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药学学报 2020年第3期55卷 473-477页

作者：陈岩王汛江熊芬王蔚倩杨莉熊爱珍王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole... 详细信息

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole-protein adducts,PPAs)。本文首先利用SD雄性大鼠单次灌胃不同剂量的菊三七醇提物(0.0625、0.25、0.5、2.0和4.0 g·kg-1)后,于2、12、24和48 h眼眶静脉丛取血,并48 h后异氟烷麻醉取肝,用于苏木精-伊红染色,进行肝组织病理分析,考察不同剂量菊三七醇提物与PPAs生成量及菊三七肝毒性的关系。此外,利用SD雄性大鼠单次灌胃0.25和0.5 g·kg-1菊三七醇提物后,于不同的时间点(10、20和30 min、1、2、4、6、12、24和48 h)眼眶静脉丛取血,进行了不同剂量的PPAs的药代动力学研究。实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准(PZSHUTCM190912019)。采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测血清中PPAs含量,并用PK Solutions 2TM软件的非房室模型进行拟合求算药动学参数。结果表明,PPAs含量随菊三七给药剂量增加呈剂量依赖性,且与肝损伤程度相关;PPAs在大鼠体内的消除率随着给药剂量的增加明显减慢。PPAs可作为PAs毒性标志物,其含量的高低及清除的快慢可为PAs减毒策略的开发提供参考。

关键词：菊三七吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征吡咯蛋白加合物药代动力学

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野百合碱对人肝窦内皮细胞的毒性机制研究

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中国药理学通报 2020年第6期36卷 833-839页

作者：王蔚倩叶铉玲陈岩熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用... 详细信息

目的利用人肝窦内皮细胞(human hepatic sinusoidal endothelial cell,HHSEC)探讨野百合碱(monocrotaline,MCT)的体外毒性及其毒性作用机制。方法CCK-8检测MCT对细胞存活率的影响;通过LC-MS检测毒性代谢物吡咯蛋白加合物(PPA)的水平;用试剂盒检测细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;通过Hoechst染色、荧光底物法和Western blot来检测细胞凋亡情况;QT-PCR分析细胞中相关基因的mRNA表达情况。结果与空白组比较,MCT(5,10 mmol·L-1)能明显降低HHSEC的细胞存活率;在给药后的HHSEC和培养基中均检测到了大量PPA,且其水平呈剂量依赖性增加;并明显降低了HHSEC中GSH含量。MCT能导致细胞核固缩,同时提高caspase-3蛋白酶活性,诱导细胞中凋亡蛋白的表达水平升高。MCT诱导代谢活化关键酶CYP3A4,并使细胞中VEGFA和MMP9基因表达上调,NOS3基因则表达下调。结论MCT经HHSEC内代谢酶代谢活化,同时消耗细胞内GSH,破坏肝脏抗氧化系统,激活了HHSEC凋亡并影响内皮及血管系统等进一步加剧细胞损伤。

关键词：野百合碱人肝窦内皮细胞吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征肝毒性凋亡

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葎草药材的质量标准研究

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中国中药杂志 2014年第20期39卷 3986-3990页

作者：谢凡吴迎春李医明徐红王瑞王峥涛上海中医药大学中药学院上海201203 中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

为建立葎草药材的质量标准，参照《中国药典》2010年版附录相关方法，对葎草药材的水分、灰分进行测定；以木犀草苷和大波斯菊苷为指标成分，采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法进行含量测定。结果表明葎草的显微鉴别特征... 详细信息

为建立葎草药材的质量标准，参照《中国药典》2010年版附录相关方法，对葎草药材的水分、灰分进行测定；以木犀草苷和大波斯菊苷为指标成分，采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法进行含量测定。结果表明葎草的显微鉴别特征性强；薄层色谱斑点清晰，分离度好；葎草中含木犀草苷质量分数为0.015%～0.651%（平均值0.148%），含大波斯菊苷质量分数为0.003%～0.118%（平均值0.036%）。所建立的方法操作简便，准确可靠，重复性好，可用于葎草药材的质量控制。

关键词：葎草药材质量标准显微鉴别薄层鉴别含量测定

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结肠炎相关的结直肠癌的癌变因素及信号转导机制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第8期30卷 874-878页

