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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2022年第5期61卷 1-8页

作者：杨慧荣曾泽乾杨炎何颖琳王庆赵会宏张勇林浩然华南农业大学海洋学院广东广州510640 华南农业大学中山创新中心广东中山528400 中山大学水生经济动物研究所/广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

肌肉生长抑制素(Mstn,myostatin)也称gdf-8(growthdifferentiationfactor 8),通过负向调控肌肉组织的增殖与分化,参与动物体的生长发育过程。部分鱼类肌肉生长抑制素具有两种或以上基因型,其时空表达特征较为独特,存在调控如脑、性腺等... 详细信息

肌肉生长抑制素(Mstn,myostatin)也称gdf-8(growthdifferentiationfactor 8),通过负向调控肌肉组织的增殖与分化,参与动物体的生长发育过程。部分鱼类肌肉生长抑制素具有两种或以上基因型,其时空表达特征较为独特,存在调控如脑、性腺等其他组织生长发育的可能性。此外,鱼类肌肉生长抑制素的功能和作用机制与其他动物类似,可通过迟滞细胞周期对成肌细胞产生影响。本文从结构、表达、功能和作用机制等方面对鱼类肌肉生长抑制素的研究进展进行概括,并结合现代生物学技术讨论其应用和研究前景,为深入研究鱼类生长发育机制提供理论基础。

关键词：肌肉生长抑制素表达调控细胞周期多态性

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胆汁酸调节鱼类糖脂代谢、免疫及肠道菌群的研究进展

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水生生物学报 2024年第9期48卷 1592-1602页

作者：周茜张俊炜王升鹏李超伟陈松林中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室青岛266071 河北大学生命科学学院保定071000 山东龙昌动物保健品股份有限公司德州253000 中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275

胆汁酸(BAs)是一类两亲性甾醇化合物,按来源可分为初级胆汁酸和次级胆汁酸,初级胆汁酸由肝脏中的胆固醇合成后进入肠道,在肠道中,初级胆汁酸在回肠末端和结肠上段肠道菌群的作用下转化为次级胆汁酸,大部分肠道中的胆汁酸在回肠部位通过... 详细信息

胆汁酸(BAs)是一类两亲性甾醇化合物,按来源可分为初级胆汁酸和次级胆汁酸,初级胆汁酸由肝脏中的胆固醇合成后进入肠道,在肠道中,初级胆汁酸在回肠末端和结肠上段肠道菌群的作用下转化为次级胆汁酸,大部分肠道中的胆汁酸在回肠部位通过肝肠循环进入肝脏,剩余胆汁酸随着粪便等排出体外。研究表明,胆汁酸在维持鱼类糖脂稳态、提高免疫功能、重塑肠道菌群等方面具有显著效果。不同鱼类中的胆汁酸成分具有物种特异性,不同胆汁酸的有益效果也因鱼而异,但是目前对鱼类中胆汁酸的组成、分类及功能知之甚少。文章总结了胆汁酸的组成分类、主要受体、生物学功能及其在鱼类上的研究进展和存在的问题,以期为鱼类中胆汁酸的进一步研究及其在水产养殖中的高效利用提供参考。

关键词：胆汁酸糖脂代谢免疫调控肠道菌群鱼类养殖

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斜带石斑鱼mstn对其肌肉细胞增殖分化及相关基因表达的影响

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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2022年第4期61卷 41-48页

作者：杨炎夏俊王庆何颖琳张勇赵会宏杨慧荣华南农业大学海洋学院/海洋生物资源保护与利用粤港联合实验室广东广州510642 新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心新疆乌鲁木齐830000 中山大学水生经济动物研究所/广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 华南农业大学中山创新中心广东中山528400

斜带石斑鱼Epinephelus coioides是具有较高经济价值的海水鱼,如何促进石斑鱼生产性状改良一直是科学研究的重点之一。肌肉生长抑制素(mstn,myostatin)是调节肌肉生长的重要转化因子。本研究中,Mstn的亚细胞定位表明Mstn在斜带石斑鱼细... 详细信息

