检索结果-内蒙古大学图书馆

柯萨奇病毒A组16型VP1-145位氨基酸变异影响对硫酸乙酰肝素结合能力的初步探究

病毒学报 2024年第2期40卷 346-356页

作者：宗彦君孙甜甜王蕊刘莹李冀琛孙强刘志军张勇潍坊医学院潍坊261053 传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 国家脊髓灰质炎实验室国家卫生健康委员会实验室生物安全重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)与肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)是国内导致手足口病的重要病原体,二者同源,来自共同祖先,基因组结构相同,并且均使用硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)作为吸附受体。本研究基于E... 详细信息

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)与肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)是国内导致手足口病的重要病原体,二者同源,来自共同祖先,基因组结构相同,并且均使用硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)作为吸附受体。本研究基于EV-A71的VP1-145位氨基酸位点的相关研究结果,分析CVA16的VP1-145氨基酸差异,选取3株中国流行的,在该位点具有差异的CVA16,进行对HS结合能力影响的研究。使用不同浓度肝素酶Ⅰ处理人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞,比较不同CVA16株对肝素酶Ⅰ处理前后的RD细胞的吸附能力,以及接种后12h,24h,48h后各毒株在RD细胞的复制情况。结果表明,在使用5mIU/mL和10mIU/mL浓度肝素酶Ⅰ水解RD细胞表面的HS后,VP1-145氨基酸位点为甘氨酸(Glycine,G)的CVA16对RD细胞的吸附能力下降,其下降程度与肝素酶Ⅰ的作用浓度呈正相关,且影响了后续12h,24h,48h病毒在RD细胞中的复制,其差异具有统计学意义(P<0.05)。而VP1-145氨基酸位点为谷氨酸(Glutamic acid,E)的两株CVA16均未观察到此种趋势。为了进一步探究该种结合能力的差异与病毒致病力之间的关系,对三株病毒进行2日龄ICR乳鼠感染实验。通过观察乳鼠生存率、临床评分、体重变化,来评估不同CVA16株在小鼠感染模型中的致病力差异。结果表明,CVA16(VP1-145E)的致病力明显强于CVA16(VP1-145G)。后对三株病毒进行全基因组测序,测序结果显示,除VP1-145位点外,三株CVA16还存在其他的差异位点,故后续我们又通过反向遗传学拯救病毒,对VP1-145位点的作用机制进行了进一步的探讨。本研究结果证实,VP1-145位点的氨基酸变异会影响CVA16与HS的结合能力,145位点为E的病毒,其与HS的结合能力较差,当145位点由E突变至G时,病毒与HS的结合能力增强,其与RD细胞的结合能力受到肝素酶Ⅰ的影响。本研究为CVA16毒力位点与致病机制的研究提供了一定的理论基础。

关键词：柯萨奇病毒A组16型 VP1-145位点硫酸乙酰肝素致病力

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一株Wa-like中国G3P-I5-A8基因型轮状病毒重配株全基因组特征分析

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国际病毒学杂志 2025年第1期32卷 12-16页

作者：唐晓苹熊光萍车如意董梦洁刘颂张无敌王宏章青孔翔羽庞立丽李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 青岛市疾病预防控制中心病毒性疾病检验所 266000

目的研究一株Wa-like中国G3P[8]-I5-A8基因型RVA重配株全基因组特征,并分析与RVA疫苗株的抗原表位之间差异。方法采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2023年中国青岛采集的一份G3P[8]基因型RVA标本进行全序列扩增。利用在线RVA自... 详细信息

目的研究一株Wa-like中国G3P[8]-I5-A8基因型RVA重配株全基因组特征,并分析与RVA疫苗株的抗原表位之间差异。方法采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2023年中国青岛采集的一份G3P[8]基因型RVA标本进行全序列扩增。利用在线RVA自动分型工具(http://***)对测序结果进行分型,应用MEGA 11.0、Geneious Prime 2023.2.1、Geneious 9.0.2和DNASTAR 5.1等软件对RVA毒株进行全序列遗传变异和进化分析。结果成功获取一株G3P[8]基因型RVA(QD01)的全基因组序列,该毒株具有独特的类似Wa-like的基因型:G3-P[8]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1。与RVA疫苗株RotaTeq^(TM)(G3)、LLR和Rotarix的VP7中和抗原表位对比有4~13个差异且均在抗原表位的关键位置7-1 b差异较大。结论本研究RVA毒株QD01为G3-P[8]-I5-A8基因型,遗传进化分析推测该毒株可能是亚洲地区猪源RVA和人源RVA毒株间发生重配产生的新型毒株,QD01与RVA疫苗株在抗原表位的关键位置差异较大。

