检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2025年第5期41卷 898-907页

作者：杨鑫娇胡汝瑶熊喆邹迪蔡洁夏从龙白忠彬赵红业云南农业大学云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南昆明650201 大理大学药学院云南大理671000

目的探究p-AMPK活性对不同亚型MDA-MB-231(三阴性乳腺癌细胞)和MCF-7(雌激素受体阳性细胞)发生自噬的影响及调节机制。方法用EBSS、Baf-A1和EBSS+Baf-A1处理MDA-MB-231细胞4 h,MCF-7细胞8 h后,自噬对细胞的增殖及凋亡影响,观察细胞线粒... 详细信息

目的探究p-AMPK活性对不同亚型MDA-MB-231(三阴性乳腺癌细胞)和MCF-7(雌激素受体阳性细胞)发生自噬的影响及调节机制。方法用EBSS、Baf-A1和EBSS+Baf-A1处理MDA-MB-231细胞4 h,MCF-7细胞8 h后,自噬对细胞的增殖及凋亡影响,观察细胞线粒体,检测自噬标志物LC3B、P62、LAMP1、TOM20、AMPK、p-AMPK、ULK1和Beclin1/VPS34蛋白表达情况,抑制AMPK活性验证自噬通路。结果饥饿诱导后乳腺癌发生自噬,不同亚型乳腺癌细胞自噬进程不一致;抑制细胞增殖;MDA-MB-231细胞自噬发生后p-AMPK水平上升,ULK1水平降低,通过p-AMPK激活ULK1启动自噬;MCF-7细胞自噬发生后p-AMPK和ULK1水平均降低,说明其激活自噬可能不由p-AMPK介导。结论MDA-MB-231主要通过p-AMPK直接激活ULK1的方式启动自噬,不依赖MTOR途径;MCF-7细胞可能通过AMPK活性抑制激活MTOR或其他上游因子直接激活MTOR的方式启动自噬,根据不同亚型细胞自噬通路调节p-AMPK活性,能够更精准靶向治疗不同类型的乳腺癌。

关键词： p-AMPK 乳腺癌饥饿诱导雌激素受体自噬 MTOR

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GTKO猪的生产及猪到恒河猴肾脏异种移植

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器官移植 2025年

作者：王艳常悦杨畅魏太云霍晓颖陈博威王娇祥赵恒郭建雄赵红芳张雄朱飞艳成文敏赵红业徐凯祥 Muhammad Ameen Jamal 王振迪魏红江云南农业大学动物医学院云南农业大学动物科学技术学院云南省小型猪基因修饰与异种器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属协和医院

目的探讨α-1, 3半乳糖基转移酶（GGTA1）基因敲除（GTKO）滇南小型猪的构建及猪到恒河猴的肾脏异种移植，评估GTKO猪的有效性。方法利用CRISPR/Cas9基因修饰系统和体细胞克隆技术构建GTKO滇南小型猪，通过聚合酶链反应、Sanger测序... 详细信息

