检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2020年第7期45卷 1641-1647页

作者：刘培卫吕菲菲张玉秀杨云高志晖梁惠惠魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

白木香Aquilaria sinensis是典型的诱导型药用植物,只有在伤害胁迫下才能产生名贵南药沉香,前期研究表明,伤害可刺激信号分子H2O2爆发,进而诱导白木香产生沉香类物质,但其代谢和调控机制还不清楚。交替氧化酶(alternative oxidase,AOX)... 详细信息

白木香Aquilaria sinensis是典型的诱导型药用植物,只有在伤害胁迫下才能产生名贵南药沉香,前期研究表明,伤害可刺激信号分子H2O2爆发,进而诱导白木香产生沉香类物质,但其代谢和调控机制还不清楚。交替氧化酶(alternative oxidase,AOX)是植物交替呼吸途径的末端氧化酶,在抗氧化胁迫过程中起着重要的作用。为了揭示AOX基因在伤害胁迫诱导白木香结香过程中的生理功能,该文在转录组数据的基础上,对白木香中AOX基因进行克隆和鉴定,同时利用qRT-PCR技术检测AOX基因在不同组织和伤害胁迫下的表达特性。该文首次从白木香中克隆获得了3个AOX基因,分别为AsAOX1a,AsAOX1d,AsAOX2,其中AsAOX1a主要在茎和种子中表达,AsAOX1d,AsAOX2基因主要在果肉和茎中表达;这3个基因都受切割伤害的诱导,其中AsAOX1a,AsAOX2在1 h时达到最高表达水平,AsAOX1d在24 h时达到最高表达水平。此外H2O2处理对伤害诱导AsAOX1a,AsAOX2的表达具有一定的抑制作用,而AsA处理对其有明显的促进作用。研究结果为揭示AOX基因在伤害诱导白木香形成沉香过程中的作用,进一步解析AOX基因与H2O2信号分子之间的关系提供了基础数据。

关键词：白木香结香 AOX基因克隆表达分析

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白木香细胞色素P450基因AsCYP71D1的克隆及表达分析

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药学学报 2023年第10期58卷 3123-3129页

作者：高世玺戎梅彭俊祥徐艳红魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

细胞色素P450(cytochrome P450 monooxygenases,CYP450)是一类超基因家族编码的含有血红素的氧化酶类,分布于各种需氧生物体内,广泛参与萜类、生物碱、黄酮、脂肪酸等的生物合成。本研究依据课题组前期测得白木香转录组数据库中一个CYP... 详细信息

细胞色素P450(cytochrome P450 monooxygenases,CYP450)是一类超基因家族编码的含有血红素的氧化酶类,分布于各种需氧生物体内,广泛参与萜类、生物碱、黄酮、脂肪酸等的生物合成。本研究依据课题组前期测得白木香转录组数据库中一个CYP450单加氧酶基因的部分转录本序列设计引物,利用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆该基因的全长cDNA序列;并对其组织表达及亚细胞定位进行了研究。结果发现,该基因全长cDNA序列为1920 bp,其中5′-非翻译区(untranslated region,UTR)为88 bp,3′-UTR为344 bp并具有21 bp的polyA尾,开放阅读框为1488 bp,编码495个氨基酸。序列比对发现该蛋白属于CYP450家族的CYP71D家族成员,命名为AsCYP71D1。组织表达分析的结果显示,AsCYP71D1基因主要在茎中表达。进一步洋葱表皮中亚细胞定位显示,AsCYP71D1编码的蛋白在细胞质、细胞核及细胞膜上都有表达。本研究为后续深入研究其在沉香倍半萜合成途径的功能奠定了基础。

关键词：白木香倍半萜细胞色素P450 基因克隆表达分析

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小鱼眼草三萜类化学成分研究

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中国中药杂志 2015年第11期40卷 2144-2147页

作者：宋波张秋博王孟华田新慧孙浩理张福宝邹忠梅丁刚中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193 宁夏回族自治区食品药品检验所宁夏银川750001

采用硅胶,Sephadex LH-20和半制备HPLC等色谱方法对小鱼眼草Dichrocephala benthamii全草的三萜类化学成分进行了研究,并运用质谱、核磁等波谱技术对分离得到的化合物进行了结构鉴定,结果从小鱼眼草中分离得到9个三萜类化合物,分别鉴定... 详细信息

采用硅胶,Sephadex LH-20和半制备HPLC等色谱方法对小鱼眼草Dichrocephala benthamii全草的三萜类化学成分进行了研究,并运用质谱、核磁等波谱技术对分离得到的化合物进行了结构鉴定,结果从小鱼眼草中分离得到9个三萜类化合物,分别鉴定为β-香树脂醇甲酸酯（1）,β-香树脂醇乙酸酯（2）,β-香树脂醇（3）,β-香树脂酮（4）,3β-羟基,Δ11,13（18）-齐墩果二烯（5）,Δ12-齐墩果烯（6）,木栓酮（7）,达玛烷二烯醇乙酸酯（8）和表木栓醇（9）。化合物1-8为首次从鱼眼草属植物中分离得到,化合物9为首次从该种植物中分离得到,其中化合物1为新的天然产物。