作者：张欣罗晓平刘琼窦薇上海中医药大学附属曙光医院药剂科上海201203 上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203

炎症性肠病(IBD)是一种病因未明的结直肠炎性病变,随着病程延长,癌变风险增加。结肠炎相关性结直肠癌(CRC)是IBD最为严重的并发症,近年来全球CRC的发病率呈逐年上升趋势。本文讨论了CRC的主要癌变因素,包括IBD患者的病程、病变范围、遗... 详细信息

炎症性肠病(IBD)是一种病因未明的结直肠炎性病变,随着病程延长,癌变风险增加。结肠炎相关性结直肠癌(CRC)是IBD最为严重的并发症,近年来全球CRC的发病率呈逐年上升趋势。本文讨论了CRC的主要癌变因素,包括IBD患者的病程、病变范围、遗传因素、生活方式及饮食习惯等,并对与CRC发病机制有关的信号转导通路如核因子κB(NF-κB)通路、Wnt通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路、白细胞介素6(IL-6)/转录激活子3(STAT3)通路和表皮生长因子(EGF)/表皮生长因子受体(EGFR)通路的激活,以及促炎因子和抑炎因子的表达失调进行了概述,为CRC的预防提供参考。

关键词：结肠炎结肠癌直肠癌信号通路

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三七总皂苷溶液滴眼给药对大鼠非增殖性糖尿病视网膜病变的改善作用

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药学学报 2024年第5期59卷 1271-1279页

作者：孙鑫王亚茹程雪梅陈泓谕陈明赖树生季莉莉尉小慧王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 广西三七综合利用技术重点实验室广西梧州543000

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是一种累及眼睛的糖尿病并发症,会导致患者视力低下甚至失明。本文旨在研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)溶液滴眼给药对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的大鼠非增殖性糖... 详细信息

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是一种累及眼睛的糖尿病并发症,会导致患者视力低下甚至失明。本文旨在研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)溶液滴眼给药对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的大鼠非增殖性糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)的改善作用及其机制。实验方案经上海中医药大学实验动物福利与伦理委员会审查,符合实验动物福利与伦理相关规范(伦理号:PZSHUTCM 211115004)。通过对大鼠腹腔单次注射STZ诱导糖尿病模型,注射两个月后,分别按照20、40和80 mg·kg-1的剂量双眼滴眼PNS溶液,每日2次,每次间隔6 h,连续1个月。通过对大鼠眼球进行苏木精-伊红染色和免疫组化分析,观察视网膜的形态结构变化和小胶质细胞的活化情况;采用伊文思蓝染料渗漏实验,观察血-视网膜屏障(blood-retina barrier,BRB)的破坏情况;利用胰酶消化视网膜并进行染色,观察视网膜中无细胞毛细血管的数量;通过尾静脉注射异硫氰酸荧光素偶联刀豆蛋白A凝集素,观察视网膜中黏附的中性粒细胞数量;采用酶联免疫实验检测血清中炎症因子的表达;采用Western blot实验检测视网膜组织中相关蛋白的表达以及核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的转录激活。结果发现,PNS溶液滴眼给药能够显著增加视网膜的厚度、减少无细胞毛细血管的数量以及上调紧密连接蛋白claudin-1和occludin的表达,从而缓解BRB的损伤。此外,PNS溶液滴眼给药也能够显著减少中性粒细胞的黏附和小胶质细胞的活化、降低血清中炎症因子的表达以及视网膜p65蛋白的核转移,有效抑制视网膜炎症的发生。以上结果表明,PNS溶液滴眼给药可以通过抑制NF-κB信号通路的激活,降低炎症的发生,从而发挥改善NPDR的作用。

关键词：三七总皂苷滴眼给药非增殖性糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障炎症因子核因子κB

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滋肾养阴颗粒的质量标准研究

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中草药 2017年第16期48卷 3338-3341页

作者：林启焰王晗雪汪毓文程雪梅谢帆李文艳王长虹上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海中药标准化研究中心上海201203 上海市浦东新区公利医院上海201315

