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半成熟树突状细胞与Tregs水平对ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的影响

中华医学杂志 2017年第4期97卷 259-264页

作者：章诚廖文尉蔡炳刘芙蓉柯琼朱晓峰何晓顺胡安斌中山大学附属第一医院广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东省器官移植国际科技合作基地广州510080 中山大学干细胞与组织工程研究中心

目的观察半成熟树突状细胞（smDCs）在小鼠胚胎干细胞（ESCs）来源的肝细胞移植中诱导免疫耐受的作用及机制，并分析smDCs与调节性树突状细胞（regDCs）之间的关系。方法将绿色荧光蛋白（GFP）标记的129系小鼠ESCs按前期方法向肝细胞诱... 详细信息

目的观察半成熟树突状细胞（smDCs）在小鼠胚胎干细胞（ESCs）来源的肝细胞移植中诱导免疫耐受的作用及机制，并分析smDCs与调节性树突状细胞（regDCs）之间的关系。方法将绿色荧光蛋白（GFP）标记的129系小鼠ESCs按前期方法向肝细胞诱导分化，同时诱导129系小鼠骨髓单核细胞向smDCs和regDCs分化。将smDCs、regDCs分别预先输入BALB／c小鼠体内，3d后再将ESCs分化的肝细胞移植入BALB／e小鼠肝实质内。观察移植细胞生存时间、生长状况、局部免疫反应情况；检测分析受体血CD4＋T细胞Foxp3表达情况等。结果对照组小鼠肝实质内移植细胞仅生存1周，smDCs组与regDCs组生存时间可达4周，移植部位CD3＋T细胞浸润较对照组明显减轻；smDCs与regDCs在形态和表型方面相似，二者均中度表达MHC-11、CIMO、CD80、CD86；smDCs组受体小鼠外周血CD4＋T细胞Foxp3表达量明显升高由1．11％上升至5．38％；regDCs组Foxp3表达量亦有所升高达3．87％。结论smDCs能诱导ESCs源性肝细胞移植耐受，其机制可能与Foxp3＋ Tregs产生相关。smDCs与regDCs作用类似，且均中度表达MHC．Ⅱ、CD40等，推测为同一类型的耐受性树突状细胞。

关键词：胚胎干细胞肝细胞移植半成熟树突状细胞调节性树突状细胞调节性T细胞

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肝癌转移相关标志物的研究进展

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实用医学杂志 2017年第12期33卷 2059-2061页

作者：蔡燕黄俊琪中山大学附属第一医院广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东省器官移植国际科技合作基地广州市510000

肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率高［1］。肝癌的治疗一般采取手术、放化疗与中药结合疗法，肝癌复发转移是影响患者疗效和获得长期生存的关键之一，是当前肝癌研究的热点。深入研究肝癌转移和复发的机制，寻找与肝癌... 详细信息

肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率高［1］。肝癌的治疗一般采取手术、放化疗与中药结合疗法，肝癌复发转移是影响患者疗效和获得长期生存的关键之一，是当前肝癌研究的热点。深入研究肝癌转移和复发的机制，寻找与肝癌转移相关的靶标，对于肝癌的治疗具有重要的临床价值。现就近些年关于肝癌转移标志物的研究，综述如下。

关键词：肝癌转移相关标志物复发转移转移标志物恶性肿瘤结合疗法长期生存临床价值

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SUZ12在肝癌患者血细胞中高表达并受miR-33a调控

SUZ12在肝癌患者血细胞中高表达并受miR-33a调控

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第十二届全国免疫学学术大会

作者：蔡燕邓小红陈斌彭宝岗何晓顺黄俊琪中山大学附属第一医院器官移植科广东省器官捐献与移植免疫重点实验室中山大学附属第一医院肝胆外科

研究背景:果蝇zeste基因抑制子的人类同源基因12(suppressor of zeste 12,SUZ12)属于表观沉默基因家族多聚梳抑制复合物2/3的组成成分。SUZ12在多种肿瘤如结肠癌、乳腺癌中表达上调,并被证明对多种肿瘤的发生发展起促进作用。然而其对... 详细信息

