了granulin基因在石斑鱼的性反转中起到了一定的作用.我们对三种granulin基因进行了RACE扩增,granulin1的全长3350 bp,其开放阅读框(ORF)为2217bp,编码739个氨基酸;granulin2的全长为1378 bp,其开放阅读框为888 bp,编码296个氨基酸;granulin3的全长为3237 bp,其开放阅读框为2433 bp,编码811个氨基酸.利用双分子荧光互补(BiFC)技术,构建了pBIFC-VN 155-granulin1、pBIFC-VN 155-granulin2、pBIFC-VN 155-granulin3三种N段真核表达质粒和pBIFC-VC 155-ARl、pBIFC-VC 155-AR2、pBIFC-VC 155-ERαt、pBIFC-VC 155-ERβ1、pB IFC-VC 155-Erβ2、pBIFC-VC155-LHR1、pBIFC-VC 155-LHR2、pBIFC-VC 155-FSHR八种不同激素受体的C端真核表达质粒,逐个将3种N段真核表达质粒分别与8种C段真核表达质粒共转染到293T细胞,若N段表达质粒与C段表达质粒有相互作用,则可以观察到荧光现象.结果：pBIFC-VN155-granulin3与pBIFC-VC155-ERα在细胞内结合出现的荧光信号,表明granulin3与雌激素受体ERα可以相互作用.具体作用机制,还需进一步验证.

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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)Ⅱ型促黄体生成素受体的克隆及其功能初步研究

斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)Ⅱ型促黄体生成素受体的克隆及...

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：陈慧敏黄敏伟彭诚肖玲李琳丽刘云张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

石斑鱼是我国南方沿海地区主要海水养殖鱼类之一,具有重要的经济价值.石斑鱼为典型的雌雄同体鱼类,其生殖调控主要受生殖内分泌因子和环境因素的调控.现已发现,在鱼类存在两种促性腺激素：促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH),它们通...

石斑鱼是我国南方沿海地区主要海水养殖鱼类之一,具有重要的经济价值.石斑鱼为典型的雌雄同体鱼类,其生殖调控主要受生殖内分泌因子和环境因素的调控.现已发现,在鱼类存在两种促性腺激素：促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH),它们通过与其受体：FSHR和LHR结合发挥作用.本研究在对斜带石斑鱼全基因组的序列分析的基础上,发现了一种新的LH受体,将其命名为LHR2,另一LH受体命名为LHR1.我们通过基因克隆等方法,得到LHR2的ORF区全长,共编码693个氨基酸.通过I-TASSER在线软件对LHR2进行三级结构的预测,发现其为七次跨膜蛋白,与另外两种受体的结构相似,同属于GPCR家族成员.分别构建了LHR2及LHR1的表达质粒,转染293-T细胞后,用hCG、hLH、hFSH、equine LH (eLH)作为刺激剂,通过双荧光素酶报告基因系统检测细胞内cAMP的变化情况,以探究LHR2是否有生物学活性.实验结果表明,在hCG或eLH的刺激下,转染LHR1或LHR2的细胞内的cAMP浓度均有不同程度的上升,且升高的幅度与刺激剂的浓度在一定范围内呈正相关的关系.上述实验结果说明,斜带石斑鱼的两种LH受体：LHR1和LHR2,都能与hCG或eLH发生相互作用,激活下游的信号通路.这是首次在海水鱼类中发现两种功能性LHR,对于研究石斑鱼的性别调控有重要意义.

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视黄酸信号在斜带石斑鱼雌性分化中的作用研究

视黄酸信号在斜带石斑鱼雌性分化中的作用研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：刘云王庆李琳丽赵密叶智锋陈嘉兴张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

斜带石斑鱼是典型的雌雄同体雌性先熟鱼类,首次性分化均为雌性.斜带石斑鱼首先分化为雌性的分子机制还知之甚少.在哺乳类,视黄酸(retinoic acid,RA)是启动生殖细胞减数分裂的关键信号,减数分裂在性分化的早期启动是性别向雌性发育的标...

斜带石斑鱼是典型的雌雄同体雌性先熟鱼类,首次性分化均为雌性.斜带石斑鱼首先分化为雌性的分子机制还知之甚少.在哺乳类,视黄酸(retinoic acid,RA)是启动生殖细胞减数分裂的关键信号,减数分裂在性分化的早期启动是性别向雌性发育的标志事件.在本研究中,我们通过分析石斑鱼不同性腺发育时期的转录组数据发现： RA合成酶编码基因aldh1 a2和aldh1 a3的表达量在原始生殖细胞增殖期(50d-11od)显著上升,并在卵原细胞启动减数分裂时期(180d-240d)高表达,随着卵母细胞进入生长期后表达量持续下降,在成熟的卵巢中检测不到表达.而RA分解酶编码基因(cyp26a1,cyp26b1和cyp26c1)在早期性腺发育过程中都处于低表达状态,而在性分化结束后表达上升.这些数据表明,在斜带石斑鱼性腺发生早期合成了大量的RA.为了进一步研究视RA信号在性分化中的作用,我们采用RA合成酶的抑制剂4-二乙氨基苯甲醛(DEAB)进行投喂实验.结果表明：在180天,DEAB投喂组的生殖细胞数量显著低于对照组;在210天,DEAB投喂组没有生殖细胞;而DEAB+RA拯救组的生殖细胞数量与对照组无明显区别.这些结果表明：石斑鱼性腺发育早期RA信号较强,能够刺激石斑鱼早期PGC的增殖以及减数分裂的启动,进而促使性腺朝雌性发育.

