检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈路芸中科院上海生化细胞所

学位级别：博士

生理状态下，细胞在经历了DNA复制，染色体分离，以及胞质分裂等一系列有丝分裂过程之后，染色体最终维持了在二倍体的状态。然而对于某些细胞类型而言，例如巨核细胞，染色体却以多倍化的方式发生在其正常的分化过程中(Ravid et al., 2... 详细信息

生理状态下，细胞在经历了DNA复制，染色体分离，以及胞质分裂等一系列有丝分裂过程之后，染色体最终维持了在二倍体的状态。然而对于某些细胞类型而言，例如巨核细胞，染色体却以多倍化的方式发生在其正常的分化过程中(Ravid et al., 2002)。我们在研究中发现，利用钒酸钠（一种磷酯酶的抑制剂）能导致成纤维细胞的染色体多倍化。通过对钒酸钠刺激产生的酪氨酸磷酸化蛋白质分析，发现cortactin（一种与纤维状肌动蛋白相关的蛋白）具有明显的酪氨酸磷酸化积累。更多的研究表明钒酸钠似乎是通过阻断cortactin酪氨酸磷酸化的转换过程而导致细胞产生染色体多倍化。利用RNA干扰技术（RNAi）进一步证实了cortactin在染色体倍性调控中的作用。在3T3-L1前脂肪细胞中，瞬时或稳定表达cortactin RNA干扰质粒使cortactin蛋白水平下调，均能诱导多倍染色体而非多核细胞的形成。为进一步了解cortactin导致染色体多倍化的内在机制，我们检测了cortactin下调后细胞的染色体数目以及细胞周期的运转过程。结果发现大量处于血清饥饿G0期的cortactin下调细胞都出现了多中心体现象。结合流式细胞分析以及活体成像技术分析的数据表明，这些cortactin下调细胞的G2-M期时间发生了延长。此外，在cortactin下调细胞中还发现了中心体分离紊乱以及多极纺锤体形成等现象。综上所述，cortactin蛋白质水平的下调会导致多中心体进而产生多极纺锤体。这些紊乱的多级纺锤体会在有丝分裂过程中干扰染色体的分离从而导致多倍染色体的形成。由于纤维状肌动蛋白能为中心体分离提供驱动力量，而cortactin又是纤维状肌动蛋白的相关蛋白，因此cortactin很有可能是通过干扰中心体分离的过程来诱导多中心体现象的产生。

关键词：钒酸钠 cortactin 多倍染色体肌动蛋白多中心体多极纺锤体

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继往开来,再创辉煌

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现代免疫学 2009年第3期29卷 177-178页

作者：葛锡锐中科院上海生化细胞学研究所

今年三月九日,上海市免疫学会走过了三十个春秋.它是我国最早成立的免疫学会.在邓小平理论的指引下,在党的十一届三中全会改革开放春风的吹拂下,全国科技大会的召开使整个学术界活跃了起来.1979年,在上海市免疫学前(氵贺)、姚錱、林飞... 详细信息

今年三月九日,上海市免疫学会走过了三十个春秋.它是我国最早成立的免疫学会.在邓小平理论的指引下,在党的十一届三中全会改革开放春风的吹拂下,全国科技大会的召开使整个学术界活跃了起来.1979年,在上海市免疫学前(氵贺)、姚錱、林飞卿、王鸣岐、叶天星等教授的倡导和主持下,成立了上海市免疫学会,并由姚鑫、朱瑞镛.分别任党组组长和副组长.

关键词：免疫学会邓小平理论改革开放上海市学术界

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慢性髓性白血病细胞来源的树突状细胞大容量诱导及其功能的实验研究

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复旦学报（医学版） 2004年第3期31卷 293-296页

作者：陈勤奋谢彦晖陈彤戴振声谢弘谢毅复旦大学附属华山医院血液科上海200040 中科院上海生化与细胞生物学研究所上海200031

目的　探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法　用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs... 详细信息

