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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第2期38卷 119-129页

作者：王淞李海胜钱卫张小容贺伟峰罗高兴陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市创面修复与组织再生重点实验室重庆400038 解放军中部战区总医院烧伤整形科武汉430064

目的探讨P311对人微血管内皮细胞1(HMEC-1)血管形成能力的影响及其可能的分子机制。方法采用实验研究方法。取HMEC-1,按随机数字表法(分组方法下同)分为P311腺病毒组和空载腺病毒组,分别进行48 h相应转染后,采用细胞计数试剂盒8法检测培... 详细信息

目的探讨P311对人微血管内皮细胞1(HMEC-1)血管形成能力的影响及其可能的分子机制。方法采用实验研究方法。取HMEC-1,按随机数字表法(分组方法下同)分为P311腺病毒组和空载腺病毒组,分别进行48 h相应转染后,采用细胞计数试剂盒8法检测培养1、3、5 d细胞增殖活性;划痕试验检测细胞划痕后6、11 h剩余划痕面积,并计算剩余划痕面积百分比;体外血管形成实验观察细胞培养8 h血管形成情况,并测量管状结构节点数和总长度;蛋白质印迹法检测细胞中血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、磷酸化VEGFR2、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及磷酸化ERK1/2蛋白表达量。取HMEC-1,分为P311腺病毒+阴性对照小干扰RNA(siRNA)组、空载腺病毒+阴性对照siRNA组、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组和空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组,分别进行相应的处理,蛋白质印迹法检测转染24 h细胞中VEGFR2、磷酸化VEGFR2、ERK1/2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量;体外血管形成实验观察转染24 h细胞血管形成情况,并测量管状结构节点数和总长度。取HMEC-1,分为P311腺病毒+二甲基亚砜(DMSO)组、空载腺病毒+DMSO组、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组和空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组,分别进行相应的处理。蛋白质印迹法检测处理2 h细胞中ERK1/2及磷酸化ERK1/2蛋白表达量;体外血管形成实验观察处理2 h细胞血管形成情况,并测量管状结构节点数和总长度。各组各时间点样本数均为6。对数据行独立样本t检验、重复测量方差分析、单因素方差分析、LSD检验。结果与空载腺病毒组比较,P311腺病毒组细胞培养1、3、5 d增殖活性均没有明显改变(t值分别为-0.23、-1.30、-1.52,P>0.05)。P311腺病毒组细胞划痕后6、11 h剩余划痕面积百分比均较空载腺病毒组明显降低(t值分别为-2.47、-2.62,P<0.05)。培养8 h,与空载腺病毒组比较,P311腺病毒组细胞管状结构节点数和总长度均明显增加(t值分别为4.49、4.78,P<0.01)。转染48 h,与空载腺病毒组比较,P311腺病毒组细胞VEGFR2、ERK1/2蛋白表达量均无明显变化(P>0.05),磷酸化VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显升高(t值分别为17.27、16.08,P<0.01)。转染24 h,P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞磷酸化VEGFR2和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于空载腺病毒+阴性对照siRNA组(P<0.01),P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞VEGFR2、磷酸化VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组(P<0.01),空载腺病毒+阴性对照siRNA组细胞VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组(P<0.05或P<0.01)。转染24 h,P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构节点数为(720±62)个,明显多于空载腺病毒+阴性对照siRNA组的(428±38)个、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组的(364±57)个(P值均<0.01);P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构总长度为(21241±1139)μm,明显长于空载腺病毒+阴性对照siRNA组的(17005±1156)μm、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组的(13494±2465)μm(P值均<0.01)。空载腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构节点数明显多于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组的(310±75)个(P<0.01),管状结构总长度明显长于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组的(11600±2776)μm(P<0.01)。处理2 h,P311腺病毒+DMSO组细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达量明显高于空载腺病毒+DMSO组、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组(P值均<0.01),空载腺病毒+DMSO组细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达量明显高于空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组(P<0.05)。处理2 h,P311腺病毒+DMSO组细胞管状结构节点数为(726±72)个,明显多于空载腺病毒+DMSO组的(421±39)个、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组的(365±41)个(P值均<0.01);P311腺病毒+DMSO组细胞管状结构总长度为(20318±1433)μm,明显长于空载腺病毒+DMSO组的(16846±1464)μm、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组的(15114±1950)μm(P值均<0.01)。空载腺病毒+D

关键词：伤口愈合血管内皮生长因子受体2 血管新生人微血管内皮细胞1 P311 胞外信号调节激酶1/2

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采用Luminex技术检测肾移植受者体内供者特异性抗体

采用Luminex技术检测肾移植受者体内供者特异性抗体

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2012中国器官移植大会

作者：唐敏英王瑾高霞王庆华南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】应用单抗原微珠抗体检测肾移植受者供者特异性抗体(DSA),并探讨DSA阳性与移植肾排斥的关系,从而避免移植后的排斥反应。【方法】应用Luminex(流式细胞微珠法)检测亲属肾移植受者移植前、后供者特异性抗体,分析HLA错配与DSA产生... 详细信息

