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第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛

作者：黄润庆朱国华张静何建国谢俊锋中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室/水产品安全教育部重点实验室/水生经济动物研究所/水生经济动物广东省重点实验室广东广州 510275

海水鱼类神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)可感染众多野生和养殖海水鱼类,尤其苗期爆发能引起极高的死亡率,已成为我国海水养殖主要病原之一.该病毒源头有三方面：亲鱼带毒造成垂直传播,鱼卵表面病毒受精时被带入,仔稚鱼敏感... 详细信息

海水鱼类神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)可感染众多野生和养殖海水鱼类,尤其苗期爆发能引起极高的死亡率,已成为我国海水养殖主要病原之一.该病毒源头有三方面：亲鱼带毒造成垂直传播,鱼卵表面病毒受精时被带入,仔稚鱼敏感期受病毒侵染.因此,必须综合三个方面全方位的对病毒进行阻断及防控,才能有效防治NNV.我们开发了针对水体、亲鱼、鱼卵和仔稚鱼四方面的NNV净化综合防治技术,包括亲鱼用疫苗的研发与亲鱼净化、鱼卵清洗液的研发与鱼卵净化、仔稚鱼用疫苗的研发、对NNV的检测与水体净化,四方面的制剂及净化技术最终整合形成海水鱼类神经坏死病毒的综合防控技术.(1)亲鱼用疫苗：病毒样颗粒(VLP)疫苗制备成功,获得其三维结构数据(3.9A),获得可以亲和纯化及带荧光标记的改造VLP.在斜带石斑鱼(亲鱼)、尖吻鲈、卵形鲳鲹均验证了VLP疫苗的免疫保护性,有效净化携带NNV.

关键词：海水鱼神经坏死亲鱼疫苗鱼卵清洗液浸泡疫苗

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急性操作胁迫对刀鲚应激反应相关神经内分泌因子的影响

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水产学报 2014年第6期38卷 803-812页

作者：王宇卢丹琪李伟萍徐跑顾若波姚谧梁瑶思张勇林浩然海南大学海洋学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室中山大学生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

为深入了解刀鲚应激反应中相关神经内分泌因子作用的分子机理,采用手工捕捉的方式对刀鲚进行了急性操作胁迫。通过放射免疫法和化学发光法测定刀鲚应激反应后头肾和血浆皮质醇含量的变化,结果显示,刀鲚胁迫刺激后血浆皮质醇含量极显著... 详细信息

为深入了解刀鲚应激反应中相关神经内分泌因子作用的分子机理,采用手工捕捉的方式对刀鲚进行了急性操作胁迫。通过放射免疫法和化学发光法测定刀鲚应激反应后头肾和血浆皮质醇含量的变化,结果显示,刀鲚胁迫刺激后血浆皮质醇含量极显著性升高,血浆皮质醇浓度平均升高56.48%,头肾皮质醇含量显著性升高,头肾皮质醇浓度平均升高49.68%,表明急性操作胁迫确实引起刀鲚的应激反应。通过同源克隆的方法获得刀鲚促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、硬骨鱼紧张肽(UI)、阿黑皮素原(POMC)基因的部分序列,并应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测上述神经内分泌因子mRNA的表达变化,结果显示,CRH基因的表达水平极显著性下降,POMC基因的表达水平显著性下降,UI基因的表达水平有下降趋势但不显著。上述结果显示,皮质醇、CRH、UI和POMC等神经内分泌因子通过鱼类下丘脑—脑垂体—肾间腺轴参与刀鲚应激反应的调节,为进一步了解刀鲚胁迫应答的作用机理,实现对其有效调控打下基础。

关键词：刀鲚应激反应促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) 硬骨鱼紧张肽(UI) 阿黑皮素原(POMC) 皮质醇

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斜带石斑鱼神经分泌素(Secretoneurin)的cDNA克隆、组织表达及功能研究

斜带石斑鱼神经分泌素(Secretoneurin)的cDNA克隆、组织表达及功...

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2014年中国水产学会学术年会

作者：杨丽冬李水生张勇舒琥李小梅侯丽萍李强广州大学生命科学学院中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁殖重点实验室

神经分泌素(Secretoneurin,SN)来源于前体分泌粒蛋白Ⅱ(Secretogranin,Sg Ⅱ)最保守的序列,由33-34个氨基酸组成。在硬骨鱼类中,由于发生特定的基因组复制事件产生SN的两个旁系同源基因:SNa和SNb。本研究采用RT-PCR方法从斜带石斑鱼(Epi... 详细信息

