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AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA构建及其对卵巢癌细胞体外抑制作用的研究

现代妇产科进展 2018年第2期27卷 108-111页

作者：柴馨婷王琳刘君星宋继荣马雷李萌王振玉佳木斯大学研究生院佳木斯154000 佳木斯大学附属第一医院检验科佳木斯154000 佳木斯大学基础医学院佳木斯154000 佳木斯大学附属第一医院妇产科佳木斯154000

目的:构建溶瘤腺病毒载体系统AD-h TERT-3E-EGFP-IRES-ELA,观察ADh TERT-3E-EGFP-IRES-ELA在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及对SKOV3细胞的体外杀伤、抑制迁移的作用。方法:利用基因重组技术构建腺病毒AD-h TERT-3E-EGFP-IRESELA。使用OLYMPUS共聚焦显微镜系统,观察EGFP在SKOV3细胞中的表达情况。通过MTS、流式细胞仪检测AD-h TERT-3E-EGFP-IRES-ELA对SKOV3细胞的杀伤效果及作用方式。通过划痕实验、Transwell检测重组病毒对SKOV3细胞体外迁移的作用。结果:成功构建AD-h TERT-3E-EGFP-IRES-ELA。AD-h TERT-3E-EGFP-IRES-ELA在卵巢癌细胞(SKOV3)中可表达EGFP,其荧光强度随时间增加而增强。AD-h TERT-3E-EGFP-IRESELA对卵巢癌细胞具有杀伤效果(P<0.05)及抑制细胞迁移的特性(P<0.05),主要作用是导致SKOV3细胞出现早期凋亡。结论:成功构建了一种新型的肿瘤特异的溶瘤腺病毒载体系统AD-h TERT-3E-EGFP-IRES-ELA,其在体外对卵巢癌细胞具有杀伤及抑制肿瘤迁移的作用。

关键词：卵巢癌细胞肿瘤增殖肿瘤迁移 AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA

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转化生长因子β1诱导以纤维连接蛋白作为生长基质的神经干细胞迁移实验

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第47期12卷 9270-9274页

作者：金玉玲綦莹朱晓峰佳木斯大学附属第一医院神经一科黑龙江省佳木斯市154002

背景:如何使移植入脑的或自体激活的神经干细胞在迁移途中能大量存活并准确到达病灶部位,以修复和替代受损组织,是应用神经干细胞治疗神经系统损伤的关键问题。目的:观察转化生长因子β1对以纤维连接蛋白为生长基质的神经干细胞定向迁... 详细信息

背景:如何使移植入脑的或自体激活的神经干细胞在迁移途中能大量存活并准确到达病灶部位,以修复和替代受损组织,是应用神经干细胞治疗神经系统损伤的关键问题。目的:观察转化生长因子β1对以纤维连接蛋白为生长基质的神经干细胞定向迁移的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-03/11在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料:选取同一基因背景Wistar大鼠72只,随机数字表法分成3组:模型对照组、单纯神经干细胞移植组、转化生长因子β1与纤维连接蛋白包被的神经干细胞联合移植组(简称联合移植组),每组24只,移植后1,3,7,14d每个时间点6只。方法:各组大鼠均采用ZeaLonga线栓法建立局灶性脑缺血模型。单纯神经干细胞移植组在左侧侧脑室注入5μL已标记Brdu的神经干细胞悬液。联合移植组在左侧感觉运动皮质区注入100μg/L的转化生长因子2μL;左侧侧脑室注入5βL已标记Brdu的纤维连接蛋白包被神经干细胞悬液。各组分别于移植后1,3,7,14d取脑组织制备切片。主要观察指标:Brdu标记的的神经干细胞在宿主脑内的迁移。结果:体外培养的神经干细胞移植到大鼠脑缺血模型后,在侧脑室下区,移植1d时,各实验组均有细胞存活,3d时细胞逐渐增加,到7d时,Brdu阳性细胞从侧脑室大量迁出,侧脑室下区阳性细胞数明显增多达到高峰,联合移植组的阳性细胞数多于其他两组,且迁移趋势明显。在皮质区,神经干细胞移植3d时迁移到皮质区的细胞数量开始增加,7d时达到高峰,各时间点均多于对照组,差异有显著性。并且到达皮质区的神经干细胞最终能分化为神经元。结论:转化生长因子β1可以促进以纤维连接蛋白作为生长基质的神经干细胞定向迁移。转化生长因子β1与纤维连接蛋白在诱导神经干细胞迁移方面可能有协同效应。

