检索结果-内蒙古大学图书馆

Survivin shRNA和APC片段双基因的载体构建及其在HT-29细胞的表达

医学研究生学报 2016年第4期29卷 369-374页

作者：袁禧先段厚羽曹锋杜井峰朱艳丽程开杨延涛佳木斯大学附属第一医院消化二科佳木斯医学硕士154003 佳木斯大学临床医学院佳木斯154003 佳木斯大学附属第一医院放射线科佳木斯154003

目的研究表明APC、Survivin 2种基因表达异常在结肠癌的发生发展中具有重要意义。构建Survivin shRNA、APC功能片段双基因共表达慢病毒载体并观察其能否于HT-29结肠癌细胞中成功表达,同时观察其是否能够对结肠癌细胞凋亡产生影响。方法... 详细信息

目的研究表明APC、Survivin 2种基因表达异常在结肠癌的发生发展中具有重要意义。构建Survivin shRNA、APC功能片段双基因共表达慢病毒载体并观察其能否于HT-29结肠癌细胞中成功表达,同时观察其是否能够对结肠癌细胞凋亡产生影响。方法构建3对互补Survivin shRNA片段,从其中筛选出一条最佳干扰shRNA片段,与APC功能片段(aa1020-1698)相连接构建双基因共表达质粒载体。将HT-29细胞分为实验组、空载组、空白组3组,慢病毒对HT-29进行侵染,观察是否有绿色荧光表达及对转染细胞进行realtime PCR、Western blot检测Survivin、APC基因表达水平。通过检测Caspase-3活性来检测细胞凋亡情况。结果 1Real time PCR检测后显示对Survivin基因起到最佳干扰效果的片段为shRNA3序列。2构建出的shRNA载体经过送序验证比对后,3对shRNA序列与最初设计的序列完全相同。在HT-29细胞中可见绿色荧光,实验组Survivin相对含量(31.71±1.49)较空载组(100±0)、空白组(95.12±2.15)明显减少(P<0.05),APC mRNA表达水平较空载组(0±0)、空白组(0.51±0.15)明显增加(P<0.05)。实验组Survivin蛋白相对含量(0.18±0.01)较空白组(0.24±0.04)、空载组(0.22±0.03)明显减少,APC蛋白表达水平(0.147±0.016)较空白组(0.095±0.012)、空载组(0.108±0.015)明显升高(P<0.05)。3实验组凋亡相对比值(0.573±0.050)较空白组(0.390±0.040)、空载组(0.407±0.030)明显增加(P<0.05)。结论成功构建Survivin-shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体,并能够在HT-29结肠癌细胞中成功表达,该双基因共表达载体可为后续利用该载体进行基因治疗的基础实验提供材料。

关键词： HT-29 Survivin shRNA APC有效片段双基因慢病毒

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多模式教学方法整合在医学寄生虫学教学中的应用研究

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中国病原生物学杂志 2014年第2期9卷 I0001-I0002,F0003页

作者：陈光蔡连顺罗兰毕胜苏菊香代月佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学第一附属医院消化一科佳木斯大学第一附属医院神经内科

本文针对新形势下五年制医学生的特点,通过全面提升教师素质,打造一流教学团队,对学生全面分析,做到因材施教,探索多种教学模式,以提高教学效果。为医学寄生虫学教学提供一定的参考和借鉴作用。

关键词：医学寄生虫学教学方法教学效果

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吡格列酮对戊四氮致痫大鼠Toll样受体、核因子-κB表达的影响

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中国老年学杂志 2016年第16期36卷 3890-3893页

作者：金玉玲单鹤刘蕾佳木斯大学附属第一医院神经一科黑龙江佳木斯154003

目的研究过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡格列酮对癫痫大鼠海马组织Toll样受体(TLR)4及核因子(NF)-κB表达的影响。方法建立雄性SD大鼠腹腔注射PTZ诱导癫痫模型,根据组别给予不同剂量PTZ连续灌胃,RT-PCR法检测各组大鼠海马区T... 详细信息