神经分泌素(Secretoneurin,SN)来源于前体分泌粒蛋白Ⅱ(Secretogranin,Sg Ⅱ)最保守的序列,由33-34个氨基酸组成。在硬骨鱼类中,由于发生特定的基因组复制事件产生SN的两个旁系同源基因:SNa和SNb。本研究采用RT-PCR方法从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)全脑中成功克隆得到两种SN前体SgⅡ基因的c DNA序列,序列分析表明:SgⅡa开放阅读框为1911bp,共编码636个氨基酸,其中SNa为34个氨基酸;Sg Ⅱb开放阅读框为1809bp,共编码602个氨基酸,而SNb为33个氨基酸,SNa和SNb的氨基酸序列同源性为38.2%。采用Real-time PCR方法研究了SNa和SNb在15种组织中的表达情况,结果表明:两种SN前体SgⅡa和Sg Ⅱb均在垂体中的表达量最高,在各脑区(嗅球、端脑、小脑、下丘脑、中脑、延脑)中也均有大量表达,而在其他外周组织几乎不表达。此外,100n M SNa和SNb离体孵育斜带石斑鱼垂体原代细胞6h,能够显著上调LHβ和FSHβm RNA水平。100n M SNa孵育下丘6h能够显著升高s Gn RH和sb Gn RH的m RNA水平,而100n M SNb刺激下丘6h对s Gn RH和sb Gn RH的释放无明显效果。这些结果为揭示斜带石斑鱼SN参与生殖调控的分子机制提供了基础。

关键词：斜带石斑鱼神经分泌素分泌粒蛋白Ⅱ

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中性植酸酶替代磷酸二氢钙对黑鲷生长和磷利用的影响

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中国水产科学 2014年第3期21卷 522-530页

作者：徐树德王树启游翠红张敏智张婷杜红方史宝军广东溢多利生物科技股份有限公司广东珠海519060 汕头大学广东省海洋生物重点实验室广东汕头515063 中山大学生命科学学院水生经济动物研究所广东广州510275

以鱼粉、豆粕、菜粕等为蛋白原料设计配方,磷酸二氢钙的添加量分别为1.5%、1.0%、0.5%和0(对应的饲料组为P1.5、PP1.0、PP0.5和PP0组),其中PP1.0、PP0.5和PP0组中均添加200 mg/kg的中性植酸酶,开展为期8周的黑鲷(Acanthopagrus schlegel... 详细信息

以鱼粉、豆粕、菜粕等为蛋白原料设计配方,磷酸二氢钙的添加量分别为1.5%、1.0%、0.5%和0(对应的饲料组为P1.5、PP1.0、PP0.5和PP0组),其中PP1.0、PP0.5和PP0组中均添加200 mg/kg的中性植酸酶,开展为期8周的黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)养殖实验,以探讨中性植酸酶替代磷酸二氢钙对黑鲷生长和磷利用的影响。结果显示,黑鲷摄食实验饲料8周后,各组间成活率无显著差异(P>0.05);摄食饲料PP1.0、PP0.5和对照组(P1.5组)实验鱼的增重率无显著差异(P>0.05),但均显著高于PP0处理组,饲料系数则显著低于PP0处理组(P<0.05)。摄食不同饲料的黑鲷全鱼中蛋白质、脂肪、灰分及钙磷含量在不同组间均无显著差异(P>0.05)。添加植酸酶的各组鱼磷的表观消化率均显著高于对照组(P<0.05)。随着磷酸二氢钙添加量的降低,黑鲷对干物质和蛋白质的表观消化率呈升高的趋势,当饲料中磷酸二氢钙的添加量降到0时,黑鲷对干物质和蛋白质的表观消化率显著高于对照组(P<0.05)。以上结果说明,在本研究配方下,黑鲷正常生长对饲料有效磷的需求量≥0.51%;磷酸二氢钙可部分被植酸酶替代,当黑鲷饲料中含有20%鱼粉、32%豆粕和12%菜粕,且植酸酶添加量为200 mg/kg时,与饲料中添加1%的磷酸二氢钙相当;在不影响黑鲷生长的前提下,植酸酶部分替代磷酸二氢钙不仅可降低无机磷的添加,同时可提高饲料中磷的利用率,降低磷排放。

关键词：黑鲷中性植酸酶磷酸二氢钙生长磷利用率

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TGF-β系统及其在硬骨鱼中的研究进展

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南方水产科学 2013年第3期9卷 90-96页

作者：詹绪良吴金英李文笙中山大学生命科学学院水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一类多效应细胞因子,在很多生理活动中发挥功能。TGF-β以前体形式合成,随后被切割活化形成成熟的TGF-β。TGF-β以二聚体的形式发挥作用,与受体TβRⅠ(transforming growth fac... 详细信息