关键词：小鱼眼草菊科三萜化学成分

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白木香转录因子As WRKY25的分子克隆与表达分析

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1919-1925页

作者：孙佩文唐小琳吕菲菲余翠翠王彬彬高志晖金钺徐艳红魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京 100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口 570311

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具... 详细信息

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具和软件分析编码蛋白的生物学特性,通过组织特异性表达分析不同组织中的基因表达模式。构建p ET-28aAs WRKY25原核表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行原核诱导表达及鉴定。结果从白木香愈伤组织中克隆到了As WRKY25转录因子基因,其CDS全长1 728 bp,编码575个氨基酸;该序列密码子优化后连接到p ET-28a表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达,其适合诱导条件为1 mmol·L-1IPTG,37℃连续培养6 h。组织表达分析结果表明,As WRKY25在白木香的沉香层中的表达量最高,在根、茎、枝中的表达量最低。结论成功克隆并表达了白木香WRKY类转录因子As WRKY25,该转录因子可能参与了沉香的伤害诱导形成过程。

关键词：白木香 As WRKY25 基因克隆原核表达表达分析

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结合非靶向代谢组学和指纹图谱对通体结香技术产沉香与野生沉香化学成分的比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5625-5635页

作者：郁萌侯文成冯剑陈兰杨云刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代... 详细信息

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代谢组学和指纹图谱,对通体香与野生沉香的乙醇提取物和挥发性成分进行分析。结果 16批通体香与16批野生沉香的共有成分相同,但通体香指纹图谱相似度较高,且4个倍半萜、3个小分子芳香物质和8个2-(2-苯乙基)色酮等共17个共有成分在通体香中含量较高。结论通体香和野生沉香主要化学成分组成相同,但不同批次间通体香的质量更稳定。

关键词：沉香通体结香技术 2-(2-苯乙基)色酮非靶向代谢组学指纹图谱 2,4-二叔丁基苯酚 6,7-二甲基-1,2,3,5,8,8a-六氢萘去氢蜂斗菜酮

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6种代表性沉香精油的化学成分及抗氧化、抗炎活性比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5720-5730页

作者：陈细钦王灿红冯剑陈德力魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,... 详细信息

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,并测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)与2,2-氮杂双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2-azabis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS]自由基的能力,考察其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7活力的影响。结果从通体香水蒸气蒸馏精油(TTS)、通体香超临界萃取精油(TTC)、板头香水蒸气蒸馏精油(BTS)、板头香超临界萃取精油(BTC)、奇楠沉香水蒸气蒸馏精油(QNS)和奇楠沉香超临界萃取精油(QNC)中鉴定出的化合物数量分别为48、55、59、71、72和35种,所含香味物质小分子芳香物质及倍半萜类成分相对含量之和分别为81.42%、87.84%、89.03%、62.05%、63.83%和28.36%,所含2-(2-苯乙基)色酮类化合物相对含量分别为0、0、0.25%、22.42%、17.48%、60.42%。6种沉香精油均具有清除DPPH和ABTS自由基能力,且质量浓度在0.5~5 mg/m L与自由基清除能力均呈正相关。3种水蒸气蒸馏沉香精油(BTS、TTS、QNS)对LPS诱导RAW264.7细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)分别为18.61、30.30、18.05μg/m L,而3种超临界CO_(2)萃取沉香精油(BTC、TTC、QNC)的IC50值分别为41.98、38.45、24.50μg/m L。结论超临界萃取沉香精油同水蒸气蒸馏沉香精油化合物组成相差较大,其能够提取出更多的脂肪酸类和色酮类化合物;板头香和通体香采用同一提取方法所得精油化学成分相似,而奇楠沉香中含有更多含量的香味物质和2-(2-苯乙基)色酮类化合物。3种超临界萃取沉香精油清除DPPH自由基能力均强于水蒸气蒸馏沉香精油,而抗炎活性则相反,且3种沉香来源中,奇楠沉香精油抗炎能力最佳。

关键词：沉香奇楠精油化学成分抗氧化能力抗炎活性 2-(2-苯乙基)色酮

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胶体金免疫层析法快速检测中药材中除草剂扑草净残留

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药物分析杂志 2024年第1期44卷 174-184页

作者：柯童炜骆骄阳秦家安王玉丹罗雅雯何春娇秦旭华杨美华成都中医药大学药学院成都611137 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193

目的:基于自制的扑草净抗原和单克隆抗体,建立了一种适用于快速检测中药材、饮片中三嗪类除草剂扑草净残留的免疫层析方法。方法:确定了抗体偶联量为7μg,稀释液配制条件为含1%OVA,0.1%Tween-80的0.1 mol·L^(-1) PBS优化条件,并采... 详细信息

