检索结果-内蒙古大学图书馆

基因组学与应用生物学 2017年第4期36卷 1556-1562页

作者：王毅赵能原晓龙陈中华杨宇明王娟云南林业学科院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 云南林业学科院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室昆明650201 西南林业大学昆明650224

在植物中,类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(F3GT)将不稳定的花色素转变为稳定的花色素苷,是花色素苷形成的关键酶。本研究采样RT-PCR技术从滇牡丹中成功克隆获得一个完整的F3GT基因(Pd F3GT1),其含有1 371 bp的开放阅读框(ORF),编码456个氨基... 详细信息

在植物中,类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(F3GT)将不稳定的花色素转变为稳定的花色素苷,是花色素苷形成的关键酶。本研究采样RT-PCR技术从滇牡丹中成功克隆获得一个完整的F3GT基因(Pd F3GT1),其含有1 371 bp的开放阅读框(ORF),编码456个氨基酸。该基因推断的蛋白与葡萄(Vitis vinifera)3GT蛋白的相似性为64%;与已知功能的3GT基因进行系统进化分析,结果显示Pd3GT1与葡萄3GT聚类到同一个分支。氨基酸比对显示Pd3GT1蛋白序列还有糖基转移酶家族特有的PSPG-box结构域。半定量PCR结果显示:Pd3GT1在花蕾,花开时期的花瓣中大量表达,在叶和花芽中有微弱表达;在根和茎中没有表达。说明Pd3GT基因表达具有组织表达特异性。该研究将为研究滇牡丹花色素形成机理,以及对滇牡丹类黄酮糖基转移酶的功能鉴定和利用基因工程手段改良花卉品质提供理论依据。

关键词：滇牡丹 3GT c DNA克隆基因表达分析

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七彩红竹中类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及功能分析

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广西植物 2015年第2期35卷 244-249,212页

作者：王毅王晨晨周旭毕玮杨宇明王娟云南省林业学科院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室昆明650201 云南林业学科院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 西南林业大学昆明650224

类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶(Flavonoid-3-O-glucosyltransferase,3GT)是花青苷(Anthocyanins)生物合成途径中的关键酶,它主要负责将不稳定的花色素转变为稳定的花色素苷,虽然目前已经从其他植物中克隆获得类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶,但... 详细信息

类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶(Flavonoid-3-O-glucosyltransferase,3GT)是花青苷(Anthocyanins)生物合成途径中的关键酶,它主要负责将不稳定的花色素转变为稳定的花色素苷,虽然目前已经从其他植物中克隆获得类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶,但是对竹子中的类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶并不清楚。该文以产生花青素的七彩红竹(Indosasa hispida Mc Clure ***)为材料,首先通过3GT的同源比对后设计3GT基因特异引物,获得3GT基因片段;然后运用RT-PCR及RACE技术从七彩红竹茎中克隆得到完整的3GT基因(Ih3GT)。结果表明:Ih3GT基因的c DNA全长序列为1 730 bp,含有1个1 425 bp的开放阅读框(ORF),编码474个氨基酸;系统进化分析显示,七彩红竹3GT与其他禾本科植物的3GT聚类到同一个分支;该基因推断的蛋白与水稻(Oryza sativa)3GT蛋白的相似性为69%,与二穗短柄草(Brachypodium distachyon)3GT的相似性为67%;经氨基酸序列比对,推断七彩红竹3GT含有糖基转移酶基因家族特有的结构域PSPG-box;半定量PCR的结果显示,七彩红竹3GT基因在微红的幼茎中大量表达,而在其他组织中并不表达,说明Ih3GT具有组织表达特异性。该结果为今后深入研究七彩红竹花色苷的形成机理、鉴定Ih3GT酶活性以及利用Ih3GT基因培育竹子新品种奠定了基础。

关键词：七彩红竹 cDNA 克隆基因表达分析

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思茅松HDR基因全长cDNA克隆与序列分析

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广西植物 2015年第5期35卷 721-727页

作者：王毅周旭毕玮杨宇明李江王娟云南林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室昆明650201 云南林业学科院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 西南林业大学昆明650224

