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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2014年第1期35卷 56-60页

作者：牟肖男杨文强王文婧刘国张晓琦叶文才暨南大学药学院中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

应用硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20柱等色谱方法对槟榔种子的体积分数95%乙醇提取物石油醚及乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,根据理化性质与波谱数据鉴定化合物的结构,分别为:表儿茶素(1),原花青素B1(2),原花青素B2(3),原花青素B7(4),ep... 详细信息

应用硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20柱等色谱方法对槟榔种子的体积分数95%乙醇提取物石油醚及乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,根据理化性质与波谱数据鉴定化合物的结构,分别为:表儿茶素(1),原花青素B1(2),原花青素B2(3),原花青素B7(4),epicatechin-(4β→8)-epicatechin-(4β→8)-catechin(5),epicatechin-(4β→6)-epicatechin-(4β→8)-catechin(6),金色酰胺醇酯(7),aurantiamide(8),neoechinulin A(9),echinulin(10).其中,化合物6~10为首次从该植物中分离得到.对分离得到的聚合鞣质类化合物1~6进行了初步的体外抗病毒活性测试.

关键词：槟榔化学成分原花青素

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重组人过氧化氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化和活性检测

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2014年第2期35卷 186-191,195页

作者：孙华张自德江仁望王峰暨南大学药学院广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

为了了解人过氧化氢酶在各种常见肿瘤细胞中的表达情况,构建人过氧化氢酶的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化人过氧化氢酶,并进行活性检测.我们通过常规分子克隆手段构建原核表达载体pET-15bhCAT,将其转化大肠杆菌Rosetta-gami,经过... 详细信息

为了了解人过氧化氢酶在各种常见肿瘤细胞中的表达情况,构建人过氧化氢酶的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化人过氧化氢酶,并进行活性检测.我们通过常规分子克隆手段构建原核表达载体pET-15bhCAT,将其转化大肠杆菌Rosetta-gami,经过IPTG诱导,表达产物经超声破碎后用Ni-NTA柱进行亲和层析纯化,用试剂盒检测重组hCAT酶活性,然后检测其对DNA氧化损伤的保护作用.通过荧光定量PCR(qPCR)测定hCAT基因在HLF-1正常细胞与几种常见肿瘤细胞中的表达情况.本研究成功构建了pET-15b-hCAT的原核表达载体,SDSPAGE检测结果表明,IPTG诱导表达出一条分子质量约为59.7 ku的目的蛋白,该蛋白主要以可溶的形式存在,活性检测表明经纯化得到的rhCAT比活力为62.9 U/mg,pUC19质粒氧化损伤保护实验显示rhCAT对DNA有一定的损伤保护作用.qPCR检测显示hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.成功构建了人过氧化氢酶的原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta-gami获得了hCAT的可溶性表达,纯化的rhCAT具有活性,hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.这为后续功能研究及性质实验奠定了基础.

关键词：过氧化氢酶表达纯化过氧化氢酶活性 DNA损伤保护荧光定量PCR

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甘松根茎化学成分研究

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中药材 2011年第8期34卷 1216-1219页

作者：刘春力段营辉戴毅姚新生暨南大学/中药及天然药物研究所广东广州510632 暨南大学/中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016

目的:研究甘松根茎的化学成分。方法:运用大孔树脂Diaion HP-20、硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱方法,结合制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质和MS、NMR等波谱学数据进行结构鉴定。结果:从甘松根茎中分离鉴定了6个化合物,分别... 详细信息

目的:研究甘松根茎的化学成分。方法:运用大孔树脂Diaion HP-20、硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱方法,结合制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质和MS、NMR等波谱学数据进行结构鉴定。结果:从甘松根茎中分离鉴定了6个化合物,分别为:8-羟基松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、8-羟基松脂醇-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、8-羟基松脂醇-4-O-(β-D-吡喃葡萄糖基)-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、环橄榄脂素-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、阿魏酸(5)、绿原酸甲酯(6)。结论:化合物1～6均为首次从该属植物中分离得到。

关键词：甘松根茎化学成分

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淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢及葡萄糖酸内酯对其肠菌代谢的抑制作用(英文)

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中国天然药物 2011年第6期9卷 461-465页

作者：姚志红刘明艳戴毅张依秦子飞屠凤娟姚新生暨南大学药学院广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632 沈阳药科大学中药学院沈阳110016

目的:考察淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢以及葡萄糖酸内酯对肠菌代谢的抑制作用,旨在帮助揭示淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的代谢途径和预防激素性骨坏死作用的物质基础。方法:淫羊藿总黄酮苷与家兔肠菌液经37℃厌氧温孵培养后,在不同... 详细信息

