检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物法生产1,3-丙二醇的代谢及关键酶研究进展

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化学通报 2014年第12期77卷 1171-1175页

作者：吴家鑫张国栋齐鹏何继红赵梅仙葛辛玫中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心中国牧工商(集团)总公司北京100095

微生物法生产1,3-丙二醇具有条件温和、环境友好的特点,是目前研究的热点。本文着重介绍了微生物法生产1,3-丙二醇所涉及的菌种和代谢过程,系统阐述了1,3-丙二醇代谢过程中关键酶的性质特点及有关基因,并展望了未来的发展趋势。

关键词： 1,3-丙二醇代谢关键酶

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蔗糖与葡萄糖作辅助碳源对重组Klebsiella pneumoniae发酵生产1,3-丙二醇的影响

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过程工程学报 2014年第4期14卷 660-663页

作者：吴家鑫王凤寰王峥谭天伟刘沛溢北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室北京100029 中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095 北京古龙嘉兰生物技术有限公司北京100097

实验研究了重组Klebsiella pneumoniae批式发酵生产1,3-丙二醇过程中辅助碳源蔗糖与葡萄糖对发酵过程的影响,对发酵工艺进行了放大,并对流加策略进行了优化.结果表明,葡萄糖为发酵生产1,3-丙二醇的辅助碳源优于蔗糖;以重组Klebsiella pn... 详细信息

实验研究了重组Klebsiella pneumoniae批式发酵生产1,3-丙二醇过程中辅助碳源蔗糖与葡萄糖对发酵过程的影响,对发酵工艺进行了放大,并对流加策略进行了优化.结果表明,葡萄糖为发酵生产1,3-丙二醇的辅助碳源优于蔗糖;以重组Klebsiella pneumoniae为菌种,以葡萄糖为辅助碳源,采用指数流加策略,30 L发酵罐中1,3-丙二醇的产量最高达85.2 g/L,产率达0.63 mol/mol,比单纯以甘油为碳源分别提高37.35%和25.00%.

关键词： 1,3-丙二醇重组Klebsiella pneumoniae 辅助碳源葡萄糖发酵指数流加

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10株猪流行性腹泻病毒序列分析

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中国兽医杂志 2019年第7期55卷 34-37页

作者：杨小蓉马良许磊赵晨璐周建民中牧实业股份有限公司北京丰台100070 农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京海淀100095 北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京海淀100095

为了分析2015-2018年北方地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,通过RT-PCR分段扩增、测序,获得10株PEDV S基因序列。分析发现,10株S基因核苷酸序列同源性为96.8%~99.4%,推导编码的氨基酸序列同源性为96.5%~99.3%;与参考株核苷酸序... 详细信息

为了分析2015-2018年北方地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,通过RT-PCR分段扩增、测序,获得10株PEDV S基因序列。分析发现,10株S基因核苷酸序列同源性为96.8%~99.4%,推导编码的氨基酸序列同源性为96.5%~99.3%;与参考株核苷酸序列同源性为93.4%~99.5%,与参考株氨基酸序列同源性为92.0%~99.4%。其中,4株序列基因长度均为4161 nt,编码1386个氨基酸;6株序列基因长度均为4158 nt,编码1385个氨基酸,与目前流行的变异株和经典株CV777相比,这6株S基因推导的氨基酸序列已分别在131位、1196位出现1个氨基酸缺失,在进化树中已形成多个小分支。由此表明,我国PEDV在流行过程中已出现较大变异。作者研究结果为监测和分析我国PEDV的变异和演化提供了有价值的基因信息数据。

关键词：猪流行性腹泻 S基因序列测定变异分析

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应用病毒计数仪定量检测口蹄疫灭活抗原方法的建立

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中国兽医杂志 2019年第4期55卷 111-112,118页

作者：杨小蓉严石许磊马良中牧实业股份有限公司北京丰台100070 农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京海淀100095 北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京海淀100095

目前国内对口蹄疫(FMD)疫苗抗原的生产质量控制检测,主要依靠蔗糖密度梯度法定量病毒146S检测。但该方法操作过程繁琐,操作时间太长,1次能检测样品数量有限,检测效率不高。本研究采用病毒计数仪对FMDV完整粒子进行定量检测,同时与蔗糖... 详细信息

目前国内对口蹄疫(FMD)疫苗抗原的生产质量控制检测,主要依靠蔗糖密度梯度法定量病毒146S检测。但该方法操作过程繁琐,操作时间太长,1次能检测样品数量有限,检测效率不高。本研究采用病毒计数仪对FMDV完整粒子进行定量检测,同时与蔗糖密度梯度法定量病毒146S检测结果进行对比,本研究方法检测时间只需10min,有耗时短、受干扰因素少、准确性较高的显著特点,为FMD疫苗的生产质量控制提供了一种可用的方法。

