检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2024年

作者：刘春兰品初次尔李奇施辉能宋占华杨红磊范伟云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南农业大学资源与环境学院

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，... 详细信息

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，编码506个氨基酸残基，相对分子量56.61 kD，理论等电点(pI) 5.72，属于亲水性不稳定蛋白，亚细胞定位于细胞核，符合转录因子特征。PnSTOP1蛋白拥有四个Cys2His2锌指保守结构域，其二级结构主要包括22.92%的α-螺旋、4.35%的β-折叠、63.44%的无规则卷曲和9.29%延伸链，PnSTOP1蛋白与茶树(Camellia sinensis) STOP1蛋白的亲缘关系最近。对三七PnSTOP1基因的启动子顺式元件进行预测，显示该序列包含激素响应元件、光响应元件和参与防御和应激的顺式元件等。PnSTOP1基因在须根中的表达量显著高于其他部位，在Al胁迫条件下，PnSTOP1基因在三七须根中的相对表达量与对照相比没有显著差异，呈组成型表达，推测PnSTOP1可能参与调控三七对Al胁迫的抗性，为进一步降低三七Al毒害提供新的可能。

关键词：三七铝胁迫基因克隆亚细胞定位表达分析

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当归肉桂醇脱氢酶AsCAD功能鉴定及表达分析

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生物技术通报 2025年第2期41卷 295-308页

作者：向春繁李勒松王娟梁艳丽杨生超栗孟飞赵艳云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室农学与生物技术学院昆明650201 云南特色植物提取实验室昆明650106 甘肃农业大学农学院兰州730070

【目的】探究当归中木质素合成关键肉桂醇脱氢酶的催化活性及表达特性,为解决当归抽薹后根部木质化问题提供新的研究思路和理论基础。【方法】以非木质化根(UBP)和木质化根(BP)为实验材料,基于转录组数据挖掘候选肉桂醇脱氢酶基因;克隆A... 详细信息

【目的】探究当归中木质素合成关键肉桂醇脱氢酶的催化活性及表达特性,为解决当归抽薹后根部木质化问题提供新的研究思路和理论基础。【方法】以非木质化根(UBP)和木质化根(BP)为实验材料,基于转录组数据挖掘候选肉桂醇脱氢酶基因;克隆AsCADs基因的全长CDS,构建pET-28a-AsCADs原核表达载体,转入大肠杆菌(***)BL21(DE3),并诱导重组蛋白表达及体外酶活测定;生物信息学分析具有活性的CAD蛋白序列;利用实时荧光定量PCR对木质化和非木质化根部进行基因表达模式分析。【结果】共鉴定出30个AsCADs基因,其中挖掘并克隆到3个肉桂醇脱氢酶基因AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24,均包含2个Zn^(2+)结合位点和1个NAD(H)辅酶结合位点。体外酶活测定发现AsCAD1能催化松柏醛和咖啡醛还原为相应的醇,AsCAD4和AsCAD24能催化对羟基肉桂醛、松柏醛、咖啡醛和芥子醛还原为相应的醇。AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24开放阅读框为1083 bp,编码360个氨基酸,理论等电点(p I)为6.1和5.52,AsCAD1为疏水性蛋白,AsCAD4和AsCAD24为亲水性蛋白,均不含跨膜结构和信号肽,亚细胞定位均定位在细胞质中。RT-q PCR结果显示AsCAD1在非木质化根(UBP)中的表达量高,而AsCAD4和AsCAD24在木质化根(BP)中的表达量高。【结论】成功克隆了AsCAD1、AsCAD4和AsCAD24基因,原核表达后蛋白均具有催化活性,其相对表达水平在木质化与非木质化根中存在差异。

关键词：当归木质化肉桂醇脱氢酶原核表达体外酶活表达分析

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藜芦和毛叶藜芦GABA-T基因的生物信息分析、克隆及原核表达

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分子植物育种 2024年

作者：徐艳姣洪开云杨润刘祥宇卢宜旺向贵生和四梅梁艳丽云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室

