检索结果-内蒙古大学图书馆

长叶轮钟草根腐病病原菌的分离鉴定及4种芳香中药植物挥发油对其病原菌的抑制作用

微生物学报 2025年第1期65卷 303-322页

作者：李映涛苟珈棋李桥峰李园园秦苗普春霞张爱丽云南中医药大学云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500 云南中医药大学中药学院云南昆明650500

长叶轮钟草[Campanumoea lancifolia(Roxb.)Merr.]是一种具有药食两用价值的新资源,开发利用前景广阔。田间调研发现,随着其种植面积的扩大,根腐病问题日益严重,在根腐病严重的田间,损失可高达40%,占长叶轮钟草所有病害造成损失的75%-9... 详细信息

长叶轮钟草[Campanumoea lancifolia(Roxb.)Merr.]是一种具有药食两用价值的新资源,开发利用前景广阔。田间调研发现,随着其种植面积的扩大,根腐病问题日益严重,在根腐病严重的田间,损失可高达40%,占长叶轮钟草所有病害造成损失的75%-90%,直接导致了果实产量及品质的下降,影响了商品价值及农户的收入,开展长叶轮钟草根腐病的防治工作迫在眉睫。【目的】分离和鉴定长叶轮钟草根腐病病原菌,同时提取4种芳香中药植物的挥发油,研究其对长叶轮钟草病原菌生长的抑制作用。【方法】采用常规组织分离法对典型根腐病症状的长叶轮钟草病害植株进行病原菌的分离纯化,结合形态学和分子生物学手段鉴定病原菌种类,并进行科赫氏法则验证。采用水蒸气蒸馏法从芳香中药植物中提取挥发油,通过牛津杯法评估挥发油的抑菌效果,并通过96孔板法研究了其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MICs)。【结果】从患病的长叶轮钟草植株根系中分离并鉴定到4株病原菌,将分离得到的4株病原菌回接后,植物出现了与大田一致的根腐病症状。经形态学和分子生物学鉴定,4株菌分别为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、茄腐镰刀菌(Fusarium solani)、麦冬炭疽菌(Colletotrichum liriopes)和蔓枯病菌(Stagonosporopsis pogostemonis)。挥发油抑菌实验发现,4种挥发油对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、蔓枯病原菌和麦冬炭疽菌均有很强的抑制效果,抑制率在32.94%-95.29%之间。此外,4种挥发油对4株病原菌MICs在0.031-4.000mg/mL之间。【结论】本研究表明,尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、蔓枯病原菌和麦冬炭疽菌均为长叶轮钟草的致病菌,且茄腐镰刀菌、蔓枯病原菌和麦冬炭疽菌为首次报道的长叶轮钟草根腐病病原菌。此外,基于中医“芳香避秽”的思想理论,本研究选取的4种芳香植物的挥发油对长叶轮钟草的根腐病病原菌均有较强的抑制作用。本研究为长叶轮钟草根腐病植物源农药的开发和未来该资源的绿色种植奠定了科学基础。

关键词：长叶轮钟草根腐病尖孢镰刀菌茄腐镰刀菌麦冬炭疽菌蔓枯病原菌挥发油

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烤制、蒸制三七中皂苷类成分的化学模式识别及定量测定

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中草药 2024年第23期55卷 7979-7988页

作者：张海莹王淑冰敖选丽刘倩如何怡霖赏宇陈兴龙张文平毛晓健王亭张荣平侯博云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

目的建立生三七Notoginseng Radix et Rhizoma与烤制三七、蒸制三七HPLC指纹图谱,并结合多元统计分析研究三七炮制前后化学成分变化,为三七炮制质量评价与质量标志物(Q-Markers)识别提供参考。方法采用HPLC法进行测定,建立不同炮制方法... 详细信息