关键词：口蹄疫灭活抗原病毒计数仪定量检测

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大孔树脂吸附与反相色谱纯化恩拉霉素

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生物工程学报 2014年第11期30卷 1701-1708页

作者：吴家鑫黄永东齐鹏何继红李萍张国栋赵梅仙中牧实业股份有限公司北京100095 农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京100095 北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095 中国牧工商(集团)总公司北京100095 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

恩拉霉素作为多肽类抗生素,是一种新型、安全的饲料添加剂。本文建立了一条基于大孔树脂初纯和反相色谱精制的分离纯化工艺。该工艺路线首先使用AB-8大孔树脂在0.012 mol/L盐酸溶液-甲醇(50:50,V/V)缓冲液条件下洗脱实现恩拉霉素初步纯... 详细信息

恩拉霉素作为多肽类抗生素,是一种新型、安全的饲料添加剂。本文建立了一条基于大孔树脂初纯和反相色谱精制的分离纯化工艺。该工艺路线首先使用AB-8大孔树脂在0.012 mol/L盐酸溶液-甲醇(50:50,V/V)缓冲液条件下洗脱实现恩拉霉素初步纯化,再使用制备型C18反相色谱柱在0.05 mol/L磷酸二氢钠-乙腈(70:30,V/V)(p H 4.5)缓冲液洗脱下实现恩拉霉素a和b的有效分离,a、b两个组分纯度分别达到98.5%和98.0%,a和b两种有效成分的总收率为29.2%。本研究为恩拉霉素a和b两种纯品的制备以及高纯度恩拉霉素产品的生产提供了参考。

关键词：恩拉霉素大孔吸附树脂反相色谱纯化

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11株禽腺病毒遗传变异分析

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中国兽医杂志 2020年第6期56卷 15-18,23页

作者：杨小蓉王楠王天恺王增福李晓冉潘文孟凡磊马良中牧实业股份有限公司北京丰台100070 农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京海淀100095 北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京海淀100095 乾元浩生物股份有限公司北京丰台100070

为了分析2019年禽腺病毒(FAdV)遗传变异情况,通过PCR分段扩增、测序,获得11株FAdV Hexon基因序列。经分析发现,11株腺病毒Hexon基因高变区核苷酸序列同源性为66.1%~100.0%,推导编码的氨基酸序列同源性为56.5%~100.0%;与参考株核苷酸序... 详细信息

为了分析2019年禽腺病毒(FAdV)遗传变异情况,通过PCR分段扩增、测序,获得11株FAdV Hexon基因序列。经分析发现,11株腺病毒Hexon基因高变区核苷酸序列同源性为66.1%~100.0%,推导编码的氨基酸序列同源性为56.5%~100.0%;与参考株核苷酸序列同源性为65.4%~100%,与参考株氨基酸序列同源性为56.5%~100.0%。其中9株序列基因长度均为738 nt,编码246个氨基酸;GX-1901001毒株序列基因长度均为750 nt,编码250个氨基酸;HB-1911039毒株序列基因长度均为756 nt,编码252个氨基酸。与目前流行株相比,本试验获得的11株腺病毒Hexon基因存在不同程度的变异或缺失,在进化树中已形成多个小分支。表明我国FAdV在流行过程中已出现变异。本试验结果为监测和分析我国FAdV的变异和演化提供了有价值的基因信息数据。

关键词：禽腺病毒 Hexon基因序列测定变异分析

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亲水作用液相色谱法测定注射液中泰地罗新含量

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现代化工 2019年第2期39卷 231-234页

作者：吴家鑫刘敏尚飞张传良宋敏齐鹏梁景乐中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095 北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室北京100029 北京化工大学分析测试中心北京100029

采用XBridge-BEH Amide(150 mm×4. 6 mm,5μm)亲水作用色谱柱,建立了泰地罗新的检测方法。确定了检测波长,考察了流动相pH、流动相盐体系、流动相洗脱方式对保留时间、对称因子和理论塔板数的影响。结果表明,采用亲水作用色谱柱分... 详细信息

采用XBridge-BEH Amide(150 mm×4. 6 mm,5μm)亲水作用色谱柱,建立了泰地罗新的检测方法。确定了检测波长,考察了流动相pH、流动相盐体系、流动相洗脱方式对保留时间、对称因子和理论塔板数的影响。结果表明,采用亲水作用色谱柱分离,以乙腈(含10 mmol/L甲酸铵、0. 125%甲酸、5%水)-0. 125%甲酸水溶液(含10 mmol/L甲酸铵)为流动相梯度洗脱,流速为1. 0 m L/min,柱温为30℃,紫外检测波长为280 nm,在此条件下泰地罗新可以获得良好的分离效果。泰地罗新药物质量浓度与峰面积在6. 25～100μg/m L范围内线性关系良好,相关系数R=0. 999 9,检出限为0. 05μg/m L,定量限为0. 14μg/m L,批内添加回收率在97. 8%～102. 1%之间,批内变异系数为1. 69%～3. 12%;批间添加回收率在96. 9%～104. 3%之间,批间变异系数为3. 39%～4. 05%。该方法能够快速、准确地检测泰地罗新含量,且成本低廉,可应用于药物生产中泰地罗新的质量控制。