斜带石斑鱼Epinephelus coioides是具有较高经济价值的海水鱼,如何促进石斑鱼生产性状改良一直是科学研究的重点之一。肌肉生长抑制素(mstn,myostatin)是调节肌肉生长的重要转化因子。本研究中,Mstn的亚细胞定位表明Mstn在斜带石斑鱼细胞质中呈点状分布。利用酶标仪测定被Mstn重组蛋白刺激肌肉原代细胞1~5 d后的A值,发现实验组细胞生长明显减缓,随着处理时间的增加,细胞活性差异进一步扩大。利用流式细胞仪测定被Mstn重组蛋白刺激的肌肉原代细胞细胞周期,发现实验组细胞周期受阻。用Mstn重组蛋白对肌肉原代细胞进行刺激,通过RT-qPCR检测Mstn重组蛋白对mstn信号通路及下游相关基因的影响,结果表明随着处理浓度的升高,p21、smad3和mrf4 mRNA的表达量也逐渐而上升,其中,smad3和mrf4表达量的上升不存在显著性差异;当处理浓度为100和1000 nmol/L时,p21存在显著性差异;随着处理浓度的升高,myod和myog mRNA的表达量均下降,但myod mRNA下降趋势不显著,myog mRNA显著下降,当处理浓度为100和1000 nmol/L时存在显著性差异。本研究揭示了Mstn定位于斜带石斑鱼GS细胞质;Mstn重组蛋白上调smad3、mrf4的表达,下调myod、myog的表达,来促进细胞的分化;同时Mstn重组蛋白能上调p21的表达,抑制细胞的增殖。本研究验证了Mstn在肌肉发育过程中的生物学功能,为后续深入开展mstn对鱼类肌肉发育的影响研究奠定了基础。

关键词： mstn 斜带石斑鱼Epinephelus coioides 肌肉表达分析

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翘嘴鳜雄性特异NLRP3基因cDNA的克隆及表达分析

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海南热带海洋学院学报 2021年第5期28卷 1-8页

作者：欧阳号锋韩崇卢灏铭朱巧莹马泽昊蒲海琦李水生张勇中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275

NLRP3基因是能够识别PAMPs和胞内危险信号的1种重要的炎性小体,参与机体对体内外病原微生物的防御和维持自身稳态。首次发现翘嘴鳜存在1个雄性特异的NLRP3基因。通过设计基因特异扩增引物,并在22条雌鱼和22条雄鱼中进行PCR扩增,证实了... 详细信息

NLRP3基因是能够识别PAMPs和胞内危险信号的1种重要的炎性小体,参与机体对体内外病原微生物的防御和维持自身稳态。首次发现翘嘴鳜存在1个雄性特异的NLRP3基因。通过设计基因特异扩增引物,并在22条雌鱼和22条雄鱼中进行PCR扩增,证实了该基因只在翘嘴鳜雄鱼中存在。为了解该NLRP3基因的潜在功能,成功克隆得到该基因的全长蛋白编码序列,并通过序列比对和系统发育分析,初步证明该基因具有NACHT、LRR和PYD等多个关键结构域,在鲈形目鱼类中具有较高的保守性。另外,通过荧光定量分析的方法研究了NLRP3基因在雄性翘嘴鳜不同组织以及在不同时期性腺中的表达差异,发现翘嘴鳜NLRP3基因在肝脏、胃和肠等组织有较高的表达,且在翘嘴鳜雄性性别分化早期有显著高表达,在性别分化后几乎不表达。

关键词：翘嘴鳜 NLRP3基因分子标记序列分析表达分析

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澳洲宝石鲈热休克蛋白90-β基因(HSP90-β)的cDNA克隆与表达

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中山大学学报（自然科学版） 2020年第4期59卷 7-18页

作者：高凇泽孙彩云吴金英叶航宇李文笙中山大学生命科学学院/水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室/广东省重要经济鱼类健康养殖工程技术研究中心广东广州510275