关键词：轮状病毒 G3P[8]基因型分子特征全基因组抗原位点

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干扰素α2b和λ1体外抗呼吸道合胞病毒活性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第2期38卷 117-124页

作者：管恩蕊张骞陈爱珺王超黄益曼麻粉莲郑丽舒中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会医学病毒与病毒病重点实验室北京100052

目的分析干扰素(interferon,IFN)α2b和λ1在Hep2细胞和人呼吸道上皮细胞(human airway epithelium,HAE)中抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)病毒活性。方法在Hep2细胞中,RSV(MOI=0.01)感染后,加入IFN-α2b或IFN-λ1,48 h后观察细胞病变(cytopathic effect,CPE)、RT-qPCR方法测定病毒载量、免疫荧光法检测RSV F蛋白及结晶紫法检测细胞存活率。在HAE细胞中,用IFN-α2b和IFN-λ1预处理24 h后,RSV(MOI=0.01)感染HAE,RT-qPCR方法测定第1~7天培养上清中的病毒载量,免疫荧光法检测RSV F蛋白及空斑法测定第7天培养上清中的病毒滴度。结果在Hep2细胞中,IFN-α2b和IFN-λ1处理组的CPE较病毒对照组均有所缓解,且均是高浓度组干扰素的CPE轻于低浓度组。不同浓度的IFN-α2b和IFN-λ1均可以显著降低RSV病毒载量(P<0.001),且高浓度组病毒载量明显低于低浓度组(P<0.001)。此外,IFN-α2b和IFN-λ1均能够降低RSV感染后F蛋白表达量,同时提高细胞存活率。在HAE细胞中,IFN-α2b和IFN-λ1均能抑制RSV病毒复制,降低病毒滴度(P<0.001)和降低RSV F蛋白表达量。结论IFN-α2b和IFN-λ1在传代细胞Hep2和HAE中对RSV均有较好抗病毒活性,为干扰素抗呼吸道病毒研究提供了数据参考。

关键词：呼吸道合胞病毒 IFN-α2b IFN-λ1 人呼吸道上皮细胞

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我国肾综合征出血热流行现状与预防控制

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热带病与寄生虫学 2024年第3期22卷 129-132+139页

作者：郑张琦林启晗杜珊珊黄晓霞李建东传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会生物安全重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS）是我国重点防治的乙类传染病，曾在我国广泛流行，给人民群众健康带来严重威胁。多年来，在政府主导多部门通力协作全面落实综合防控措施的背景下，HFRS得到有效控制，... 详细信息

肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS）是我国重点防治的乙类传染病，曾在我国广泛流行，给人民群众健康带来严重威胁。多年来，在政府主导多部门通力协作全面落实综合防控措施的背景下，HFRS得到有效控制，发病总体上进入低水平波动期，但累及地区却在扩大，新的疫源地仍在出现，部分疫源地疫情时有反复，防控工作面临新的形势。进一步巩固防控成果，降低发病率和病死率，仍是当前公共卫生系统亟待解决的挑战之一。为此，本文介绍了HFRS的病原学特征，结合既往疫情资料分析了我国当前HFRS的流行特点，总结了我国HFRS的防控策略与措施，以期为新形势下我国HFRS的防控工作提供有益参考。

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒病原学特征流行特征防控策略

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云南不明原因猝死肠道病毒感染研究进展与展望

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中华地方病学杂志 2024年第5期43卷 425-430页

作者：马琳王跃兵张勇大理大学公共卫生学院大理671000 云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室大理671000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会实验室生物安全重点实验室世界卫生组织西太平洋区脊髓灰质炎参比实验室北京102206

云南不明原因猝死病因至今未明,是云南省长期以来危害严重的地方性公共卫生问题。目前,有研究表明,该病由多种病因导致,鉴于以往研究方法有限,迄今对该病的认识还存在一定的局限性。本文对云南不明原因猝死自首次报道以来的病因研究学... 详细信息

云南不明原因猝死病因至今未明,是云南省长期以来危害严重的地方性公共卫生问题。目前,有研究表明,该病由多种病因导致,鉴于以往研究方法有限,迄今对该病的认识还存在一定的局限性。本文对云南不明原因猝死自首次报道以来的病因研究学说进行了系统梳理,详细论述了该病与肠道病毒感染间的相关性,并结合宏基因组二代测序技术作一展望,以期为今后的病因研究提供借鉴和参考。