目的探讨α-1, 3半乳糖基转移酶（GGTA1）基因敲除（GTKO）滇南小型猪的构建及猪到恒河猴的肾脏异种移植，评估GTKO猪的有效性。方法利用CRISPR/Cas9基因修饰系统和体细胞克隆技术构建GTKO滇南小型猪，通过聚合酶链反应、Sanger测序、免疫荧光染色等验证GTKO猪的表型。流式细胞术检测抗原抗体（IgM）结合与补体依赖细胞毒性，并进行GTKO猪到恒河猴的肾脏异种移植，监测受体猴体液免疫、细胞免疫、凝血及生理指标，利用超声检查、苏木素-伊红染色、免疫组织化学染色和免疫荧光染色等分析移植肾功能和病理学改变。结果靶向滇南小型猪GGTA1基因第4外显子设计单向导RNA(sgRNA)，将p GL3-GGTA1-sgRNA1-GFP载体转染到滇南小型猪胎儿成纤维细胞中，经嘌呤霉素筛选后，获得的C59#和C89#两个细胞克隆点均鉴定为GGTA1基因敲除克隆点，经扩大培养形成细胞系后混合用作供体细胞进行体细胞克隆，并将重构胚胎移植至三元杂代孕母猪输卵管中，获得13头胎儿猪，其中F04和F11胎儿的GGTA1基因发生双等位基因突变，且F04核型正常，利用此GTKO胎儿猪进行重克隆，并将重构胚胎移植至三元杂代孕母猪输卵管中，共获得7头存活仔猪，其均不表达α-Gal抗原表位。20#恒河猴血清IgM与GTKO猪PBMC结合数量减少，且GTKO猪PBMC在补体依赖细胞毒性实验中的存活率高于野生型猪。获取GTKO猪肾并进行灌注直至完全变白，切除受体猴左肾后进行猪肾异位移植，血管吻合完成后开放血流，猪肾迅速变为粉红色，未发生超急性排斥反应（HAR）,6 min后输尿管出现尿液，表明肾移植术成功，再切除受体右肾。移植术后7 d移植肾血流供应良好，受体猴血清肌酐水平稳定，血清钾和胱抑素C水平得到有效控制，但在移植术后10 d均升高。移植术后7 d受体猴体内白细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞水平均升高，血小板计数和纤维蛋白原水平均降低，而活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间和凝血酶原时间均较为稳定，之后呈上升趋势。受体猴存活10 d，尸检发现移植肾充血、肿胀和坏死，肾组织中少量IgG沉积，大量IgM、补体C3c和C4d沉积，CD68+巨噬细胞浸润。结论GTKO滇南小型猪肾脏可在恒河猴体内维持一定时间的正常肾功能，并有效克服HAR，证实GTKO猪用于异种移植有效。

关键词： GGTA1基因敲除猪恒河猴肾脏异种移植基因修饰超急性排斥反应免疫抑制外周血单个核细胞体细胞核移植

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筛选的差异表达microRNAs对猪卵母细胞Npm2基因的表达调控及作用研究

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畜牧兽医学报 2024年第11期55卷 5035-5049页

作者：李河林蒋玉芬程娜韩宇辰霍晓颖苏宏鼎常悦方玉珠王配贾宝瑜魏红江成文敏云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201 云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201

旨在研究卵母细胞中筛选的差异表达microRNAs对Npm2(nucleoplasmin 2)基因的调控作用。本研究采集屠宰场卵巢,收集GV期卵母细胞进行体外成熟培养,收集MⅡ期卵母细胞。使用qPCR检测筛选的差异表达miRNAs在GV、MⅡ期卵母细胞的表达水平;... 详细信息

旨在研究卵母细胞中筛选的差异表达microRNAs对Npm2(nucleoplasmin 2)基因的调控作用。本研究采集屠宰场卵巢,收集GV期卵母细胞进行体外成熟培养,收集MⅡ期卵母细胞。使用qPCR检测筛选的差异表达miRNAs在GV、MⅡ期卵母细胞的表达水平;双荧光素酶报告试验验证预测的miRNA是否与靶基因Npm2存在结合位点;在体外成熟培养液中添加miRNAs模拟物/抑制物,验证miRNA对卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎体外发育能力的影响。添加最适浓度的miRNAs模拟物/抑制物后,使用花生凝集素染色试验检测皮质颗粒分布和qPCR检测Npm2 mRNA表达水平。结果表明,MⅡ期卵母细胞中miR-150、miR-7138-5p表达显著高于GV期卵母细胞(P<0.05),miR-296-3p、miR-423-3p表达水平极显著低于GV期卵母细胞(P<0.01),表达趋势与测序结果一致。miR-32表达水平无显著差异(P>0.05)。双荧光素酶报告试验结果表明,miR-32、miR-7138-5p、miR-296-3p与Npm2存在结合位点,荧光强度极显著下调(P<0.01);miR-150与Npm2存在结合位点,荧光强度显著下调(P<0.05);miR-296-5p、miR-423-3p与Npm2不存在结合位点,荧光强度无显著变化(P>0.05)。通过在体外成熟培养液中添加不同浓度miRNAs模拟物/抑制物以确定最适浓度,添加miR-32抑制物、miR-296-5p模拟物、miR-296-5p抑制物、miR-423-3p模拟物、miR-423-3p抑制物、miR-7138抑制物、miR-150模拟物、miR-150抑制物后皮质颗粒荧光强度极显著下调(P<0.01);添加miR-296-3p抑制物、miR-7138-5p模拟物后皮质颗粒荧光强度显著下调(P<0.05)。MⅡ期卵母细胞Npm2 mRNA表达量极显著高于GV期卵母细胞,添加最适浓度miR-150、miR-296-3p、miR-296-5p、miR-7138-5p模拟物和/或抑制物Npm2 mRNA表达量与对照组有显著差异(P<0.05),添加miR-32、miR-423-3p模拟物/抑制物后MⅡ期卵母细胞Npm2 mRNA表达量与对照组无显著差异(P>0.05)。筛选的差异miRNA(如miR-296-3p、miR-7138-5p)可能通过调控Npm2表达影响卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育,可为猪卵母细胞microRNAs与靶基因复杂调控网络研究提供基础。