热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)在鱼类的应激与免疫反应中起着重要的作用,HSP90-β是该家族的重要成员。为了探讨澳洲宝石鲈(Scortum barcoo)HSP90-β在免疫应答中的作用,本研究首次克隆得到了澳洲宝石鲈HSP90-β的全长cDNA序列... 详细信息

热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)在鱼类的应激与免疫反应中起着重要的作用,HSP90-β是该家族的重要成员。为了探讨澳洲宝石鲈(Scortum barcoo)HSP90-β在免疫应答中的作用,本研究首次克隆得到了澳洲宝石鲈HSP90-β的全长cDNA序列。该序列长2708 bp,其中5’UTR长86 bp,3’UTR长444 bp,ORF长2178 bp,编码725个氨基酸,相对分子质量约为83200,具有5个HSP90家族的特征序列,没有信号肽序列和跨膜结构域,与其他鱼类HSP90-β氨基酸的序列一致性皆超过90%。正常情况下,澳洲宝石鲈HSP90-βmRNA主要在肝脏表达。而感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)后,其在肝组织中的表达呈先降低后增加的趋势,在脾脏、头肾和脑组织则呈先上升后下降的趋势。这些结果表明澳洲宝石鲈HSP90-β可能参与了无乳链球菌感染引发的免疫反应。

关键词：澳洲宝石鲈 HSP90-β 分子克隆表达

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尼罗罗非鱼TNF-R1和TNF-R2基因克隆及表达

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中山大学学报（自然科学版） 2020年第5期59卷 144-155页

作者：叶航宇葛岩岩吴金英詹绪良中山大学生命科学学院/水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室/广东省重要经济鱼类健康养殖工程技术研究中心广东广州510275

为揭示TNF-α受体基因TNF-R1和TNF-R2在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫过程的作用,本研究利用RACE技术获得了TNF-R1和TNF-R2的cDNA。结果表明,TNF-R1 cDNA全长2275 bp,ORF区1335bp,编码444个氨基酸;TNF-R2 cDNA全长1719 bp,ORF区1476 bp,编码491个氨基酸。TNF-R1含3个富含半胱氨酸结构域(cysteine-rich domain,CRD)和一个死亡结构域(death domain,DD),而TNF-R2有4个CRD,缺少DD。系统进化分析表明:其TNF-R1和TNF-R2分别与其他脊椎动物TNF-R1和TNF-R2基因同源性很高,在进化树中TNF-R1、TNF-R2各自聚类且两者之间分支明显。实时荧光定量PCR结果表明:TNF-R1和TNF-R2在该鱼体的不同组织中均有表达,其中在鳃、头肾和脾脏中表达水平最高,而在肌肉、垂体中表达量低。用脂多糖(LPS)和多聚肌苷酸-胞苷酸(PolyⅠ:C)分别刺激离体孵育的该鱼头肾和脾脏白细胞可不同程度上调TNF-α、TNF-R1和TNF-R2的表达。无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染该鱼可显著上调头肾和脾脏中3种基因的表达。本研究对揭示TNF-R1和TNF-R2免疫调控机制,提高罗非鱼健康养殖水平具有一定参考价值。

关键词： TNF-α TNF-R1 TNF-R2 罗非鱼免疫无乳链球菌

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海豚链球菌simA和pgmA真核表达质粒对尼罗罗非鱼免疫保护的研究

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南方水产科学 2020年第3期16卷 38-46页

作者：马丽吴金英高凇泽孙彩云李文笙中山大学生命科学学院/水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室/广东省重要经济鱼类健康养殖工程技术研究中心广东广州510275

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是世界水产养殖业中的重要经济鱼类,但在养殖生产中易受海豚链球菌(Streptococcus iniae)感染而致病致死,使用疫苗是一种相对理想的防感染措施。该研究采用海豚链球菌simA、pgmA基因构建的真核表达载... 详细信息