研究背景:果蝇zeste基因抑制子的人类同源基因12(suppressor of zeste 12,SUZ12)属于表观沉默基因家族多聚梳抑制复合物2/3的组成成分。SUZ12在多种肿瘤如结肠癌、乳腺癌中表达上调,并被证明对多种肿瘤的发生发展起促进作用。然而其对肝癌发生发展的作用研究寥寥。miR-33包括miR-33a和miR-33b,定位于固醇调节元件结合蛋白16号基因内区,研究表明miR-33a可能与肝脏功能有重要关系,能调节肝纤维化的发生及肝再生,并在许多肿瘤组织如前列腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌等中异常表达,本实验组前期的研究成果表明miR-33a能抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,但其具体机制仍未明晰。目的:探讨SUZ12在肝癌中的表达及其与miR-33a的关系。方法:收集中山大学附属第一医院肝胆外科肝癌手术患者抗凝血及肝癌和正常肝组织,收集icu科非肿瘤患者抗凝血做对照组。提取肝癌组织、正常肝组织RNA,肝癌病人和非肿瘤患者血细胞RNA,qRT-PCR检测其SUZ12表达;miR-33a模拟物/抑制物及其对照转染肝癌细胞系SMMC-7721和Huh7后,qRT-PCR及western b1ot检测SUZ12的表达。结果:SUZ12在肝癌患者的肝癌组织中较正常肝组织表达有增高的趋势(n=11);SUZ12在肝癌患者的血细胞中表达较非肿瘤患者血细胞中高(n1=7,n2=5,p<0.05);SMMC-7721和Huh7转染miR-33a模拟物后,SUZ12在RNA水平和蛋白水平均表达下调,转染miR-33a抑制物后,SUZ12在蛋白水平表达上调。结论:SUZ12在肝癌患者血细胞及肝癌组织中高表达,可能与肝癌的进程相关,且在肝癌细胞中能被miR-33a负向调控。

关键词： SUZ12 肝癌 miR-33a

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上腹部多器官联合移植术后胰漏的观察及护理

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中国实用护理杂志 2017年第20期33卷 1551-1553页

作者：叶海丹罗新春豆秋江马延召曾巧玲何小凤廖培娇中山大学附属第一医院移植一区广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东省器官移植国际科技合作基地广州510080

目的探讨上腹部多器官联合移植术后胰漏的护理要点。方法回顾性分析2009年3月至2015年7月因终末期肝病合并2型糖尿病成功接受上腹部多器官联合移植术后患者2例出现胰漏的护理体会。结果2例患者均于术后1周内血糖恢复至正常水平，停用胰... 详细信息

目的探讨上腹部多器官联合移植术后胰漏的护理要点。方法回顾性分析2009年3月至2015年7月因终末期肝病合并2型糖尿病成功接受上腹部多器官联合移植术后患者2例出现胰漏的护理体会。结果2例患者均于术后1周内血糖恢复至正常水平，停用胰岛素，患者分别在术后14、21d出现胰漏，经积极引流及使用抑制胰酶与消化道腺体分泌的药物，加强感染控制及营养支持等保守治疗，术后均顺利康复出院。结论术后密切观察腹部体征、腹部引流管的变化、准确使用生长抑素、营养支持、维持水电解质平衡、心理干预是提高上腹部多器官联合移植术后胰漏恢复的关键。

关键词：护理手术后并发症上腹部多器官移植胰漏

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儿童移植肾穿刺病理特征分析

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中华器官移植杂志 2017年第4期38卷 206-210页

作者：陈徐涛刘龙山傅茜李军张桓熙邓荣海黄刚莫樱孙良忠蒋小云杨诗聪陈文芳王长希中山大学附属第一医院器官移植科广州510080 中山大学附属第一医院儿科广州510080 中山大学附属第一医院病理科广州510080 广东省器官捐献与移植免疫重点实验室

目的总结儿童肾移植指征性移植肾穿刺病理特征,分析移植肾并发症和特点.方法回顾性分析2003年1月至2017年3月单中心儿童肾移植的指征性移植肾穿刺病理资料.结果 35例患者共43例次移植肾行病理穿刺,以排斥反应（11/35,31.4％）和新发/... 详细信息