目的　探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法　用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs) ;单采的CML PBMNCS转入组织培养袋 ,加入重组人粒巨细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,培养诱导 7d ;在诱导前后 ,用流式细胞仪分别检测细胞表面HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达水平 ;用3 H TdR掺入法检测CML DCs和CML PBMNCs刺激自体和异体T细胞增殖的能力 ;用ELISA法检测在自体混合淋巴细胞培养 (MLR)时T细胞分泌的IFN γ浓度。结果　用血细胞分离机收集的CML PBMNCs ,在组织培养袋内经细胞因子培养诱导 ,HLA DR、CD1a、CD80、CD86的表达均有明显上调 ,细胞形态也表现典型的DC特征 ;CML DCs能显著刺激自体和异体T细胞增殖 ,而CML PBM NCs仅能刺激异体T细胞的增殖 ,刺激自体T细胞增殖的能力很弱 ;刺激自体T细胞增殖时分泌的IFN γ浓度 ,CML DCs组为 (877± 2 14 )pg/mL ;CML BPMNCs组仅为 (14± 1.7) pg/mL。结论　单采的CML PBMNCs转入组织培养袋 ,加入rhGM CSF和rhIL 4 ,可收获大容量的CML DCs;CML DCs在体外具有显著刺激自体T细胞增殖?

关键词：慢性髓性白血病细胞来源树突状细胞诱导实验研究

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貂肠炎病毒基因的分子克隆和结构研究

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病毒学报 1991年第3期7卷 235-240页

作者：赵新泰吴祥甫李载平殷震长春兽医大学兽医研究所中科院上海生化研究所

从貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)感染细胞培养物提取病毒的中间复制形双链DNA分子(RF DNA),经绿豆核酸酶(Mung bean nuclease)酶解消除RF DNA两端封闭的发夹结构,将全长基因组克隆于质粒pUC18中。对克隆片段进行了酶切位点分析... 详细信息

从貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)感染细胞培养物提取病毒的中间复制形双链DNA分子(RF DNA),经绿豆核酸酶(Mung bean nuclease)酶解消除RF DNA两端封闭的发夹结构,将全长基因组克隆于质粒pUC18中。对克隆片段进行了酶切位点分析,并做了限制性内切酶图谱。将测定的核苷酸序列与猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)相应片段的序列进行了比较,同源序列可达99.2％。

关键词：貂肠炎病毒分子克隆酶切图谱

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急性B淋巴细胞白血病B细胞B7分子表达缺陷

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复旦学报（医学版） 2003年第5期30卷 499-500页

作者：陈字戴振声王钦红谢弘谢毅上海复旦大学附属华山医院血液科上海200040 中科院上海生化与细胞研究所生物治疗组上海200031

目的　探讨B7分子表达与急性B淋巴细胞白血病 (BALL)发病机制的的关系。方法　Ficoll Hypaque密度梯度离心法分离出患者及正常人的外周血单个核细胞 ,体外培养 2 4h后 ,流式细胞仪检测B细胞细胞膜表达B7.1、B7.2表达的百分率 ;BALL组与... 详细信息

目的　探讨B7分子表达与急性B淋巴细胞白血病 (BALL)发病机制的的关系。方法　Ficoll Hypaque密度梯度离心法分离出患者及正常人的外周血单个核细胞 ,体外培养 2 4h后 ,流式细胞仪检测B细胞细胞膜表达B7.1、B7.2表达的百分率 ;BALL组与正常对照组作组间比较。结果　与正常对照组相比 ,BALL组B7.1、B7.2表达及B7.1、B7.2双表达的百分率明显低于正常人 (P <0 .0 5 )。结论　BALL外周血B细胞B7分子的表达存在缺陷 ,可能是BALL的发病机制之一及白血病细胞逃避机体“免疫监视”的重要原因。

关键词：急性B淋巴细胞白血病 B细胞 B7 流式细胞术发病机制

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低剂量白藜芦醇增强小鼠免疫反应(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第10期23卷 31-35页

作者：冯永红周文亮吴庆莉李晓玉赵维民左建平中国 200031 中科院上海生命科学研究院药物研究所免疫药理室中科院上海生命科学研究院药物研究所免疫药理室上海

目的:研究低剂量白藜芦醇的免疫调节作用.方法:用ConA和Sac分别刺激T淋巴细胞和抗原细胞并诱导细胞因子产生;[~3H]-胸腺嘧啶核苷掺入法检测淋巴细胞增殖;ELISA法检测IL-2,IL-12,IL-10和IFN-γ;用DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH),小鼠... 详细信息