目的:基于自制的扑草净抗原和单克隆抗体,建立了一种适用于快速检测中药材、饮片中三嗪类除草剂扑草净残留的免疫层析方法。方法:确定了抗体偶联量为7μg,稀释液配制条件为含1%OVA,0.1%Tween-80的0.1 mol·L^(-1) PBS优化条件,并采用T线划线浓度为0.05 mg·mL^(-1),C线划线浓度为0.5 mg·mL^(-1)的湿法试纸条,提升胶体金免疫层析试纸条的灵敏度,降低不同用药部位中药的基质效应,并进行大批量中药材检测。结果:试纸条检测灵敏度可达到1 ng·mL^(-1),实际样品检出限可达到0.1 mg·kg^(-1),所建立的方法适用于陈皮、蒲公英、三七、金银花等中药材中40种不同部位扑草净残留检测。对10批西洋参、5批山药、12批三七、5批黄芪、3批沙参、4批牛膝、14批菊花、9批生姜、6批菟丝子进行了实际样品快速检测,均未检出扑草净残留。结论:本方法检测方法快速准确,前处理简便,操作简单,推广性强,可作为现场快速筛查扑草净残留的有效手段,以保证中药材的质量和安全性。同时,该研究为开发多种中药材的农残快速检测具有一定的参考意义。

关键词：扑草净胶体金试纸条中药材除草剂快速检测适用性基质效应

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基于Citespace和VOSviewer可视化分析沉香研究的发展态势

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中草药 2024年第20期55卷 7033-7046页

作者：何国浩杨云曾琳许利嘉魏建和肖培根中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的通过对近32年沉香相关研究的文献分析,探析沉香研究领域的相关热点与前沿。方法以中国知网(CNKI)、Web of Science (WOS)等国内外数据库为数据源,运用Citespace对数据进行处理筛选,运用VOSviewer、Citespace、COOC等软件对文献年... 详细信息

目的通过对近32年沉香相关研究的文献分析,探析沉香研究领域的相关热点与前沿。方法以中国知网(CNKI)、Web of Science (WOS)等国内外数据库为数据源,运用Citespace对数据进行处理筛选,运用VOSviewer、Citespace、COOC等软件对文献年度发文量、机构、关键词、作者等方面进行分析,绘制可视化图谱。结果共纳入中文文献981篇,英文文献662篇。文献数量整体呈增长趋势;研究机构主要以中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所、中国热带农业科学院热带生物技术研究所和中国林业科学研究院热带林业研究所等为代表;中英文关键词显示,沉香的主要研究方向为沉香倍半萜、结香技术、化学成分、药理作用等;目前沉香的研究热点主要为内生真菌、次生代谢产物、沉香四醇等。结论沉香研究目前处于稳定发展阶段,该领域的最新进展主要集中于对其结香技术的探究、药理作用的靶点、信号通路以及基因层面的深入研究等。

关键词：沉香文献计量学结香技术沉香倍半萜可视化分析

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沉香中倍半萜类化合物与生物活性研究进展及其质量标志物预测分析

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中草药 2022年第4期53卷 1191-1209页

作者：王云云侯文成魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现... 详细信息

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现状进行综述,并在此基础上结合质量标志物(quality marker,Q-Marker)的核心概念,从生源途径、传统药效、传统药性和化学成分等方面对沉香的Q-Marker进行预测分析,α-沉香呋喃、β-沉香呋喃、沉香螺旋醇可作为沉香的Q-Marker,为建立和完善沉香质量标准提供依据,以期为沉香质量的深入研究提供参考。

关键词：沉香质量标志物倍半萜 β-沉香呋喃 α-沉香呋喃沉香螺旋醇

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菟丝子及混伪品的DNA条形码鉴定

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中草药 2024年第17期55卷 5982-5990页

作者：秦新月金钺高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的调研市售菟丝子Cuscutae Semen混杂情况,为菟丝子药材质量的提升和安全应用提供依据。方法收集市售菟丝子25份,对样品进行ITS2基因扩增并双向测序,利用HMMer注释方法获得ITS2序列,使用MEGA6.0进行遗传距离计算并构建邻接法(neighbor... 详细信息

目的调研市售菟丝子Cuscutae Semen混杂情况,为菟丝子药材质量的提升和安全应用提供依据。方法收集市售菟丝子25份,对样品进行ITS2基因扩增并双向测序,利用HMMer注释方法获得ITS2序列,使用MEGA6.0进行遗传距离计算并构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统发育树;运用DNAsp5.0进行功能域检测和单倍型分析;比较菟丝子及杂质的二级结构差异;用R语言将所得序列转换成彩色条形码图片及二维码。结果通过序列分析、遗传距离分析、构建系统发育树、二级结构分析、功能域分析及单倍型分析可将菟丝子药材中不同科属及同一属的杂质准确区分;成功检测出25份菟丝子中分别含有藜种子、绿穗苋种子、虫实种子、铁苋菜种子、稗子、酸模叶蓼种子、大豆碎粒等1种或多种杂质。结论首次调研了市售菟丝子的混杂情况,表明其混杂种类多,且部分混杂种子有毒,为菟丝子相关标准制定提供了依据。此外,ITS2序列可准确鉴定菟丝子及其混伪品,为微小种子类药材鉴别提供了理论依据;与二维码技术结合可实现菟丝子监管的标准化和信息化。

关键词：菟丝子混伪品 ITS2 彩色条形码二维码 DNA条形码

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