目的总结儿童肾移植指征性移植肾穿刺病理特征,分析移植肾并发症和特点.方法回顾性分析2003年1月至2017年3月单中心儿童肾移植的指征性移植肾穿刺病理资料.结果 35例患者共43例次移植肾行病理穿刺,以排斥反应（11/35,31.4％）和新发/复发肾病（9/35,25.7％）为主.排斥反应包括急性T淋巴细胞排斥反应（8/11,72.7％）和急性抗体介导排斥反应（3/11,27.3％）,肾病包括IgA肾病（5/9,55.6％）、局灶性节段性肾小球硬化（2/9,22.2％）、溶血尿毒综合症（1/9,11.1％）等.其他穿刺病理检查发现包括间质性肾炎（4/35,11.4％）、BK病毒相关性肾病、移植肾淋巴瘤、钙调磷酸酶抑制剂（CNI）毒性和草酸盐肾病等.结论儿童肾移植术后指征性移植肾穿刺病理以急性排斥反应和新发/复发肾病为主,病理活检对患者病因诊断和及时治疗起重要作用.

关键词：肾移植儿童肾活检急性排斥反应复发性移植肾病

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肝癌患者移植前外周血免疫细胞亚群分析

肝癌患者移植前外周血免疫细胞亚群分析

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第十二届全国免疫学学术大会

作者：邓小红张倩倩蔡燕欧阳涓陈茂根何晓顺黄俊琪中山大学附属第一医院器官移植科广东省器官捐献与移植免疫重点实验室中山大学中山医学院免疫学研究所中山大学附属第一医院检验科

研究背景:肝移植是目前治疗中晚期肝癌的最直接,最有效的手段之一,可快速恢复患者肝功能从而极大地改善移植受体的远期预后。然而移植物排斥反应仍然是影响术后移植物失功的主要原因。尽管目前免疫抑制剂可有效的减少移植物排斥反应,但... 详细信息

研究背景:肝移植是目前治疗中晚期肝癌的最直接,最有效的手段之一,可快速恢复患者肝功能从而极大地改善移植受体的远期预后。然而移植物排斥反应仍然是影响术后移植物失功的主要原因。尽管目前免疫抑制剂可有效的减少移植物排斥反应,但现有的免疫抑制剂选择性差、不良反应多仍使肝移植患者远期的可预期生存寿命低于正常健康人。大量研究表明,机体免疫细胞亚群的比例与免疫排斥反应密切相关。因此,全面监测移植受体的免疫状态有助于移植病人的精准治疗,指导免疫抑制剂的使用,减少排斥反应、机会性感染和新生肿瘤等的发生。目的:探讨肝癌患者肝移植前外周血免疫细胞表型的特征。方法:通过多色流式细胞术对6例准备接受肝移植的肝癌患者及6例健康对照组外周血中T细胞、B细胞、单核细胞亚群、树突状细胞（DC）及NK细胞进行免疫表型分析。结果:与健康对照组比较,肝癌组患者外周血CD3CD4PD-1T细胞、CD3CD4CD25T细胞及CD3CD4CD39T细胞均升高;肝癌组CD3CD19B细胞升高、Non-switched B细胞CD19CD27CD38IgM升高、transition B细胞CD19CD27CD38IgMCD24升高、浆细胞CD19CD27CD38IgDIgM升高、边缘区B细胞CD19CD27IgD下降;NK细胞CD3CD56降低、CD3CD56升高。结论:等待肝移植的肝癌患者外周血免疫细胞的表型与健康人有所差异,对监测患者移植后的免疫状态起重要作用,对指导免疫抑制剂的使用有重要作用。

关键词：肝癌肝移植免疫细胞亚群多色流式细胞术

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胰肾联合移植术后11年并发胆囊结石行腹腔镜切除胆囊一例

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中华医学杂志 2017年第22期97卷 1752-1752页

作者：廖文尉章诚何晓顺朱晓峰王文静胡安斌中山大学附属第一医院器官移植科广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东省器官移植国家科技合作基地广州510080

患者男，41岁，因右上腹部不适并超声发现胆囊结石3年，急性胆囊炎伴呕吐、腹泻间断性发作1年，于2016年6月入院。患者于2005年1月因“1型糖尿病肾病伴肾功能衰竭”在我院行胰肾联合移植术，术程顺利，术后常规口服抗排斥药物并定期复... 详细信息