关键词： TGF-β1 纤维连接蛋白神经干细胞迁移移植

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华支睾吸虫病患者细胞因子水平与肝功能关系的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第1期22卷 54-56页

作者：蔡连顺肖景莹辛华朱丽贤陈光张涛王国志佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154007 佳木斯大学第一附属医院检验科佳木斯154003 佳木斯大学基础医学院生化教研室佳木斯154007

目的　探讨华支睾吸虫病患者细胞因子水平与肝功能的关系。　方法　 47例确诊、但未经药物治疗的华支睾吸虫病患者 ,参照Child Pugh肝功能分级法 ,按照评分将其分成A ( 3～ 4分 ) 2 0例、B( 5～ 6分 ) 15例、C( 7～ 9分 )12例等 3组。... 详细信息

目的　探讨华支睾吸虫病患者细胞因子水平与肝功能的关系。　方法　 47例确诊、但未经药物治疗的华支睾吸虫病患者 ,参照Child Pugh肝功能分级法 ,按照评分将其分成A ( 3～ 4分 ) 2 0例、B( 5～ 6分 ) 15例、C( 7～ 9分 )12例等 3组。用放射免疫法及双抗体夹心酶联免疫吸附测定 (ELISA)法 ,检测血清白细胞介素 2 (IL 2 )、可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R )、白细胞介素 8(IL 8)、肿瘤坏死因子α(TNF α) ;用全自动生化分析仪检测患者血清总胆红素(TBL)、血清白蛋白 (ALB)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)。并进行统计分析。　结果　华支睾吸虫病患者sIL 2R、IL 8、TNF α水平明显高于健康人对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,而IL 2含量明显减少 (P <0 0 1)。随着患者肝功能受累程度的加重 ,sIL 2R、IL 8、TNF α含量依次递增 ,IL 2含量依次递减 ,A组和C组间差异具有显著性意义 (P <0 0 5 )。sIL 2R、TNF α含量与其TBL(r =0 3 3 1　P <0 0 5 ,r =0 5 18　P <0 0 1)及ALT (r =0 475　P <0 0 1,r =0 2 85　P <0 0 5 )呈正相关 ,与ALB呈负相关 (r =-0 3 19　P <0 0 5 ,r =-0 665　P <0 0 1)。　结论　华支睾吸虫病患者细胞免疫功能降低 ,血清IL 2、sIL 2R、TNF

关键词：华支睾吸虫病细胞因子肝功能放射免疫法 ELISA 细胞免疫功能肿瘤坏死因子

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基于Nrf2-ARE信号通路探析己酮可可碱对癫痫大鼠脑内氧化应激的影响

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医学研究生学报 2020年第2期33卷 144-148页

作者：孙光涛戚询中邹春颖王克健黄作义佳木斯大学附属第一医院神经四科佳木斯154002

目的基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路探析己酮可可碱(PTX)对癫痫(EP)大鼠脑内氧化应激的影响。方法实验纳入36只健康、成年雄性Wistar大鼠,并按照完全随机法分为空白对照组(腹腔注射等渗盐水)、EP对照组(诱发E... 详细信息