目的建立生三七Notoginseng Radix et Rhizoma与烤制三七、蒸制三七HPLC指纹图谱,并结合多元统计分析研究三七炮制前后化学成分变化,为三七炮制质量评价与质量标志物(Q-Markers)识别提供参考。方法采用HPLC法进行测定,建立不同炮制方法下的指纹图谱;通过热图分析和层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA)对指纹图谱进行分析评价,同时对10个主要成分进行定量测定,阐明炮制前后差异成分,结合超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法快速预测熟三七中的化合物,对主要色谱峰进行鉴定,分析裂解规律。结果建立三七不同炮制时间、方法的叠加指纹图谱,共匹配13个主要色谱峰,通过对照品比对指认了其中10个色谱峰。烤制230℃、6 h时,新生成的皂苷较蒸制转化率高且含量最大,进而把该烤制条件作为最佳的炮制方法。HCA将不同条件下炮制的三七分为2类,PCA可以明显区分不同炮制方法及时间的三七,OPLS-DA的VIP值确定了人参皂苷Rk1、Rg5、Rk3、Rh4、Rb1、Rd这6个Q-Markers,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对熟三七中化合物进行预测,对其主要色谱峰进行定性分析,推测新生成皂苷可能的裂解规律。已有文献报道人参皂苷Rk3、Rh4均具有补血的作用,验证三七“生打熟补”的传统应用,说明建立的烤制方法具备科学依据。结论建立的HPLC指纹图谱、含量测定、UPLC-Q-TOF-MS/MS定性分析结果指出,与传统蒸制相比,烤制法可使三七中“熟补”的化学成分转化率高;对三七及其炮制品的质量控制具有重要意义。

关键词：三七烤制蒸制指纹图谱化学模式识别三七皂苷R1 人参皂苷

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LC-MS/MS结合分子网络技术快速鉴定生三七和砂烫三七的三萜皂苷类成分

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分析测试学报 2024年第3期43卷 421-431页

作者：陈兴龙周堂白同尘张海莹侯博张荣平云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)和分子网络技术,快速鉴定了生三七和砂烫三七中的三萜皂苷类成分。通过170~220℃高温河砂炒制获得砂烫三七,70%乙醇-水回流提取获得生三七和砂烫三七浸膏,利用D101大孔树脂以70%乙醇-水洗脱获得三七总... 详细信息

采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)和分子网络技术,快速鉴定了生三七和砂烫三七中的三萜皂苷类成分。通过170~220℃高温河砂炒制获得砂烫三七,70%乙醇-水回流提取获得生三七和砂烫三七浸膏,利用D101大孔树脂以70%乙醇-水洗脱获得三七总皂苷。采用Agilent C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5µm),以0.05%甲酸-水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下采集三萜皂苷对照品、生三七总皂苷和砂烫三七总皂苷的二级质谱信息。将经格式转换后的MS/MS数据上传至全球天然产物社会分子网络(GNPS)平台计算分析,借助Cytoscape 3.9.1软件构建可视化分子网络,获得生三七和砂烫三七三萜皂苷的分子网络图。根据对照品、保留时间、特征碎片离子、MS/MS裂解规律和文献报道等信息,从生三七中鉴定出50个三萜皂苷,从砂烫三七中鉴定出60个三萜皂苷,二者共有23个皂苷类成分;生三七单独含有27个成分,包括11个丙二酰基取代的皂苷;砂烫三七单独含有37个成分,包括19个乙酰基取代的成分。其中有11个成分通过对照品进行验证。采用高效液相色谱法测定了生三七和砂烫三七总皂苷中人参皂苷Rb1、Rg1、Rg3、Rh4、Rk3和三七皂苷R1的含量,发现生三七中原生皂苷的含量较高,砂烫三七中转化皂苷的含量较高。

关键词：生三七砂烫三七三萜皂苷液相色谱-串联质谱分子网络

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大黄藤中黄藤素生物合成途径关键酶基因的筛选

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药学学报 2024年第6期59卷 1873-1882页

作者：周兴乾耿应敏张体操郑兰平云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用重点实验室云南昆明650500

黄藤素是大黄藤的主要功效成分,是典型的小檗碱类异喹啉类生物碱,具有广泛的抗炎、抗菌活性。本研究运用代谢组学与转录组学研究,筛选了与黄藤素合成显著相关的差异表达基因(DEGs),并对其中8个DEGs进行了实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证... 详细信息

黄藤素是大黄藤的主要功效成分,是典型的小檗碱类异喹啉类生物碱,具有广泛的抗炎、抗菌活性。本研究运用代谢组学与转录组学研究,筛选了与黄藤素合成显著相关的差异表达基因(DEGs),并对其中8个DEGs进行了实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。代谢组学研究共检测到106种生物碱,其中包含23种异喹啉类生物碱。黄藤素在根与叶的对比组中位居差异代谢物差异倍数前十位,其在根中的相对含量约是叶中的47.5倍。通过转录组学研究,共188条基因注释到异喹啉类生物碱的生物合成途径上,其中36条基因具有显著差异,根与叶的对比组包含33条DEGs,30条DEGs在黄藤素的生物合成途径上。最后,通过代谢组学与转录组学关联分析,筛选到4条基因序列的表达模式与黄藤素具有显著相关性。qRT-PCR实验结果表明8个DEGs的表达趋势均与转录组结果一致。本研究不仅丰富了大黄藤的组学数据,也为黄藤素的生物合成研究奠定了基础,并进一步为其他异喹啉类生物碱生物合成途径上关键酶基因的解析提供了参考。