目的:考察淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢以及葡萄糖酸内酯对肠菌代谢的抑制作用,旨在帮助揭示淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的代谢途径和预防激素性骨坏死作用的物质基础。方法:淫羊藿总黄酮苷与家兔肠菌液经37℃厌氧温孵培养后,在不同时间点经水饱和的乙酸乙酯萃取,并对加入不同浓度(8,12和16mg·mL-1)的葡萄糖酸内酯对淫羊藿总黄酮苷经家兔肠菌代谢的抑制情况进行考察。采用ODS柱和乙腈-水(各含0.1%的甲酸)的流动相梯度洗脱,检测波长为335nm。结果:淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌液中温孵2h时被代谢成淫羊藿次苷Ⅱ,在温孵8h时被代谢成淫羊藿素;葡萄糖酸内酯能够浓度依赖性地抑制家兔肠菌对淫羊藿总黄酮苷的代谢。结论:淫羊藿总黄酮苷能被家兔肠道菌群迅速水解成淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿素;当葡萄糖酸内酯的浓度为16mg·mL-1时,则能完全抑制家兔肠菌对淫羊藿总黄酮苷的代谢。

关键词：淫羊藿总黄酮苷抗骨坏死活性家兔肠菌代谢葡萄糖酸内酯抑制作用

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应用胚胎干细胞试验模型对碱性成纤维细胞生长因子发育毒性的初步评价

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中国药理学通报 2012年第3期28卷 347-351页

作者：许华邓淑琴何清苏本金江海香黄亚东暨南大学药学院广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 医药生物技术研究开发中心广东广州510632

目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测b... 详细信息

目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测bFGF对未分化基因Sox-2表达的影响。结果 bFGF对ESC和3T3的半数抑制浓度和ESC的半数抑制分化浓度分别为IC50ESC=15.2 mg.L-1,IC50 3T3=24.2 mg.L-1,ID50 ESC=1.7 mg.L-1。结论 bFGF发育毒性的判定为弱胚胎毒性。

关键词：小鼠胚胎干细胞胚胎干细胞试验模型碱性成纤维细胞生长因子 Sox-2胚胎毒性发育毒性

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山橙枝叶化学成分研究

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中药材 2013年第3期36卷 398-401页

作者：仝永斌王文婧李国强袁经权张晓琦叶文才暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室/药学院中药及天然药物研究所广东广州510632 广西药用植物园广西南宁530023

目的:研究山橙枝叶的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS及RP-HPLC对山橙枝叶化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从山橙枝叶的95%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为:乌苏酸(1)... 详细信息

目的:研究山橙枝叶的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS及RP-HPLC对山橙枝叶化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从山橙枝叶的95%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为:乌苏酸(1)、22α-羟基乌苏酸(2)、白桦酸(3)、白桦醇(4)、2,3-dihydroxy-1-(4-hy-droxy-3-methoxyphenyl)-propan-1-one(5)、(+)-异落叶松树脂醇(6)、(±)-甘草素(7)、水杨酸(8)、β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10)。结论:首次报道化合物2的NMR数据,所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

关键词：山橙化学成分三萜

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LC-MS/MS测定家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2012年第3期33卷 305-310页

作者：张依姚志红秦子飞李凯宇戴毅姚新生暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

建立能定量分析家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ的液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS).以水饱和乙酸乙酯萃取为家兔胆汁样本前处理方法,采用OSD柱(150×4.6 mm,i.d.,5μm),以乙腈-水(各含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(... 详细信息

建立能定量分析家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ的液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS).以水饱和乙酸乙酯萃取为家兔胆汁样本前处理方法,采用OSD柱(150×4.6 mm,i.d.,5μm),以乙腈-水(各含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),二级质谱全扫描,负离子方式下检测.方法学考察结果显示,该方法专属性良好;日内精密度(RSD)不大于10.6%,日间精密度(RSD)不大于8.3%,准确度(RE)在-4.4%～+5.0%范围以内;胆汁样本稳定性良好;基质效应对测定影响可以忽略不计且提取率较高并稳定.该方法快速而灵敏,可用于家兔灌胃给以淫羊藿总黄酮后胆汁中的活性代谢物淫羊藿次苷Ⅱ的动态变化研究.

关键词：淫羊藿次苷Ⅱ 液相色谱-串联质谱联用法定量分析活性代谢物淫羊藿总黄酮家兔胆汁

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齐墩果酸对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响

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中药材 2011年第4期34卷 588-592页

作者：赵晶晶魏明吕艳青叶春玲张晓琦王英叶文才暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然药物研究所暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的：观察齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响并探讨其机制。方法：在诱导脂肪分化时用OA干预,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度。采用葡萄糖氧化酶法检测OA对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响;采用... 详细信息

目的：观察齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响并探讨其机制。方法：在诱导脂肪分化时用OA干预,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度。采用葡萄糖氧化酶法检测OA对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响;采用酶联免疫吸附法检测上清液中的游离脂肪酸浓度;采用RT-PCR法检测脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达。结果：与溶媒对照组比较,OA能显著增加脂肪细胞葡萄糖消耗量（P〈0.05或P〈0.01）,在1~30μmol/L浓度范围时,其作用随着剂量增加显著增强;OA能促进前脂肪细胞的分化,在3~30μmol/L浓度范围内,OA组油红O染液光密度值均显著高于溶媒对照组（P〈0.05或P〈0.01）。同时,OA还能减少游离脂肪酸的产生,其30μmol/L剂量时游离脂肪酸的含量只有溶媒对照组的47.2%,显著低于溶媒对照组（P〈0.01）。与溶媒对照组比较,30μmol/L OA能显著增加脂肪细胞PPAR-γ及GLUT-4 mRNA的表达（P〈0.05）。结论：OA能促进脂肪细胞分化和葡萄糖的消耗,减少游离脂肪酸的产生,其机制可能与上调脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达、增加脂肪细胞对胰岛素的敏感性有关。

