检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与比较医学 2024年第4期44卷 384-392页

作者：刘凯胡毓琦耿亚田程文杰王晶魏太云赵红芳李加宇角德灵赵红业魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201

目的构建1型糖尿病微型猪模型,并探索有效延长模型猪生存周期的术后护理方案。方法选取7头版纳微型猪进行胰腺切除手术。术后3~5 d通过补充葡萄糖、维生素及抗生素等方法帮助其恢复。每日早晚两次检测血糖、尿糖水平,据此调整胰岛素补... 详细信息

目的构建1型糖尿病微型猪模型,并探索有效延长模型猪生存周期的术后护理方案。方法选取7头版纳微型猪进行胰腺切除手术。术后3~5 d通过补充葡萄糖、维生素及抗生素等方法帮助其恢复。每日早晚两次检测血糖、尿糖水平,据此调整胰岛素补充量。每日巡视模型猪并记录其饮食欲、精神状态、虚弱程度、皮肤破损情况、粪尿量等数据,每周称量体重,直至动物死亡。根据模型猪状态及时给予葡萄糖注射液和乳酸林格氏液等以补充营养并纠正电解质失衡。结果7头版纳微型猪在胰腺切除术后均表现为随机血糖浓度大于11.1 mmol/L,远超正常猪的平均血糖值(6.0 mmol/L),尿糖阳性,且其体重呈渐进性下降等典型的糖尿病临床表征,提示1型糖尿病模型构建成功。此外,存活时间超过8周的1型糖尿病猪还出现了渐进性被毛脱落及皮肤破溃的情况;在模型猪无法站立乃至无法自主进食时进行安乐死,并采集其肝脏、肾脏及皮肤等受累及的器官组织进行病理组织切片及HE染色,病理组织切片也可见长期高血糖导致的肝脏淤血、肝糖原大量蓄积、肝细胞气球样变和渐进性肝脏纤维化,肾小球淤血、肾小管上皮细胞空泡变性和蛋白尿,真皮层出现淤血、血管壁变薄以及不同程度的角化不全和角化不良等肝脏、肾脏及皮肤组织病变。本研究构建的版纳微型猪糖尿病模型平均生存期为44 d,最长可生存121 d。结论通过胰腺切除术可成功建立版纳微型猪的1型糖尿病模型,进一步通过术后精心护理可获得并发症明显的长期1型糖尿病微型猪模型,这为1型糖尿病治疗策略研究提供了稳定的大动物模型。

关键词：版纳微型猪 1型糖尿病模型胰腺切除术术后护理糖尿病并发症

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猪血型PCR鉴定方法的建立

引用

实验动物与比较医学 2023年第6期43卷 585-594页

作者：王娇祥王艳胡珂徐凯祥魏太云角德灵赵恒赵红业魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 云南省异种器官移植工程研究中心昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201

目的异种器官移植是解决人类器官供体短缺的有效途径,但其面临严重的免疫排斥反应,包括血型差异导致的超急性排斥反应。建立稳定、便捷、可靠的猪血型鉴定方法,可快速筛选合适血型的供体猪用于异种器官移植研究。方法选择版纳微型猪近... 详细信息

