检索结果-内蒙古大学图书馆

西部林业科学 2014年第5期43卷 117-121页

作者：冯丹张艳丽宁德鲁陈少瑜吴涛王洋云南省林业科学院云南昆明650201 国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201

利用ISSR分子标记技术对云南省选育出的49个板栗优良品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果表明,筛选出的11条引物一共扩增出86条DNA谱带,其中70条为多态性条带,多态位点百分率(PPB%)81.40%,多态性指数(H)0.228,Shannon信息指数(I)0.3... 详细信息

利用ISSR分子标记技术对云南省选育出的49个板栗优良品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果表明,筛选出的11条引物一共扩增出86条DNA谱带,其中70条为多态性条带,多态位点百分率(PPB%)81.40%,多态性指数(H)0.228,Shannon信息指数(I)0.350,数据表明所选育的板栗优良品种资源具有较高的遗传多样性。根据各品种的Nei’s遗传距离,进行UPGMA聚类,49个品种被分为2个大类,其中第1大类又分为了2个亚类,来源地相同的品种基本聚在同一类。聚类结果在分子水平上揭示了各板栗品种的亲缘关系,为今后板栗育种的亲本选配提供科学依据。

关键词：板栗 ISSR分子标记遗传多样性聚类分析

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多花含笑的花部数量变异研究

引用

西部林业科学 2012年第6期41卷 58-62页

作者：朱云凤郝佳波司马永康徐亮韩明跃马惠芬云南省林业科学院云南昆明650201 国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201

为了更好地掌握多花含笑花部数量特征及其变异的特点,采用直接计数和数理统计的方法对昆明树木园内随机采集的9株多花含笑54朵花进行了花部数量观察和分析。结果表明,花枝节间、花序梗和花梗的数量无变异,均为1节,花梗缩短不明显;花被... 详细信息

为了更好地掌握多花含笑花部数量特征及其变异的特点,采用直接计数和数理统计的方法对昆明树木园内随机采集的9株多花含笑54朵花进行了花部数量观察和分析。结果表明,花枝节间、花序梗和花梗的数量无变异,均为1节,花梗缩短不明显;花被片、花被片分轮、最内轮花被片、其他轮花被片、雄蕊和心皮的数量有变异,花被片9～17片,3～5轮,最内轮1～5片,其他轮3～5片;雄蕊39～70枚,心皮19～46枚。其中,最内轮花被片数的变异系数最大,达到51.20%;其他轮花被片数的变异系数最小,为13.87%。多花含笑花部数量变异主要发生在株间,该研究结果为优良观赏单株存在的可能性及其选择提供了科学依据。

关键词：多花含笑花部数量特征变异

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牛樟芝鲨烯合酶基因的克隆与表达分析

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福建师范大学学报（自然科学版） 2017年第6期33卷 50-59页

作者：原晓龙赵能华梅陈剑杨宇明王娟王毅云南省林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室云南昆明650201 西南林业大学林学院云南昆明650224

为了解牛樟芝三萜类生物合成、调控机理,以多孔菌科真菌茯苓(Wolfiporia cocos,AFR13032.1)的SQS基因为模板对牛樟芝基因组数据进行本地Blast,分离获得牛樟芝鲨烯合酶(AcSQS)基因.以该序列为模板设计特异引物Ac SQSF0和Ac SQSR0,通过PC... 详细信息

为了解牛樟芝三萜类生物合成、调控机理,以多孔菌科真菌茯苓(Wolfiporia cocos,AFR13032.1)的SQS基因为模板对牛樟芝基因组数据进行本地Blast,分离获得牛樟芝鲨烯合酶(AcSQS)基因.以该序列为模板设计特异引物Ac SQSF0和Ac SQSR0,通过PCR扩增得到Ac SQS c DNA全长,并对其进行生物信息学分析,检测不同碳氮源添加物的培养基上该基因的表达水平.结果显示:克隆得到的基因为牛樟芝鲨烯合酶(Ac SQS),该基因含4个外显子,3个内含子,外显子拼接总长1 803 bp,编码600个氨基酸;其蛋白序列的1~17位为信号肽位点,具两段跨膜结构,可能定位于内质网;位于该蛋白189~204位的CHYVAGLVGEGLTRL和225~238位的MGLMLQKTNIIRDY的保守基序为鲨烯合酶识别位点,DTIEDD和D(Y/F)RED为FPP绑定位点;蛋白网络分析显示其位于三萜类化合物的代谢网络中;聚类分析显示Ac SQS蛋白和茯苓、硫磺多孔菌、拟蜡菌、灵芝、云芝等的SQS蛋白聚为一支;不同碳氮源添加物培养基上的表达分析显示:果糖诱导该基因表达的能力最强,而不同氮源添加物诱导该基因表达的能力无明显差异.

