检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2022年第16期53卷 5142-5148页

作者：马晓惠曹小青管丽娜李国栋王一博云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

目的对黄草乌Aconitum vilmorinianum的异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)基因进行克隆及功能研究,为黄草乌中二萜生物碱的生物合成途径解析奠定基础。方法基于黄草乌的转录组数据筛选注释为IDI的基因,设计... 详细信息

目的对黄草乌Aconitum vilmorinianum的异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)基因进行克隆及功能研究,为黄草乌中二萜生物碱的生物合成途径解析奠定基础。方法基于黄草乌的转录组数据筛选注释为IDI的基因,设计特异性引物克隆其编码区,利用相关软件对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR分析其在黄草乌不同器官中的表达情况,在大肠杆菌中表达其重组蛋白,利用功能显色验证其功能。结果从黄草乌中克隆得到1个IDI基因(AvIDI,Genbank登录号MZ814967)。生物信息学分析表明,AvIDI的开放阅读框(open reading frame,ORF)为897 bp,编码298个氨基酸,分子式为C_(1516)H_(2362)N_(414)O_(452)S_(11),相对分子质量为33970,理论等电点为5.94,具有异戊烯基焦磷酸异构酶TNTCCSHPL和WGEHELDY 2个保守序列。系统进化分析显示,AvIDI与黄龙胆Gentiana lutea IDI的亲缘关系最近。表达分析表明,AvIDI基因在黄草乌根、茎、叶和花中均有表达,在茎中表达量最高。在大肠杆菌中成功表达了AvIDI重组蛋白,功能显色实验表明,AvIDI编码有功能的IDI蛋白,能促进大肠杆菌中番茄红素的积累。结论克隆得到AvIDI基因,并通过功能显色实验证明其编码有功能的IDI蛋白,该研究为利用IDI基因调控黄草乌中二萜生物碱生物合成奠定了基础。

关键词：黄草乌异戊烯基焦磷酸酶基因克隆生物信息学分析功能显色

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白背叶楤木乙酸乙酯提取物通过抑制MAPK信号通路干预OVA所致的哮喘小鼠气道炎症

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中药新药与临床药理 2025年第5期36卷 729-742页

作者：龙玉淮李媛媛袁圆徐双娅张蝶陈福长张进伟李宝晶云南中医药大学中药学院南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500 云南省教育厅中药防治哮喘重点实验室云南昆明650500 成都中医药大学药学院四川成都611137 滇池学院云南昆明650228

目的通过网络药理学和实验验证探讨白背叶楤木乙酸乙酯提取物对哮喘小鼠气道炎症的潜在作用机制。方法采用鸡卵白蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠模型,评价白背叶楤木乙酸乙酯提取物对哮喘小鼠气道炎症的改善作用;白背叶楤木乙酸乙酯提取物活性... 详细信息

目的通过网络药理学和实验验证探讨白背叶楤木乙酸乙酯提取物对哮喘小鼠气道炎症的潜在作用机制。方法采用鸡卵白蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠模型,评价白背叶楤木乙酸乙酯提取物对哮喘小鼠气道炎症的改善作用;白背叶楤木乙酸乙酯提取物活性成分靶点与哮喘疾病靶点取交集后,构建“药物-成分-疾病-靶点”的网络,进行GO与KEGG富集分析,对关键活性成分与通路核心靶点进行分子对接;对关键通路进行体内验证。结果白背叶楤木乙酸乙酯提取物显著改善哮喘小鼠肺组织气道炎症浸润、杯状细胞增生及气道高反应;下调哮喘小鼠血清中IgE和OVA-IgE及肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IL-25、IL-33、TSLP(P<0.05,P<0.01,P<0.001)炎症因子的水平。网络药理学显示,白背叶楤木乙酸乙酯提取物干预哮喘的KEGG分析富集于MAPK、HIF-1、PI3K/Akt等信号通路。分子对接结果显示,豆甾醇(stigmasterol)与TLR4、MAPK8、MAPK14有较强的结合。实验验证显示,白背叶楤木乙酸乙酯提取物降低了哮喘小鼠肺组织MYD88、p-P38/P-38和p-JNK/JNK蛋白表达(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论白背叶楤木乙酸乙酯提取物可能是通过抑制MAPK通路的激活而发挥干预哮喘气道炎症作用。

关键词：白背叶楤木乙酸乙酯提取物哮喘气道炎症网络药理学实验验证 MAPK通路小鼠

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药食同源大品种茯苓中多糖与三萜研究进展

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第7期25卷 2561-2573页

作者：浦雪梅李雪何旭东何金彪刘志博徐丹陈晓娇张范俞捷云南中医药大学中药学院暨云南省南药资源可持续利用重点实验室昆明650500

茯苓为经典药食同源中药,有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神等功效,素有“十方九茯苓”之称。茯苓中含有多糖、三萜、甾体等化学成分类群,其中多糖和三萜是主要有效成分群。现代研究表明,茯苓多糖和茯苓三萜具有抗肿瘤、调节免疫、抗氧化... 详细信息