关键词：大黄藤多组学生物合成途径黄藤素异喹啉类生物碱

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昆明山海棠的苯丙素类成分研究

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药学学报 2024年第6期59卷 1730-1740页

作者：林芷淇朱红波周堂王吉张荣平陈兴龙云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

本文对昆明山海棠的苯丙素类成分进行研究,采用硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离纯化手段,从昆明山海棠的70%乙醇提取物中分离获得24个化合物。化合物1~3为苯丙素类新化合物,结合紫外光... 详细信息

本文对昆明山海棠的苯丙素类成分进行研究,采用硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离纯化手段,从昆明山海棠的70%乙醇提取物中分离获得24个化合物。化合物1~3为苯丙素类新化合物,结合紫外光谱、红外光谱、高分辨质谱和核磁共振波谱等结构鉴定方法,将其鉴定为:苏式-2-(4-羟基-3-甲氧基苯氧基)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,3-丙二醇(1)、赤式-2-(4-羟基-3-甲氧基苯氧基)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,3-丙二醇(2)、赤式-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-3-乙氧基-1,2-丙二醇(3)。化合物4~6、9、14、15、18、19、21~24为首次从雷公藤属植物中分离得到。生物学活性研究表明化合物20在50μmol·L^(-1)下对4T1乳腺癌细胞表现出抑制作用,测得其半数抑制浓度为125.60μmol·L^(-1)。

关键词：昆明山海棠化学成分苯丙素木脂素细胞毒性

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樟叶越橘的酚类成分:二级质谱裂解行为和神经保护作用

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食品科学 2024年第23期45卷 140-149页

作者：周堂王吉乔温皓林芷淇朱红波常月胡炜彦张荣平陈兴龙云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500 昆明医科大学药学院云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500

以樟叶越橘嫩芽为研究对象,利用硅胶、小孔树脂、Sephadex LH-20和RP-18等分离材料,结合制备型和半制备型高效液相色谱,通过高分辨质谱和核磁等结构鉴定手段,从樟叶越橘的嫩芽水提取物中分离鉴定16个酚类化合物,包括7个熊果苷类、4个黄... 详细信息

以樟叶越橘嫩芽为研究对象,利用硅胶、小孔树脂、Sephadex LH-20和RP-18等分离材料,结合制备型和半制备型高效液相色谱,通过高分辨质谱和核磁等结构鉴定手段,从樟叶越橘的嫩芽水提取物中分离鉴定16个酚类化合物,包括7个熊果苷类、4个黄酮类、2个木脂素类和3个其他酚类化合物,其中化合物2~5、7和11~16为首次从越橘属植物中分离得到。二级质谱分析发现在负离子模式下糖苷类成分断裂糖苷键是其主要裂解途径,产生苷元部分或糖基部分的碎片,苷元部分或糖基碎片会继续丢失H_(2)O、CO、CHO或CH_(2)O等中性碎片,产生一系列子离子;黄酮或木脂素类成分丢失羟基、羟甲基、甲氧基等取代基,产生中性碎片或加合离子碎片;逆狄尔斯-阿尔德裂解在黄酮母核的裂解过程中也较为常见。利用H_(2)O_(2)损伤的SH-SY5Y细胞,评价了所有化合物的神经保护作用。结果表明化合物1~4、6、10和16对H_(2)O_(2)损伤SH-SY5Y细胞具有保护作用,其中化合物3(淫羊藿次苷F2)在5、10、20μmol/L剂量条件下其神经保护作用随浓度增加而提高,且存活率在3个剂量浓度条件下均超过80%,神经保护作用强于阳性药物表没食子儿茶素没食子酸酯。以上研究结果说明樟叶越橘含有丰富的酚类成分,这些成分表现出较强的神经保护作用,拓展了樟叶越橘嫩芽作为绿色健康食品的保健功能。

关键词：樟叶越橘酚类成分二级质谱裂解行为神经保护作用

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盐炙小茴香醋酸乙酯部位化学成分及抗酪氨酸酶活性研究

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中草药 2023年第24期54卷 7967-7976页

作者：董维茂朱奎霖杨兴尹蕊邓徐丽陈章贤张洪川王一谋何红平董发武云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明 650500

目的对小茴香Foeniculum vulgare醋酸乙酯部位化学成分及其对酪氨酸酶活性影响的研究.方法利用硅胶、D101大孔吸附树脂、MCI、ODS、Sephadex LH-20及半制备型高效液相等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;... 详细信息

