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分子植物育种 2023年

作者：王玲仙王波钟巧芳殷富有张敦宇陈玲程在全云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室

本研究以云南不同居群药用野生稻的幼嫩植株根、芽、叶、叶鞘作为外植体，研究药用野生稻适合于基因编辑的最佳外植体、最佳株系和关键步骤。结果显示，根的愈伤组织诱导率比芽和叶鞘高，其分化率虽没有芽和叶鞘高，但大部分材料的根都... 详细信息

本研究以云南不同居群药用野生稻的幼嫩植株根、芽、叶、叶鞘作为外植体，研究药用野生稻适合于基因编辑的最佳外植体、最佳株系和关键步骤。结果显示，根的愈伤组织诱导率比芽和叶鞘高，其分化率虽没有芽和叶鞘高，但大部分材料的根都能分化，说明根是最佳外植体。芽和叶鞘也有分化优势，也可利用这两种外植体进行药用野生稻的纯合无菌株系培养；来自临沧市的不同株系得苗率较其他群体株系高，说明临沧市的药用野生稻比较适合进行规模化组织培养；大部分参试材料愈伤组织基本都能被诱导，但只有40%左右的愈伤组织能分化出无根苗，而分化出无根苗的愈伤组织均能产生新根，说明药用野生稻整个组织培养过程中愈伤组织的分化是关键步骤。本研究明确了药用野生稻适合于基因编辑的最佳外植体、最佳株系和关键步骤，为突破药用野生稻基因编辑中的瓶颈问题提供参考依据。

关键词：药用野生稻(Oryza officinalis Wall. ex Watt) 外植体组织培养居群

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水稻OsERF67和OsERF68的表达分析及突变体构建

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分子植物育种 2025年

作者：王鑫涛张翠杨奕郭怡卿孙一丁云南农业大学植物保护学院云南农业大学农学与生物技术学院云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室

为探究乙烯应答转录因子AP2/ERF家族OsERF67和OsERF68的逆境胁迫应答机制，本研究利用RT-qPCR技术分析了在化感水稻PI312777及非化感水稻Lemont中OsERF67和OsERF68基因在ETH、SA、IAA、GA、JA、ABA激素处理1、6、12 h及稗草胁迫7 d后的... 详细信息

为探究乙烯应答转录因子AP2/ERF家族OsERF67和OsERF68的逆境胁迫应答机制，本研究利用RT-qPCR技术分析了在化感水稻PI312777及非化感水稻Lemont中OsERF67和OsERF68基因在ETH、SA、IAA、GA、JA、ABA激素处理1、6、12 h及稗草胁迫7 d后的相对表达量；并利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，成功构建了OsERF67和OsERF68基因的敲除突变体。获得了21株OsERF67的T0代阳性植株。转基因阳性率为100%、突变率与结实率分别为67.74%和64.58%；12株OsERF68的T0代转基因植株，其转基因阳性率、突变率与结实率分别为99.00%、75.00%和66.67%。激素和稗草胁迫处理结果表明OsERF67和OsERF68受到了激素处理的影响，随着时间的推移，会有所下降，ETH处理后最高，且化感水稻高于非化感水稻；JA和SA处理后最低。同时稗草胁迫降低了OsERF67和OsERF68的相对表达量，且化感水稻中稗草胁迫对OsERF67和OsERF68的抑制率强于非化感水稻。OsERF67和OsERF68纯和敲除突变体的氨基酸发生不同程度的突变，它们的表达受乙烯诱导表达，而水杨酸及茉莉酸则抑制其表达，化感水稻更能有效地调控OsERF67和OsERF68的表达，从而在一定程度上缓解稗草对其生长发育的负面影响。这为ERF亚家族转录因子参与逆境胁迫转录调控机制的研究提供了理论依据，也为水稻抗逆品种的选育奠定了基础。