1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya ***)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因片段,然后根据... 详细信息

1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya ***)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因片段,然后根据所获得的基因片段设计特异引物,提取受伤后的思茅松树皮的RNA,并运用RT-PCR和RACE技术从思茅松树皮中克隆得到完整的HDR基因(Pk HDR)。生物信息学分析表明:克隆获得的Pk HDR1基因c DNA全长序列为1 876 bp,含有1个1 464 bp的开放阅读框(ORF),编码487个氨基酸。同源性分析结果表明:思茅松HDR蛋白与赤松(Pinus densiflora)HDR蛋白的相似性高达99%。亚细胞定位及结构域分析结果表明:思茅松Pk HDR氨基酸序列中包含转运肽序列(A1-A61)及植物HDR蛋白多个保守的功能位点(A143,A234,A288,A371)。系统进化分析结果表明:Pk HDR蛋白与赤松HDR蛋白的亲缘关系最为接近。半定量PCR检测结果表明:树皮的创伤促进思茅松HDR基因的表达。该研究成功克隆获得HDR基因,并确定其与松脂代谢密切相关,为阐明思茅松松脂生物合成机制和分子育种提供了参考。

关键词：思茅松 cDNA 克隆基因功能分析

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滇牡丹根皮初提物抗菌活性研究

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西南林业大学学报（自然科学） 2017年第4期37卷 213-217页

作者：赵能原晓龙陈中华华梅王娟王毅西南林业大学林学院云南昆明650224 云南林业学科院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201 云南林业学科院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室云南昆明650201

采用乙醇与丙酮分别提取滇牡丹根皮内物质,用13种致病细菌进行活性筛选,采用抑菌圈法评价相应初提物的抗菌活性,并测定具有抗菌活性初提物的最低抑制浓度(MIC),并检测不同温度和不同pH处理后滇牡丹根皮中抗菌物质的抑菌效果。结果表明:... 详细信息

采用乙醇与丙酮分别提取滇牡丹根皮内物质,用13种致病细菌进行活性筛选,采用抑菌圈法评价相应初提物的抗菌活性,并测定具有抗菌活性初提物的最低抑制浓度(MIC),并检测不同温度和不同pH处理后滇牡丹根皮中抗菌物质的抑菌效果。结果表明:乙醇初提物与丙酮初提物能够对供试13种致病细菌中的5种致病细菌具有明显抑菌效果,最低抑制浓度基本相同,只有对无乳链球菌与副溶血弧球菌的MIC值不同;滇牡丹根皮乙醇初提物在不同温度与不同pH处理后,各个处理部分抑菌圈大小没有出现明显变化,因此滇牡丹根皮乙醇初提物有较好的热稳定性和酸碱稳定性;滇牡丹乙醇初提物经过大孔树脂分段纯化后,发现只有100%乙醇洗脱部分具有抗菌活性。

关键词：滇牡丹根皮抗菌活性抑菌圈法抑制浓度稳定性

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短柄草基因组调查测序

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分子植物育种 2023年

作者：杨跃仙段利武马山俊曾昭朝原晓龙王毅云南林业职业技术学院云南省林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室

短柄草(Brachypodium sylvaticum (Huds.) Beauv.)是禾本科中一种体型较小的可自花结实的二倍体多年生植物，是多年生草本植物中优秀的候选模式植物。为大规模全基因组测序及其组装策略提供研究基础、确定其基因组大小及复杂程度提供信... 详细信息