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是世界水产养殖业中的重要经济鱼类,但在养殖生产中易受海豚链球菌(Streptococcus iniae)感染而致病致死,使用疫苗是一种相对理想的防感染措施。该研究采用海豚链球菌simA、pgmA基因构建的真核表达载体作为DNA疫苗,肌肉注射罗非鱼评估疫苗保护效果。免疫后在DNA和RNA水平上,在注射鱼体内检测到2个目的基因。首次免疫后第7至第28天,鳃、肝、肾脏、头肾中疫苗组的白介素1 (Interleukin,IL-1β)与肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)表达量高于PBS对照组;疫苗组的抗体滴度、血清抗菌活性显著(P<0.05)高于PBS对照组。攻毒后,注射pcDNA3.1-pgmA、pcDNA3.1-simA、pcDNA3.1-pgmA与pcDNA3.1-simA等比例混合疫苗的相对保护率(Relative percent survival,RPS)分别为60.7%、49.9%和75.0%。结果表明所制备的疫苗具有免疫保护效果,可作为候选疫苗。

关键词：尼罗罗非鱼海豚链球菌 DNA疫苗 simA基因 pgmA基因

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盐度胁迫对尼罗罗非鱼免疫相关指标的影响

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水产学报 2020年第6期44卷 978-986页

作者：蔡然陈立敏辛颖赵早亚俞筱筝黄金凤廖宗甄李文笙中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东省重要经济鱼类健康养殖工程技术研究中心

为探究盐度胁迫对尼罗罗非鱼免疫的影响,对体质量(35.0±5.0) g的尼罗罗非鱼进行了急性和慢性的盐度胁迫实验,对免疫相关指标进行了检测和分析。在急性盐度胁迫中,设置0、5和15盐度组,分别在胁迫后6、12、24、48和96 h进行取样,检... 详细信息

为探究盐度胁迫对尼罗罗非鱼免疫的影响,对体质量(35.0±5.0) g的尼罗罗非鱼进行了急性和慢性的盐度胁迫实验,对免疫相关指标进行了检测和分析。在急性盐度胁迫中,设置0、5和15盐度组,分别在胁迫后6、12、24、48和96 h进行取样,检测血清SOD、CAT、GSH-Px和AKP的活性。在慢性实验中,设置0、10、20和30盐度组,胁迫8周后检测血清SOD、CAT、GSH-Px和AKP活性,并进行了无乳链球菌易感性实验。结果显示:①血清中SOD活性在急性盐度胁迫6、12和24 h时都有随盐度上升而上升的趋势,但在96 h时盐度15组酶活性显著低于盐度5组;在慢性盐度胁迫下,各组的酶活性呈现出随着盐度升高而显著性下降的趋势。②血清CAT活性在急性盐度胁迫下12和24 h时呈现出随着盐度升高而显著下降的趋势;在慢性胁迫下不存在显著性差异。③血清中GSH-Px活性在急性和慢性胁迫后,均呈现随着盐度升高而降低的趋势。④血清AKP活性在胁迫后6 h随盐度升高呈现出显著下降趋势;在慢性盐度胁迫下,盐度20组显著低于其他实验组。⑤尼罗罗非鱼对无乳链球菌易感性实验中,盐度10组的易感性和盐度0组之间无显著差异,盐度20和30组的易感性高于盐度0组。研究表明,两种盐度胁迫均会引起免疫相关指标的变化,急性盐度胁迫实验表明,盐度5和15可导致尼罗罗非鱼机体氧化损伤,但尼罗罗非鱼可以逐渐适应这一变化;慢性盐度胁迫实验表明,盐度高于20会抑制尼罗罗非鱼多种免疫指标活性,造成其对无乳链球菌的易感性升高。

关键词：尼罗罗非鱼无乳链球菌盐度胁迫免疫相关因子

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类胰岛素生长因子(IGFs)在斜带石斑鱼胚胎及卵巢的表达

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中山大学学报（自然科学版） 2019年第5期58卷 94-103页

作者：杨慧荣王庆李水生赵会宏何思美薛华艺吴沅沅杨炎张勇华南农业大学海洋学院广东广州510642 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