关键词： AP2/ERF 激素 RT-qPCR CRISPR/Cas9技术突变体

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68份甜荞种质资源产量性状遗传多样性分析及综合评价

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南方农业学报 2025年第4期56卷 1045-1055页

作者：翟冰欣黄春燕王宇谭静卢文洁刘鑫谢佳星王莉花孙道旺云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室云南昆明650205 云南大学农学院资源植物研究院云南昆明650505

【目的】对不同甜荞种质资源产量性状进行遗传多样性分析及综合评价,为甜荞种质改良及新品种选育提供理论依据。【方法】以来源于国内外各地的68份甜荞种质资源为材料,对其12个产量性状进行测定,并通过相关分析、主成分分析和聚类分析... 详细信息

【目的】对不同甜荞种质资源产量性状进行遗传多样性分析及综合评价,为甜荞种质改良及新品种选育提供理论依据。【方法】以来源于国内外各地的68份甜荞种质资源为材料,对其12个产量性状进行测定,并通过相关分析、主成分分析和聚类分析对68份甜荞种质资源进行遗传多样性分析及综合评价。【结果】12个产量性状的变异系数为14.59%46.56%,平均为30.23%,其中主花序空瘪种子率、株粒数、主花序未结实花朵率、株粒重和小区产量的变异系数较高,分别为46.56%、44.95%、42.58%、42.08%和35.24%,Shannon-Weaver多样性指数在0.06~12.25,平均为4.41,说明参试甜荞种质资源间产量性状差异较大。相关分析结果显示,小区产量与主花序种子数、株粒数、株高和主茎节数呈极显著正相关(P<0.01)。主成分分析结果显示,前3个主成分对变异的累计贡献率达79.544%,第一主成分(PC1)主要由小区产量、株粒数、主花序种子数和株高决定,第二主成分(PC2)主要由主花序未结实花朵率和茎粗决定,第三主成分(PC3)主要由主花序空瘪种子率、主茎节数和株高决定。聚类分析显示,68份甜荞种质资源可分为四大类,类群Ⅰ包含17份材料,类群Ⅱ包含29份材料,类群Ⅲ包含6份材料,类群Ⅳ包含16份材料,4个类群材料各有特点,改良品种时可根据特点选择亲本,其中类群Ⅰ产量的平均值最高(0.54 kg);根据主成分综合得分(F)大于2.500,筛选出3份甜荞种质资源。【结论】68份甜荞种质资源具有丰富的遗传多样性,筛选出的高产优质材料2022-资-甜-22、2022-资-甜-34和2022-资-甜-7,可作为云南甜荞新品种选育的优异材料。

关键词：甜荞产量性状遗传多样性综合评价

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基于小RNA测序技术和RT-PCR检测云南省大樱桃病毒

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植物病理学报 2023年第5期53卷 950-958页

作者：郭淼李婷婷王朝文钟静陈越和加卫丁铭云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南农业基因资源与种质创制重点实验室昆明650223 云南省农业科学院高山经济植物研究所丽江674199

我国是大樱桃的主要产区,目前种植面积位居世界首位,随着种植面积的不断扩大,病毒病严重制约了大樱桃生产。本研究对云南3个大樱桃主要繁育基地(陆良、宣威和丽江)的6个大樱桃品种的病毒病发生情况调查,发现主要症状为植株矮化、小叶、... 详细信息