短柄草(Brachypodium sylvaticum (Huds.) Beauv.)是禾本科中一种体型较小的可自花结实的二倍体多年生植物，是多年生草本植物中优秀的候选模式植物。为大规模全基因组测序及其组装策略提供研究基础、确定其基因组大小及复杂程度提供信息，本研究采用流式细胞术和二代测序技术的数据约简法(Ken-monomeric unit， K-mer)分析评估短柄草基因组大小，并分析其基因组的特征信息。研究结果显示，(1)以玉米作为内参，流式细胞测定短柄草基因组大小约为349.35 Mb；(2)高通量测序获得原始数据23.85 Gb，处理后得到约21.41 Gb的Clean data，数据质量良好；(3) K-mer分析显示短柄草基因组大小约为385.45 Mb，杂合度较低(0.3%)，GC含量为45.85%；(4) NT数据库比对发现二穗短柄草(B. distachyon)、安第斯短柄草(B. andinum)、大麦(Hordeum vulgare)亲缘关系较近。本研究为短柄草的全基因组de novo测序策略提供有效依据，也为未来短柄草分子育种及高效牧草培育奠定基础。

关键词：短柄草流式细胞术全基因组Survey分析基因组大小(C值)

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巴拉圭瓜多竹CCR基因的克隆与分析

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竹子研究汇刊 2016年第2期35卷 10-15页

作者：朱金鑫孙金金原晓龙王娟杨宇明王毅国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 云南林业学科院云南昆明650201 西南林业大学昆明650224

肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-Co A reductase,CCR)是木质素生物合成途径中关键酶。本研究依据转录组数据设计特异性引物,采用RT-PCR方法成功地从巴拉圭瓜多竹(Guadua paraguayanan)中克隆得到一个全新的CCR基因的全长cDNA序列,命名为Gp... 详细信息

肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-Co A reductase,CCR)是木质素生物合成途径中关键酶。本研究依据转录组数据设计特异性引物,采用RT-PCR方法成功地从巴拉圭瓜多竹(Guadua paraguayanan)中克隆得到一个全新的CCR基因的全长cDNA序列,命名为GpCCR。序列分析结果表明,GpCCR包含完整的c DNA开放阅读框(ORF),由1065bp组成,编码354个氨基酸。Blast比对结果显示该蛋白质属于CCR家族蛋白;系统进化树结果显示瓜多竹与禾本科植物大麦、水稻等亲缘关系较近。荧光定量PCR检测显示GpCCR在巴拉圭瓜多竹的茎秆中表达量最高,在叶中表达量最低。

关键词：瓜多竹木质素生物合成肉桂酰辅酶A还原酶基因克隆荧光定量PCR

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七彩红竹查尔酮合成酶IhCHS1基因的克隆与分析

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竹子研究汇刊 2014年第3期33卷 11-16页

作者：周旭王晨晨毕玮王娟杨宇明王毅西南林业大学林学院云南昆明650224 云南林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室云南昆明650201 云南林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201

通过已报道查尔酮合成酶基因的保守序列设计特异引物,扩增得到七彩红竹(Indosasa hispida ***)查尔酮合成酶(Chalcone Synthase,CHS)基因片段,再以RACE法获得CHS基因全长cDNA序列。该cDNA全长1953 bp,含1542 bp的开放阅读框,编码含513... 详细信息

通过已报道查尔酮合成酶基因的保守序列设计特异引物,扩增得到七彩红竹(Indosasa hispida ***)查尔酮合成酶(Chalcone Synthase,CHS)基因片段,再以RACE法获得CHS基因全长cDNA序列。该cDNA全长1953 bp,含1542 bp的开放阅读框,编码含513个氨基酸残基的蛋白质。多序列比对结果表明IhCHS1推断的蛋白与节节麦(Aegilops tauschii)等禾本科植物的CHS相似性在87%以上,临位法构建系统发生树显示IhCHS1与禾本科植物CHS亲缘关系较近。RT-PCR结果显示IhCHS1在幼嫩红秆中大量表达。

关键词：七彩红竹查尔酮合成酶基因克隆表达分析

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根癌农杆菌介导的地衣型真菌Cladonia metacorallifera的转化

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菌物学报 2015年第2期34卷 246-251页

作者：王毅王晨晨周旭许宰铣王娟云南林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室云南昆明650201 云南林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201 西南林业大学林学院云南昆明650224 韩国国立顺天大学韩国地衣研究所韩国顺天540742