目的研究过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡格列酮对癫痫大鼠海马组织Toll样受体(TLR)4及核因子(NF)-κB表达的影响。方法建立雄性SD大鼠腹腔注射PTZ诱导癫痫模型,根据组别给予不同剂量PTZ连续灌胃,RT-PCR法检测各组大鼠海马区TLR4及NF-κB含量,免疫荧光检测TLR4及NF-κB蛋白表达。结果通过RT-PCR及免疫组化检测,癫痫模型组(PTZ)大鼠脑海马TLR4、NF-κB含量比正常对照组(NC组)增高(P<0.05);PTZ干预低、中、高剂量组(PL、PM、PH组)的TLR4、NF-κB表达量较PTZ组减低(P<0.05),且随着PTZ干预剂量增加而调低,并于PH组显著下降(P<0.05)。结论戊四氮致痫大鼠海马区TLR4及其下游信号NF-κB表达增加,PPARγ激动剂吡格列酮能够通过降低TLR4及NF-κB表达,从而减轻癫痫发作对神经系统的炎性损伤,这可能是其对神经细胞保护作用的潜在机制之一。

关键词：癫痫戊四氮过氧化物酶增殖物激活受体γ 吡格列酮 Toll样受体4 核因子-κB

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人为因素导致上肢外周神经损伤延迟修复的显微外科治疗

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中华显微外科杂志 2004年第3期27卷 216-217页

作者：周成福乔晓峰黑龙江佳木斯大学附属第一医院骨外一科 154002

目的　探讨分析应用显微外科技术治疗人为因素所致上肢外周神经损伤延迟修复的原因及治疗体会。　方法　应用显微外科技术治疗人为因素所致上肢外周神经损伤延迟修复 2 7例 2 9条神经 ,手术方法包括神经松解、屈曲腕 (肘 )关节位神经外... 详细信息

目的　探讨分析应用显微外科技术治疗人为因素所致上肢外周神经损伤延迟修复的原因及治疗体会。　方法　应用显微外科技术治疗人为因素所致上肢外周神经损伤延迟修复 2 7例 2 9条神经 ,手术方法包括神经松解、屈曲腕 (肘 )关节位神经外膜缝合、束膜缝合及电缆式神经移植。　结果　术后随访 8个月～ 9年 ,平均 3 7个月 ,平均优良率 77 8%。　结论　应用显微外科技术治疗人为因素所致上肢外周神经损伤延迟修复时 ,如能尽早治疗并做到神经对位精确、无张力缝合以及神经彻底松解 ,是可以取得较为满意疗效的。

关键词：人为因素上肢外周神经损伤显微外科手术方法

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用犬股静脉移植修复股动脉缺损后动态增殖研究

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中华显微外科杂志 2007年第2期30卷 118-120,I0004页

作者：孙义久石磊黄冶宇李长德孙佳冰乔晓峰佳木斯大学附属第一医院骨外一科黑龙江省佳木斯市154002

目的以杂种家犬为实验对象,用手术的方法建立股静脉替代股动脉的实验模型,探讨股静脉移植修复动脉缺损后的微细结构增殖性改变及其随时间改变的变化程度,找寻静脉替代动脉后的增殖规律。方法股静脉倒置移植修复动脉缺损,术后30～180 d分... 详细信息

目的以杂种家犬为实验对象,用手术的方法建立股静脉替代股动脉的实验模型,探讨股静脉移植修复动脉缺损后的微细结构增殖性改变及其随时间改变的变化程度,找寻静脉替代动脉后的增殖规律。方法股静脉倒置移植修复动脉缺损,术后30～180 d分6个时间段行血管造影观察通畅率并分别切取移植静脉,肉眼和光镜观察自体静脉移植后的内膜、中膜增殖情况。结果血管造影显示移植静脉管腔变细,管壁增厚,都有不同程度的僵硬变厚,弹性减低,光镜下管腔面内皮细胞层随时间延长由扁平状逐渐变为柱状,中膜平滑肌层数增多。结论自体静脉移植入动脉环境后时间越长,移植血管管壁就越厚,管腔就越狭窄,闭塞的几率增加。术后60 d为移植静脉管壁增殖的开始时期。

关键词：股静脉股动脉移植犬

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老年癫痫患者血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-2水平和脑电图检查的相关性

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中国老年学杂志 2017年第13期37卷 3317-3318页

作者：张春野王昆祥李欣胡金玲魏巍佳木斯大学附属第一医院急诊科黑龙江佳木斯15400 佳木斯大学附属第一医院神经二科黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学附属第一医院神经一科黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学附属第一医院口腔科黑龙江佳木斯154002

