检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2024年第12期40卷 170-181页

作者：徐艳姣洪开云卢宜旺汪长清梁艳丽和四梅云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室昆明650201 丘北长水实验中学文山663200

【目的】22(R)-羟基胆固醇是藜芦甾体生物碱合成的重要前体,通过异源表达验证藜芦(Veratrum nigrum)中胆固醇C-22位羟化酶的功能,并构建酵母底盘生产22(R)-羟基胆固醇,为藜芦甾体生物碱的生物合成途径解析奠定基础。【方法】基于藜芦转... 详细信息

【目的】22(R)-羟基胆固醇是藜芦甾体生物碱合成的重要前体,通过异源表达验证藜芦(Veratrum nigrum)中胆固醇C-22位羟化酶的功能,并构建酵母底盘生产22(R)-羟基胆固醇,为藜芦甾体生物碱的生物合成途径解析奠定基础。【方法】基于藜芦转录组数据,从藜芦根中克隆3条全长的CYP90B亚家族基因序列,构建到酵母Y33表达载体,并转入胆固醇酵母底盘进行功能验证。通过高效液相色谱、液相色谱-质谱联用仪检测酵母摇瓶发酵产物,筛选到具有胆固醇C-22位羟化酶催化功能的酶VnCYP90B27-1,利用多片段组装、同源重组和醋酸锂转化等方法将VnCYP90B27-1整合到酵母染色体,构建22(R)-羟基胆固醇的酵母底盘。【结果】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)显示,3条候选基因在根和叶中的表达与转录组表达趋势一致,VnCYP90B27-1在藜芦根中的表达量极显著高于叶。系统发育树结果表明,VnCYP90B27-1与加州藜芦的VcCYP90B27和藜芦的VnCYP90B27有较高的同源性,同属于CYP90B亚家族。此外,酵母异源表达结果表明,VnCYP90B27-1具有胆固醇C-22位羟化酶功能,并成功实现酿酒酵母异源合成22(R)-羟基胆固醇,摇瓶产量达(5.37±0.37)mg/L。【结论】成功克隆并验证了藜芦22(R)-羟基胆固醇合成基因VnCYP90B27-1的功能,构建了22(R)-羟基胆固醇酵母底盘,证明在酿酒酵母中VnCYP90B27-1的催化活性比加州藜芦的VcCYP90B27高,为甾体生物碱异源合成提供基因资源。

关键词：藜芦 CYP90B27 功能验证 22(R)-羟基胆固醇酵母底盘

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三七PnSTOP1转录因子基因的克隆与表达分析

引用

分子植物育种 2024年

作者：刘春兰品初次尔李奇施辉能宋占华杨红磊范伟云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南农业大学资源与环境学院

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，... 详细信息

克隆三七锌指转录因子基因PnSTOP1，分析其编码蛋白特征、亚细胞定位和在铝(Al)胁迫下的表达特征，为探索PnSTOP1基因在三七抗Al胁迫中的作用机制奠定基础。本研究从三七基因组中挖掘并克隆获得PnSTOP1基因，其CDS序列长度为1 521 bp，编码506个氨基酸残基，相对分子量56.61 kD，理论等电点(pI) 5.72，属于亲水性不稳定蛋白，亚细胞定位于细胞核，符合转录因子特征。PnSTOP1蛋白拥有四个Cys2His2锌指保守结构域，其二级结构主要包括22.92%的α-螺旋、4.35%的β-折叠、63.44%的无规则卷曲和9.29%延伸链，PnSTOP1蛋白与茶树(Camellia sinensis) STOP1蛋白的亲缘关系最近。对三七PnSTOP1基因的启动子顺式元件进行预测，显示该序列包含激素响应元件、光响应元件和参与防御和应激的顺式元件等。PnSTOP1基因在须根中的表达量显著高于其他部位，在Al胁迫条件下，PnSTOP1基因在三七须根中的相对表达量与对照相比没有显著差异，呈组成型表达，推测PnSTOP1可能参与调控三七对Al胁迫的抗性，为进一步降低三七Al毒害提供新的可能。

关键词：三七铝胁迫基因克隆亚细胞定位表达分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三七磷酸吡哆醛依赖性酶和鸟氨酸环脱氨酶原核表达