【目的】应用单抗原微珠抗体检测肾移植受者供者特异性抗体(DSA),并探讨DSA阳性与移植肾排斥的关系,从而避免移植后的排斥反应。【方法】应用Luminex(流式细胞微珠法)检测亲属肾移植受者移植前、后供者特异性抗体,分析HLA错配与DSA产生关系,以及DSA产生对移植物排斥的影响。【结果】39例亲属肾移植受者,共检测样本313次,其中移植前78次,移植后235次。移植前出现DSA阳性的均

关键词：供者特异性抗体肾移植受者 Luminex 技术检测

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无血清培养人脐带间充质干细胞的初步探讨

无血清培养人脐带间充质干细胞的初步探讨

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2012中国器官移植大会

作者：王昊旻黄梁浒路君王瑾陈津付云峰施晓华赵红州林娜王庆华谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

无血清培养基(SFM)因组分较明确、无或少有动物源性成分等优点受到干细胞研究者的重视,而干细胞基础与临床应用研究的蓬勃发展,掀起了SFM的研发热潮,其中Invitrogen公司的STEMPROMSC SFM是业内公认的优质间充质干细胞无血清培养基。... 详细信息

无血清培养基(SFM)因组分较明确、无或少有动物源性成分等优点受到干细胞研究者的重视,而干细胞基础与临床应用研究的蓬勃发展,掀起了SFM的研发热潮,其中Invitrogen公司的STEMPROMSC SFM是业内公认的优质间充质干细胞无血清培养基。人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)因来源丰富、体外扩增能力强、免疫原性低、无伦理问题等有巨大的临床应用前景。本实验为应用STEMPRO(?)MSC SFM培养hUC-MSCs的初步探讨。

关键词：人脐带间充质干细胞无血清培养基无血清培养初步探讨

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HLA配型对肾移植受者长期人/肾存活率的影响

HLA配型对肾移植受者长期人/肾存活率的影响

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2012中国器官移植大会

作者：王庆华吴琳王瑾王英唐敏英杨顺良吴卫真谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】探讨HLA交叉反应组(CREGs)配型对肾移植受者长期人/肾存活率的影响【方法】应用美国莱姆德公司LM72OR、PCR-SSP2LB、ABDR、LAT1240试剂,准确检测肾移植受者HLA抗体和供受者HLA分型,应用CREGs配型标准选择供者,经长期随访观察其C... 详细信息

【目的】探讨HLA交叉反应组(CREGs)配型对肾移植受者长期人/肾存活率的影响【方法】应用美国莱姆德公司LM72OR、PCR-SSP2LB、ABDR、LAT1240试剂,准确检测肾移植受者HLA抗体和供受者HLA分型,应用CREGs配型标准选择供者,经长期随访观察其Cr值及人/肾生存情况。【结果】本组111例肾移植受者均于2001年1～12月间行肾脏移植术,术前群体反应性抗体阳性12例,供受者

关键词：肾移植受者肾存活率 HLA

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慢病毒载体系统介导人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系的建立

慢病毒载体系统介导人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表...

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2012中国器官移植大会

作者：王水良林凤锦黄粱浒王瑾王庆华谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】建立慢病毒载体系统介导的人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系。【方法】绿荧光蛋白和荧光素酶共表达慢病毒载体与相应包装质粒psPAX2和pMD2.G经聚乙烯亚胺(PEI)介导共转染HEK293T细胞,转染12小时后弃去转染... 详细信息

【目的】建立慢病毒载体系统介导的人脐带间充质干细胞绿荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系。【方法】绿荧光蛋白和荧光素酶共表达慢病毒载体与相应包装质粒psPAX2和pMD2.G经聚乙烯亚胺(PEI)介导共转染HEK293T细胞,转染12小时后弃去转染液,换正常培养基继续培养,每隔24小时后收集含慢病毒的培养液并行0.45μM孔径的滤器过滤以去除细胞碎片,病毒上清置-80℃保存待用。待分离的人脐带间充质干细胞长至约80%汇合

关键词：人脐带间充质干细胞共表达绿荧光蛋白慢病毒载体系统

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胰岛与间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的实验研究

胰岛与间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：陈津马予洁黄梁浒蔡锦全付云峰王庆华谭建明南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】探讨胰岛与间充质干细胞联合移植的实验基础和治疗效果。是否能在体外共培养模型中延长胰岛细胞的存活,以及在体内联合移植中改善移植胰岛的功能,发挥更好的移植治疗效果。【方法】通过在体外将分离的大鼠胰岛细胞与骨髓间充质... 详细信息