目的分析老年癫痫患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、白细胞介素(IL)-2水平和脑电图检查关系。方法 40例老年癫痫患者为癫痫组,同期健康体检老年人40例为健康组,运用酶联免疫吸附(ELISA)法对两组血清TNF-α、IL-2水平进行检测,应用脑... 详细信息

目的分析老年癫痫患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、白细胞介素(IL)-2水平和脑电图检查关系。方法 40例老年癫痫患者为癫痫组,同期健康体检老年人40例为健康组,运用酶联免疫吸附(ELISA)法对两组血清TNF-α、IL-2水平进行检测,应用脑电图仪对其进行脑电图检查。结果癫痫组发病后1 h、1 d的血清TNF-α、IL-2水平、脑电图异常率均显著高于健康组(P<0.05),脑电图轻、中、重度异常血清TNF-α、IL-2水平均逐渐提升(P<0.05),且均显著高于健康组(P<0.05)。结论老年癫痫患者血清TNF-α、IL-2水平和脑电图异常率均较健康人高且呈正相关。

关键词：癫痫血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2 脑电图

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动力髋螺钉和解剖型钢板治疗股骨粗隆间骨折比较

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中国老年学杂志 2010年第21期30卷 3195-3196页

作者：王鲁川李长德臧志海张卓然佳木斯大学附属第一医院骨一科黑龙江佳木斯154002 哈尔滨体育学院

股骨粗隆间骨折是老年人常见骨折之一,目前多采用手术治疗.老年人由于机体功能衰退常合并有较严重的内科并发症,对手术的耐受性差,难以承受大的手术创伤及长时间卧床.故治疗要求创伤小、手术时间短、出血少、早离床等;DHS内固定治疗股... 详细信息

股骨粗隆间骨折是老年人常见骨折之一,目前多采用手术治疗.老年人由于机体功能衰退常合并有较严重的内科并发症,对手术的耐受性差,难以承受大的手术创伤及长时间卧床.故治疗要求创伤小、手术时间短、出血少、早离床等;DHS内固定治疗股骨粗隆周围骨折具备以上优点,DHS内固定还具有滑动加压、牢固固定、在C臂监控下操作相对简单且定位准确的优点,是目前治疗股骨粗隆周围骨折的主要内固定物.另外,由于DHS具有向尾部滑动的功能,可促使断端产生持续轴向嵌压,有利于骨折的愈合,能达到早期活动患肢的目的,因而适应于各种类型粗隆间骨折的治疗.手术前应对患者特别是老年患者的健康情况作出一个全面的评估,这对降低手术的危险性及术后并发症十分重要~[3].麻醉后在手术台上直接牵引复位,在C臂监控下复位迅速、准确,导针定位准确,这样大大缩短了手术操作时间;从髋关节外侧人路进入软组织剥离少、血管少,无需离断肌肉,故出血少;因为有坚强的内固定,术后患者可早离床;减少术后并发症,符合老年人骨折的治疗特点,DHS是目前治疗此种骨折理想的内固定材料~[4]

关键词：动力髋螺钉解剖型钢板股骨粗隆间骨折

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骨关节炎与骨质疏松的相关性研究

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中国骨质疏松杂志 2017年第2期23卷 259-261页

作者：胡泽昆吴霞孙晓鹏付冰冰佳木斯大学第一附属医院风湿免疫科黑龙江佳木斯154000

关于骨关节炎与骨质疏松的相关性研究已有半个世纪,两者的相关性存在很大争议,骨关节炎与骨质疏松作为两种与骨代谢相关的疾病,雌激素、NO、基因遗传、甲状旁腺激素等多种因素对其存在影响。两者均属于与人体衰老密切联系且发病机制并... 详细信息

关于骨关节炎与骨质疏松的相关性研究已有半个世纪,两者的相关性存在很大争议,骨关节炎与骨质疏松作为两种与骨代谢相关的疾病,雌激素、NO、基因遗传、甲状旁腺激素等多种因素对其存在影响。两者均属于与人体衰老密切联系且发病机制并不相同的退行性疾病。有的研究认为两者是对立的,OA患者的BMD是普遍增高的,系列的纵向研究也发现OA患者伴BMD升高其骨折发生率反而增加。有的研究认为BMD增高可以阻止OA的疾病进展。也有一部分学者认为两者并不关联。本文通过查阅国内外近10年的文献,探讨两者的确切关系,应用于临床,使患者受益。

关键词：骨关节炎骨质疏松相关性

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脂蛋白脂酶活性与老年2型糖尿病关系的研究

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中国老年学杂志 2004年第6期24卷 510-511页