环巴胺(Cyclopamine)是从藜芦属(Veratrum)植物中提取出的一种甾体类生物碱，具有抗癌抗真菌等功效，γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-transaminase， GABA-T)在环巴胺合成中发挥着关键作用。为鉴定藜芦(Veratrum nigrum L.)和毛叶藜芦(Veratrum... 详细信息

环巴胺(Cyclopamine)是从藜芦属(Veratrum)植物中提取出的一种甾体类生物碱，具有抗癌抗真菌等功效，γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-transaminase， GABA-T)在环巴胺合成中发挥着关键作用。为鉴定藜芦(Veratrum nigrum L.)和毛叶藜芦(Veratrum grandiflorum Loes.)植物中参与环巴胺的预测前体藜芦嗪生物合成的GABA-T基因，本研究以药用植物藜芦和毛叶藜芦的根和叶的转录组数据为基础，对2个GABA-T基因编码蛋白进行一系列的生物信息学分析，分别克隆得到两条全长GABA-T序列，命名为VgraGABAT03和VnigGABAT02。这两个序列的开放阅读框(ORF)长度分别为1 503 bp和1 476 bp，分别编码由500个和491个氨基酸组成的2个蛋白产物，其相对分子质量分别为55.54 kD和53.73 kD；2个蛋白都为亲水蛋白，亚细胞定位于线粒体；VgraGABAT03蛋白的三级结构与加州藜芦(Veratrum californicum Durand.)的GABAT2蛋白的三级结构同源性为98.40%。将这两个基因分别构建到表达载体pET-28a上，进行蛋白原核表达发现2个蛋白均能稳定表达。本研究为进一步验证GABA-T基因的功能和藜芦嗪的生物合成提供参考。

关键词：环巴胺藜芦嗪生物信息学分析基因克隆原核表达

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茉莉酸甲酯对三七叶总黄酮含量及其应答基因表达量的影响

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中草药 2023年第2期54卷 631-640页

作者：李莹张广辉王前范伟杨生超云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201

目的研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对三七叶总黄酮含量的影响,探究其在转录水平上对类黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate,JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法使用不同浓度(0、200、400、800μmol/L)的MeJA喷施一年生三... 详细信息

目的研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对三七叶总黄酮含量的影响,探究其在转录水平上对类黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate,JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法使用不同浓度(0、200、400、800μmol/L)的MeJA喷施一年生三七叶片7d,测定植株生物量以及叶片总黄酮含量;基于MeJA处理的一年生三七叶转录组数据,挖掘类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因,并分析它们在200μmol/L的MeJA处理7、14 d后的表达模式;使用200μmol/L的MeJA喷施一年生三七叶片,采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因在处理0、2、4、6、10、14h后的相对表达量。结果不同浓度MeJA处理均显著提高一年生三七叶总黄酮的含量,但对其生物量的影响并未达到显著水平。外源MeJA诱导了三七中类黄酮生物合成和JA信号通路关键酶基因的表达。其中,类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL、F3H、FLS和IFS呈现上调表达,而CHS和CHI呈下调表达;JA信号通路基因LOX、AOS、AOC、OPR、ACX、MEP、KAT、JAR1、JAZ和MYC都呈上调表达。研究发现,当三七受到外源MeJA诱导时,JAZ阻遏蛋白介导了JA信号对类黄酮生物合成基因表达模式的影响。结论外源MeJA对一年生三七叶总黄酮含量的正向调控主要是通过增强JA信号通路基因JAZ和MYC,以及类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL和IFS的表达来实现的。

关键词：三七茉莉酸甲酯类黄酮基因表达茉莉酸信号通路

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雪胆BAHD型乙酰基转移酶原核表达

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分子植物育种 2024年

作者：舒彦宇陈庚李志远冯孝林向贵生张广辉杨生超云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南省特色植物提取实验室