目的建立滋肾养阴颗粒(ZYG)的定性与定量方法。方法山茱萸的薄层色谱(TLC)鉴别;以氯仿-甲醇(3∶1)为展开剂,5%香草醛-硫酸为显色剂;墨旱莲、泽泻、牡丹皮的TLC鉴别:以石油醚(60~90℃)-三氯甲烷-醋酸乙酯(3∶1∶2)作为展开剂,采用不同的... 详细信息

目的建立滋肾养阴颗粒(ZYG)的定性与定量方法。方法山茱萸的薄层色谱(TLC)鉴别;以氯仿-甲醇(3∶1)为展开剂,5%香草醛-硫酸为显色剂;墨旱莲、泽泻、牡丹皮的TLC鉴别:以石油醚(60~90℃)-三氯甲烷-醋酸乙酯(3∶1∶2)作为展开剂,采用不同的检视方法,对ZYG中多味药材同时鉴别。采用Boston C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,对ZYG中莫诺苷、马钱苷、金丝桃苷、特女贞苷、丹皮酚的量进行测定。结果可用莫诺苷和马钱苷对ZYG中的山茱萸进行定性鉴别;在同一展开条件下,分别在254nm下对ZYG中的牡丹皮进行鉴别;在366 nm下对ZYG中的墨旱莲进行鉴别;用5%磷钼酸乙醇为显色剂,于日光下对ZYG中的泽泻进行鉴别;所建立的2个TLC方法,各斑点清晰,Rf值适中,分离度良好。以莫诺苷、马钱苷、金丝桃苷、特女贞苷和丹皮酚为指标成分进行方法学研究,其对应的线性范围分别为4.432~110.8、4.192~104.8、4.040~101.0、4.132~103.3、4.076~101.9μg/m L,各指标成分的相关系数均大于0.999 7,平均加样回收率在96.57%~98.67%,方法的日内精密度小于2%,日间精密度小于3%。方法的稳定性与重复性良好。结论该方法准确灵敏,易于操作,专属性强,重复性好,可用于ZYG的质量控制。

关键词：滋肾养阴颗粒质量标准莫诺苷马钱苷金丝桃苷特女贞苷丹皮酚

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鼓槌石斛对小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变的改善作用及其机制研究

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中草药 2016年第11期47卷 1908-1913页

作者：余增洋盛雨辰周玲玉陆宾季莉莉上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学药物安全评价研究中心上海201203

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPD... 详细信息

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPDR实验动物模型,再给予EEDC进行干预。采用视网膜组织伊文思蓝渗漏实验观察NPDR小鼠中血-视网膜屏障（BRB）的破坏情况;采用real-time PCR（RT-PCR）检测视网膜组织中白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF-α）及早期生长反应因子（Egr-l）、组织因子（TF）、纤溶酶原激活物抑制剂l（Serpine l）的基因表达;进一步采用酶联免疫实验（ELISA）检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结果与对照组相比,模型组小鼠视网膜组织伊文思蓝渗漏量明显增加,EEDC能够减少视网膜组织伊文思蓝渗透量;EEDC能够显著降低模型小鼠视网膜组织中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的基因表达;EEDC能够明显下调模型小鼠血清中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结论 EEDC具有改善STZ诱导小鼠NPDR的作用,其机制为通过抑制NPDR小鼠视网膜和血清中增加的炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及与凝血/纤溶相关基因TF、Serpine l的基因表达,缓解BRB的破坏,从而发挥改善NPDR的作用。

关键词：鼓槌石斛糖尿病非增殖性糖尿病视网膜病变血视网膜屏障炎性因子

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不同来源引流熊胆粉的化学成分系统分析

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中国中药杂志 2018年第11期43卷 2326-2332页

作者：王杰熊爱珍程绒绒杨莉王峥涛刘绍勇上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海凯宝药业股份有限公司上海201401

熊胆粉中含有胆汁酸、胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素等多种成分,其中胆汁酸类是熊胆粉中含量最高且研究最多的活性成分,而非胆汁酸类成分目前却鲜有报道。因此,该研究对来源为四川、黑龙江、云南的熊胆粉中各化学成分进行系统的研... 详细信息