我国是大樱桃的主要产区,目前种植面积位居世界首位,随着种植面积的不断扩大,病毒病严重制约了大樱桃生产。本研究对云南3个大樱桃主要繁育基地(陆良、宣威和丽江)的6个大樱桃品种的病毒病发生情况调查,发现主要症状为植株矮化、小叶、叶片皱缩、畸形、斑驳、叶片褐色斑点等症状,发病率在10%~30%之间。对每个品种混合样品进行小RNA测序,并利用RT-PCR对小RNA测序分析得到的病毒种类进行验证。结果表明,在陆良样品中检测到樱桃病毒A(cherry virus A,CVA)、李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus, PNRSV)、李树皮坏死与茎痘伴随病毒(plum bark necrosis stem pitting-associated virus, PBNSPaV)、柑橘叶斑病毒(citrus leaf blotch virus, CLBV)和樱桃小果病毒-1(little cherry virus-1,LChV-1);宣威样品中检测到CVA和PNRSV;丽江样品中检测到CVA、PNRSV、PBNSPaV、CLBV和樱桃小果病毒-2(little cherry virus-2,LChV-2)。序列分析表明,这5种病毒分别与GenBank中登录注册的病毒核苷酸序列均具有较高的一致性。其中,PNRSV在不同种植区的品种中检出率较高,推测有可能是目前云南大樱桃种植区的主要病毒种类,其危害情况有待于进一步研究。

关键词：云南大樱桃小RNA深度测序病毒种类

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播期对甜荞品种(系)农艺性状及产量的影响

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作物杂志 2024年第4期 216-222页

作者：李春花吴晗加央多拉王春龙王艳青任长忠吉林省白城市农业科学院吉林白城137000 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室云南昆明650205

为筛选出适合吉林省西部种植的甜荞品种及其最佳播期,利用34份甜荞品种(系)在3个播期(5月22日、6月12日、7月3日)对14个农艺性状及产量进行了遗传多样性分析。结果表明,播期对甜荞品种(系)14个农艺性状影响明显。生育期平均值随着播期... 详细信息

为筛选出适合吉林省西部种植的甜荞品种及其最佳播期,利用34份甜荞品种(系)在3个播期(5月22日、6月12日、7月3日)对14个农艺性状及产量进行了遗传多样性分析。结果表明,播期对甜荞品种(系)14个农艺性状影响明显。生育期平均值随着播期的延迟缩短;4个株型性状、6个粒形性状和3个产量性状随着播期的推迟分别表现为先增后减、先减后增、逐渐增高的趋势。从各性状的遗传率来看,籽粒面积、籽粒周长、长宽比、籽粒长、籽粒宽、籽粒圆度等粒形性状以及千粒重的遗传率在3个播期中为0.901~0.992,大于其他性状。在相关性分析中,籽粒面积与籽粒周长、长宽比与籽粒圆度、株粒数与株粒重的相关系数绝对值在3个播期中均大于0.950。结果还表明,适合早播的甜荞品种为呵OK、呵T、喀1;适合中期播种的甜荞品种为呵T;适合晚播的甜荞品种为D2。综上所述,在吉林省西部地区选择适宜的播期结合种植适宜的品种可提高甜荞产量。

关键词：甜荞播期农艺性状产量

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云南烟草产区辣椒脉斑驳病毒的调查及其遗传多样性分析

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植物保护 2024年第2期50卷 192-201,218页

作者：陈越韩天华马文广钟静尹跃艳赵丽玲李婷婷丁铭云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业农村部西南农业基因资源与种质创制重点实验室昆明650205 云南省农业科学院高山经济植物研究所丽江674100 云南省烟草公司丽江市公司丽江674100

明确辣椒脉斑驳病毒(chilli veinal mottle virus,ChiVMV)在云南6个州(市)烟草生产区的分布、遗传多样性和群体遗传结构,对病害的防控预警具有重要意义。本研究以2022年采集自云南6个州(市)不同烟草产区的96份疑似感染ChiVMV的烟草样品... 详细信息