以潮霉素抗性和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为筛选标记,利用地衣型真菌Cladonia metacorallifera的菌丝,成功实现了根癌农杆菌介导的遗传转化,PCR检测证明转化子中存在潮霉素抗性基因,共聚焦显微镜... 详细信息

以潮霉素抗性和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为筛选标记,利用地衣型真菌Cladonia metacorallifera的菌丝,成功实现了根癌农杆菌介导的遗传转化,PCR检测证明转化子中存在潮霉素抗性基因,共聚焦显微镜检测到转化子菌丝能够产生绿色荧光,证明EGFP能够在trp C启动子控制下在地衣型真菌中表达。

关键词： Cladonia metacorallifera 农杆菌介导的转化增强型绿色荧光蛋白潮霉素抗性

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凋落物及播种时间对高山栲和滇青冈种子萌发的影响

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东北林业大学学报 2012年第6期40卷 5-7页

作者：李小双彭明春陈军文袁春明国家林业局昆明勘察设计院昆明650216 云南大学生态学与地植物学研究所云南农业大学国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室(云南省林业科学院)

高山栲(Castanopsis delavayi)和滇青冈(Cyclobalanopsis glaucoides)种子播种后,分别覆盖约2 cm厚的高山栲、滇青冈、元江栲(Castanopsis orthacantha)和云南油杉(Keteleeria evelyniana)枯枝落叶,以覆盖红壤为对照,研究了森林凋落物及播种时间对半湿润常绿阔叶林建群种高山栲和滇青冈种子萌发的影响。结果表明:不同森林凋落物对高山栲和滇青冈种子萌发率的影响趋势一致,其中对照处理的红壤最高(29.1%和66.9%),其次是云南油杉枯枝落叶(28.2%和57.1%)、高山栲枯枝落叶(25.1%和53.3%)和滇青冈枯枝落叶(20.7%和51.6%),最低的是元江栲枯枝落叶(18.7%和44.0%)。播种时间对高山栲和滇青冈种子萌发率的影响差异极显著,其中12月份播种的种子萌发率最高,分别为58.0%和68.7%;随着播种时间的后移,其萌发率逐渐降低。高山栲种子在次年5月中旬开始萌发,休眠期为6个月,而滇青冈种子的休眠期约5个月,于次年4月中旬开始萌发;两种植物的萌发期大致在6个月左右,且萌发高峰期基本一致,即出现在次年6月份。

关键词：半湿润常绿阔叶林高山栲(Castanopsis delavayi) 滇青冈(Cyclobalanopsis glaucoides) 种子萌发

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思茅松产脂力分析

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福建农林大学学报（自然科学版） 2016年第4期45卷 405-408页

作者：缪福俊李江熊智原晓龙杨宇明王娟云南省林业科学院云南昆明650201 国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室云南昆明650201 云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201 西南林业大学研究生院云南昆明650224

采用V型下降采脂方法对200株思茅松进行产脂力测定,并结合3个主要树体因子（胸径、冠幅、树高）进行相关性分析.结果表明：与产脂力相关性最强的树体因子为胸径,相关系数为0.853,平均单刀产脂力为7.18 g;在相同径级条件下,思茅松的产脂... 详细信息

采用V型下降采脂方法对200株思茅松进行产脂力测定,并结合3个主要树体因子（胸径、冠幅、树高）进行相关性分析.结果表明：与产脂力相关性最强的树体因子为胸径,相关系数为0.853,平均单刀产脂力为7.18 g;在相同径级条件下,思茅松的产脂力表现出显著的差异,均存在相对高、低产的思茅松;当径级为33-34 cm时,思茅松G33-6最高产脂力达到25.86 g;思茅松在雨季的产脂力比旱季高,产脂力与季节温度有关.表明产脂力可能与思茅松本身的遗传因子相关.

关键词：思茅松树体因子产脂力遗传因子

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