【目的】探讨胰岛与间充质干细胞联合移植的实验基础和治疗效果。是否能在体外共培养模型中延长胰岛细胞的存活,以及在体内联合移植中改善移植胰岛的功能,发挥更好的移植治疗效果。【方法】通过在体外将分离的大鼠胰岛细胞与骨髓间充质干细胞共培养,与单独胰岛细胞培养对比,通过AO/PI染色评价胰岛细胞的活性,高糖刺激胰岛细胞释放胰岛素功能实验以及激光共聚焦检测胰岛细胞GAPDH活性等来评价胰岛细胞在体外存活时间、活性、功能等。同时将分离的胰岛细胞与间充质干细胞经肝门静脉联合移植到链脲佐菌素诱导

关键词：联合移植间充质干细胞胰岛细胞培养糖尿病移植治疗

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受体相互作用蛋白激酶1在小鼠实验性牙周炎模型中的作用

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实用口腔医学杂志 2021年第5期37卷 596-600页

作者：夏思颖杨亚楠闫香珍章海兵罗礼君同济大学附属口腔医院牙周病科·上海牙组织修复与再生工程技术研究中心 200072 中国科学院上海生命科学研究院营养与健康研究所·营养代谢与食品安全重点实验室

目的:研究受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)在小鼠实验性牙周炎模型中的作用和可能机制。方法:提取牙周炎患者及牙周健康者的牙龈组织,Western blot检测RIP1蛋白的表达。在RIP1条件性基因敲除(RIP1^(-/-))小鼠和C57野生型小鼠上颌第二磨牙... 详细信息

目的:研究受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)在小鼠实验性牙周炎模型中的作用和可能机制。方法:提取牙周炎患者及牙周健康者的牙龈组织,Western blot检测RIP1蛋白的表达。在RIP1条件性基因敲除(RIP1^(-/-))小鼠和C57野生型小鼠上颌第二磨牙建立牙周炎模型,用Micro-CT扫描成像分析对比两组小鼠实验侧牙槽骨丧失量。提取2组小鼠对照侧及实验侧牙龈组织,用实时荧光定量聚合酶链反应检测相关炎症因子mRNA的表达差异。结果:牙周炎患者牙龈组织RIP1蛋白的表达降低(P<0.01)。建立牙周炎模型后,RIP1^(-/-)小鼠牙槽骨丧失量增加(P<0.01),牙龈组织中多个促炎和抗炎因子表达改变(P<0.05)。结论:RIP1可能通过调节炎症因子的表达减轻实验性牙周炎小鼠的牙槽骨吸收。

关键词：牙周炎受体相互作用蛋白激酶1 炎症因子

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流式细胞仪检测肾移植受者外周血调节性T细胞

流式细胞仪检测肾移植受者外周血调节性T细胞

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2012中国器官移植大会

作者：董会月林凤锦林灵婧路君黄梁浒南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】肾移植术后受者外周血CD4CD25FOXP3T-reg有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受,与移植肾长期存活密切相关,其百分含量可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。本文应用流式细胞仪检测肾移植受者移植前后外... 详细信息

【目的】肾移植术后受者外周血CD4CD25FOXP3T-reg有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受,与移植肾长期存活密切相关,其百分含量可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。本文应用流式细胞仪检测肾移植受者移植前后外周血中调节性T细胞的变化。【方法】入组亲属肾移植受者31例,术后常规服用免疫抑制剂,应用美国BD公司FACSAriaSORP流式细胞仪检

关键词：肾移植受者同种异体移植免疫耐受肾移植术后流式细胞仪检测急性排斥反应外周血

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衰老间充质干细胞核糖体蛋白基因表达分析

衰老间充质干细胞核糖体蛋白基因表达分析

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2012中国器官移植大会

作者：路君南京军区福州总医院全军器官移植研究所福建省移植生物学重点实验室全军组织修复和器官重建重点实验室

【目的】间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有分化为多种组织细胞的能力,已被用于多种组织的再生和修复,成为目前研究最活跃的成体干细胞。老年个体来源的MSCs移植疗效要低于年轻个体来源的MSCs。间充质干细胞衰老过程中核... 详细信息

【目的】间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有分化为多种组织细胞的能力,已被用于多种组织的再生和修复,成为目前研究最活跃的成体干细胞。老年个体来源的MSCs移植疗效要低于年轻个体来源的MSCs。间充质干细胞衰老过程中核糖体蛋白基因表达变化尚未研究报道。【方法】本研究检测了72种Ensemble数据库中人的RP基因的mRNA转录水平。我们分离了两个健康志愿者的骨髓间充质干细胞(bone marrow derived MSCs,BM-MSCs),分别培养至第9代(P9)。β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测

关键词：间充质干细胞核糖体蛋白基因表达分析

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远程医疗在慢性创面愈合治疗和护理领域的应用及前景

远程医疗在慢性创面愈合治疗和护理领域的应用及前景

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2013年全军烧伤外科学术年会

作者：程飚陈葵刘坚广州军区广州总医院整形外科伤口治疗中心全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广州广东510010

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