转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一类多效应细胞因子,在很多生理活动中发挥功能。TGF-β以前体形式合成,随后被切割活化形成成熟的TGF-β。TGF-β以二聚体的形式发挥作用,与受体TβRⅠ(transforming growth factor-βreceptorⅠ)和TβRⅡ(transforming growth factor-βreceptorⅡ)形成一个大型复合物后,磷酸化胞内的Smad,激活下游信号通路。鱼类中对TGF-β家族成员的研究主要集中在对TGF-β1的研究,包括TGF-β1与免疫相关和与生殖相关的功能,也有研究表明TGF-β1与肝功能相关。此外,有少量对TGF-β家族其他成员和TGF-β受体的研究。

关键词： TGF-β TGF-β受体硬骨鱼

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LHRH-A对尼罗罗非鱼生长及生长轴相关基因表达的影响

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水生生物学报 2013年第1期37卷 42-47页

作者：马细兰张勇周立斌刘晓春林浩然中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室生命科学学院水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 华南师范大学生命科学学院广州510631 惠州学院生命科学系生物技术研究所惠州516007

促性腺激素释放激素(GnRH)的主要作用是刺激脑垂体促性激素(GtH)的释放,亦可促进鱼类生长激素(GH)的释放。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)是哺乳类GnRH的类似物,为了分析LHRH-A对尼罗罗非鱼生长调节的作用,设计了长期和短期2个实验,采... 详细信息

促性腺激素释放激素(GnRH)的主要作用是刺激脑垂体促性激素(GtH)的释放,亦可促进鱼类生长激素(GH)的释放。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)是哺乳类GnRH的类似物,为了分析LHRH-A对尼罗罗非鱼生长调节的作用,设计了长期和短期2个实验,采用腹腔注射(剂量0.1μg/g体重)方法,分析LHRH-A对尼罗罗非鱼绝对生长率、特定生长率、肝体系数和肥满度的影响,并应用荧光实时定量PCR方法检测在注射LHRH-A后不同时段(6h、12h、24h、2周)尼罗罗非鱼垂体GH、肝脏GHR和肝脏IGF-I基因的表达变化。结果表明,LHRH-A组尼罗罗非鱼的绝对生长率、特定生长率、肝体系数、肥满度均显著高于对照组(P<0.05);注射LHRH-A后12h、24h垂体GH mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),2周后恢复到对照组水平;注射LHRH-A后24h和2周肝脏GHR mRNA表达水平显著上升(P<0.05);注射LHRH-A后6h肝脏IGF-I mRNA表达水平显著升高(P<0.05),12h、24h和2周恢复到对照组水平。以上结果提示,LHRH-A可显著上调尼罗罗非鱼生长轴相关基因的表达,从而促进鱼类的生长。

关键词：尼罗罗非鱼促黄体素释放激素类似物生长基因表达

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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)饲料中铜的适宜添加量研究

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海洋与湖沼 2013年第2期44卷 461-466页

作者：叶超霞刘永坚田丽霞阳会军王安利周立斌华南师范大学生命科学学院广东省水产健康安全养殖重点实验室广州510631 中山大学水生经济动物研究所广州510275 惠州学院生命科学系惠州516007

以初始体重为(13.0±0.3)g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为实验对象,用铜添加量为0、1、3、5、10和20mg/kg的实验饲料投喂斜带石斑鱼8周,研究斜带石斑鱼的铜需求量。结果表明,饲料中添加0—20mg/kg铜对石斑鱼生长、饲料效率... 详细信息

以初始体重为(13.0±0.3)g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为实验对象,用铜添加量为0、1、3、5、10和20mg/kg的实验饲料投喂斜带石斑鱼8周,研究斜带石斑鱼的铜需求量。结果表明,饲料中添加0—20mg/kg铜对石斑鱼生长、饲料效率、存活率、形态学指标和红细胞比容没有显著性影响。随饲料铜水平的上升,斜带石斑鱼全鱼和肝脏的铜含量呈先上升后平稳的趋势,当饲料铜添加量达到或超过3mg/kg时,石斑鱼全鱼和肝脏的铜含量趋于平稳。折线模型表明,饲料中铜总含量为5—5.5mg/kg时,石斑鱼全鱼和肝脏的铜含量能够达到饱和。当饲料中铜总含量≥6.00mg/kg时,全鱼的铁、锰、锌含量显著下降。因此,根据全鱼和肝脏铜含量的折线模型分析,考虑到饲料铜对全鱼铁、锰、锌含量的影响,作者认为当基础饲料铜含量为1.50mg/kg时,饲料中的最适铜添加量为3mg/kg,饲料中铜总量为5—5.5mg/kg左右。