关键词：牛樟芝鲨烯合酶基因克隆表达分析

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八角RAPD-PCR反应体系的建立及引物筛选研究

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西部林业科学 2012年第4期41卷 65-69页

作者：陈海云陈少瑜宁德鲁吴涛耿树香谷丽萍白平李勇杰云南省林业科学院云南昆明650201 国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650201

在提取高质量八角基因组DNA的基础上,通过对其RAPD反应体系的Taq DNA聚合酶、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等因子的优化,建立了稳定、重复性高的八角RAPD-PCR反应体系。研究结果表明,在25μL PCR反应体系中,含1.0 UTaq DNA聚合酶,0.15... 详细信息

在提取高质量八角基因组DNA的基础上,通过对其RAPD反应体系的Taq DNA聚合酶、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等因子的优化,建立了稳定、重复性高的八角RAPD-PCR反应体系。研究结果表明,在25μL PCR反应体系中,含1.0 UTaq DNA聚合酶,0.15 mmol.L-1 dNTPs,2.0 mmol.L-1 Mg2+,2.0μmol.L-1引物,20～80 ng模板。最佳反应程序为,94℃预变性5 min,扩增后94℃变性30 s,31～37℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;72℃完全延伸7 min,4℃保存。在建立RAPD-PCR反应体系的基础上,从240条RAPD引物中筛选出15条扩增条带清晰、稳定性好的引物,并通过各引物的退火温度梯度实验,确定了各引物的最适退火温度。

关键词：八角 RAPD-PCR 反应体系优化引物

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牛樟芝HMGR基因的克隆和表达分析

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基因组学与应用生物学 2018年第1期37卷 358-365页

作者：原晓龙肖支叶陈丽英陈剑陈中华赵能王娟杨宇明王毅云南省林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650204 西南林业大学林学院昆明650224 普洱市林业管理服务中心云南普洱665000

为研究牛樟芝（Antrodia camphorata）萜类生物合成MVA途径中关键酶3-羟-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutary CoA reductase,HMGR）的调控机制,从牛樟芝基因组中分离并克隆出AcHMGR基因,对其进行生物信息学分析、... 详细信息

为研究牛樟芝（Antrodia camphorata）萜类生物合成MVA途径中关键酶3-羟-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutary CoA reductase,HMGR）的调控机制,从牛樟芝基因组中分离并克隆出AcHMGR基因,对其进行生物信息学分析、不同碳氮源添加物对该基因的诱导表达情况进行分析。分析显示：AcHMGR基因含7个外显子、6个内含子;开放阅读框为3 402 bp,编码1 133个氨基酸残基组成蛋白质序列;AcHMGR包含HMGR典型的多肽位点,即2个HMG-CoA结合基序：PLG（Ⅰ/Ⅴ）AGPLK（Ⅰ/Ⅴ）DG和AEGTLVASTSRG,2个NADP结合基序：TGDAMGMNMI和IEVGT（Ⅰ/Ⅴ）GGGT;分子系统进化分析显示,AcHMGR蛋白序列与其他多孔菌科真菌的HMGR聚为一支;表达谱分析显示：碳源中的果糖、氮源中的酪蛋白胨诱导表达AcHMGR基因的能力最强。本研究为探讨牛樟芝萜类,尤其是三萜类化合物的生物合成及调控机理提供了帮助。

关键词：牛樟芝 3-羟-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR) 基因克隆诱导表达

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珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立

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安徽农业科学 2009年第31期37卷 15163-15166页

作者：毛云玲陈少瑜韩燕吴涛司马永康郝佳波付玉嫔云南省林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室云南昆明650204 西南林学院资源学院云南昆明650224

[目的]建立高效稳定的大果木莲ISSR-PCR反应体系。[方法]以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料,在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上,通过ISSR-PCR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验,优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的IS... 详细信息

[目的]建立高效稳定的大果木莲ISSR-PCR反应体系。[方法]以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料,在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上,通过ISSR-PCR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验,优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的ISSR-PCR反应体系和反应程序。[结果]试验建立的大果木莲的ISSR-PCR反应体系为:20.0μl反应体系中含10×buffer2.0μl、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶0.5 U、DNA模板40 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs0.2 mmol/L和ddH2O13.3μl,其反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,50～60℃退火45 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃完全延伸7 min。[结论]该研究为进一步揭示大果木莲群体的遗传多样性和遗传结构状况以及制定科学的保护措施提供了理论依据。

关键词：珍稀濒危植物大果木莲基因组DNA ISSR—PCR反应体系

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七彩红竹MYB转录因子基因的克隆与分析

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竹子研究汇刊 2015年第3期34卷 1-6页

作者：王晨晨毕玮王娟周旭杨宇明王毅国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 西南林业大学昆明650224 云南省林业科学院昆明650201

MYB基因是最大的植物转录因子家族成员之一,在植物次生代谢、生长及发育过程中发挥着重要作用。利用RACE方法,从七彩红竹中克隆得到1个与MYB同源的基因,命名为Ih MYB4,并利用RTPCR检测Ih MYB4在不同组织部分表达情况。序列分析表明:Ih M... 详细信息

MYB基因是最大的植物转录因子家族成员之一,在植物次生代谢、生长及发育过程中发挥着重要作用。利用RACE方法,从七彩红竹中克隆得到1个与MYB同源的基因,命名为Ih MYB4,并利用RTPCR检测Ih MYB4在不同组织部分表达情况。序列分析表明:Ih MYB4序列全长1044 bp,编码347个氨基酸,该蛋白含有2个MYB功能结构域,属于R2R3-MYB家族。系统进化分析表明:Ih MYB4蛋白可能是一类参与花青素生物合成调控相关的蛋白。RT-PCR检测表明Ih MYB4只有在微红的幼嫩竹秆中才表达,说明Ih MYB4参与七彩红竹中花青素生物合成的调控。