关键词：猪卵母细胞 microRNA Npm2

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亚洲象不同组织来源成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

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中国畜牧兽医 2024年第9期51卷 3752-3761页

作者：李晋达彭自伟 Muhammad Ameen Jamal 角德灵魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201

【目的】建立不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,并进行冷冻保存和细胞生物学特性研究,为实现濒危动物遗传资源保存和开发利用提供理论依据。【方法】分别采集6岁龄亚洲象耳缘组织(AE00)、新生亚洲象脐带组织(AE01)及死亡16 ... 详细信息

【目的】建立不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,并进行冷冻保存和细胞生物学特性研究,为实现濒危动物遗传资源保存和开发利用提供理论依据。【方法】分别采集6岁龄亚洲象耳缘组织(AE00)、新生亚洲象脐带组织(AE01)及死亡16 h后的4岁龄亚洲象耳缘组织(AE02)样品,分别建立成纤维细胞系并进行传代培养和冷冻保存,通过细胞形态学、增殖能力、衰老及凋亡水平分析不同年龄、不同组织来源成纤维细胞的生物学特性,并进行绿色荧光蛋白(GFP)转染筛选和核型检测,分析亚洲象成纤维细胞的遗传稳定性。【结果】成功建立了3头亚洲象成纤维细胞系并进行冷冻保存,复苏后细胞均能保持一定水平的活力,经连续传代培养后,细胞形态均呈梭形;AE02成纤维细胞冻存活力、细胞增殖能力均最佳,细胞凋亡率依次为AE01(16.7%)>AE00(6.4%)>AE02(3.8%),细胞衰老率依次为AE00(35.9%)>AE01(17.2%)>AE02(7.8%);AE02细胞经长达19次传代后,细胞染色体数目稳定,AE00进行GFP转染筛选可获得稳定表达GFP的亚洲象成纤维细胞系。【结论】本研究成功建立了不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系,细胞形态均为梭形,不同年龄、不同组织来源的成纤维细胞系增殖能力、细胞衰老及凋亡水平均不同,经连续传代后细胞染色体数目稳定,能实现外源基因的稳定转染和长期筛选,可作为濒危动物遗传资源长期保存和复活个体的重要方法之一。

关键词：亚洲象成纤维细胞生物学特性

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昆明犬IGF1基因在肝脏中的表达特征及遗传多样性分析

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黑龙江畜牧兽医 2024年第4期 108-114页

作者：韦云芳李飞翔汪斌陈方良魏红江云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 公安部昆明警犬基地昆明650204 警犬技术公安部重点实验室昆明650204

为了探究IGF1基因在不同生长发育阶段昆明犬肝脏中的表达特征,并筛选与昆明犬体重和体尺性状相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,试验首先采用实时荧光定量PCR方法检测IGF1基因在不同年龄段昆明犬肝脏中的m... 详细信息