目的异种器官移植是解决人类器官供体短缺的有效途径,但其面临严重的免疫排斥反应,包括血型差异导致的超急性排斥反应。建立稳定、便捷、可靠的猪血型鉴定方法,可快速筛选合适血型的供体猪用于异种器官移植研究。方法选择版纳微型猪近交系、滇南小耳猪、巴马香猪为研究对象,用DNA提取试剂盒提取3种品系猪的血液、口腔颊黏膜和胎儿成纤维细胞中DNA,通过PCR法对猪ABO血型同源基因EAA第7号内含子附近的目标片段进行扩增。采用血液凝集反应检测猪前腔静脉全血加入抗A、B抗体后的溶血现象,采用免疫组织化学法检测猪心、肝、脾、肺、肾组织中A抗原表达水平,采用免疫荧光法检测猪口腔黏膜中A抗原表达水平。通过对比不同方法测定猪血型的结果,验证PCR方法的稳定性和可靠性,以此建立一种基于PCR的便捷式猪血型鉴定方法。结果首先,69头版纳微型猪近交系、7头滇南小耳猪和34头巴马香猪的血液PCR结果显示AO血型20头,AA血型66头,OO血型24头。47头滇南小耳猪的胎儿成纤维细胞PCR结果显示47个胎儿均为OO血型,其中8头基因编辑克隆猪的口腔黏膜PCR结果与供体胎儿成纤维细胞的PCR结果一致,均为OO血型;8头野生型猪(2头版纳微型猪近交系、4头滇南小耳猪和2头巴马香猪)的口腔黏膜PCR结果均与血液PCR鉴定结果一致。然后,从中随机挑选11头版纳微型猪近交系、4头滇南小耳猪和2头巴马香猪进行血液凝集反应验证,结果均与血液及口腔黏膜PCR鉴定结果一致。而且,对1头版纳微型猪近交系和2头巴马香猪的心、肝、肺、肾、脾组织进行免疫组织化学分析,结果与血液PCR鉴定和血液凝集反应结果相一致。最后,采集其中2头版纳微型猪近交系和1头巴马香猪的口腔黏膜样本进行免疫荧光检测,结果与血液PCR鉴定结果一致。结论通过采集胎儿细胞和活体猪的口腔黏膜样本进行PCR检测,可准确、高效地鉴定出猪的血型,为异种器官移植供体猪的血型筛选提供了一种简便方法。

关键词：猪血型 PCR技术异种器官移植血液胎儿成纤维细胞口腔黏膜

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版纳微型猪近交系用于镇痛类经皮吸收药物体外渗透性评价

引用

云南农业大学学报（自然科学版） 2023年第6期38卷 929-936页

作者：王晶史海琼程雯张大妹师亚玲高艺柴文英魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学动物医学院云南昆明650201 昆明医科大学第一附属医院乳腺外科云南昆明650032

【目的】通过比较版纳微型猪近交系皮肤(以下简称“猪皮肤”)和人皮肤的组织形态学以及镇痛类经皮吸收药物的体外渗透试验,验证猪皮肤在镇痛类经皮吸收药物评价方面的应用价值。【方法】通过HE染色、Masson染色、弹力纤维染色和透射电... 详细信息

【目的】通过比较版纳微型猪近交系皮肤(以下简称“猪皮肤”)和人皮肤的组织形态学以及镇痛类经皮吸收药物的体外渗透试验,验证猪皮肤在镇痛类经皮吸收药物评价方面的应用价值。【方法】通过HE染色、Masson染色、弹力纤维染色和透射电镜观察比较2种皮肤组织结构形态;选择水杨酸溶液、双氯酚酸二乙胺乳膏和利多卡因凝胶贴膏3种药物作为模型药物,通过Franz扩散池进行药物渗透试验,采用酶标仪和高效液相色谱仪检测透过皮肤的药物质量浓度。【结果】HE染色、Masson染色以及透射电镜结果显示:猪皮肤与人皮肤的分层和细胞构成相似,但是猪皮肤的表皮层极显著厚于人皮肤表皮层(P<0.01),人皮肤的真皮层极显著厚于猪皮肤真皮层(P<0.01)。版纳微型猪身体各部位皮肤从厚到薄依次是肩胛、臀部、背部和腹部。3种药物渗透的0~24 h内,大部分时间点3种药物透过猪皮肤和人皮肤的药物质量浓度均无显著差异(P>0.05)。【结论】猪皮肤和人皮肤组织结构相似,3种镇痛药物在2种皮肤中的渗透性相似,猪皮肤可用于镇痛类经皮吸收药物的体外渗透性评估。

关键词：镇痛类经皮吸收药物版纳微型猪近交系猪皮肤皮肤渗透试验

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体细胞克隆技术扩繁超细型二狼山绒山羊的应用研究

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中国畜牧兽医 2024年第4期51卷 1420-1427页