熊胆粉中含有胆汁酸、胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素等多种成分,其中胆汁酸类是熊胆粉中含量最高且研究最多的活性成分,而非胆汁酸类成分目前却鲜有报道。因此,该研究对来源为四川、黑龙江、云南的熊胆粉中各化学成分进行系统的研究。通过采用微孔板分光光度计法测定胆红素、蛋白质,利用液相色谱质谱联用技术测定胆汁酸和氨基酸,利用电感耦合等离子体质谱仪测定微量元素。并采用相似度评价软件对不同来源的20批熊胆粉进行系统分析,表明不同来源熊胆粉中胆汁酸类成分相似度高（相似度系数为0.922~0.977）,不存在明显差异。所测样本中牛磺熊去氧胆酸与牛磺鹅去氧胆酸是熊胆粉中含量最高的成分,为41%~59%,均符合现行卫生部质量标准。二者总含量在来源为黑龙江的熊胆粉中最高,对不同来源的熊胆粉有分类意义。此外,不同来源熊胆粉中胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素含量也存在着一定的差异。该研究发现不同来源熊胆粉主要化学成分较为相似,但胆汁酸、胆红素、蛋白质、氨基酸、微量元素对不同来源的样本有分类意义,该研究为市售熊胆粉的质量评价和控制提供了更加全面科学的依据。

关键词：熊胆粉胆汁酸氨基酸微量元素胆红素蛋白质

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紫皮石斛的质量标准研究

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中国中药杂志 2013年第23期38卷 4113-4118页

作者：甘小娜徐英徐红刘家保杨莉王峥涛中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室、上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 云南省龙陵县林业局云南保山678300

[摘要]为建立云南省龙陵县紫皮石斛的地方质量标准，采用硫酸-苯酚法测定紫皮石斛中多糖的含量；采用高效液相色谱法测定药材中甘露糖的含量，并根据2010年版《中国药典》相关附录测定浸出物。结果表明紫皮石斛的显微鉴别特征性强；薄... 详细信息

[摘要]为建立云南省龙陵县紫皮石斛的地方质量标准，采用硫酸-苯酚法测定紫皮石斛中多糖的含量；采用高效液相色谱法测定药材中甘露糖的含量，并根据2010年版《中国药典》相关附录测定浸出物。结果表明紫皮石斛的显微鉴别特征性强；薄层色谱分离度好，斑点清晰；紫皮石斛含多糖质量分数为35．7％-52．1％（平均42．7％），甘露糖为27．8％～46．1％（平均35．8％），浸出物为4．5％－10．6％（平均7．38％）。所建方法操作简单，准确可靠，重复性好，制定的标准限度合理，可用于评价云南省龙陵县紫皮石斛的质量。

关键词：紫皮石斛质量标准显微鉴别薄层鉴别含量测定

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白蚀丸中7种潜在肝毒性成分含量测定及用药安全分析

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中成药 2022年第8期44卷 2722-2727页

作者：贾夏丽熊芬熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的对白蚀丸中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、补骨脂素、异补骨脂素、黄独素B、吡咯里西啶生物碱进行含量测定,结合白蚀丸致临床肝损伤报道,分析其用药安全,为其临床用药提供参考。方法收集市场上不同来源的白蚀丸,采用UPLC-MS、HPL... 详细信息

目的对白蚀丸中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、补骨脂素、异补骨脂素、黄独素B、吡咯里西啶生物碱进行含量测定,结合白蚀丸致临床肝损伤报道,分析其用药安全,为其临床用药提供参考。方法收集市场上不同来源的白蚀丸,采用UPLC-MS、HPLC等技术对白蚀丸中潜在毒性成分进行定性和定量检测。结果不同批次之间同一种成分的含量差异较大,其中二苯乙烯苷含量最高,达10 mg/g,其次为补骨脂素和异补骨脂素。白蚀丸中吡咯里西啶生物碱含量超过德国卫生部门的限量标准。结论患者长期服用白蚀丸可能造成毒性成分蓄积中毒;毒性成分之间可能发生药物-药物相互作用,从而增强机体对于损伤的易感性。

关键词：白蚀丸用药安全肝毒性含量测定质量控制吡咯里西啶生物碱

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