为了探究IGF1基因在不同生长发育阶段昆明犬肝脏中的表达特征,并筛选与昆明犬体重和体尺性状相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,试验首先采用实时荧光定量PCR方法检测IGF1基因在不同年龄段昆明犬肝脏中的mRNA表达水平,然后分别针对IGF1基因5′和3′侧翼序列、外显子1~4和内含子1设计引物,采用PCR-单链构象多态性(SSCP)技术对昆明犬IGF1基因单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛查,通过测序分析其突变情况,统计该SNP位点的基因型频率和基因频率及遗传多样性指标[纯合度(homozygosity,Ho)、杂合度(heterozygosity,He)和有效等位基因数(number of effective alleles,Ne)],最后分析该SNP位点与昆明犬体重和体尺性状的关联性。结果表明:IGF1基因在5个年龄段的昆明犬肝脏中均有表达,且表达量随着月龄的增大呈现逐渐下降的趋势;与2月龄比较,6,12,20,30月龄昆明犬肝脏中IGF1基因的相对表达量均极显著降低(P<0.001)。昆明犬IGF1基因仅外显子3中识别到1个SNP位点,其他区域未识别到SNP位点。该位点位于外显子3第464位核苷酸处,发生了T→C的点突变,但氨基酸未变,命名为T464C位点。T464C位点在昆明犬群体中共存在两种基因型,分别为TT纯合型和TC杂合型,其中优势基因型为TT纯合型,优势等位基因为T,表现为低度多态(PIC<0.25),Ho为0.97,He为0.03,Ne为1.03,在昆明犬群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态。昆明犬IGF1基因T464C位点TT纯合型个体胸深、头长显著高于TC杂合型个体(P<0.05)。说明IGF1基因在昆明犬生长发育过程中具有重要作用,T464C位点可作为昆明犬品种培育的潜在辅助选择标记。

关键词：昆明犬胰岛素样生长因子1(IGF1) 差异表达单核苷酸多态性(SNP) 遗传多样性关联性分析

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昆明犬IGF1R基因外显子多态性与体重和体尺性状的关联性分析

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黑龙江畜牧兽医 2024年第12期 115-121页

作者：韦云芳李飞翔彭建国陈方良魏红江云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 公安部昆明警犬基地昆明650204 警犬技术公安部重点实验室昆明650204

为了解胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因外显子多态性与昆明犬体重和体尺性状的关系,从而为优质昆明犬的培育寻找可靠的分子选择标记,试验采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对昆明犬IGF1R基因外显子区域单核苷酸多态性(single nucl... 详细信息

为了解胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因外显子多态性与昆明犬体重和体尺性状的关系,从而为优质昆明犬的培育寻找可靠的分子选择标记,试验采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对昆明犬IGF1R基因外显子区域单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点进行筛选,通过测序分析其突变情况,统计SNP位点的优势基因型、优势等位基因、多态信息含量(polymorphism information content, PIC)、纯合度(homozygosity, Ho)、杂合度(heterozygosity, He)、有效等位基因数(number of effective alleles, Ne)、Hardy-Weinberg平衡状态,并采用一般线性模型分析SNP位点与昆明犬体重和体尺性状的关联性。结果表明:在昆明犬IGF1R基因外显子中仅识别到1个SNP位点,该位点位于外显子8的第1 773位核苷酸处,发生了C→T的点突变,但氨基酸未变,命名为C1773T位点。C1773T位点在昆明犬群体中共存在两种基因型,分别为CC纯合型和CT杂合型,其中优势基因型为CC纯合型,优势等位基因为C,表现为低度多态(PIC<0.25),Ho为0.97,He为0.03,Ne为1.03,在昆明犬群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态。昆明犬IGF1R基因C1773T位点CT杂合型个体胸宽显著高于CC纯合型个体(P<0.05),其他体重和体尺性状指标均差异不显著(P>0.05)。说明IGF1R基因C1773T位点对昆明犬胸宽具有一定影响,可作为昆明犬品种培育的潜在分子选择标记。

关键词：昆明犬 IGF1R基因基因多态性体尺性状关联性分析

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多西环素长期高剂量诱导对滇南小耳猪肝肾功能的影响

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生物技术通报 2025年第4期41卷 345-354页

作者：娄亚楠熊晶晶娄亚玲王福斌程文杰陈晓晶李加宇普少瑕魏红江赵红业云南农业大学、云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南农业大学食品科学技术学院昆明650201