关键词：云南不明原因猝死病因学肠道病毒二代测序

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广谱抗病毒药物吐根碱抑制HCoV-OC43的转录组分析

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病毒学报 2024年第3期40卷 458-468页

作者：李涵张高倩吴长城张钟贤牛军伟霍恕婷叶飞邓瑶黄保英赵莉沈晓玲谭文杰包头医学院公共卫生学院包头014040 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 内蒙古医科大学基础医学院微生物教研室呼和浩特010010

本研究旨在探索吐根碱对人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43, HCoV-OC43)的作用时相和抗病毒机制。首先,在MRC-5细胞上建立了HCoV-OC43病毒的体外感染复制动力学曲线,测定了药物的EC_(50)和CC_(50)。结果表明吐根碱能够在感染早期... 详细信息

本研究旨在探索吐根碱对人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43, HCoV-OC43)的作用时相和抗病毒机制。首先,在MRC-5细胞上建立了HCoV-OC43病毒的体外感染复制动力学曲线,测定了药物的EC_(50)和CC_(50)。结果表明吐根碱能够在感染早期有效地抑制HCoV-OC43病毒在MRC-5细胞中的复制。通过转录组分析,发现HCoV-OC43感染和吐根碱处理均导致宿主基因表达的紊乱,并且两者共同激活了抗病毒通路。吐根碱可能通过激活OASL、Mx1和IFIT2等抗病毒基因来增强宿主对病毒的抵抗能力。此外,吐根碱还可能通过抑制TMEM41B表达而进一步影响病毒复制过程。这些研究结果为深入探究吐根碱作为抗冠状病毒药物的机制和潜在靶点提供了重要线索。

关键词：吐根碱 HCoV-OC43 抗病毒作用转录组学基因表达紊乱

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登革热疫苗研究进展

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病毒学报 2025年第2期 580-586页

作者：刘铁柱李建东王世文传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

登革热是全球流行范围最广、经济负担最重的虫媒传染病，2024年至今全球登革热报告病例数已经超过1200万，达历史最高纪录2倍多。目前，登革热治疗主要对症治疗，尚无特效药物，最好的防制手段为预防感染。尽管存在多种限制性技术瓶颈... 详细信息

登革热是全球流行范围最广、经济负担最重的虫媒传染病，2024年至今全球登革热报告病例数已经超过1200万，达历史最高纪录2倍多。目前，登革热治疗主要对症治疗，尚无特效药物，最好的防制手段为预防感染。尽管存在多种限制性技术瓶颈，登革热疫苗研发近年来取得了明显进展，本文对登革热疫苗的种类、效果评估、接种人群和接种策略等方面的进展进行了归纳总结。

关键词：登革热疫苗类型

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人A组轮状病毒VP6单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立和验证

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中国生物制品学杂志 2025年第3期38卷 330-337,343页

作者：赵颖苏韫曦刘晓钰欧阳瑄泽章青庞立丽李金松李丹地孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院甘肃兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家健康卫生委员会医学病毒与病毒重点实验室北京102206

目的制备人A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)VP6单克隆抗体(简称单抗),建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对方法进行验证及初步应用,为我国RVA的快速诊断、流行病学调查及病毒监测提供更多选择。方法利用杆状病毒系统表达纯化人RVA G9P... 详细信息

目的制备人A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)VP6单克隆抗体(简称单抗),建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对方法进行验证及初步应用,为我国RVA的快速诊断、流行病学调查及病毒监测提供更多选择。方法利用杆状病毒系统表达纯化人RVA G9P[8]株VP6蛋白,免疫5只雌性BALB/c小鼠,制备单抗,间接ELISA法测定单抗的半数效应浓度(EC_(50)),Western blot和间接免疫荧光试验测定单抗与RVA的结合活性。利用单抗配对,其中1株用于包被,另1株进行HRP标记用于检测,建立双抗体夹心ELISA检测方法,并进行灵敏性、特异性和精密性验证。取RV临床粪便样本,分别利用Oxoid ProSpecT商品化试剂盒和建立的双抗体夹心ELISA法进行检测,比较检测结果的符合率。结果纯化得到可溶的VP6蛋白,纯度达90%以上,表达量约为4.5 mg/L。筛选获得2株RVA VP6单抗,命名为1L3和4F22,与VP6蛋白结合的EC_(50)分别为1.777和3.748 ng/mL,2株单抗与RVA可很好的结合。以1L3单抗为捕获抗体,HRP标记的4F22单抗为检测抗体,建立了人RVA双抗体夹心ELISA检测方法。该方法对RVA VP6蛋白的最低检出量为156.25 ng/mL;2株单抗与人诺如病毒(Norovirus,NoV)、札如病毒(Sapovirus,SaV)、腺病毒(adenovirus,AdV)均无交叉反应;批内和批间精密性验证的变异系数(CV)均<10%。该方法检测192份RV临床粪便样本,与商品化试剂盒检测结果比较,阳性符合率为99%,阴性符合率为98%。结论建立的人RVA双抗体夹心ELISA方法具有良好的灵敏性、特异性和精密性,可用于人RVA的检测。