目的基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路探析己酮可可碱(PTX)对癫痫(EP)大鼠脑内氧化应激的影响。方法实验纳入36只健康、成年雄性Wistar大鼠,并按照完全随机法分为空白对照组(腹腔注射等渗盐水)、EP对照组(诱发EP发作)、PTX组(诱发EP发作+PTX预处理),每组12只。观察各组大鼠行为学改变,记录EP发作率、发作潜伏期,断头处死取黑质、海马组织后检测氧化应激指标及Nrf2-ARE信号通路相关蛋白表达水平。结果给药后空白对照组大鼠未见异常反应,PTX组EP发作率(33.3%)、发作等级[(2.14±0.40)vs(3.09±0.58)]均明显低于EP对照组,且发作潜伏期明显延长(P<0.05)。与空白对照组相比,EP对照组大鼠黑质、海马组织丙二醛(MDA)含量明显高,谷胱甘肽(GSH)、超氧化物岐化酶(SOD)活性显著降低(P<0.05);而相比EP对照组,PTX组黑质、海马组织MDA含量[(760.22±74.86)nmol/g vs(682.93±69.01)nmol/g·pro、(842.24±101.17)nmol/g·pro vs(705.46±80.87)nmol/g·pro]明显降低,GSH[(68.31±12.57)μg/g·pro vs(94.43±14.11)μg/g·pro、(64.27±10.28)μg/g·pro vs(87.36±11.11)μg/g·pro]、SOD[(95.34±8.72)U/mg·pro vs(120.60±10.04)U/mg·pro,(91.33±8.46)U/mg·pro vs(118.46±9.94)U/mg·pro]活性明显增加(P<0.05)。与空白对照组相比,EP对照组大鼠黑质组织、海马Nrf2、HO-1蛋白表达明显降低(P<0.05);而PTX组黑质组织、海马Nrf2相比EP对照组,显著增加[(0.72±0.09)vs(0.30±0.04)、(0.34±0.06)vs(0.21±0.03)]、HO-1[(0.66±0.08)vs(0.34±0.05)、(0.48±0.08)vs(0.31±0.05)],NQO-1蛋白表达显著增加[(0.48±0.07)vs(0.25±0.06)、(0.78±0.11)vs(0.68±0.07),P<0.05],且海马组织表达恢复至空白对照组水平(P>0.05),黑质组织表达明显高于空白对照组水平(P<0.05)。结论 PTX可抑制EP发作,改善EP发作早期大鼠脑内氧化应激状态,可能机制为PTX可特异性激活Nrf2-ARE信号通路。

关键词： Nrf2-ARE信号通路己酮可可碱癫痫氧化应激

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乙酰半胱氨酸致胰岛素自身免疫综合征1例

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医药导报 2018年第11期37卷 1422-1423页

作者：胡嘉庆子潘佳秋佳木斯大学佳木斯154007 佳木斯大学第一附属医院内分泌科佳木斯154002

患者，女，48岁，农民。因“反复发作性出汗、手抖伴意识丧失1周”于2017年5月4日入院。入院前1周，患者无明显诱因突感心悸、手抖、大汗淋漓、视物模糊，继而意识丧失，约1 h后神志自行恢复，发作时无偏瘫、失语及大小便失禁等。此后... 详细信息

患者，女，48岁，农民。因“反复发作性出汗、手抖伴意识丧失1周”于2017年5月4日入院。入院前1周，患者无明显诱因突感心悸、手抖、大汗淋漓、视物模糊，继而意识丧失，约1 h后神志自行恢复，发作时无偏瘫、失语及大小便失禁等。此后上述症状反复发作，1～2 d发作一次，发作时间多在餐后3～4 h，为求进一步诊治收入我院。

关键词：乙酰半胱氨酸胰岛素自身免疫综合征不良反应,药品

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透明质酸对树突状细胞肿瘤抗原提呈效应的调节

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第1期30卷 48-51页

作者：付艳军李春海张雪董中国卓越佟秀凤董航卞德强佳木斯大学附属第一医院教务科佳木斯市中心医院普外科

目的观察透明质酸负载的树突状细胞(DC)肿瘤抗原提呈的生物学行为的变化,探索透明质酸对DC肿瘤抗原提呈效应的调节。方法构建B16黑素瘤鼠模型,随机分成3组,即生理盐水组,DC悬液组和由透明质酸介导的DC组。小鼠股骨骨髓干细胞用GM-CSF和I... 详细信息