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体外诱导斜带石斑鱼卵母细胞成熟技术的初步探索

体外诱导斜带石斑鱼卵母细胞成熟技术的初步探索

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：唐霖彭诚赵密张勇刘云李水生林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成...

水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成熟的斜带石斑鱼进行性腺解剖,根据直径大小可初步将其未成熟的卵泡(follicle)分为5个发育时期：原始生长期(Primary growth stage,PG,～0.08 mm);卵黄发生前的时期(Previtellogenic stage,PV,～0.18 mm);卵黄积累早期(Early vitellogenic stage,EV, ～).25 mm);卵黄积累中期(Midvitell-ogenicstage,MV,～0.35 mm);卵黄积累完全时期(Full-grown immature stage,FG,～0.45 mm).用FG期的卵泡进行体外诱导成熟试验,发现L15培养基对于细胞的形态的维持效果最好.进一步对L15培养基进行了浓度梯度的试验,发现浓度(60％-100％)对细胞培养过程中的形态影响并无明显差异,使用100％的L15培养基进行体外诱导成熟试验.在大部分淡水鱼类和少数海水鱼类中,已有研究鉴定得出了两种主要的鱼类卵母细胞成熟诱导激素(MIH)：DHP (17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one)和20βS (17,20,21-trihydroxy-4-Pregnen-3-one),本研究使用HCG,DHP和20βs作为刺激剂进行成熟诱导试验.(1)直接单独加入HCG(10IU,100IU),DHP(100nM,300nM),20βS(100nM,300nM)不能诱导FG期卵泡成熟;(2)同时加入两种刺激剂：100IU HCG+100nM DHE 100IU HCG+100nM 20βS,100nMDHP+100nM20βS也无法诱导FG期卵泡成熟;(3)加入100IU HCG诱导1,3,6小时后再加入DHP(100nM,300nM)或20βS(100nM,300nM)也不能诱导FG期卵泡成熟.以上结果表明,斜带石斑鱼的卵母细胞成熟机制较为复杂,暂时仍无法确定其MIH是哪一种性类固醇激素,其体外诱导卵母细胞成熟技术仍须继续探索.

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激素诱导卵巢分化期斜带石斑鱼性逆转机制研究

激素诱导卵巢分化期斜带石斑鱼性逆转机制研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：王庆肖玲李琳丽刘云刘晓春李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

外源激素能够诱导鱼类性别转变,外源雄激素17α-甲基睾丸酮(17-methyltestosterone,MT)广泛应用于诱导性成熟石斑鱼性逆转,但是停止MT处理诱导出的雄鱼又转变回雌鱼,能否通过MT诱导卵巢分化期的幼鱼产生永久性的雄鱼尚不清楚。本研究通...

外源激素能够诱导鱼类性别转变,外源雄激素17α-甲基睾丸酮(17-methyltestosterone,MT)广泛应用于诱导性成熟石斑鱼性逆转,但是停止MT处理诱导出的雄鱼又转变回雌鱼,能否通过MT诱导卵巢分化期的幼鱼产生永久性的雄鱼尚不清楚。本研究通过MT诱导孵化后90天左右处于卵巢分化期的幼鱼性逆转,并从性腺组织学、基因袁达水平和激素水平方面研究了MT诱导卵巢分化期幼鱼性逆转过程。通过连续性腺组织切片发现,MT投喂会抑制卵巢腔的形成,停止MT投喂后性腺组织出现雌性生殖细胞但是没有卵巢腔生成;进一步通过细胞增殖和细胞凋亡,追踪DMRT1蛋白表达的细胞发现,在诱导雄性性腺生成过程是先形成输出小管,之后在输出小管周围开始出现雄性生殖细胞,之后才开始精子发生过程。检测性别相关基因表达水平发现,雄性性别相关基因dmrt1表达水平随着投喂时间的进行表达量增加,但是cyp11b和sox9的表达水平没有变化;雌性性别相关基因cyp19a1a和foxl2随着投喂的进行表达量降低;进一步我们检测激素水平发现随着MT投喂的进行11-KT水平维持不变但是E2的水平下降,当停止MT处理时E2又回到雌鱼水平,表明MT投喂只是抑制了雌激素的生成并没有产生出内生的雄激素。综上所述,我们的研究发现MT诱导卵巢分化期的斜带石斑鱼性逆转过程是先抑制卵巢腔的形成并生成输出小管,然后在输出小管周围开始出现雄性生殖细胞,之后开始精子发生,在整个过程中雌激素受到抑制但是并不会产生内生的雄激素,因此当停止MT投喂后,诱导出的雄性性腺转变成没有卵巢腔的雌性性腺。

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