【目的】探究Tet-On系统中多西环素(doxycycline,Dox)持续高剂量摄入对实验猪健康状态的影响。【方法】选用9只6月龄滇南小耳猪作为模型动物,分别设置3倍(30 mg/kg)和5倍(50 mg/kg)推荐剂量组及空白对照组。各组实验猪均肌肉注射相应药... 详细信息

【目的】探究Tet-On系统中多西环素(doxycycline,Dox)持续高剂量摄入对实验猪健康状态的影响。【方法】选用9只6月龄滇南小耳猪作为模型动物,分别设置3倍(30 mg/kg)和5倍(50 mg/kg)推荐剂量组及空白对照组。各组实验猪均肌肉注射相应药物或生理盐水,持续30 d,分别采集第0、10、20、28天的血液进行血常规及肝肾功能指标测定,末次给药后2 h采集实验猪肝、肾进行形态学观察、病理学检测及疾病检测。【结果】与对照组相比,30 mg/kg剂量组Lym#、MPV下降,而PLT上升;50 mg/kg剂量组中这些指标的变化更为显著,且RDW-SD显著降低,同时ALT、MG、P等指标升高,NA、CO_(2)、CYSC等指标下降,显示出较为明显的肝肾功能损伤。组织病理学检查结果显示30 mg/kg和50 mg/kg剂量组实验猪的肝脏和肾脏均出现不同程度的病变,且50 mg/kg剂量组的肝脏炎性细胞和红细胞浸润更为严重,肾脏则显示出更明显的萎缩和组织结构损伤。病原感染检测结果排除病毒感染对实验结果的干扰。【结论】高剂量Dox长期使用会对实验猪的肝肾功能造成显著损伤,且损伤程度与Dox的剂量呈正相关,为大型基因编辑动物的条件性诱导表达相关研究提供参考。

关键词：盐酸多西环素 Tet-On系统滇南小耳猪肝肾损伤

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医用小型猪选育方法和应用进展

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畜牧兽医学报 2023年第7期54卷 2667-2682页

作者：连玉举张致远廖晓波魏红江印遇龙刘梅湖南农业大学动物科学技术学院长沙410128 中南大学湘雅二医院胸心外科长沙410011 云南农业大学动物医学院云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201

模式动物广泛应用于人类疾病研究中。随着人类医学研究的深入,啮齿动物、犬、猴等经典模式动物不能完全满足科学研究的需要,而小型猪逐渐成为现有医用模式动物的有效补充。本文介绍了小型猪的基本生物学特性(包括解剖学和生理学特点),... 详细信息

模式动物广泛应用于人类疾病研究中。随着人类医学研究的深入,啮齿动物、犬、猴等经典模式动物不能完全满足科学研究的需要,而小型猪逐渐成为现有医用模式动物的有效补充。本文介绍了小型猪的基本生物学特性(包括解剖学和生理学特点),论述小型猪作为医用模式动物的优势和价值。同时,介绍了国内外18种不同品种小型猪的主要特征、产地、选育方式、应用进展等情况。此外,本文也回顾分析了目前以小型猪作为模式动物,在心血管、代谢、异种移植等领域的应用现状,以期为中国小型猪的种质资源保护、开发为医用模式动物提供参考,进而助力人类疾病研究。

关键词：小型猪模式动物选育方法心血管系统疾病

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GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪的构建及功能验证

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实验动物与比较医学 2025年

作者：王娇祥张璐陈姝含角德灵赵恒魏太云郭建雄徐凯祥魏红江云南农业大学云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南农业大学云南省异种器官移植工程研究中心云南农业大学动物科学技术学院云南农业大学动物医学院

目的开发GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪并进行功能验证。方法利用CRISPR/Cas9、piggyBac（PB）转座子技术和体细胞克隆技术，构建GTKO/hCD55基因编辑的滇南小耳猪。再通过PCR、Sanger测序、细胞流式、免疫荧光、重亚硫酸盐测... 详细信息