关键词：齐墩果酸 3T3-L1脂肪细胞细胞分化糖脂代谢

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不同剂型霉酚酸类药物在早期肾移植患者体内的药动学研究及不良反应分析

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中国药学杂志 2020年第17期55卷 1460-1469页

作者：张绮雯贾萌萌杨晶姚志红秦子飞张晓坚姚新生郑州大学第一附属医院药学部郑州450052 河南省精准临床药学重点实验室郑州450052 暨南大学药学院中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632

目的研究不同剂型霉酚酸类药物在早期肾移植患者体内的药动学特征与不良反应的相关性。方法肾移植患者121例,术后分别服用吗替麦考酚酯胶囊(骁悉,MMF)(给药剂量分别为500,750,1000 mg)、吗替麦考酚酯分散片(赛可平,MMF-T)(给药剂量分别... 详细信息

目的研究不同剂型霉酚酸类药物在早期肾移植患者体内的药动学特征与不良反应的相关性。方法肾移植患者121例,术后分别服用吗替麦考酚酯胶囊(骁悉,MMF)(给药剂量分别为500,750,1000 mg)、吗替麦考酚酯分散片(赛可平,MMF-T)(给药剂量分别为500,750,1000 mg)、吗替麦考酚酯分散片(国药川抗,MMF-DT)(给药剂量分别为500,750 mg)和麦考酚钠肠溶片(米芙,EC-MPS)(给药剂量分别为360,540,720,900 mg),每12 h给药1次;分别于术后第7天服药前和服药后0.5,1,1.5,2,3,4,6,8,10和12 h采集静脉血样2 mL;采用超高效液相色谱法(UHPLC-DAD)测定MPA的血药浓度;以WinNoLin6.3软件,采用非房室模型计算药动学参数,并分析AUC0-12 h与不良反应的相关性。结果不同剂型给药组的平均ρ0变化不大,基本维持在1.0~3.0μg·mL^-1;平均ρmax在4~12μg·mL^-1之间,相应的tmax基本维持在1~3 h;各组别半衰期t1/2基本在4~9 h以内;除MMF-T组的AUC0-12 h小于30μg·h·mL^-1,其余3组的AUC0-12 h基本维持在治疗窗30~60μg·h·mL^-1内。MMF和MMF-T均在500~1000 mg(bid)、MMF-DT在500~750 mg(bid)和EC-MPS在360~900 mg(bid)剂量范围内,各组别药物剂量与AUC0-12 h呈非线性关系,而AUC0-12 h与ρ0,ρmax呈不确定地线性关系(r=0.591~0.817,P<0.01)。肾移植术后早期患者主要出现中度贫血,血压异常,腹泻等不良反应,超出MPA的AUC0-12 h治疗窗范围,更容易出现各种不良反应。结论患者个体间MPA的药动学差异较大;MMF组(500~1000 mg,bid),MMF-T组(500~1000 mg,bid),MMF-DT组(500~750 mg,bid)和EC-MPS组(360~900 mg,bid)的药物剂量与AUC0-12 h呈非线性关系,AUC0-12 h值基本一致;AUC0-12 h与ρ0,ρmax之间相关性一般;治疗窗范围内不良反应出现例数较少。

关键词：霉酚酸类药物早期肾移植药动学剂量依赖性不良反应

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不同产地品种阳春砂仁挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析

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时珍国医国药 2010年第10期21卷 2534-2536页

作者：付琛周日水周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东省高校中药药效物质基础与创新药物研究重点实验室广东广州510632

目的比较不同产地、品种阳春砂仁挥发油的化学成分。方法以水蒸气蒸馏法提取挥发油,分别得到不同样品的挥发油,以气相色谱-质谱(GC—MS)联用技术对其化学成分进行分离和鉴定。通过标准图谱进行对照确定化合物成分,经色谱峰面积归一化法... 详细信息

目的比较不同产地、品种阳春砂仁挥发油的化学成分。方法以水蒸气蒸馏法提取挥发油,分别得到不同样品的挥发油,以气相色谱-质谱(GC—MS)联用技术对其化学成分进行分离和鉴定。通过标准图谱进行对照确定化合物成分,经色谱峰面积归一化法测定其百分含量。结果不同产地、品种阳春砂仁挥发油主成分都比较集中,前三位主成分含量均达到70%以上;且不同产地、品种阳春砂仁挥发油成分种类基本相似,但不同产地挥发油中各成分的比例存在差异。结论道地药材阳春砂仁中乙酸龙脑酯是所有药材中含量最高的,这可能是阳春砂仁为道地药材的依据之一;而经炮制后道地药材阳春砂在成分比例上变化明显。

关键词：阳春砂仁挥发油成分气相色谱-质谱联用法乙酸龙脑酯

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