目的:研究低剂量白藜芦醇的免疫调节作用.方法:用ConA和Sac分别刺激T淋巴细胞和抗原细胞并诱导细胞因子产生;[~3H]-胸腺嘧啶核苷掺入法检测淋巴细胞增殖;ELISA法检测IL-2,IL-12,IL-10和IFN-γ;用DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH),小鼠耳肿胀作为DTH反应指标;流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞亚群的变化.结果:白藜芦醇(0.75-6μmol/L)剂量依赖性地促进小鼠T淋巴细胞的增殖和IL-2的产生;白藜芦醇还剂量依赖性地促进脾脏淋巴细胞IFN-γ和IL-12的生成,同时抑制IL-10的产生;白藜芦醇(4 mg/kg)灌胃给药能对抗乙醇(16％,w/v)对小鼠DTH反应的抑制作用;白藜芦醇对脾脏淋巴细胞亚群无明显改变,但能逆转乙醇对脾淋巴细胞中巨噬细胞数量和 MHC-II分子表达的下调作用.结论:低剂量白藜芦醇能促进小鼠细胞介导的免疫反应,促进Th1细胞因子产生及影响巨噬细胞功能是其可能的机制.

关键词：白藜芦醇 T淋巴细胞白介素-12 白介素-10 干扰素Ⅱ型迟发型超敏反应乙醇

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中国地方株人乳头瘤病毒16型E7基因一级结构及其变异

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中华微生物学和免疫学杂志 1996年第6期16卷 395-398页

作者：伍欣星赵文先丁晓华丁红珍甘人宝湖北医科大学病毒研究所武汉430071 中科院上海生化所

从湖北地区一宫颈癌活检组织中提取ＤＮＡ，采取加端聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，获得了人乳头瘤病毒１６型Ｅ７基因（ＨＰＶ１６Ｅ７）。将该基因克隆于载体ｐＵＣ１８后，进行了该基因一级结构顺序分析。完整的ＨＰＶ１６Ｅ７湖北株... 详细信息

从湖北地区一宫颈癌活检组织中提取ＤＮＡ，采取加端聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，获得了人乳头瘤病毒１６型Ｅ７基因（ＨＰＶ１６Ｅ７）。将该基因克隆于载体ｐＵＣ１８后，进行了该基因一级结构顺序分析。完整的ＨＰＶ１６Ｅ７湖北株基因（ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ）全长２９４ｂｐ，与已发表的德国株（ＧＳ）大小一致，但其核苷酸顺序中有２处发生了变异，均为Ｃ→Ｔ变异。

关键词：人乳头瘤病毒 16型核苷酸序列分析宫颈肿瘤

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日本血吸虫23kD抗原表位及多价疫苗的初步研究

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中国人兽共患病杂志 2003年第6期19卷 62-65页

作者：林矫矫傅志强吴祥甫蔡幼民中国农科院上海家畜寄生虫病研究所中科院上海生化细胞生物学研究所

目的　研究日本血吸虫 2 3kD抗原表位及日本血吸虫 2 3kD抗原大亲水区多肽 (LHD -Sj2 3)与脂肪酸结合蛋白(SjFABP)两个基因重组抗原联合免疫小鼠的保护效果。方法　人工合成血吸虫 2 3kD抗原中一段可诱导T细胞和B细胞免疫应答的抗原表... 详细信息

目的　研究日本血吸虫 2 3kD抗原表位及日本血吸虫 2 3kD抗原大亲水区多肽 (LHD -Sj2 3)与脂肪酸结合蛋白(SjFABP)两个基因重组抗原联合免疫小鼠的保护效果。方法　人工合成血吸虫 2 3kD抗原中一段可诱导T细胞和B细胞免疫应答的抗原表位多肽p14 ,与鸡白蛋白偶联后免疫小鼠。用LHD -Sj2 3和SjFABP两个基因重组抗原联合免疫大鼠 ,观察诱导的免疫保护效果。结果与结论　人工合成肽 p14诱导了 2 2 2 2 %～ 30 18% (P <0 0 5～ 0 0 0 1)的减虫率。用LHD -Sj2 3和SjFABP两个基因重组抗原免疫大鼠时 ,分别获得 32 14 %和 31 85 %的减虫率 (P >0 0 5 ) ,当用这两种基因重组抗原联合免疫大鼠时 ,获得了 4 7 2 8%的减虫率。加强抗原表位及“鸡尾酒”疫苗研究 ,可为寻找更高保护作用的抗血吸虫病疫苗提供基础。