目的开发GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪并进行功能验证。方法利用CRISPR/Cas9、piggyBac（PB）转座子技术和体细胞克隆技术，构建GTKO/hCD55基因编辑的滇南小耳猪。再通过PCR、Sanger测序、细胞流式、免疫荧光、重亚硫酸盐测序分析GTKO/hCD55猪的表型及功能。结果将载体转染至成纤维细胞后，经药物筛选获得48个单细胞克隆点，挑选两个单细胞克隆点进行体细胞克隆，获得两个33 d的胎猪。F01胎猪的GGTA1基因型为-17 bp和WT，F02胎猪的GGTA1基因型为-26 bp/+2 bp和-3 bp。两个胎猪的hCD55 mRNA表达量均与野生型（WT）猪有显著差异，选择F02胎猪作为供体细胞来源进行重克隆后获得11头成活仔猪，鉴定均为GTKO/hCD55基因编辑猪。这些猪αGal抗原表达缺失，但hCD55出现弱表达或不表达的情况。因此，对hCD55基因的CpG岛进行甲基化分析，结果表明在不表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛被完全甲基化，而表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛未被甲基化或部分被甲基化。对hCD55基因的CpG岛进行密码子优化降低CG含量后，可实现hCD55基因的稳定表达。此外，抗原抗体结合实验表明人IgM结合到GTKO/hCD55基因编辑猪成纤维细胞的数量显著小于WT猪；补体依赖的细胞毒性实验表明GTKO/hCD55猪的成纤维细胞成活率明显高于WT猪。结论成功获得了GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪，通过优化密码子降低过表达基因的CG含量，可有效避免甲基化导致的基因表达沉默，本研究为异种器官移植研究提供了可用的供体猪，并为供体猪的开发提供了借鉴。

关键词：异种器官移植滇南小耳猪 GGTA1 hCD55

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AMPK介导的饥饿条件下小鼠肝细胞能量代谢转换及脂肪自噬

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云南农业大学学报(自然科学版) 2024年第6期39卷 48-58页

作者：张晓银苏宏鼎卯升义杨畅角德灵王晶魏红江赵红业云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南农业大学云南昆明650201 云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学动物医学院云南昆明650201

【目的】通过探究饥饿条件下小鼠肝细胞内能量代谢的过程,揭示其营养感应的变化,筛选调节肝细胞内自噬及能量调控的关键通路,阐明脂质响应能量动员的降解机制。【方法】近交系小鼠(C57/B6)分别完全禁食0、24和48 h,按时间点记录小鼠血... 详细信息

【目的】通过探究饥饿条件下小鼠肝细胞内能量代谢的过程,揭示其营养感应的变化,筛选调节肝细胞内自噬及能量调控的关键通路,阐明脂质响应能量动员的降解机制。【方法】近交系小鼠(C57/B6)分别完全禁食0、24和48 h,按时间点记录小鼠血糖和体质量的变化,取各组小鼠肝脏组织进行过碘酸雪夫染色和电镜观察;采用RT-qPCR检测糖脂代谢和自噬相关基因mRNA的相对表达量;采用Western-blot检测自噬和能量感应AMPK通路中关键蛋白的表达。【结果】饥饿24和48 h后,小鼠肝组织内LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的相对表达量极显著升高,P62蛋白的相对表达量显著降低。饥饿处理引起小鼠肝细胞内主要能量来源发生转换,脂滴招募自噬基因ATG2A和PLIN2的mRNA表达显著上调,线粒体膜蛋白TOM20以及调控能量代谢和脂噬的P-AMPK、P-FOXO1蛋白表达极显著上调,表明饥饿处理导致小鼠肝细胞发生了线粒体自噬和脂噬。【结论】饥饿24 h后,小鼠机体主要能量来源由以糖代谢为主转换为以脂质代谢为主,饥饿处理可能通过激活AMPK和FOXO1促进储存于小鼠肝细胞内的脂质发生脂噬降解,释放游离脂肪酸氧化供能。

关键词：饥饿能量代谢转换脂肪自噬腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)

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