雪胆甲素和雪胆乙素是雪胆中的关键药用活性成分。雪胆甲素因其具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，使其成为一类新型抗癌药物。在雪胆甲素的生物合成途径中，乙酰基转移酶在其最后形成过程中起到关键作用，其能催化雪胆乙素的C-25位羟基进行... 详细信息

雪胆甲素和雪胆乙素是雪胆中的关键药用活性成分。雪胆甲素因其具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，使其成为一类新型抗癌药物。在雪胆甲素的生物合成途径中，乙酰基转移酶在其最后形成过程中起到关键作用，其能催化雪胆乙素的C-25位羟基进行乙酰基化，生成雪胆甲素。本研究基于雪胆的转录组数据，以雪胆的块茎为材料，通过PCR扩增得到雪胆中的3条乙酰基转移酶基因HcACT1、HcACT2和HcACT3，HcACT1、HcACT2和HcACT3的开放阅读框(ORF)长度分别为1 299、1 293和1 392 bp；编码蛋白相对分子质量分别为47 550.45、47 548.84和52 255.53；预测等电点分别为4.99、5.55、6.10，亲水性在-0.039～-0.253之间，无跨膜结构域，均位于细胞膜；蛋白质二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主，三级结构分别与7w26.2.A、2bgh.1.A和7dex.1.A相似。将3个ACT基因构建在表达载体PET-32a上，利用大肠杆菌BL21中进行原核表达，成功获得3个基因的重组蛋白。本研究的结果为进一步验证雪胆乙酰基转移酶基因功能和合成雪胆甲素提供了基础。

关键词：雪胆葫芦素生物合成乙酰基转移酶基因克隆原核表达

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人参和三七叶绿体基因组密码子偏好性比较分析

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分子植物育种 2024年

作者：早浩龙李奇黄珍华刘春兰施辉能张广辉杨生超罗瑜范伟云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南农业大学资源与环境学院云南农业大学食品科学技术学院

为探讨人参(Panax ginseng C. A. Meyer)和三七(Panax notoginseng (Burk.) ***)叶绿体基因的密码子偏好性(codon usage bias， CUB)及其影响因素，找到二者在进化过程中的异同性。本研究综合运用CodonW 1.4.2、CUSP、Graphpad Prism 8.0.2软件以及Python编程语言，系统分析了人参和三七叶绿体基因组编码序列(coding sequence， CDS)的CUB模式、变异来源、高频密码子以及最优密码子。结果表明，人参和三七叶绿体基因组CUB主要受自然选择影响，但影响程度在人参中大于三七；人参和三七叶绿体基因组CUB较弱，均表现出高度相似的CUB特征，倾向于使用以A/T结尾的密码子，但相比而言，人参对A/T的偏好性更强。进一步对密码子使用频率比较发现，酿酒酵母和本氏烟草均可作为人参和三七叶绿体基因异源表达的适配受体。本研究结果可为深入理解五加科人参属药用植物叶绿体基因组密码子使用模式及进化规律提供参考。

关键词：人参三七叶绿体基因组密码子偏好性最优密码子

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滇黄精多糖提取工艺优化及体外抗氧化和降血糖活性分析

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南方农业学报 2025年第3期56卷 874-886页

作者：廖谦梁正维寸竹徐素素管彦辉赵银河陈军文西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201

[目的]优化滇黄精多糖提取工艺,分析其体外抗氧化及降血糖活性,以期为滇黄精产品规模化开发提供参考依据。[方法]使用复合酶法,将木瓜蛋白酶复合纤维素酶按一定比例加入至滇黄精提取液中,采用单因素—响应面试验提取滇黄精多糖,优化滇... 详细信息