生殖和生长是生物体最基本的特征,两者既密切相关又相互区别,IGFs是生长轴和生殖轴相交联的关键因子。自IGFs在鱼类卵巢的表达被发现后,它们在卵巢的功能开始备受关注,大量的研究表明它们参与了鱼类的性腺发育和成熟进程。氨基酸序列同... 详细信息

生殖和生长是生物体最基本的特征,两者既密切相关又相互区别,IGFs是生长轴和生殖轴相交联的关键因子。自IGFs在鱼类卵巢的表达被发现后,它们在卵巢的功能开始备受关注,大量的研究表明它们参与了鱼类的性腺发育和成熟进程。氨基酸序列同源性比对表明:IGF-3具有IGF家族成员典型的结构特征,相对IGF-1和IGF-2基因的高保守性,IGF-3基因保守性差。本研究用半定量和荧光定量PCR技术检测了IGF-1、IGF-2和IGF-3mRNA在斜带石斑鱼胚胎发育及人工诱导性逆转过程中的表达模式。对胚胎发育的半定量结果显示:IGF-1在斜带石斑鱼胚胎发育过程中仅有微弱表达,IGF-2自桑椹期开始表达,在桑椹期后期呈现持续高水平的表达态势,预示IGF-2对胚胎发育有着重要作用;IGF-3自未受精卵开始,随着胚胎发育表达水平不断提高,但表达量不如IGF-2丰富,暗示了IGF-3可能在胚胎发育进程中扮演某种角色。利用甲基睾丸酮MT埋植鱼体腹腔,诱导性逆转,荧光定量PCR结果显示:IGF-1和IGF-3在斜带石斑鱼性逆转过程中的表达量都显著性降低,而IGF-2却没有显著变化,表明不同IGFs因子在雌性和雄性的生理功能存在性别差异。

关键词： IGF-1 IGF-2 IGF-3 斜带石斑鱼胚胎卵巢表达分析

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工程微生物合成苯丙酸类化合物及其衍生物的研究进展

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合成生物学 2020年第3期1卷 337-357页

作者：牛福星杜云平黄远斌周荷田刘建忠中山大学生命科学学院合成生物学研究所生物无机与合成化学教育部重点实验室广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 温氏食品集团股份有限公司广东云浮527400

苯丙酸类化合物是一类重要的苯丙素类化合物,是指含C6-C3单元的天然有机酸,包括苯丙烯酸类和苯乳酸类化合物。许多苯丙酸类化合物具有抗氧化、抑菌、增强免疫力、抗癌、抗病毒、抗炎、降血脂、治疗心血管疾病等生物学活性,广泛应用于食... 详细信息

苯丙酸类化合物是一类重要的苯丙素类化合物,是指含C6-C3单元的天然有机酸,包括苯丙烯酸类和苯乳酸类化合物。许多苯丙酸类化合物具有抗氧化、抑菌、增强免疫力、抗癌、抗病毒、抗炎、降血脂、治疗心血管疾病等生物学活性,广泛应用于食品、医药、香料、化妆品、农业等领域。苯丙酸类化合物是经由莽草酸合成途径合成的苯丙氨酸或酪氨酸衍生物。随着代谢工程和合成生物学的发展,成功构建了一些微生物以合成苯丙酸类化合物及其衍生物。为此,本文系统综述了工程微生物合成苯丙酸类化合物及其衍生物的进展,包括肉桂酸、苯乙烯、对香豆酸、对羟基苯乙烯、对香豆酸-莽草酸、咖啡酸、绿原酸、3,4-二羟基苯乙烯、阿魏酸、姜黄素、左旋多巴、苯乳酸、对羟基苯乳酸、丹参素和迷迭香酸。其后,归纳了应用于微生物合成芳香化合物的主要合成生物学策略。最后,对合成苯丙酸类化合物及其衍生物的工程微生物的发展趋势进行了展望。本文旨在为合成苯丙酸类化合物及其衍生物的人工微生物的创制提供指导。

关键词：工程微生物苯丙酸类化合物及其衍生物代谢工程合成生物学生物合成菌种构建

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