关键词：人A组轮状病毒 VP6 真核表达单克隆抗体双抗体夹心ELISA

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基于慢病毒包装构建稳定表达Cas9蛋白的Caco-2细胞系

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中国生物制品学杂志 2025年第1期38卷 8-13,21页

作者：王铭月刘欣奕张锦华章青王宏孔翔羽孙晓曼庞立丽李丹地段招军甘肃中医药大学公共卫生学院甘肃兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 大连医科大学附属第二医院辽宁大连116023

目的采用成簇的规律性间隔短回文重复序列及其相关蛋白9(clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9,CRISPR/Cas9)系统构建基因敲除细胞文库,以人结肠腺癌细胞Caco-2为研究对象构建稳定表达Cas9蛋白的细胞系。方法包装重组Cas9慢病毒并感染Caco-2细胞,经杀稻瘟菌素及2次有限稀释法筛选Caco-2/Cas9单克隆细胞,并进行PCR和Western blot鉴定。用同时表达GFP和带有GFP向导RNA(single guide RNA,sgRNA)的慢病毒感染Caco-2/Cas9单克隆细胞,经嘌呤霉素筛选后,采用流式细胞术检测结果计算Caco-2细胞株的敲除效率,CCK-8法检测其细胞增殖活性。结果共获得5株Caco-2/Cas9单克隆细胞系,分别命名为Caco-2/Cas9-2、Caco-2/Cas9-3、Caco-2/Cas9-4、Caco-2/Cas9-5和Caco-2/Cas9-6,均可扩增出392 bp的Cas9基因条带,Cas9蛋白在细胞中稳定表达,敲除效率分别为91.27%、20.30%、24.13%、11.33%、12.27%、8.89%;Caco-2/Cas9-4、Caco-2/Cas9-5、Caco-2/Cas9-63株单克隆细胞及未感染Caco-2细胞的增殖活性分别为2.07、1.75、1.46和1.40。Caco-2/Cas9-5、Caco-2/Cas9-6单克隆细胞与未感染Caco-2细胞比较,差异均无统计学意义(t分别为1.92和0.37,P均>0.05)。结论筛选出1株具有Cas9高酶切活性且细胞增殖活性较未感染Caco-2细胞无显著变化的Caco-2/Cas9单克隆细胞系,即Caco-2/Cas9-6单克隆细胞,为进一步构建高覆盖率敲除细胞文库奠定了基础,也为筛选病毒感染有关基因和其他特定功能基因提供了平台。

关键词： Cas9蛋白 Caco-2细胞基因敲除成簇的规律性间隔短回文重复序列

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肠杆菌目细菌碳青霉烯酶检测的研究进展

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新发传染病电子杂志 2024年第3期9卷 78-85页

作者：滑少为赵子今赵萌申辛欣冯志山河北北方学院河北张家口075000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206 河北省人民医院检验科河北石家庄050051

近年来,细菌耐药已经成为公共卫生的一项重大挑战,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对抗生素的耐药形势尤为严峻。CRE的主要耐药机制是碳青霉烯酶的产生,不同菌株携带的耐药基因不同,产生... 详细信息

近年来,细菌耐药已经成为公共卫生的一项重大挑战,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)对抗生素的耐药形势尤为严峻。CRE的主要耐药机制是碳青霉烯酶的产生,不同菌株携带的耐药基因不同,产生的碳青霉烯酶也不同,因此,碳青霉烯酶和耐药基因的早期检测对于控制耐药菌的传播起到重要作用。目前对于碳青霉烯酶的表型检测方法有改良Hodge实验、改良碳青霉烯灭活试验、Carba NP试验、免疫学技术、质谱技术,对于耐药基因型的检测方法有实时荧光定量PCR技术、微阵列技术、等温扩增技术、测序技术,这些方法在碳青霉烯酶的检测中均具有广泛应用。了解各检测技术的优缺点对于在实际应用中选择最适检测方法是非常重要的。本文主要对CRE碳青霉烯酶检测方法的研究进展和各方法的优缺点进行综述,为CRE的检测、预防以及院内感染控制提供数据支持。

关键词：碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌碳青霉烯酶诊断检测

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