引用

分子植物育种 2025年

作者：刘启泽彭玉青向贵生张广辉云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室

三七素(dencichine)是药用植物三七(Panax notoginseng (Burkill) F. H. Chen)重要止血活性成分，其生物合成的直接前体是L-2，3-二氨基丙酸(L-DAP)。课题组提出了一个可能的三七中三七素生物合成途径，其中包括了磷酸吡哆醛依赖性酶(PA... 详细信息

三七素(dencichine)是药用植物三七(Panax notoginseng (Burkill) F. H. Chen)重要止血活性成分，其生物合成的直接前体是L-2，3-二氨基丙酸(L-DAP)。课题组提出了一个可能的三七中三七素生物合成途径，其中包括了磷酸吡哆醛依赖性酶(PALP)和鸟氨酸环脱氨酶(OCD)等关键酶，为了验证这两类基因的功能，解析三七中L-DAP的生物合成途径。本研究从三七中克隆了4条PALP基因和1条OCD基因，PnPALP基因全长915～1 428 bp，编码305～476个氨基酸，PnOCD全长1 023 bp，编码341个氨基酸。生物信息学分析发现，除了PnPALP3，其余理论等电点均低于7；除了PnPALP8，其余均为稳定性蛋白；所有蛋白均不存在跨膜结构域，二级结构主要是α-螺旋和无规则卷曲。蛋白三级结构预测显示，PnPALP1的蛋白结构与嗜热细菌HB8的色氨酸合酶的同源性为48%；PnPALP3、PnPALP5、PnPALP8的蛋白结构与拟南芥的半胱氨酸合酶的同源性分别为49%、55%、52%；PnOCD的蛋白结构与恶臭假单胞菌的鸟氨酸环脱氨酶的同源性为31%。原核表达显示，4个PnPALP蛋白均能在大肠杆菌BL21中表达得到可溶性蛋白，而PnOCD为包涵体蛋白，融合MBP标签后，增加了该蛋白的溶解性。本研究可为PnPALP和PnOCD基因的功能验证提供条件，为解析三七素前体L-DAP的合成途径提供参考。

关键词：磷酸吡哆醛依赖性酶鸟氨酸环脱氨酶 L-2，3-二氨基丙酸原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三七休眠调控因子DOG基因家族的全基因组鉴定及表达模式

引用

中草药 2025年第8期56卷 2898-2913页

作者：黄敏李朝林葛娜贾金山王清艳张金燕陈军文云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201

目的研究三七Panax notoginseng DOG(PnDOG)基因家族结构特征和表达模式及其在三七种子后熟休眠和萌发的作用机制。方法基于三七的全基因组和转录组数据,利用生物信息手段分析PnDOG家族的理化性质、基因结构、系统发育关系、保守结构域... 详细信息

目的研究三七Panax notoginseng DOG(PnDOG)基因家族结构特征和表达模式及其在三七种子后熟休眠和萌发的作用机制。方法基于三七的全基因组和转录组数据,利用生物信息手段分析PnDOG家族的理化性质、基因结构、系统发育关系、保守结构域、顺式作用元件和表达模式;探讨了外施赤霉素(gibberellins,GA)和脱落酸(abscisic acid,ABA)激素对三七种子的影响,以及PnDOG基因家族对这些外源激素的响应机制。结果PnDOG基因家族包含16个成员,不均匀地分布在8条染色体上。PnDOG基因都含有外显子,编码216~514个氨基酸,均为亲水性蛋白,亚细胞定位预测显示均位于细胞核中。系统进化将PnDOG基因分为3个亚组,不同亚组成员的基因结构存在差异。共线性分析显示,串联重复是PnDOG基因扩增的主要驱动因素。启动子顺式作用元件分析显示,PnDOG基因的启动子区含有大量激素响应、胁迫响应以及少量胚发育响应等元件。基因本体(geneontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析显示,PnDOG基因可能在非生物应激和激素诱导中起作用。基因表达分析和qRT-PCR分析显示,PnDOG基因在三七不同组织中均有表达,并具有明显的组织特异性。部分PnDOG基因在三七种子不同后熟阶段和激素处理下的表达量均存在显著差异。发现PnDOG1和PnDOG14在种子中高表达且受激素强烈诱导,其表达量随后熟时间的增加逐渐下降,推测PnDOG1和PnDOG14是调控三七种子后熟休眠的关键基因。结论大多数PnDOG基因的高表达可能与三七种子的后熟休眠形成有关,在后熟过程中通过响应激素信号调控种子休眠解除。