患者男，41岁，因右上腹部不适并超声发现胆囊结石3年，急性胆囊炎伴呕吐、腹泻间断性发作1年，于2016年6月入院。患者于2005年1月因“1型糖尿病肾病伴肾功能衰竭”在我院行胰肾联合移植术，术程顺利，术后常规口服抗排斥药物并定期复查。患者近5年出现慢性肾功能减退，

关键词：胰肾联合移植术胆囊结石移植术后腹腔镜切除胆囊 1型糖尿病肾病慢性肾功能减退并发上腹部不适

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半成熟树突状细胞与调节性树突状细胞在减轻ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫损伤的共同机制研究

半成熟树突状细胞与调节性树突状细胞在减轻ESCs分化的肝细胞移植...

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第九届全国疑难及重症肝病大会

作者：胡安斌章诚廖文尉朱晓峰何晓顺中山大学附属第一医院器官移植科、广东省器官捐献与移植免疫重点实验室2013A061401007、广东省器官移植国家科技合作基地2015B050501002

目的研究半成熟树突状细胞(smDCs)与调节性树突状细胞(regDCs)诱导胚胎干细胞(ESCs)分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的作用机制,并分析比较二者的分子表型及功能特点。方法体外培养绿色荧光蛋白(GFP)标记的129小鼠ESCs使其向肝细胞分... 详细信息

目的研究半成熟树突状细胞(smDCs)与调节性树突状细胞(regDCs)诱导胚胎干细胞(ESCs)分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的作用机制,并分析比较二者的分子表型及功能特点。方法体外培养绿色荧光蛋白(GFP)标记的129小鼠ESCs使其向肝细胞分化。按相关方法在体外诱导培养smDCs与regDCs。然后,用倒置荧光相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪(FCM)检测细胞表面MHC-II、CD40、CD80、CD86表达水平以及ELISA检测细胞因子分泌情况。将129系小鼠smDCs、regDCs分别预先输入BALB/c小鼠体内,3d后再将ESCs分化的肝细胞移植入BALB/c小鼠肝实质内,然后检测观察受体小鼠移植部位免疫浸润及外周血CD4+T细胞Foxp3表达情况。结果 smDCs形态与regDCs相似,为类圆形和不规则形,大小、树突介于imDCs和mDCs之间。(图1)smDCs与regDCs细胞表面分子表达水平及细胞因子分泌水平相近,与成熟树突状细胞(mDCs)和未成熟树突状细胞(imDCs)相比,均中度表达MHC-II、CD40、CD80、CD86,同时高分泌抑制性细胞因子TGF-β、IL-10及低分泌炎症性细胞因子IL-2。(图2)smDCs与regDCs预输入组,BALB/c小鼠肝脏移植部位CD3+T细胞浸润较对照组减轻,炎症因子IL-2明显降低。(图3)预先输入smDCs组受体小鼠外周血CD4+T细胞Foxp3表达量较对照组明显升高,由1.11%上升至最高5.38%;regDCs组受体小鼠外周血CD4+T细胞Foxp3表达量较对照组亦有所升高,最高达到3.87%。(图4)结论 smDCs与regDCs在细胞形态、免疫表型及细胞因子分泌上是相似的。smDCs与regDCs均可明显减轻ESCs源性肝细胞移植在受体内免疫损伤,二者诱导移植耐受机制与CD4+CD25+Foxp3+Tregs产生相关,smDCs与regDCs诱导扩增Tregs过程中适当水平的MHC-II、CD40、CD80、CD86和抑制性细胞因子TGF-β、IL-10及低水平的炎症因子IL-2发挥了重要作用。综合上述特点,二者可能为同一类型的耐受性树突状细胞。

关键词： ESCs 肝细胞移植半成熟树突状细胞调节性树突状细胞 Tregs 移植耐受

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早期移植肾功能不良受者吗替麦考酚酯的浓度一时间曲线下面积研究

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中华器官移植杂志 2017年第9期38卷 531-535页

作者：刘岩峰刘龙山黄珈雯李军傅茜王长希暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院泌尿外科深圳518020 中山大学附属第一医院器官移植中心广东省器官捐献与移植免疫重点实验室暨南大学第一附属医院