关键词：斜带石斑鱼铜矿物质

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饲料中锌含量对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)生长、饲料效率、矿物质含量和体组成的影响

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海洋与湖沼 2013年第1期44卷 83-89页

作者：叶超霞刘永坚田丽霞周立斌阳会军梁桂英华南师范大学生命科学学院广东省水产健康安全养殖重点实验室广州510631 中山大学水生经济动物研究所广州510275 惠州学院生命科学系惠州516007

以ZnSO4·7H2O为锌源,用锌添加量为0、20、40、60、80和100mg/kg的实验饲料投喂斜带石斑鱼12周,研究其对斜带石斑鱼生长、饲料效率、矿物质含量和体组成的影响。结果表明,各实验组的增重率,饲料效率,存活率和全鱼、脊椎骨、鳞片的... 详细信息

以ZnSO4·7H2O为锌源,用锌添加量为0、20、40、60、80和100mg/kg的实验饲料投喂斜带石斑鱼12周,研究其对斜带石斑鱼生长、饲料效率、矿物质含量和体组成的影响。结果表明,各实验组的增重率,饲料效率,存活率和全鱼、脊椎骨、鳞片的锌含量无显著差异。全鱼、脊椎骨和鳞片的锰含量均随着饲料中锌的添加而降低,锰和锌存在明显的拮抗关系。全鱼的铁含量随着饲料中锌的添加而降低。全鱼、脊椎骨和鳞片的钙、磷、镁含量均不受饲料中锌含量的影响。饲料中添加锌对全鱼水分、灰分,肌肉水分、脂肪,形态学指标,红细胞比容和血红蛋白含量没有显著影响。饲料中不添加锌时,全鱼的蛋白、脂肪和肌肉的蛋白、灰分含量较低。实验结果表明基础饲料中33mg/kg的锌已经满足斜带石斑鱼生长的需求,能使鱼体锌达到饱和。

关键词：斜带石斑鱼锌需要量生长矿物质

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饲料中高水平铜对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)生长和铜、铁、锰、锌含量的影响

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海洋与湖沼 2013年第3期44卷 606-610页

采用铜适量(4.47mg/kg)和铜过量(1127.51mg/kg)的两种饲料投喂初始体重为(12.9±0.2)g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)8周,研究饲料中过量铜对斜带石斑鱼生长性能、形态学指标、体组成和鱼体微量元素含量的影响。结果表明,当饲... 详细信息

采用铜适量(4.47mg/kg)和铜过量(1127.51mg/kg)的两种饲料投喂初始体重为(12.9±0.2)g的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)8周,研究饲料中过量铜对斜带石斑鱼生长性能、形态学指标、体组成和鱼体微量元素含量的影响。结果表明,当饲料铜含量由4.47mg/kg升高到1127.51mg/kg时,斜带石斑鱼增重率由228%下降到63%,饲料效率由1.12下降到0.51,肠脂比由2.90%下降到1.69%。全鱼和肝脏中的铜含量均随饲料铜水平的增加而显著增加,斜带石斑鱼全鱼铜含量由2.98mg/kg上升到34.98mg/kg,肝脏铜含量由36.6mg/kg上升到1364.0mg/kg。但饲料中过量铜对斜带石斑鱼的存活率、鱼体肥满度、脏体比、肝体比和全鱼体组成没有显著性影响。摄食高铜饲料的斜带石斑鱼肝脏锌含量显著升高,锌可能在铜的解毒过程中起着重要的作用。

关键词：石斑鱼铜毒性矿物质

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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)两种催乳素受体基因的cDNA克隆和mRNA表达分析

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海洋与湖沼 2012年第1期43卷 138-146页

作者：张勇马细兰陈勇智李水生陈华谱刘晓春林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 华南师范大学生命科学学院广州510631 惠州学院生命科学系生物技术研究所惠州516007

采用RT-PCR方法克隆了斜带石斑鱼两种催乳素受体(Prolactin receptor,PRLR)的cDNA序列,序列分析表明:PRLR1开放阅读框为1947bp,共编码649个氨基酸,PRLR2开放阅读框为1749bp,共编码487个氨基酸,PRLR1与PRLR2的氨基酸同源性为40.4%。用Real-time RT-PCR方法研究了PRLR1和PRLR2在各组织和早期发育不同阶段的表达情况,结果表明:PRLR1和PRLR2在所检测的12种组织中均有表达,其中以鳃、肾、肠表达量较高;PRLR1在受精期表达最高,PRLR2在视囊形成期表达最高,而且除受精卵期外PRLR2在各时期的表达量均高于PRLR1。

关键词：斜带石斑鱼催乳素受体 cDNA克隆 Real-time RT-PCR mRNA表达

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