关键词：三七种子休眠 DOG基因家族表达模式外源激素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

雪胆BAHD型乙酰基转移酶原核表达

引用

分子植物育种 2024年

作者：舒彦宇陈庚李志远冯孝林向贵生张广辉杨生超云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南省特色植物提取实验室

雪胆甲素和雪胆乙素是雪胆中的关键药用活性成分。雪胆甲素因其具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，使其成为一类新型抗癌药物。在雪胆甲素的生物合成途径中，乙酰基转移酶在其最后形成过程中起到关键作用，其能催化雪胆乙素的C-25位羟基进行... 详细信息

雪胆甲素和雪胆乙素是雪胆中的关键药用活性成分。雪胆甲素因其具有抑制肿瘤细胞增殖的作用，使其成为一类新型抗癌药物。在雪胆甲素的生物合成途径中，乙酰基转移酶在其最后形成过程中起到关键作用，其能催化雪胆乙素的C-25位羟基进行乙酰基化，生成雪胆甲素。本研究基于雪胆的转录组数据，以雪胆的块茎为材料，通过PCR扩增得到雪胆中的3条乙酰基转移酶基因HcACT1、HcACT2和HcACT3，HcACT1、HcACT2和HcACT3的开放阅读框(ORF)长度分别为1 299、1 293和1 392 bp；编码蛋白相对分子质量分别为47 550.45、47 548.84和52 255.53；预测等电点分别为4.99、5.55、6.10，亲水性在-0.039～-0.253之间，无跨膜结构域，均位于细胞膜；蛋白质二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主，三级结构分别与7w26.2.A、2bgh.1.A和7dex.1.A相似。将3个ACT基因构建在表达载体PET-32a上，利用大肠杆菌BL21中进行原核表达，成功获得3个基因的重组蛋白。本研究的结果为进一步验证雪胆乙酰基转移酶基因功能和合成雪胆甲素提供了基础。

关键词：雪胆葫芦素生物合成乙酰基转移酶基因克隆原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

藜芦和毛叶藜芦GABA-T基因的生物信息分析、克隆及原核表达

引用

分子植物育种 2024年

作者：徐艳姣洪开云杨润刘祥宇卢宜旺向贵生和四梅梁艳丽云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室

环巴胺(Cyclopamine)是从藜芦属(Veratrum)植物中提取出的一种甾体类生物碱，具有抗癌抗真菌等功效，γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-transaminase， GABA-T)在环巴胺合成中发挥着关键作用。为鉴定藜芦(Veratrum nigrum L.)和毛叶藜芦(Veratrum... 详细信息

环巴胺(Cyclopamine)是从藜芦属(Veratrum)植物中提取出的一种甾体类生物碱，具有抗癌抗真菌等功效，γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-transaminase， GABA-T)在环巴胺合成中发挥着关键作用。为鉴定藜芦(Veratrum nigrum L.)和毛叶藜芦(Veratrum grandiflorum Loes.)植物中参与环巴胺的预测前体藜芦嗪生物合成的GABA-T基因，本研究以药用植物藜芦和毛叶藜芦的根和叶的转录组数据为基础，对2个GABA-T基因编码蛋白进行一系列的生物信息学分析，分别克隆得到两条全长GABA-T序列，命名为VgraGABAT03和VnigGABAT02。这两个序列的开放阅读框(ORF)长度分别为1 503 bp和1 476 bp，分别编码由500个和491个氨基酸组成的2个蛋白产物，其相对分子质量分别为55.54 kD和53.73 kD；2个蛋白都为亲水蛋白，亚细胞定位于线粒体；VgraGABAT03蛋白的三级结构与加州藜芦(Veratrum californicum Durand.)的GABAT2蛋白的三级结构同源性为98.40%。将这两个基因分别构建到表达载体pET-28a上，进行蛋白原核表达发现2个蛋白均能稳定表达。本研究为进一步验证GABA-T基因的功能和藜芦嗪的生物合成提供参考。