目的观察透明质酸负载的树突状细胞(DC)肿瘤抗原提呈的生物学行为的变化,探索透明质酸对DC肿瘤抗原提呈效应的调节。方法构建B16黑素瘤鼠模型,随机分成3组,即生理盐水组,DC悬液组和由透明质酸介导的DC组。小鼠股骨骨髓干细胞用GM-CSF和IL-4诱导形成DC,实验组用透明质酸孵育24 h。随后将单纯生理盐水、未处理的DC和用透明质酸孵育的DC(HA-DC)悬液(注射前1 d均加入BrdU,并调整细胞密度为1×106/mL),注射到小鼠移植瘤周围皮下。利用阳性胶体铁染色法,检测蛋白多糖在不同处理组中的表达;利用免疫组织化学法,观察HA-DC和DC在肿瘤组织中的分布及对肿瘤细胞的杀伤作用。结果 HA-DC组比DC治疗作用更明显(瘤体缩小)。BrdU标记的HA-DC细胞主要分布于癌巢边缘区,局部淋巴结的被膜下窦和副皮质区,HA-DC组蛋白多糖的表达明显高于对照组和DC组(P<0.05)。结论骨髓干细胞来源的DC细胞负载透明质酸后大量增殖,抗原呈递能力增强,调节淋巴细胞的增殖活化,激发CTL免疫应答。

关键词：透明质酸 B16黑素瘤树突状细胞

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脑梗死后癫痫与γ-氨基丁酸B受体及前强啡肽原启动子基因多态性的关系

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中国老年学杂志 2018年第10期38卷 2323-2325页

作者：王璇王辰秦丽微秦丽红佳木斯大学附属第一医院神经内科黑龙江佳木斯154002 佳木斯大学附属第一医院物理诊断科

目的探讨γ-氨基丁酸B受体基因亚单位(G1465A)及前强啡肽原启动子基因多态性与脑梗死后癫痫发生的关系。方法选取脑梗死继发癫痫患者52例(继发癫痫组),脑梗死无癫痫患者81例(无癫痫组);同期90例体检正常老年人为健康对照组。采集三组受... 详细信息

目的探讨γ-氨基丁酸B受体基因亚单位(G1465A)及前强啡肽原启动子基因多态性与脑梗死后癫痫发生的关系。方法选取脑梗死继发癫痫患者52例(继发癫痫组),脑梗死无癫痫患者81例(无癫痫组);同期90例体检正常老年人为健康对照组。采集三组受试者空腹肘静脉血,柱层析法提取基因组DNA,PCR-RFLP技术检测γ-氨基丁酸B受体基因(G1465A)多态性;PCR技术检测前强啡肽原启动子基因多态性。结果三组受试者γ-氨基丁酸B受体基因第7外显子1465位均为G等位基因,基因型均为G/G型,无A/A型、A/G型。继发癫痫组患者L/L型频率明显高于无癫痫组、健康对照组,H/H型频率明显低于无癫痫组、健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);无癫痫组与健康对照组前强啡肽原启动子区基因型分布之间差异无统计学意义(P>0.05)。继发癫痫组等位基因以L型频率为明显高于无癫痫组、健康对照组,无癫痫组、健康对照组等位基因以H型频率明显高于继发癫痫组,差异有统计学意义(P<0.01);无癫痫组与健康对照组前强啡肽原启动子区基因型频率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论γ-氨基丁酸B受体(G1465A)非脑梗死继发癫痫的易感基因;前强啡肽原启动子基因多态性与脑梗死后癫痫发生有明显关系,其中L型等位基因是易感基因,H型等位基因是保护基因。

关键词：脑梗死继发癫痫 γ-氨基丁酸B受体前强啡肽原

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核因子κB在低氧诱导因子1α基因修饰神经干细胞上调血管内皮生长因子表达中的桥接作用

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第49期13卷 9668-9672页

作者：金玉玲刘静静朱晓峰佳木斯大学附属第一医院神经一科黑龙江省佳木斯市154003

背景:很多研究发现,在脑缺氧损伤区域核因子κB与血管内皮生长因子表达呈正相关。因此,作者大胆假设,核因子κB是否处于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子作用通路上并起桥接作用。目的:以低氧诱导因子1α修饰的神经干细胞为载体,观... 详细信息