目的对小茴香Foeniculum vulgare醋酸乙酯部位化学成分及其对酪氨酸酶活性影响的研究.方法利用硅胶、D101大孔吸附树脂、MCI、ODS、Sephadex LH-20及半制备型高效液相等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;运用酪氨酸酶催化L-酪氨酸速率法筛选化合物的酪氨酸酶抑制活性,对从盐炙小茴香分离出的化合物进行抗酪氨酸酶活性评价,最后通过分子对接技术对其进行验证.结果从盐炙小茴香醋酸乙酯部位分离得到20个化合物,分别鉴定为 bombasinol A(1)、齐墩果酸(2)、山柰素(3)、槲皮素(4)、(1 R,2R)-1-(4-methoxypheny)propane-1,2-diol(5)、(1 S,2R)-1-(4-methoxyphenyl)propane-1,2-diol(6)、(3S,5R,6S,7E)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one(7)、齐墩果酮酸(8)、刺五加酮(9)、phenylpropanoid(10)、(Z)-4-[30-(β-D-glucopyranosyloxy)butylidene]-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexen-l-one(11)、3-oxo-a-ionol-β-D-glucopyranoside(12)、(+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)、trans-4-(1-propenyl)-phenol-β-D-glucopyranoside(14)、l-O-β-D-glucopyranosyl-4-allybenzene(15)、3-hydroxyestragole β-D-glucopyranoside(16)、黄花夹竹桃黄酮(17)、3,5-dihydroxyestragole 3-O-β-D-glucopyranoside(18)、水杨酸(19)和 benzyl β-D-glucopyranoside(20).酪氨酸酶活性抑制实验表明,盐炙小茴香中分离得到的20个化合物中5个(化合物4、13～15和17)具有良好的抗酪氨酸酶活性,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值分别为 0.783、0.532、0.575、0.113、0.092 mg/mL,阳性药 β-熊果苷 IC50值为1.784 mg/mL,同时分子对接结果也显示化合物17的结合能为-5.74 kJ/mol,化合物15的结合能为-3.5 kJ/mol.结论化合物1为伞形科首次分离得到,化合物3、7～17为茴香属首次分离得到;化合物4、13～15和17均具有较好的抑制酪氨酸酶活性,其中化合物15和17抑制效果最好,分子对接结果也显示化合物17抑制效果强于化合物15,与实验结果一致.

关键词：盐炙小茴香酪氨酸酶活性分子对接槲皮素黄花夹竹桃黄酮

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内生真菌与宿主植物协同调控砷胁迫作用机制研究进展

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微生物学报 2023年第6期63卷 2369-2384页

作者：毕悦代红洋张兴开曹冠华贺森云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用重点实验室云南昆明 650500 云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用重点实验室云南昆明 650500 云南中医药大学云南省傣医药与彝医药重点实验室云南昆明 650500

丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)和深色有隔内生真菌(dark septate endophytes,DSE)是植物根系中最主要的两大类内生真菌,均可与植物根系形成菌根共生体,在促进植物生长,提高重金属等胁迫抗性方面发挥着重要作用.砷(ars... 详细信息

丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)和深色有隔内生真菌(dark septate endophytes,DSE)是植物根系中最主要的两大类内生真菌,均可与植物根系形成菌根共生体,在促进植物生长,提高重金属等胁迫抗性方面发挥着重要作用.砷(arsenic,As)及砷化合物具有较强的毒性,可在植物中富集,造成生物链毒害.本团队一直致力于内生真菌与药用植物生长、活性物质合成,砷吸收、积累关系的研究,并取得了一定的进展.结合团队现有研究和前人研究成果,本文分析归纳了砷胁迫条件下,AMF定殖对宿主植物生长和砷吸收、积累的影响;详细阐述了砷胁迫条件下,宿主植物生理活动、抗氧化系统、激素水平、转录水平响应AMF调控的变化.其后,从宿主植物细胞内、外两个方面总结内生真菌与宿主植物协同调控砷胁迫的作用机制,归纳为"生长稀释效应""菌丝隔离""螯合过滤""菌根固定化(mycorrhizal immobilization)""转运体抑制效应""生物转化作用"和"保宿主、降氧化"等 7 项作用机制,并绘制了不同机制之间的作用关系图.DSE-宿主植物调控砷胁迫的研究相对较少,对已有研究进行梳理归纳,发现DSE增强宿主植物砷耐性机制与AMF类似.本文对研究内生真菌与宿主植物协同调控砷胁迫作用机制,解决土壤砷污染问题,实施生态农业或中药材生态化种植,降低植物关键部位砷积累具有重要的参考价值.