关键词：环巴胺藜芦嗪生物信息学分析基因克隆原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三七茎叶-滇黄精速溶粉提取工艺及抗氧化活性分析

引用

食品与发酵工业 2023年第2期49卷 91-98页

作者：梁正维王晓漫刘小苏张双艳马燕陈军文张广辉姜薇薇赵银河赵明云南农业大学农学与生物技术学院、龙润普洱茶学院云南昆明650201 西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心、云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201

为探索三七茎叶-滇黄精复合产品的开发工艺,该研究分析了三七茎叶-滇黄精速溶粉中可溶性总糖、皂苷、多酚化合物的组成及含量,并测定其抗氧化活性。以单因素-响应面实验考察三七茎叶-滇黄精在乙醇添加量、料液比(g∶mL)、浸提时间3种变... 详细信息

为探索三七茎叶-滇黄精复合产品的开发工艺,该研究分析了三七茎叶-滇黄精速溶粉中可溶性总糖、皂苷、多酚化合物的组成及含量,并测定其抗氧化活性。以单因素-响应面实验考察三七茎叶-滇黄精在乙醇添加量、料液比(g∶mL)、浸提时间3种变量条件下的最佳浸提条件,进一步以喷雾干燥的方法获取三七茎叶-滇黄精速溶粉,以蒽酮比色法测定速溶粉中可溶性总糖的含量,高效液相色谱法测定速溶粉中皂苷、多酚含量,进一步测定其抗氧化活性,并进行感官审评。喷雾干燥优化出三七茎叶与滇黄精的最佳质量比为6∶4,最佳浸提工艺为三七茎叶-滇黄精的料液比(g∶mL)为1∶21,29%(体积分数)乙醇,浸提37 h,重复浸提2次,每1 kg复合物可得到速溶粉374.23 g,得粉率37.42%,该速溶粉溶解性好,香甜回甘。速溶粉中可溶性总糖含量为(55.44±3.21)mg/g,活性成分以三七皂苷Fa、Fd、Fc、人参皂苷Rb1等7种皂苷及咖啡酸(caffeic acid,CA)、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin-3-gallate,ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocahechin-3-gallate,EGCG)等5种酚类化合物为主。抗氧化活性结果表明,三七茎叶-滇黄精速溶粉对ABTS阳离子自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基具有较好的清除能力,其IC 50值分别为0.30、0.63、0.49、1.67 mg/mL。该研究优化了三七茎叶-滇黄精浸提工艺,所得速溶粉富含皂苷、多酚、可溶性糖等成分,为三七茎叶和滇黄精在食品开发领域提供基础研究数据,为云南特色食品及药食同源产品的开发利用提供科学支撑。

关键词：三七茎叶滇黄精浸提工艺皂苷多酚

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

茉莉酸甲酯对三七叶总黄酮含量及其应答基因表达量的影响

引用

中草药 2023年第2期54卷 631-640页

作者：李莹张广辉王前范伟杨生超云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201

目的研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对三七叶总黄酮含量的影响,探究其在转录水平上对类黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate,JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法使用不同浓度(0、200、400、800μmol/L)的MeJA喷施一年生三... 详细信息

目的研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对三七叶总黄酮含量的影响,探究其在转录水平上对类黄酮生物合成以及茉莉酸(jasmonate,JA)信号通路关键酶基因的调控模式。方法使用不同浓度(0、200、400、800μmol/L)的MeJA喷施一年生三七叶片7d,测定植株生物量以及叶片总黄酮含量;基于MeJA处理的一年生三七叶转录组数据,挖掘类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因,并分析它们在200μmol/L的MeJA处理7、14 d后的表达模式;使用200μmol/L的MeJA喷施一年生三七叶片,采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测类黄酮生物合成与JA信号通路中关键酶基因在处理0、2、4、6、10、14h后的相对表达量。结果不同浓度MeJA处理均显著提高一年生三七叶总黄酮的含量,但对其生物量的影响并未达到显著水平。外源MeJA诱导了三七中类黄酮生物合成和JA信号通路关键酶基因的表达。其中,类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL、F3H、FLS和IFS呈现上调表达,而CHS和CHI呈下调表达;JA信号通路基因LOX、AOS、AOC、OPR、ACX、MEP、KAT、JAR1、JAZ和MYC都呈上调表达。研究发现,当三七受到外源MeJA诱导时,JAZ阻遏蛋白介导了JA信号对类黄酮生物合成基因表达模式的影响。结论外源MeJA对一年生三七叶总黄酮含量的正向调控主要是通过增强JA信号通路基因JAZ和MYC,以及类黄酮生物合成基因PAL、C4H、4CL和IFS的表达来实现的。