关键词：日本血吸虫 23kD抗原多价疫苗抗原表位免疫保护

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基因微矩阵技术在骨肉瘤发病相关基因研究中的应用

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中华实验外科杂志 2005年第9期22卷 1094-1097页

作者：李国东蔡郑东陈正军卢雪峰雷会宁郑龙坡第二军医大学附属长海医院骨科上海200433 中科院上海生化细胞研究所

目的探索骨肉瘤发病相关基因,研究基因表达水平对于骨肉瘤发病的重要意义。方法采用3个公认的骨肉瘤细胞株及1个成骨细胞株,提取总RNA,合成生物素标记的cRNA与AffymetrixGeneChipU133A芯片杂交。随机挑选10个差异表达基因,分别设计合成... 详细信息

目的探索骨肉瘤发病相关基因,研究基因表达水平对于骨肉瘤发病的重要意义。方法采用3个公认的骨肉瘤细胞株及1个成骨细胞株,提取总RNA,合成生物素标记的cRNA与AffymetrixGeneChipU133A芯片杂交。随机挑选10个差异表达基因,分别设计合成引物,用嵌合荧光法(SYBRGreenI)实时RTPCR法定量测量9例术中收集的新鲜骨肉瘤标本中各基因的表达水平,应用ABIPrism7000分析其与成骨细胞株之间的表达差异。结果以表达差异≥2.0倍为限,在AffymetrixHGU133A芯片包含的所有基因(约22000个转录本)中,3个骨肉瘤细胞株与成骨细胞株相比较,共同上调58个基因;共同下调142个基因。随机挑选10个差异表达基因的实时RTPCR结果与芯片结果完全相符。结论骨肉瘤是一种多基因病变,应用微矩列有助于发现该肿瘤的基因变化规律以及研究肿瘤内基因与基因的相互作用关系。

关键词：骨肉瘤基因骨肉瘤细胞株相关基因研究基因微矩阵 Affymetrix 发病 GeneChip 基因表达水平差异表达基因

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白藜芦醇和乙醇对内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子产生的作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第11期23卷 44-48页

作者：冯永红左建平李晓玉中国 200031 中科院上海生命科学研究院药物研究所免疫药理室上海

目的:研究白藜芦醇和乙醇对细菌内毒素活化的小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子产生的相互作用.方法:Griess试剂法检测NO产生;小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1的产生;ELISA检测IL-6,TNF-α的生成.结果:自藜芦醇(6.25,12.5,25 μmol/L)和乙醇(0.2％,... 详细信息

目的:研究白藜芦醇和乙醇对细菌内毒素活化的小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子产生的相互作用.方法:Griess试剂法检测NO产生;小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1的产生;ELISA检测IL-6,TNF-α的生成.结果:自藜芦醇(6.25,12.5,25 μmol/L)和乙醇(0.2％,0.8％)剂量依赖性和协同性地抑制24小时LPS(1 mg/L)和IFN-γ(5 kU/L)刺激的NO的产生;25μmol/L的白黎芦醇还抑制IL-6的产生,此作用可被乙醇加强;乙醇单独对24小时IL-1的产生无影响,但可提高自藜芦醇促进IL-1产生的作用;低剂量乙醇抑制巨噬细胞TNF-α产生,但两种浓度的乙醇与白黎芦醇共用时均增强白黎芦醇对TNF-α的产生的促进作用.结论:白黎芦醇和乙醇对巨噬细胞功能分子的产生有调控作用.

关键词：白藜芦醇乙醇巨噬细胞一氧化氮肿瘤坏死因子白介素-1 白介素-6 脂多糖类

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