检索结果-内蒙古大学图书馆

刑事技术 2020年第1期45卷 9-13页

作者：孙启凡李冉冉赵一霞舒跹何红霞胡胜季安全公安部物证鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室法医遗传学公安部重点实验室北京100038 济宁医学院司法鉴定中心山东济宁272067 山西医科大学太原030001

目的研究判断常规试剂盒所提RNA中残留的基因组是否会对后续RNA检测产生影响并建立相应的纯化应对策略。方法使用miRNeasy?Mini Kit提取外周血和月经血样本中的RNA,用TURBO DNA-free?Kit对部分RNA纯化,通过紫外荧光定量、琼脂糖凝胶电... 详细信息

目的研究判断常规试剂盒所提RNA中残留的基因组是否会对后续RNA检测产生影响并建立相应的纯化应对策略。方法使用miRNeasy?Mini Kit提取外周血和月经血样本中的RNA,用TURBO DNA-free?Kit对部分RNA纯化,通过紫外荧光定量、琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量检测等方法对比纯化前后是否存在显著差异性,并使用琼脂糖凝胶电泳以及毛细管电泳DNA分型扩增来判断外周血样本中提取的RNA是否有基因组残留。结果使用试剂盒进行DNA纯化后可有效去除残留的基因组DNA。纯化后的RNA浓度较纯化前大都有所下降;琼脂糖电泳结果显示纯化后无DNA条带,RNA条带纯化前后差异不大,完整性良好;RNA实时荧光定量检测结果显示单个microRNA(miRNA)在纯化前后有些会存在总量上的差异,但6种miRNA在外周血和月经血中相对表达量高低始终保持一致。结论常规RNA提取试剂盒所提RNA中含有的DNA会影响部分miRNA检测结果,但不会影响对体液组织属性来源的判定。对提取的RNA进一步纯化可有效去除基因组DNA残留,但同时会影响RNA总量。要根据实际研究需要,决定是否应该予以纯化。

关键词：法医遗传学 RNA提取 RNA纯化

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一种复合miRNAs检测体系的构建及在体液组织属性来源鉴定中的应用研究

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中国司法鉴定 2020年第3期 28-34页

作者：孙启凡马温华胡胜李冉冉赵一霞王乐叶健李彩霞季安全公安部物证鉴定中心法医遗传公安部重点实验室现场物证溯源技术国家工程实验室北京100038

目的选取5种常见体液的10条特异性miRNAs基因,通过逆转录-终点法PCR技术构建复合扩增体系,并对体系的灵敏度进行测试,之后使用该体系检测静脉血、精液、月经血、唾液和阴道分泌液中miRNAs的表达情况。方法首先设计10条miRNAs标记的逆转... 详细信息

目的选取5种常见体液的10条特异性miRNAs基因,通过逆转录-终点法PCR技术构建复合扩增体系,并对体系的灵敏度进行测试,之后使用该体系检测静脉血、精液、月经血、唾液和阴道分泌液中miRNAs的表达情况。方法首先设计10条miRNAs标记的逆转录引物和cDNA扩增引物,构建10个标准miRNAs标记的荧光复合体系,并进行灵敏度测试。然后使用miRNeasy Mini Kit(QIAGEN)提取体液样本的RNA,运用荧光复合体系进行检测,并对检测结果进行分析。结果本研究得到10个标准miRNAs标记的分型结果,标准miRNAs标记的荧光复合体系的检测灵敏度为总miRNAs模板量≥1ng。静脉血样本10条miRNA检测结果:miR-451、miR-144-3p、miR-144-5p,峰值在3000~7000 rfu之间;月经血样本分型结果:miR-214、miR-451、miR-144-3p、miR-205-5p、miR-203-3p,峰值在800~7000 rfu之间;阴道分泌物样本分型结果:miR-144-3p、miR-203-3p,miR-205-5p,峰值在600~3000 rfu之间。唾液样本分型结果:miR-451、miR-144-3p、miR-205-5p、miR-203-3p,峰值在600~7000 rfu之间;精液样本分型结果:miR-888、miR-144-3p、miR-891a,峰值在1000~7000 rfu之间。结论本研究建立的该体系能够对5种法医学常见体液(静脉血、唾液、精液、月经血和阴道分泌物)进行区分鉴定,为犯罪现场体液斑痕鉴定提供了新的检测方法。