关键词：三七茉莉酸甲酯类黄酮基因表达茉莉酸信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

岩白菜莽草酸脱氢酶基因的生物信息学分析、克隆及原核表达

引用

分子植物育种 2025年第7期23卷 2148-2155页

作者：刘祥宇王益娜陈碧环徐素素张广辉郝冰张敬丽云南农业大学园林园艺学院昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室昆明650201

没食子酸作为岩白菜素的生物合成途径中的重要底物,是莽草酸经由莽草酸脱氢酶(SDH)催化而来。因此,SDH是参与调控岩白菜素生物合成的重要酶。本研究对药用植物岩白菜[Bergenia purpurascens(*** Thoms.)Engl.]的3个SDH基因编码的蛋白进... 详细信息

没食子酸作为岩白菜素的生物合成途径中的重要底物,是莽草酸经由莽草酸脱氢酶(SDH)催化而来。因此,SDH是参与调控岩白菜素生物合成的重要酶。本研究对药用植物岩白菜[Bergenia purpurascens(*** Thoms.)Engl.]的3个SDH基因编码的蛋白进行一系列的生物信息学分析,并将其克隆构建在表达载体上进行异源表达。结果表明,3个SDH蛋白均为酸性蛋白,有2个亲水蛋白、1个疏水蛋白;3个SDH蛋白均为非分泌蛋白,亚细胞定位于叶绿体中;3个SDH蛋白的三级结构与拟南芥的SDH蛋白三级结构的同源性分别为47.44%、65.49%、65.82%,异源表达发现3个蛋白均能稳定表达。作为没食子酸生物合成路径中的关键酶基因,本研究首次分析、克隆并异源表达了岩白菜中的BpSDH1、BpSDH2、BpSDH3基因,为进一步研究岩白菜SDH基因的功能以及岩白菜素合成路径的解析奠定了基础。

关键词：岩白菜(Bergenia purpurascens) 莽草酸脱氢酶生物信息学分析原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

西洋参鼠李糖糖基转移酶的原核表达及功能验证

引用

分子植物育种 2024年

作者：陈碧环刘祥宇李翠霞王益娜彭素芳和四梅张广辉杨生超字淑慧云南农业大学农学与生物技术学院西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南特色植物提取实验室

人参皂苷Re是人参属植物的主要活性成分，对其生物合成最后一步的鼠李糖糖基转移酶已有研究，但是西洋参的鼠李糖糖基转移酶仍然不清楚，糖基转移酶(UGT)的功能验证对于丰富人参皂苷的多样化具有重要意义。本研究基于转录组分析，克隆... 详细信息

人参皂苷Re是人参属植物的主要活性成分，对其生物合成最后一步的鼠李糖糖基转移酶已有研究，但是西洋参的鼠李糖糖基转移酶仍然不清楚，糖基转移酶(UGT)的功能验证对于丰富人参皂苷的多样化具有重要意义。本研究基于转录组分析，克隆得到一个西洋参的UGT基因(PqUGT1)，将其构建pET28a载体并在大肠杆菌中异源表达获得可溶性蛋白，通过体外酶促的方式验证其功能。结果表明，PqUGT1全长1 401 bp，编码467个氨基酸，PqUGT1蛋白质相对分子量为52.10 kDa，理论等电点为5.51，预测为亲水性蛋白。能够催化PPT型人参皂苷Rg1鼠李糖基化生成人参皂苷Re，本试验首次鉴定了西洋参中的鼠李糖基转移酶PgUGT1的功能，为进一步阐明西洋参其它类型人参皂苷如拟人参皂苷F11等合成的UGT基因奠定了基础。

关键词：西洋参人参皂苷鼠李糖糖基转移酶原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：