茯苓为经典药食同源中药,有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神等功效,素有“十方九茯苓”之称。茯苓中含有多糖、三萜、甾体等化学成分类群,其中多糖和三萜是主要有效成分群。现代研究表明,茯苓多糖和茯苓三萜具有抗肿瘤、调节免疫、抗氧化等药理活性。茯苓多糖和三萜在传统的煎煮过程溶出率均较低,且茯苓多糖口服吸收率较低的情况下,茯苓依然展现了非常好的活性,提示茯苓多糖和三萜的高活性,因此本文针对茯苓多糖和茯苓三萜类成分的提取分离、结构鉴定、含量测定、结构修饰、生物合成、药理活性和潜在的产品开发价值等方面进行系统综述,以期为茯苓大健康产业的发展提供文献参考。

关键词：茯苓多糖茯苓三萜化学药理活性临床应用

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加拿大一枝黄花中一个新的六取代异戊酰基蔗糖衍生物

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药学学报 2025年第4期60卷 1052-1058页

作者：钱启超董俊芳史路利乔温皓李世香胡炜彦张荣平陈兴龙云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500

本文对加拿大一枝黄花的化学成分进行研究,运用硅胶、微孔树脂、Rp^(-1)8、Sephadex LH-20柱色谱等技术,从加拿大一枝黄花的甲醇提取物中分离得到一个新的蔗糖衍生物。利用一维、二维核磁共振波谱、高分辨质谱和酸水解等方法将其鉴定为2... 详细信息

本文对加拿大一枝黄花的化学成分进行研究,运用硅胶、微孔树脂、Rp^(-1)8、Sephadex LH-20柱色谱等技术,从加拿大一枝黄花的甲醇提取物中分离得到一个新的蔗糖衍生物。利用一维、二维核磁共振波谱、高分辨质谱和酸水解等方法将其鉴定为2,4,6,1′,3′,6′-O-六异戊酰基蔗糖(2,4,6,1′,3′,6′-O-hexaisovaleryl sucrose)。并运用高分辨质谱对其质谱裂解行为进行解析,发现化合物1容易断裂糖苷键,产生分子量为m/z 415的碎片离子。碎片离子m/z415继续以中性或者非中性的形式丢失异戊酰基碎片,产生一系列子离子。化合物1在5、10和20μmol·L^(-1)浓度下能够抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞(BV2)炎症损伤模型的NO生成,表现出神经保护作用,测得其NO半数抑制率(IC_(50))为13.96±0.78μmol·L^(-1)。

关键词：加拿大一枝黄花化学成分异戊酰基蔗糖衍生物 MS/MS裂解行为神经保护作用

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越南参2-C-甲基-D-赤藓糖醇-2，4-环焦磷酸合成酶基因的克隆及表达分析

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分子植物育种 2024年

作者：管丽娜甘静怡唐俊豪徐福荣马晓惠云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南省教育厅民族药物质基准研究重点实验室

2-C-甲基-D-赤藓糖醇-2，4-环焦磷酸合成酶(2C-methyl-D-erythritol 2，4-cytidine pyrophosphate synthase， MCS)是2-甲基赤藓糖醇磷酸(2-C-methl-D-erythritol-4-phospate， MEP)途径的关键酶之一。为初步探究越南参MCS基因的功能，本研究基于越南参转录组数据，从中筛选并成功克隆到2条MCS基因，分别命名为PvMCS1 (GenBank登录号: OQ241377)和PvMCS2 (GenBank登录号: OQ241378)，并对其进行了生物信息学分析和表达情况分析。结果表明：(1) PvMCS1和PvMCS2的开放阅读框(ORF)分别为714 bp和699 bp，分别编码237个和232个氨基酸，编码蛋白的相对分子质量分别为25.42 kD和24.79 kD，理论等电点分别为8.83和7.79。PvMCS1和PvMCS2编码的蛋白质均含有MECDP合酶特征性结构域。(2)系统进化分析显示，PvMCS1和PvMCS2与常春藤MCS的亲缘关系最近。(3) SDS-PAGE电泳结果显示，PvMCSs的重组蛋白均在大肠杆菌中成功表达。(4) RT-qPCR结果表明，PvMCS1和PvMCS2基因在越南参根、茎、叶和根茎中均有表达，且均在根中表达量最高，但在不同组织中的表达水平存在差异。本研究为解析越南参MCSs基因的功能和人参皂苷的生物合成途径提供一定的参考。

