【目的】了解白蜡虫[Ericerus pela (Chavannes)]二龄雄虫泌蜡初期的基因表达,鉴定参与白蜡合成的脂酰辅酶A还原酶(fatty acyl-CoA reductase,far)基因,并明确FAR在白蜡虫雌雄虫中的蛋白表达情况。【方法】采用三代全长转录组测序,分析...
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【目的】了解白蜡虫[Ericerus pela (Chavannes)]二龄雄虫泌蜡初期的基因表达,鉴定参与白蜡合成的脂酰辅酶A还原酶(fatty acyl-CoA reductase,far)基因,并明确FAR在白蜡虫雌雄虫中的蛋白表达情况。【方法】采用三代全长转录组测序,分析白蜡虫二龄雄虫泌蜡初期表达的基因,筛选获得与白蜡虫泌蜡相关的far基因;对关注的1个FAR制备单克隆抗体,通过Western-blot分析该FAR在白蜡虫雌雄虫中的表达情况。【结果】对白蜡虫泌蜡初期的二龄雄虫成功进行了转录组测序,共获得81个far基因,筛选获得与白蜡虫泌蜡一致的6个基因,本研究关注的far基因命名为far3;成功制备了FAR3的单克隆抗体,通过单克隆抗体分析了FAR3在白蜡虫雌雄虫中的表达情况,证实FAR3在二龄雄虫中大量表达,在雌虫中有微量表达。【结论】本研究通过对泌蜡初期的白蜡虫二龄雄虫进行三代全长转录组测序获得了与白蜡虫泌蜡相关的far基因;通过制备的FAR3单克隆抗体证实了FAR3在二龄雄虫分泌白蜡期高量表达,这为白蜡虫其他far基因功能研究以及探索白蜡虫泌蜡分子机理奠定了基础。
薇甘菊颈盲蝽Pachypeltis micranthus Mu et Liu(Hemiptera:Miridae)为世界性恶性杂草薇甘菊Mikania micrantha的自然天敌。在该天敌取食寄主的过程中,存在于其唾液中的多聚半乳糖醛酸酶作为重要的果胶水解酶在降解寄主植物细胞壁和引...
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薇甘菊颈盲蝽Pachypeltis micranthus Mu et Liu(Hemiptera:Miridae)为世界性恶性杂草薇甘菊Mikania micrantha的自然天敌。在该天敌取食寄主的过程中,存在于其唾液中的多聚半乳糖醛酸酶作为重要的果胶水解酶在降解寄主植物细胞壁和引起寄主植物组织损伤中起着重要作用。然而,至今未有关于该天敌的任何基因信息被报道,本研究旨在获得其转录组数据,并基于该数据鉴定获得多聚半乳糖醛酸酶基因。采用Illumina测序技术进行转录组测定,共获得约5.2 Gbps的数据量,拼接得到57 739条非冗余基因(unigene)。通过BlastX注释,23 549条非冗余基因能与NCBI(National Center for Biotechnology Information)非冗余蛋白数据库中的已知蛋白相匹配,7 048、8 548和16 135条非冗余基因分别被成功的注释到GO(Gene Orthology)、COG(Clustes of Orthologous Groups)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库中。基于构建的转录组数据库,共鉴定获得了24个多聚半乳糖醛酸酶基因,其中15个基因具有完整的开放阅读框。该转录组数据可为今后从分子水平研进一步研究薇甘菊颈盲蝽的生态学、生物学和生理学特性和机理提供了有价值的信息,鉴定获得的多聚半乳糖醛酸酶基因为深入研究揭示其在薇甘菊颈盲蝽与寄主互作中的作用奠定了基础。
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