作者：郭朝阳隋少玉郭朝晖白书阁佳木斯大学附属第二医院检验科黑龙江佳木斯154003 佳木斯大学第一附属医院佳木斯大学基础医学院

目的　探讨脂蛋白脂酶 (LPL)活性的改变与老年 2型糖尿病 (T2 DM)的关系。方法　 55例老年 T2 DM患者 ,55例非 T2 DM老人为对照组 ,测定两组 LPL活性、血糖、糖化血红蛋白 (Hb Alc)、血脂水平。结果　与对照组比较 ,老年 T2 DM组血糖、H... 详细信息

目的　探讨脂蛋白脂酶 (LPL)活性的改变与老年 2型糖尿病 (T2 DM)的关系。方法　 55例老年 T2 DM患者 ,55例非 T2 DM老人为对照组 ,测定两组 LPL活性、血糖、糖化血红蛋白 (Hb Alc)、血脂水平。结果　与对照组比较 ,老年 T2 DM组血糖、Hb Alc水平明显高于对照组 (P<0 .0 1 )、LPL活性显著低于对照组 (P<0 .0 1 )、甘油三酯 (TG)高于对照组 (P<0 .0 5)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)明显低于对照组 (P<0 .0 1 )。老年 T2 DM组 LPL与 TG呈负相关 (P<0 .0 1 ) ,与 HDL - C水平呈正相关 (P<0 .0 1 )。结论　老年 T2 DM患者 LPL活性降低导致 TG分解代谢降低而出现高 TG血症 ,TG向 HDL- C转化速度的改变使 HDL-

关键词：老年2型糖尿病脂蛋白脂酶

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SurvivinshRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长情况的影响

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医学研究生学报 2017年第6期30卷 584-590页

作者：袁禧先温超曹雅杜井峰程开朱艳丽段厚羽佳木斯大学附属第一医院消化二科佳木斯医学硕士154003 佳木斯大学临床医学院佳木斯154003

目的在转录后水平进行干预的RNA干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛。文中旨在构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过联合RNAi和外源性补充的方式研究Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对结肠癌裸鼠移植瘤生长情... 详细信息

目的在转录后水平进行干预的RNA干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛。文中旨在构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过联合RNAi和外源性补充的方式研究Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对结肠癌裸鼠移植瘤生长情况的影响。方法选取35只裸鼠随机数字表法分为5组,即Survivin shRNA-APC双基因组、Survivin shRNA组、APC组、空载组和空白组,每组7只;将已经构建好的处于对数生长期的双基因共表达Survivin shRNA-APC、Survivin shRNA及APC稳转株,空载稳转株,HT-29结肠癌细胞(均为2×106/mL)分别注射至5组裸鼠左前腋下成瘤,构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型;通过测量瘤体体积、重量,检测移植瘤生长抑制率,Real time PCR检测移植瘤组织survivin mRNA的表达,免疫组化检测Survivin蛋白的表达,TUNEL检测凋亡情况。结果与空白组比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组移植瘤平均体积、平均重量均减少(P<0.05);与空载组比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组平均体积、平均移植瘤重量亦减少(P<0.05),而体积抑制率、瘤重抑制率均增加(P<0.05);与双基因组比较,APC组、Survivin shRNA组移植瘤平均体积、平均重量均增加(P<0.05)。与空白组和空载组相比,APC组、Survivin shRNA组、Survivin shRNA-APC双基因组移植瘤组织Survivin mRNA和蛋白表达相对含量明显降低(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,双基因组移植瘤组织Survivin mRNA和蛋白表达相对含量亦明显降低(P<0.05)。与空白组裸鼠移植瘤组织结肠癌细胞凋亡指数[(9.89±0.31)%]比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组[(31.19±1.79)%、(33.64±2.03)%、(56.72±3.17)%]明显升高(P<0.05),而APC组、Survivin shRNA组、双基因组亦较空载组[(10.06±0.43)%]明显升高(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,Survivin shRNA-APC双基因组移植瘤组织癌细胞凋亡指数明显升高(P<0.05)。结论 Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体能够使Survivin基因的表达水平降低,促进结肠癌细胞的凋亡,抑制移植瘤的生长,且优于单个基因的影响。

关键词：皮下移植瘤双基因共表达慢病毒载体 Survivin shRNA APC HT-29

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