关键词：亲水作用色谱泰地罗新定量检测

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甲氧苄啶增溶技术研究

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广东化工 2024年第8期51卷 21-23页

作者：吴家鑫张国栋葛辛玫赵伯杨齐鹏肖进中牧实业股份有限公司农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095

本文首先测定了甲氧苄啶在水中的溶解度,然后采用表面活性剂增溶、β环糊精包合、固体分散体等药剂学常用增溶技术对甲氧苄啶开展了溶解度提升研究。实验结果显示,甲氧苄啶在水中的溶解性为0.31 mg/mL,使用表面活性剂增溶、β环糊精包... 详细信息

本文首先测定了甲氧苄啶在水中的溶解度,然后采用表面活性剂增溶、β环糊精包合、固体分散体等药剂学常用增溶技术对甲氧苄啶开展了溶解度提升研究。实验结果显示,甲氧苄啶在水中的溶解性为0.31 mg/mL,使用表面活性剂增溶、β环糊精包合、固体分散体三种增溶技术后,甲氧苄啶在水中的最高溶解度分别为0.37 mg/mL、7.06μg/mL和3.3 mg/mL。通过三种药物制剂技术的对比说明,固体分散体制备的最优方法为溶剂法,最优载体为聚维酮K30,最优冷冻时间为2小时,制得甲氧苄啶固体分散体溶液甲氧苄啶的浓度可以达到3.3 mg/mL,与自身溶解度0.31 mg/mL相比,浓度达到甲氧苄啶普通水溶液的10.64倍,有效提高了甲氧苄啶在水中的溶解性。

关键词：甲氧苄啶溶解性表面活性剂增溶 β环糊精包合固体分散体

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利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱鉴别预混剂中黄霉素

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中国兽药杂志 2016年第5期50卷 24-28页

作者：吴家鑫刘敏尚飞齐鹏张国栋梁景乐中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095 北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室北京100029 北京化工大学分析测试中心北京100029 中牧实业股份有限公司北京100070

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱对预混剂中的黄霉素5种组分进行鉴别分析。采用C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(含2 mmol/L乙酸铵)为流动相梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温40℃;质谱条件为电喷雾离子源,检测方式为负... 详细信息

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱对预混剂中的黄霉素5种组分进行鉴别分析。采用C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(含2 mmol/L乙酸铵)为流动相梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温40℃;质谱条件为电喷雾离子源,检测方式为负离子全扫描模式,通过保留时间、精确分子量和二级质谱特征碎片完成对黄霉素的5种组分的鉴别。与高效液相色谱方法比较,本方法具有判断准确、检测快速的特点,具有很好的应用价值。

关键词：鉴别黄霉素超高效液相色谱高分辨四极杆飞行时间质谱

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超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱测定注射液中泰拉霉素方法的建立

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黑龙江畜牧兽医 2018年第19期 213-216页

作者：吴家鑫张刚刘敏梁景乐尚飞徐金雷齐鹏宋敏中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室/北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术研究中心北京100095 北京化工大学生命科学与技术学院/北京市生物加工过程重点实验室北京100029 北京化工大学分析测试中心北京100029

泰拉霉素是一种动物专用的大环内酯类抗生素,分子式为C41H79N3O12,相对分子质量为806.23,是由13元氮杂内酯环和15元氮杂内酯环两种同分异构体以1∶9的比例组成的混合物（结构式见图1）,且两者之间可以相互转化[1-4]。2004年,泰拉霉素在... 详细信息

泰拉霉素是一种动物专用的大环内酯类抗生素,分子式为C41H79N3O12,相对分子质量为806.23,是由13元氮杂内酯环和15元氮杂内酯环两种同分异构体以1∶9的比例组成的混合物（结构式见图1）,且两者之间可以相互转化[1-4]。2004年,泰拉霉素在美国与欧盟上市销售,主要用于防治由胸膜肺炎放线杆菌、支原体、巴氏杆菌、副嗜血杆菌、支气管败血性博德特菌等引起的猪、牛呼吸系统疾病。泰拉霉素具有药物吸收速度快、药效持久、生物利用度高等优点。

关键词：泰拉霉素保留时间 MS 分子离子峰超高效液相

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