关键词：砷丛枝菌根真菌深色有隔内生真菌胁迫抗性生长稀释效应菌根固定化机制

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黄芩苷与苦参碱分子间相互作用的量子化学计算与验证

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原子与分子物理学报 2025年第4期42卷 8-14页

作者：董志舒启江田爽王皎侯安国王文苹云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用重点实验室昆明650500

为探究苦参碱能极大增强黄芩苷在水中的溶解度的原因,采用量子计算对二者反应过程及共存状态进行分析,并使用单晶衍射和红外图谱验证计算结果.本研究表明,黄芩苷和苦参碱并非简单的以非共价作用相结合,二者存在质子转移现象,反应生成黄... 详细信息

为探究苦参碱能极大增强黄芩苷在水中的溶解度的原因,采用量子计算对二者反应过程及共存状态进行分析,并使用单晶衍射和红外图谱验证计算结果.本研究表明,黄芩苷和苦参碱并非简单的以非共价作用相结合,二者存在质子转移现象,反应生成黄芩苷阴离子和苦参碱阳离子,以静电作用为主导形成共无定型物,导致水溶性极大增加.

关键词：苦参碱黄芩苷质子转移离子共无定型物

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共载姜黄素及顺铂pH敏感脂质体制备及其体外抗乳腺癌活性评价

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中草药 2025年第1期56卷 52-67页

作者：赵笑雨陈怡莹张海亮唐钧泽喻锟潘蕊程欣云南中医药大学中药学院云南省傣医药与彝医药重点实验室云南省南药可持续利用研究重点实验室云南省高校外用给药系统与制剂技术研究重点实验室

目的制备共载姜黄素及顺铂pH敏感脂质体（cisplatin and curcumin co-loaded pH sensitive liposomes,CCL），初步考察其体外抗乳腺癌活性。方法半效法筛选两药联用的最佳比例；薄膜分散法制备CCL；单因素考察最佳处方工艺，并用Box-B... 详细信息

目的制备共载姜黄素及顺铂pH敏感脂质体（cisplatin and curcumin co-loaded pH sensitive liposomes,CCL），初步考察其体外抗乳腺癌活性。方法半效法筛选两药联用的最佳比例；薄膜分散法制备CCL；单因素考察最佳处方工艺，并用Box-Behnken设计-响应面法优化最优处方；激光粒度仪、透射电子显微镜（transmission electron microscope,TEM）考察CCL的粒径、ζ电位及形态；HPLC法测定药物含量；透析袋法考察体外释放规律；CCK-8考察4T1细胞增殖抑制作用；细胞划痕、细胞克隆、DAPI核染细胞实验分别考察4T1细胞迁移能力、增殖能力以及细胞凋亡；溶血实验考察其生物相容性。结果两药联用的最佳比例为顺铂-姜黄素1∶6;CCL的最优处方参数为药脂比1∶29.83，胆脂比1∶11.23，脱氧胆酸钠的用量14.08 mg;CCL在pH 7.0和pH 5.0条件下的粒径分别为（156.54±2.56）、（318.92±12.82）nm,ζ电位分别为（-34.48±2.67）、（-11.07±1.05）m V;TEM下，CCL在pH 7.0条件下形态较规整，呈类球形，无明显裂痕，在pH 5.0条件下粒径增大，形态不规则，出现裂痕；HPLC法测定CCL中姜黄素和顺铂的包封率和载药量分别为（96.45±0.53）%、（79.85±0.20）%和（1.43±0.13）%、（0.30±0.05）%；体外释放结果显示，CCL具有一定的缓释作用，符合一级释放模型；CCK-8实验结果显示，CCL对乳腺癌4T1细胞具有增殖抑制作用，并与药物质量浓度呈正相关；细胞划痕实验结果表明，同一时间下与对照组和其他给药组比较，CCL抑制细胞迁移能力显著增强（P<0.001）;DAPI核染实验结果表明，CCL组细胞核固缩、细胞数目少于其他给药组；细胞克隆形成实验结果表明，CCL组抑制细胞克隆的能力比其他组显著增强（P<0.001）；溶血实验结果表明，CCL生物相容性良好。结论成功制备CCL，且姜黄素和顺铂两药联用比其单用的体外抗乳腺癌效果好，为药物联用治疗乳腺癌的研究提供新思路。

关键词：姜黄素顺铂 pH敏感脂质体薄膜分散法乳腺癌 Box-Behnken设计-响应面法

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