明确辣椒脉斑驳病毒(chilli veinal mottle virus,ChiVMV)在云南6个州(市)烟草生产区的分布、遗传多样性和群体遗传结构,对病害的防控预警具有重要意义。本研究以2022年采集自云南6个州(市)不同烟草产区的96份疑似感染ChiVMV的烟草样品为试验材料,利用电子显微镜负染色观察和分子生物学方法对病毒进行检测和鉴定,获得21个ChiVMV云南烟草分离物的cp基因序列。利用SDT、MEGA、RDP、DnaSP及Arlequin等生物学软件对21个云南烟草分离物及NCBI上下载的38个来自不同国家、地区及寄主的ChiVMV分离物cp基因序列的系统进化、遗传多样性和群体遗传结构特征进行分析。结果显示,从云南6个州(市)烟草生产区采集的96份烟草样品中,ChiVMV检出率为51.04%;序列比对发现,本研究获得的cp基因与NCBI中38个ChiVMV分离物cp基因的核苷酸一致性在84.1%以上;系统发育分析发现,59个ChiVMV分离物按照地理位置的远近被划分为4个分支,聚类结果具有明显的地理分布特征,而与寄主植物无关;遗传多样性和遗传分化分析表明,4个地理种群的ChiVMV cp基因遗传多样性水平均较高,中国种群与印度、泰国和其他国家种群间发生了很大的遗传分化且差异显著(P<0.05);遗传力分析显示,基因交流、遗传漂变和基因的负选择压力是ChiVMV分离物适应性进化的重要方式。

关键词：辣椒脉斑驳病毒云南遗传多样性遗传结构 cp基因

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侵染凤仙花的菜豆金色花叶病毒的鉴定及基因组结构分析

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园艺学报 2022年第5期49卷 1136-1144页

作者：钟静赵丽玲李婷婷张水英陈越丁铭云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业农村部西南农业基因资源与种质创制重点实验室昆明650223

在对云南省西双版纳州进行病毒病害调查时发现1株疑似菜豆金色花叶病毒属病毒侵染的凤仙花植株,其症状表现为叶片皱缩和花叶。利用菜豆金色花叶病毒属病毒简并引物进行PCR扩增、克隆和分析,获得YN6198-28和YN6198-31两条菜豆金色花叶病... 详细信息

在对云南省西双版纳州进行病毒病害调查时发现1株疑似菜豆金色花叶病毒属病毒侵染的凤仙花植株,其症状表现为叶片皱缩和花叶。利用菜豆金色花叶病毒属病毒简并引物进行PCR扩增、克隆和分析,获得YN6198-28和YN6198-31两条菜豆金色花叶病毒属病毒的DNA-A全长序列,长度均为2 763 bp,编码6个开放阅读框,其中YN6198-28核苷酸序列与越南丁香黄脉病毒(Ludwigia yellow vein Vietnam virus,LuYVVNV)相似性为94.90%,表明该分离物是LuYVVNV1个分离物。重组分析发现,YN6198-28是种间重组病毒,其主要亲本为丁香黄脉病毒(Ludwigia yellow vein virus,LuYVV),次要亲本为中国胜红蓟黄脉病毒(Ageratum yellow vein China virus,AYVCNV)。

关键词：凤仙花菜豆金色花叶病毒属重组病毒

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青蒿中番茄斑萎病毒和烟草花叶病毒的分子鉴定及相关序列分析

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植物保护 2024年第1期50卷 244-255页

作者：钟静李婷婷韩天华李学卫尹跃艳陈越马文广丁铭云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业农村部西南农业基因资源与种质创制重点实验室昆明650223 云南省烟草公司丽江市公司丽江674100 云南省农业科学院高山经济植物研究所丽江674199

番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)是2种重要的植物病原病毒,对多种经济作物的产量和品质均造成严重影响。2021年-2022年,在云南省丽江市烟草种植区不同烟区采集叶片黄化、皱缩... 详细信息