背景:很多研究发现,在脑缺氧损伤区域核因子κB与血管内皮生长因子表达呈正相关。因此,作者大胆假设,核因子κB是否处于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子作用通路上并起桥接作用。目的:以低氧诱导因子1α修饰的神经干细胞为载体,观察核因子κB在低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达通路中的作用。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/12在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料:新生24h内的Wistar大鼠,雌雄不拘。方法:扩增腺病毒载体低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后转染神经干细胞,荧光检测神经干细胞中低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白及空载体Ad-绿色荧光蛋白表达,分别提取基因转染后神经干细胞、空载体转染神经干细胞、正常神经干细胞蛋白。然后低氧诱导因子1α基因修饰的神经干细胞中按50,150,300μmol/L浓度梯度加入核因子κB特异性抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷,WesternBlot法检测其中血管内皮生长因子的表达变化。主要观察指标:各组神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达;给予梯浓度核因子κB特异性抑制剂后神经干细胞中血管内皮生长因子的表达。结果:腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白转染神经干细胞后基因表达强弱与MOI及转染时间有关;转染低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后的神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达呈正相关;给予梯浓度核因子κB特异性抑制剂后腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白修饰的神经干细胞中血管内皮生长因子的表达呈抑制剂浓度依赖性下调,各浓度组之间血管内皮生长因子表达差异有显著性意义(P<0.05～0.01)。结论:核因子κB位于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达的信号通路上并起桥接作用。

关键词：神经干细胞低氧诱导因子1α 基因转染血管内皮生长因子核因子κB

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超声及超声双重造影在阑尾病变诊断中的应用

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中国老年学杂志 2013年第7期33卷 1698-1700页

作者：张静曹霞郑春梅王薇杨欣佳木斯大学附属第一医院物理诊断科黑龙江佳木斯154003

阑尾是一个细长的管状结构,一端连于盲肠,一端为盲端,因其位置、形态多变且不固定,加之周围气体和肠内容物的干扰,正常用低频探头扫查较难清晰显示,只有在右下腹腔内有游离液体的衬托下部分可完整显示〔1〕。阑尾病变是临床的常见病和... 详细信息

阑尾是一个细长的管状结构,一端连于盲肠,一端为盲端,因其位置、形态多变且不固定,加之周围气体和肠内容物的干扰,正常用低频探头扫查较难清晰显示,只有在右下腹腔内有游离液体的衬托下部分可完整显示〔1〕。阑尾病变是临床的常见病和多发病。近年来随着超声影像学技术的不断发展,阑尾病变的术前诊断率明显上升，但是阑尾的肿瘤特别是较小的肿瘤普通超声较难检出，需应用超声造影检查及超声双重造影检查以提高诊断率。

关键词：超声双重造影助显剂阑尾病变超声诊断

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肉桂醛对RSV宿主细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响

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中国老年学杂志 2014年第6期34卷 1575-1577页

作者：代立娟韩有文李绍民徐伟丽李春媚朱有冯澜佳木斯大学附属第一医院感染病科黑龙江佳木斯154002

目的探讨肉桂醛对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的宿主细胞Hela细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响。方法 RSV感染宿主Hela细胞后,选用不同浓度肉桂醛在不同作用方式下进行干预,采用免疫荧光方法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达量。结果与病毒对照... 详细信息

目的探讨肉桂醛对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的宿主细胞Hela细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响。方法 RSV感染宿主Hela细胞后,选用不同浓度肉桂醛在不同作用方式下进行干预,采用免疫荧光方法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达量。结果与病毒对照组相比,给药组的Bcl-2表达量增加,Bax表达量降低(P<0.05);从蛋白的表达量可以看出肉桂醛在病毒直接灭活、吸附作用阶段对RSV有杀灭抑制作用。结论肉桂醛在有效浓度范围内通过对感染病毒细胞凋亡通路Bcl-2蛋白、Bax蛋白的影响,对RSV有杀灭作用。

关键词：呼吸道合胞病毒(RSV) 细胞凋亡 Bcl-2蛋白 Bax蛋白肉桂醛

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