关键词：七彩红竹 MYB 基因克隆序列分析花青素

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思茅松HDR基因全长cDNA克隆与序列分析

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广西植物 2015年第5期35卷 721-727页

作者：王毅周旭毕玮杨宇明李江王娟云南林业科学院国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室昆明650201 云南林业学科院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650201 西南林业大学昆明650224

1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya ***)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因片段,然后根据... 详细信息

1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya ***)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因片段,然后根据所获得的基因片段设计特异引物,提取受伤后的思茅松树皮的RNA,并运用RT-PCR和RACE技术从思茅松树皮中克隆得到完整的HDR基因(Pk HDR)。生物信息学分析表明:克隆获得的Pk HDR1基因c DNA全长序列为1 876 bp,含有1个1 464 bp的开放阅读框(ORF),编码487个氨基酸。同源性分析结果表明:思茅松HDR蛋白与赤松(Pinus densiflora)HDR蛋白的相似性高达99%。亚细胞定位及结构域分析结果表明:思茅松Pk HDR氨基酸序列中包含转运肽序列(A1-A61)及植物HDR蛋白多个保守的功能位点(A143,A234,A288,A371)。系统进化分析结果表明:Pk HDR蛋白与赤松HDR蛋白的亲缘关系最为接近。半定量PCR检测结果表明:树皮的创伤促进思茅松HDR基因的表达。该研究成功克隆获得HDR基因,并确定其与松脂代谢密切相关,为阐明思茅松松脂生物合成机制和分子育种提供了参考。

关键词：思茅松 cDNA 克隆基因功能分析

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曲靖翠峰山云南含笑的叶部变异研究

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西南林业大学学报（自然科学） 2018年第5期38卷 76-83页

作者：郝佳波司马永康陈潜娥付玉嫔祁荣频耿云芬云南省林业科学院云南省森林植物培育与开发利用重点实验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室云南昆明650201 昆明方德波尔格玫瑰花丼有限公司云南昆明652100

为掌握云南含笑的叶部变异规律,以曲靖翠峰山天然分布的云南含笑为研究对象,对其中的9株45枝共316片叶进行观测,分析了云南含笑叶部的变异情况。结果表明:云南含笑叶部所有性状的变异系数范围为10.86%～56.85%,其中痕柄长比的变异系数最... 详细信息

为掌握云南含笑的叶部变异规律,以曲靖翠峰山天然分布的云南含笑为研究对象,对其中的9株45枝共316片叶进行观测,分析了云南含笑叶部的变异情况。结果表明:云南含笑叶部所有性状的变异系数范围为10.86%～56.85%,其中痕柄长比的变异系数最小,叶片基部形状的变异系数最大;除基宽比、顶宽比和叶片形状外,云南含笑叶部的其他性状无论枝间还是株间均存在显著差异;云南含笑叶部性状的信息主要集中于叶片长度、宽度、长宽比、基顶长比和叶柄长度等5个性状。

关键词：木兰科云南含笑叶变异

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滇牡丹ω-3脂肪酸脱氢酶基因克隆与功能分析

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中国油脂 2017年第2期42卷 102-106页

作者：朱金鑫孙金金原晓龙王娟杨宇明王毅西南林业大学林学院昆明650224 国家林业局重点开放性实验室云南珍稀濒特森林植物保护和繁育实验室云南省森林植物培育与开发利用重点实验室昆明650204 云南省林业科学院昆明650204

ω-3脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸亚麻酸生物合成途径的关键酶。依据转录组数据设计特异性引物,使用RT-PCR方法从滇牡丹克隆得到1个FAD3基因的c DNA全长序列,命名为Pd FAD3(Gene Bank登录号为KX289610)。生物信息学分析结果表明Pd FAD... 详细信息

ω-3脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸亚麻酸生物合成途径的关键酶。依据转录组数据设计特异性引物,使用RT-PCR方法从滇牡丹克隆得到1个FAD3基因的c DNA全长序列,命名为Pd FAD3(Gene Bank登录号为KX289610)。生物信息学分析结果表明Pd FAD3基因片段序列全长2 134 bp,包含完整的c DNA开放阅读框,编码含有450个氨基酸残基的蛋白质;Blast比对结果显示该蛋白质属于FAD蛋白质家族;系统进化树分析结果显示与芍药属芍药组植物芍药亲缘关系较近;该蛋白质属于跨膜蛋白质,亲水性较低;RT-PCR结果显示其在种子中的表达随着种子成熟出现双峰型的表达量变化,与目前所报道的其他物种的FAD3表达情况相似。为进一步研究其调控机理提供理论依据及获得含高不饱和脂肪酸转基因滇牡丹品种奠定理论基础。

关键词：滇牡丹 ω-3脂肪酸脱氢酶基因克隆基因功能分析

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