番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)是2种重要的植物病原病毒,对多种经济作物的产量和品质均造成严重影响。2021年-2022年,在云南省丽江市烟草种植区不同烟区采集叶片黄化、皱缩以及无症状的青蒿Artemisia caruifolia样品共计14份,利用免疫金标速测卡和RT-PCR对其病原病毒进行检测。利用免疫金标速测卡检测结果显示,在所检样品中有9份样品检测出TSWV,检出率为64.28%,有3份样品检测出TMV,检出率为21.43%,2种病毒复合侵染的检出率同样为21.43%;利用RT-PCR对复合侵染的3份样品进行分子检测,结果显示,在3份复合侵染青蒿样品中获得3条TSWV N基因序列、3条TMV cp基因序列和2条TMV RdRp部分序列。TSWV青蒿分离物与分离自云南的TSWV-2分离物相似性最高,为99.6%;TMV青蒿分离物与分离自辽宁的TMV-Shenyang分离物和分离自云南的TMV-Yongren-1相似性最高,均大于99.4%。这是首次发现TSWV和TMV 2种不同属病毒复合侵染青蒿。

关键词：番茄斑萎病毒烟草花叶病毒青蒿复合侵染

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白肉灵芝三个新品种的选育报告

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菌物学报 2022年第12期41卷 2095-2097页

作者：姚春馨田果廷王晖云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室云南昆明650205

‘云白灵芝’3个新品种由采自云南不同地区的野生白肉灵芝菌株,经常规育种系统选育获得,属白肉灵芝Ganoderma leucocontextum。3个品种的子实体菌肉洁白、质软,弹射孢子粉少,形态特征差异大。菌丝生长适宜温度18–23℃,子实体发育最适温... 详细信息

‘云白灵芝’3个新品种由采自云南不同地区的野生白肉灵芝菌株,经常规育种系统选育获得,属白肉灵芝Ganoderma leucocontextum。3个品种的子实体菌肉洁白、质软,弹射孢子粉少,形态特征差异大。菌丝生长适宜温度18–23℃,子实体发育最适温度15–23℃,菌丝长速快,发菌期、出菇期短,是中低温型早熟新品种。3个品种均适宜熟料袋栽覆土栽培,干芝产量和品质均高于对照品种。

关键词：白肉灵芝品种中低温早熟

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贵州黔西南烟草中烟草脉带花叶病毒的鉴定及遗传结构分析

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植物病理学报 2024年第5期54卷 925-936页

作者：陈越穆青李婷婷罗富方刘朝忠曹毅丁铭云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南农业基因资源与种质创制重点实验室昆明650205 贵州省烟草科学研究院贵阳550081 贵州省烟草公司黔西南州公司兴义562400

为了明确贵州省黔西南州烟草中烟草脉带花叶病毒(tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV)的发生和病毒的群体遗传结构,了解该TVBMV贵州烟草分离物上的遗传变异机制。利用电子显微镜负染色、超薄切片制样观察及分子生物学方法对采集... 详细信息

为了明确贵州省黔西南州烟草中烟草脉带花叶病毒(tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV)的发生和病毒的群体遗传结构,了解该TVBMV贵州烟草分离物上的遗传变异机制。利用电子显微镜负染色、超薄切片制样观察及分子生物学方法对采集自贵州省黔西南州兴义市具有典型TVBMV症状的烟草样品进行检测和鉴定,并利用生物信息学软件对其进行基于病毒分离物CP基因序列的系统进化和群体遗传结构分析。结果表明:采集的22份烟草样品中,TVBMV的检出率为13.64%;所获得的TVBMV贵州烟草分离物与GenBank上公布的其它42个分离物CP基因的核苷酸和氨基酸序列的一致性分别为94.1%~99.6%和93.4%~100%;基于CP氨基酸序列的系统发育分析按照地理分布将分离物划分为4个类群,聚类结果具有明显的地理分布特征;遗传多样性分析显示,受到地理分布的影响,各组TVBMV分离物均表现出较高的遗传多样性水平;种群遗传结构分析发现,负选择作用、遗传漂变和生态环境是TVBMV种群遗传变异的重要方式。研究结果为贵州烟草病毒病的防控和抗病育种提供一定的理论支持。

关键词：烟草烟草脉带花叶病毒群体遗传结构遗传变异 CP基因

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