关键词：越南参 2-C-甲基-D-赤藓糖醇-2，4-环焦磷酸合成酶生物信息学分析原核表达表达分析

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白背叶楤木芽苞化学成分及其体外抗炎活性研究

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中成药 2025年第1期47卷 101-107页

作者：王娟袁圆尹芃程李绍花陈帅钱海珊李红芳何红平李宝晶云南中医药大学中药学院云南昆明650500 玉溪农业职业技术学院云南玉溪653100 云南中医药大学第一附属医院云南昆明650500 云南中医药大学云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

目的研究白背叶楤木Aralia chinensis *** Nakai芽苞化学成分及其体外抗炎活性。方法白背叶楤木芽苞70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。采用RAW264.7模型评... 详细信息

目的研究白背叶楤木Aralia chinensis *** Nakai芽苞化学成分及其体外抗炎活性。方法白背叶楤木芽苞70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。采用RAW264.7模型评价其体外抗炎活性。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为4-(2,2-dibutoxyethyl)phenol(1)、trans-linalool-3,7-oxide-6-O-β-D-glucopyranoside(2)、2′-O-(9Z,12Z,15Z-octadecatrienoyl)glycerylβ-D-galactopyranoside(3)、quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside(3′→O-3)quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside(4)、syringaresinol-4′-O-β-D-glucopyranoside(5)、p-hydroxybenzaldehyde(6)、7α-hydroxystigmasterol 3-O-β-D-glucopyranoside(7)、trans-p-hydroxycinnamic acid methyl ester(8)、funingensin A(9)、3,4-dihydroxy-acetophenone(10)、N-acetyltyramine(11)、3,4-di-O-caffeoyl quinic acid(12)、chlorogenic acid(13)、aralia cerebroside(14)、caffeic acid methyl ester(15)、tetradecanoic acid(16)。化合物8、10、12、13的IC 50值分别为(22.19±1.59)、(35.25±1.30)、(13.38±0.72)、(15.73±1.16)μmol/L。结论化合物1为新化合物,2~13为首次从楤木属植物中分离得到。化合物8、10、12、13具有良好的体外抗炎活性。

关键词：白背叶楤木芽苞化学成分分离鉴定体外抗炎活性

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葛根芩连汤制法对相态基本特征的影响研究

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时珍国医国药 2023年第5期34卷 1117-1121页

作者：张丽蓉王文苹杨月蕊许家喜彭苑哲王皎闫鸿丽云南中医药大学中药学院云南昆明650500 云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

目的明确不同煎煮方法对葛根芩连汤各相态基本特征的影响。方法以饮片直接煎煮、粗粉无纺布袋或透析袋包煎法分别制备葛根芩连汤,经4000 r·min^(-1)低速离心和3 KD、12000 r/min超滤离心分离各相态,计算得率和占比,借助显微技术观... 详细信息

目的明确不同煎煮方法对葛根芩连汤各相态基本特征的影响。方法以饮片直接煎煮、粗粉无纺布袋或透析袋包煎法分别制备葛根芩连汤,经4000 r·min^(-1)低速离心和3 KD、12000 r/min超滤离心分离各相态,计算得率和占比,借助显微技术观测粒子形态,扫描红外和紫外光谱,以碘显色法测定淀粉含量,并比较α-淀粉酶水解前后沉淀的形态变化。结果不同煎煮方法所得沉淀得率、沉淀在总固含物中的占比、淀粉含量均为饮片直接煎煮>无纺布袋包煎>透析袋包煎,而淀粉在不同相态中含量依次为沉淀>上清液>胶体>真溶液;沉淀富含30μm类球形粒子,酶解前后对沉淀粒子形态无影响,但光谱变化明显;胶体含大量均匀20nm粒子、丁达尔效应明显;不同制法所得汤剂及其各相态的光谱图类似而峰强度不同。结论煎煮方法对汤剂相态基本特征影响显著,且淀粉在各相态中均有分布,在汤剂相态研究过程中应予以重视。

关键词：相态分离汤剂制法葛根芩连方分子间相互作用淀粉含量粒子形态

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基于“ 辨色论质” 的红大戟色泽与蒽醌类成分的相关性研究

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时珍国医国药 2023年第9期34卷 2288-2290页

作者：蒲昕颖陈晓娇徐雅静王欣格刘小莉邱斌云南中医药大学中药学院云南昆明650500 云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500

目的基于红大戟药材粉末颜色与蒽醌类活性成分含量之间的相关性分析,阐释红大戟“辨色论质”中以红褐色为佳的科学内涵,为红大戟质量评价提供参考依据。方法利用色差仪测定红大戟药材粉末颜色,采用HPLC法对芦西定、3-羟基巴戟醌、甲基... 详细信息