作者：卿玉波程雯角德灵刘城郝志强郭建雄李钰莹张筱琳李臻李效宇王文魏红江云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室昆明650201 云南农业大学动物医学院昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 内蒙古中科正标生物科技有限公司巴彦淖尔015000 内蒙古正标种畜有限公司巴彦淖尔015000 中国科学院昆明动物研究所昆明650201

【目的】通过体细胞克隆技术生产超细型二狼山绒山羊克隆个体,为该技术在地方优质羊品种资源扩繁及新品种培育中的应用提供理论依据。【方法】选择1只4岁龄羊绒细度为13.89μm的二狼山绒山羊(♂),采集耳组织并分离培养成纤维细胞,以其... 详细信息

【目的】通过体细胞克隆技术生产超细型二狼山绒山羊克隆个体,为该技术在地方优质羊品种资源扩繁及新品种培育中的应用提供理论依据。【方法】选择1只4岁龄羊绒细度为13.89μm的二狼山绒山羊(♂),采集耳组织并分离培养成纤维细胞,以其为供体细胞,利用体细胞克隆技术开展超细型二狼山绒山羊的扩繁研究,通过克隆羊体重、羊绒细度、繁殖性能等指标评估该技术的可行性。【结果】试验成功建立了稳定的山羊卵母细胞体外成熟培养及体细胞克隆技术体系,卵母细胞成熟率为44.8%,孤雌激活卵裂率、囊胚率分别为83.0%、22.4%;二狼山绒山羊克隆胚的卵裂率、囊胚率分别为77.8%、13.7%。获得5只克隆羊个体,其生长发育正常,二狼山绒山羊母羊自然交配共获得16只健康的F1代个体,具有正常繁殖能力。克隆个体羊绒细度极显著低于同龄对照个体(P<0.01)。【结论】本研究通过体细胞克隆技术成功克隆了超细型二狼山绒山羊个体,其具备正常生产性能和繁殖性能,并保留了超细羊绒的特性,为地方优良羊种质资源扩繁和新品种培育应用研究奠定了基础。

关键词：二狼山绒山羊体细胞克隆羊绒细度繁殖性能

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不同麻醉剂对代孕母猪胚胎移植麻醉效果的影响

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现代畜牧兽医 2022年第3期 30-33页

作者：肖宏涛李超角德灵赵恒魏太云郭建雄李鸿辉云南农业大学动物医学院云南昆明650201 云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室云南昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201

研究旨在探究不同麻醉剂对代孕母猪胚胎移植麻醉效果的影响,选出最适合代孕母猪胚胎移植的麻醉剂。选择1567头代孕母猪,采用静脉注射方式注射丙泊酚进行诱导麻醉,分别使用丙泊酚、氯胺酮和异氟烷等3种麻醉药物维持麻醉进行胚胎移植手术... 详细信息

研究旨在探究不同麻醉剂对代孕母猪胚胎移植麻醉效果的影响,选出最适合代孕母猪胚胎移植的麻醉剂。选择1567头代孕母猪,采用静脉注射方式注射丙泊酚进行诱导麻醉,分别使用丙泊酚、氯胺酮和异氟烷等3种麻醉药物维持麻醉进行胚胎移植手术,记录麻醉剂的用量及手术时间。结果显示,使用丙泊酚进行麻醉平均所需丙泊酚用量为51.8 mL,平均手术时间为38.0 min;使用丙泊酚+氯胺酮进行麻醉平均所需丙泊酚用量为14.4 mL,平均所需氯胺酮用量为24.0 mL,平均手术时间为33.8 min;使用丙泊酚+异氟烷进行麻醉平均所需丙泊酚用量为31.3 mL,平均所需异氟烷用量为33.0 mL,平均手术时间为26.0 min。研究表明,与其他两组相比,使用丙泊酚+异氟烷麻醉效果好、麻醉风险低、手术时间短,更适用于代孕母猪胚胎移植手术。

关键词：代孕母猪麻醉效果丙泊酚氯胺酮异氟烷

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