优化脂质体及胰腺癌细胞外泌体的透射电子显微镜(TEM, transmission electron microscopy)样品前处理条件,以提高透射电镜下的成像质量并保护样品结构完整性。针对脂质体和外泌体在TEM下成像衬度弱、结构易受损的问题,系统探索了一...
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优化脂质体及胰腺癌细胞外泌体的透射电子显微镜(TEM, transmission electron microscopy)样品前处理条件,以提高透射电镜下的成像质量并保护样品结构完整性。针对脂质体和外泌体在TEM下成像衬度弱、结构易受损的问题,系统探索了一系列样品前处理实验方法,包括滤膜除尘、琼脂糖凝胶柱纯化、磷钨酸负染、真空加热干燥及提取液浓度稀释等。通过透射电镜观察,分析了不同实验条件下脂质体及外泌体的形态特征,并讨论了其对透射电镜成像效果的影响,从而为得到更真实可靠、满足分析要求的透射电镜形态结构观察表征提供参考依据。结果表明,相比常规磷钨酸负染法,脂质体样品经滤膜除尘及凝胶柱纯化后成像效果得到提升。对于外泌体样品,优化磷钨酸负染时间及样品浓度,其尺寸分布均匀,形态特征明显。
采用冷冻干燥法制备壳聚糖-海藻酸钠复合纳米纤维,此纤维呈均匀丝状结构,宽度约0.4μm。通过化学键合方式将赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)核酸适配体固载于纳米纤维表面,制备得到核酸适配体修饰的壳聚糖-海藻酸钠复合纳米纤维材料,适...
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采用冷冻干燥法制备壳聚糖-海藻酸钠复合纳米纤维,此纤维呈均匀丝状结构,宽度约0.4μm。通过化学键合方式将赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)核酸适配体固载于纳米纤维表面,制备得到核酸适配体修饰的壳聚糖-海藻酸钠复合纳米纤维材料,适配体键合量达到2.3μg/mg,可作为分散固相萃取吸附剂。此吸附剂对OTA表现出良好的萃取能力及高选择性,萃取容量约为3.1 ng/mg,萃取量为结构类似物赭曲霉毒素B及5种参照物分子的2.44~12.8倍,相比随机序列修饰的复合纳米纤维以及复合纳米纤维,OTA的萃取量分别提高了4.88和13.0倍。在最佳萃取实验条件下,建立了基于核酸适配体修饰复合纳米纤维分散固相萃取-高效液相色谱测定OTA的分析方法,线性范围为0.05~3.0μg/L,检出限(LOD,S/N=3)为13 ng/L,加标回收率为86.7%~101.0%。本方法选择性好、灵敏度高,可用于花生、玉米和小麦等样品中痕量OTA的检测。
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