目的研究成人肾移植后早期肾功能不良情况下吗替麦考酚酯（MMF）的药物代谢动力学特点。方法30例成人肾移植受者，采用MMF联合他克莫司、泼尼松的三联免疫抑制方案。根据术后第30天移植肾功能分为3组：移植肾功能正常组（Ⅰ组，9例），... 详细信息

目的研究成人肾移植后早期肾功能不良情况下吗替麦考酚酯（MMF）的药物代谢动力学特点。方法30例成人肾移植受者，采用MMF联合他克莫司、泼尼松的三联免疫抑制方案。根据术后第30天移植肾功能分为3组：移植肾功能正常组（Ⅰ组，9例），估算肾小球滤过率（eGFR）≥90 ml·min－1·1.73 m－2；移植肾功能轻中度不全组（Ⅱ组，12例），30 ml·min－1·1.73 m－2≤eGFR〈90 ml·min－1·1.73 m－2；移植肾功能重度不全组（Ⅲ组，9例），eGFR〈30 ml·min－1·1.73 m－2。采用高效液相色谱法测定各组外周血麦考酚酸（MPA）及其代谢物麦考酚酸葡糖苷酸（MPAG）浓度，比较各组间MPA和MPAG的药物代谢动力学参数的差异。结果Ⅰ组和Ⅱ组的MPA 0～12 h药物浓度-时间曲线下面积（MPA-AUC0-12）分别为（37.8±15.6）μg·h·ml－1和（54.5±27.0）μg·h·ml－1，差异无统计学意义（P〉0.05）。Ⅲ组的MPA-AUC0-12明显高于Ⅰ组（P〈0.05），分别为（75.7±29.5）μg·h·ml－1和（37.8±15.6）μg·h·ml－1。Ⅲ组的MPAG-AUC0-12明显高于Ⅰ组和Ⅱ组（均P〈0.05），依次分别为（1899.1±987.1）μg·h·ml－1、（692.6±384.8）μg·h·ml－1和（859.9±261.4）μg·h·ml－1；Ⅰ组和Ⅱ组间MPAG-AUC0-12的差异无统计学意义（P＝0.532）。结论肾移植后早期重度移植肾功能不全伴少尿或无尿时，受者血总MPA水平显著增高，需注意调整药物剂量以减少相关不良反应。

关键词：霉酚酸药物代谢动力学肾移植

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肾移植患者激素撤除后麦考酚酸钠肠溶片的药代动力学研究

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国际泌尿系统杂志 2017年第5期37卷 751-755页

作者：刘岩峰肖克峰刘龙山黄珈雯王长希暨南大学第二附属医院泌尿外科(深圳市人民医院) 广东深圳518020 中山大学附属第一医院器官移植中心广东广州510080 暨南大学第一附属医院广东广州510080 广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东广州510080

目的研究成人肾移植激素撤除后麦考酚酸钠肠溶片的药代动力学特点,建立配伍他克莫司的血麦考酚酸浓度曲线下面积的有限检样方法.方法 30例成人肾移植受者,采用麦考酚酸钠肠溶片（EC-MPS）联合他克莫司的二联免疫抑制方案.血麦考酚酸浓... 详细信息

目的研究成人肾移植激素撤除后麦考酚酸钠肠溶片的药代动力学特点,建立配伍他克莫司的血麦考酚酸浓度曲线下面积的有限检样方法.方法 30例成人肾移植受者,采用麦考酚酸钠肠溶片（EC-MPS）联合他克莫司的二联免疫抑制方案.血麦考酚酸浓度通过高效液相色谱法测定,采血点为服药前（C0）及服药后1、2.5、4、5、6、7、8、9、10.5、12 h,用梯形面积法计算浓度曲线下面积（AUC）,采用多元线性回归分析,确定相关采血点,确定有限取样方案.结果通过多元线性回归分析出四点法估算的公式MPA-AUC=15.889＋0.692·C25＋1.071·C4＋4.948·C7＋4.477·C12（r2 =0.878）.采用Bland＆Altman分析法评估,四点法未超出置信限范围,与全点AUC有较好的一致性.模型绝对预测误差百分比（APE％）为（11.8±10.2）％,为临床可接受范围.结论该有限检样方案适用于监测激素撤除成人肾移植受者配伍他克莫司时血麦考酚酸浓度的曲线下面积.

关键词：肾移植激素类药代动力学

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