[目的]优化滇黄精多糖提取工艺,分析其体外抗氧化及降血糖活性,以期为滇黄精产品规模化开发提供参考依据。[方法]使用复合酶法,将木瓜蛋白酶复合纤维素酶按一定比例加入至滇黄精提取液中,采用单因素—响应面试验提取滇黄精多糖,优化滇黄精多糖在料液比、pH、复合酶添加量及酶解温度下的最佳提取条件,并评价最佳提取条件下得到滇黄精多糖的体外抗氧化活性和降血糖活性。[结果]滇黄精多糖的最佳提取工艺:料液比1∶23(g/mL)、pH 4.6、复合酶添加量14.5 g/L、酶解温度52℃,在此条件下获得滇黄精多糖提取率为22.27%,与理论值(22.31%)无显著差异(P>0.05);各因素对多糖提取率的影响大小为酶解温度>pH>料液比>复合酶添加量,4个因素对滇黄精多糖提取率均有极显著影响(P<0.01)。优化工艺提取得到的滇黄精多糖对2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)阳离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基表现出较强的清除作用,半抑制浓度(IC_(50))分别为0.26、0.54、1.07和0.59 mg/mL,有明显的铁离子还原能力,IC_(50)为0.62 mg/mL;以阿卡波糖作阳性对照,当质量浓度为1.2 mg/mL时,滇黄精多糖对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率分别为35.65%和49.83%,表现出一定的降血糖能力。[结论]经单因素试验和响应面试验优化的提取工艺可提高滇黄精多糖提取率,得到的多糖具有较强的体外抗氧化及降血糖活性。

关键词：滇黄精多糖响应面法抗氧化活性降血糖活性

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三七开花生物学与繁育系统研究

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广西植物 2025年第2期45卷 360-376页

作者：李可铖王富贵王再旺张晓玉尤古丽杨生超梁艳丽云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 寻甸县农业农村局昆明655200

三七(Panax notoginseng)作为我国的名贵中药材,存在繁殖率低和野生资源灭绝等问题,为探究三七的开花生物学与繁育系统特征,阐明其自然状态下结实率低的原因,该文对其开花生物学参数、传粉系统和人工授粉进行了研究。结果表明:(1)三七... 详细信息

三七(Panax notoginseng)作为我国的名贵中药材,存在繁殖率低和野生资源灭绝等问题,为探究三七的开花生物学与繁育系统特征,阐明其自然状态下结实率低的原因,该文对其开花生物学参数、传粉系统和人工授粉进行了研究。结果表明:(1)三七单花花期4~5 d,花序花期20~25 d,群体花期约60 d。(2)存在雌雄异位异熟现象,为典型的雄蕊先熟类型。(3)花粉粒为中型花粉粒,具有3条萌发孔沟。(4)开花第1天的花粉活力最高,开花第12天的柱头可授性最高。(5)杂交指数(OCI)为4,繁育系统为异交型,部分自交亲和,需要传粉者,花粉/胚珠比为(450.0~1037.5),繁育系统为专性异交。(6)由授粉实验可知,繁育系统类型为自交授粉和异交授粉同时存在的混合交配系统,虫媒与风媒均可帮助其完成传粉。(7)访花昆虫有中华蜜蜂(Apis cerana)、黑带食蚜蝇(Episyrphus balteatus)和点蜂缘蝽(Riptortus pedestris),中华蜜蜂是主要传粉昆虫。综上认为,三七的繁育系统为兼性异交型,部分自交亲和,需风媒与虫媒传粉,花粉受限与花果期病害严重是影响其结实率的关键因素。该研究结果可为三七的良种选育及其扩繁提供理论依据。

关键词：三七开花生物学繁育系统访花昆虫传粉生物学

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滇黄精炮制前后化学成分变化研究

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中草药 2024年第11期55卷 3647-3658页

作者：管彦辉梁正维施扬徐素素廖谦王藤伯年国杨生超张广辉郭云胶党菱婧龚福明陈军文赵明云南农业大学农学与生物技术学院/茶学院云南昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心/云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南特色植物提取实验室云南昆明650201 德宏师范高等专科学校云南芒市678400 德宏职业学院云南芒市678400