目的基于红大戟药材粉末颜色与蒽醌类活性成分含量之间的相关性分析,阐释红大戟“辨色论质”中以红褐色为佳的科学内涵,为红大戟质量评价提供参考依据。方法利用色差仪测定红大戟药材粉末颜色,采用HPLC法对芦西定、3-羟基巴戟醌、甲基异茜草素及6-羟基茜草素进行含量测定;并将两者进行相关性分析。结果红大戟中芦西定、6-羟基茜草素含量及四种蒽醌类成分总量(芦西定、3-羟基巴戟醌、甲基异茜草素及6-羟基茜草素)与L(代表颜色亮度)、a(代表颜色红绿色度)、b(代表颜色黄蓝色度)、E ab(色差值)值呈显著或极显著正相关(P<0.05或P<0.01);3-羟基巴戟醌含量与a值呈显著正相关(P<0.05);甲基异茜草素含量仅与b值呈显著正相关(P<0.05)。结论红大戟颜色与其四种活性成分含量有显著相关性,颜色偏红色的红大戟芦西定、3-羟基巴戟醌、6-羟基茜草素含量及四种蒽醌类成分总量较高,这与传统描述以“红褐色为佳”相符合,此研究为阐释“辨色论质”在红大戟药材传统鉴别中的科学性提供理论依据。

关键词：辨色论质红大戟色度值蒽醌类成分相关性

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侵染鸢尾的番茄斑萎病毒鉴定

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园艺学报 2023年第1期50卷 170-176页

作者：忽靖宇阙开娟缪田丽吴少政王田田张磊董鲜季鹏章董家红云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用重点实验室昆明650500 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所昆明650205

2020年,在云南中医药大学校园发现叶片表现褪绿斑点、坏死环斑症状的鸢尾植株。用电子显微镜在病叶汁液中观察到典型的正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒粒子。在用感病叶片汁液摩擦接种的普通烟、本生烟上观察到系统坏死斑症状,... 详细信息

2020年,在云南中医药大学校园发现叶片表现褪绿斑点、坏死环斑症状的鸢尾植株。用电子显微镜在病叶汁液中观察到典型的正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒粒子。在用感病叶片汁液摩擦接种的普通烟、本生烟上观察到系统坏死斑症状,中国辣椒(PI152225)的接种叶片出现局部坏死斑,但无系统侵染。为进一步明确病原,用RT-PCR扩增番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)的NSs和N基因,序列测定发现,分别与分离自云南番茄和旱金莲的TSWV分离物具有最高的氨基酸序列相似性(99.79%和100%)。结果表明引起鸢尾褪绿斑点病的病原是番茄斑萎病毒。

关键词：鸢尾番茄斑萎病毒 N基因 NSs基因

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丹参酮生物合成途径中C20位氧化酶改造研究

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中国中药杂志 2023年第9期48卷 2298-2306页

作者：曹小青马晓惠程亚田李琦爽卜俊玲马莹郭娟云南中医药大学中药学院、云南省南药可持续利用研究重点实验室云南昆明650500 中国中医科学院中药资源中心、道地药材国家重点实验室培育基地北京100700

丹参酮类化合物是丹参主要有效成分之一,在心血管类疾病治疗中发挥重要作用,丹参酮类化合物的微生物异源生产能够为含丹参中药制剂生产提供大量原材料,降低提取成本,缓解临床用药压力。丹参酮生物合成途径包含多个P450酶,高效优势的催... 详细信息

丹参酮类化合物是丹参主要有效成分之一,在心血管类疾病治疗中发挥重要作用,丹参酮类化合物的微生物异源生产能够为含丹参中药制剂生产提供大量原材料,降低提取成本,缓解临床用药压力。丹参酮生物合成途径包含多个P450酶,高效优势的催化元件是丹参酮微生物生产的基础,该研究以丹参酮途径关键P450-C20位羟化酶CYP76AK1为研究对象,使用SWISS-MODEL、Robetta和AlphaFold2这3种蛋白建模方法,对所得蛋白模型进行分析,获取可靠蛋白结构,以分子对接和同源比对进行突变体蛋白的半理性设计。筛选发现了影响CYP76AK1氧化活性的关键氨基酸位点,通过真核表达对所得突变体进行体外功能研究。研究获得了对11-羟基柳杉酚具有连续氧化功能的CYP76AK1突变体元件,解析了影响其氧化活性的4个关键氨基酸位点,并根据突变结果分析3种蛋白建模方法的可靠性。研究首次报道了丹参中CYP76AK1的有效蛋白改造位点,为丹参酮类化合物合成生物学研究提供了C20位不同氧化活性的催化元件,为解析C20位修饰P450蛋白的连续氧化机制奠定基础。

关键词：细胞色素P450 定向进化突变体连续氧化 11-羟基柳杉酚

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