目的探究滇黄精Polygonatum kingianum传统炮制过程化学成分变化规律。方法按照九蒸九晒法进行滇黄精炮制,应用分光光度法和HPLC测定炮制过程中总多糖、总皂苷、总多酚、总黄酮和游离氨基酸的含量。应用UPLC-MS/MS的广泛靶向代谢组学技... 详细信息

目的探究滇黄精Polygonatum kingianum传统炮制过程化学成分变化规律。方法按照九蒸九晒法进行滇黄精炮制,应用分光光度法和HPLC测定炮制过程中总多糖、总皂苷、总多酚、总黄酮和游离氨基酸的含量。应用UPLC-MS/MS的广泛靶向代谢组学技术检测原料和炮制后的代谢产物。结果随着炮制次数的增加,颜色逐渐加深,第3次蒸制后为深褐色,第4次至炮制结束缓慢转变为黑色。滇黄精原料具有麻味,第4蒸之后麻味消失,变为酸甜味。炮制过程中多糖和16种游离氨基酸含量降低,总皂苷、总黄酮和总多酚含量增加。广泛靶向代谢组学共检测到419个代谢物,氨基酸及其衍生物66个,脂质65个,酚酸类52个,黄酮类51个,有机酸42个,生物碱41个,核苷酸及其衍生物32个,甾体9个,木脂素和香豆素7个,异黄酮1个,萜类3个,其他类物质50个。结论系统阐述了滇黄精九蒸九晒炮制过程中化学成分的变化,九蒸九晒对滇黄精中的化学成分影响较大,随着炮制时间的增加,氨基酸及其衍生物和生物碱类化合物的相对丰度降低,有机酸和酚酸类相对丰度增加等。该研究可为炮制滇黄精有效成分的筛选与质量评价提供参考,同时差异性成分的发现为研究滇黄精生熟饮片中差异性物质的分析提供新思路,对滇黄精的扩大开发利用有重要意义。

关键词：传统中药滇黄精代谢组学九蒸九晒成分变化多糖皂苷多酚黄酮氨基酸 UPLC-MS/MS 炮制脂质酚酸有机酸生物碱核苷酸甾体木脂素香豆酸异黄酮萜类

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滇黄精酸奶的配方优化及品质评价

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食品工业科技 2024年第15期45卷 195-202页

作者：王藤蒋帅涵刘琨毅李若愚梁正维伯年国马燕唐卿雁赵明云南农业大学茶学院&食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心&云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南特色植物提取实验室云南昆明650106 宜宾职业技术学院五粮液技术与食品工程学院四川宜宾644003

以奶粉、滇黄精膏、蔗糖为主要原料,发酵研制滇黄精酸奶。通过感官审评、单因素实验结合响应面试验,优化得到滇黄精酸奶的最佳配方。此外,以优化后的配方制备酸奶,比较滇黄精酸奶与原味酸奶(未添加滇黄精)的理化指标、微生物指标及抗氧... 详细信息

以奶粉、滇黄精膏、蔗糖为主要原料,发酵研制滇黄精酸奶。通过感官审评、单因素实验结合响应面试验,优化得到滇黄精酸奶的最佳配方。此外,以优化后的配方制备酸奶,比较滇黄精酸奶与原味酸奶(未添加滇黄精)的理化指标、微生物指标及抗氧化能力。结果表明,滇黄精酸奶的最佳配方为滇黄精膏添加量1.5%,蔗糖添加量10%,发酵剂添加量0.02%。滇黄精酸奶口感细腻,酸甜比适中,带有清淡的滇黄精风味,感官评分为87.62分。各项理化指标和微生物指标均符合国家标准。抗氧化能力与质构分析表明,与原味酸奶相比,添加滇黄精膏显著提升了酸奶的抗氧化能力与稳定性。微观结构分析表明,滇黄精膏与乳蛋白紧密结合,形成了结构致密的乳凝胶,改善了酸奶的黏度值。综上,复配滇黄精膏开发了一种功能酸奶,具有一定的市场价值。

关键词：滇黄精膏酸奶配方优化产品品质

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