关键词：法医遗传学 miRNAs 体液来源鉴定逆转录-终点法PCR 毛细管电泳

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细胞分离检验技术在法医混合生物检材检验中的应用

细胞分离检验技术在法医混合生物检材检验中的应用

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中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会

作者：李彩霞胡兰公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室

DNA检验技术通过对犯罪现场遗留的血迹、精斑、唾液斑、毛发等生物检材的检验来认定和排除嫌疑人,在公安办案实践中发挥着至关重要的作用。混合生物样品是强奸、杀人等案件中常见的生物检材,常规检测方法往往只能得到不同来源人的混合DN... 详细信息

DNA检验技术通过对犯罪现场遗留的血迹、精斑、唾液斑、毛发等生物检材的检验来认定和排除嫌疑人,在公安办案实践中发挥着至关重要的作用。混合生物样品是强奸、杀人等案件中常见的生物检材,常规检测方法往往只能得到不同来源人的混合DNA图谱,不能作为直接认定嫌疑人的证据,也不能入DNA数据库查找比对。针对该问题,本实验室在国内首次建立了适合法医学应用的细胞分离检验技术平台,该技术是根据细胞形态的差异,分离和富集特定来源人的细胞,然后进行后续检验,从而得到单独个体的DNA分型。该平台包括三项关键技术:显微操作技术、激光捕获显微切割技术、低体积扩增技术(1.5微升体系)。其中,前两种技术用于细胞分离,低体积扩增技术用于微量细胞DNA的扩增。整个平台的灵敏度高,对不同数目的二倍体细胞进行检验,三个细胞可以获得Identifilier试剂中16个STR基因座的全部分型,单个细胞分型成功率为43.4%。通过实际案例检材的检测进一步证明了该平台的有效性和优势,选择常规方法检测不理想的混合检材,可以成功获得不同个体的DNA图谱。

关键词：混合生物检材显微操作激光捕获显微切割低体积扩增

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单细胞分离检验技术在法医学中的应用研究

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刑事技术 2015年第5期40卷 359-363页

作者：丰蕾杨帆李彩霞徐珍凃政李万水胡兰公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 上海市公安局刑侦总队上海200083

法医单细胞分离检验技术是微量混合DNA样本检验最有效的方法之一。常规的单细胞分离检验技术包括单细胞分离、单细胞裂解、PCR扩增、数据分析。本文将详细介绍单细胞分离检验技术原理和应用进展,同时展望了单细胞测序在法医DNA的应用前... 详细信息

法医单细胞分离检验技术是微量混合DNA样本检验最有效的方法之一。常规的单细胞分离检验技术包括单细胞分离、单细胞裂解、PCR扩增、数据分析。本文将详细介绍单细胞分离检验技术原理和应用进展,同时展望了单细胞测序在法医DNA的应用前景。近5年来,单细胞分离、全基因组扩增和二代测序技术的结合而产生的单细胞测序技术,将为法医遗传学检测提供一种全新的技术和思路,尤其为微量混合生物样品检验提供全新的技术手段。

关键词：法医遗传学单细胞分离检验技术微量混合样本单细胞测序二代测序

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法医学二代测序标准化进展与展望

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中国法医学杂志 2020年第1期35卷 73-77,83页

作者：康克莱叶健季安全张驰王乐现场物证溯源技术国家工程实验室公安部物证鉴定中心北京100038 法医遗传学公安部重点实验室公安部物证鉴定中心北京100038

二代测序技术可检测多种法医遗传标记获取海量序列信息,满足法医学实践中精准个体识别、复杂亲缘关系鉴定、特征刻画等应用需求。国内外已开展大量二代测序法医学应用科研工作,但由于缺乏行业标准,二代测序在我国公安实战中并未得到有... 详细信息

二代测序技术可检测多种法医遗传标记获取海量序列信息,满足法医学实践中精准个体识别、复杂亲缘关系鉴定、特征刻画等应用需求。国内外已开展大量二代测序法医学应用科研工作,但由于缺乏行业标准,二代测序在我国公安实战中并未得到有效应用。目前,法医学二代测序的标准制定面临检测靶标特殊、测序技术流程和结果分析不统一等挑战。本文从核酸标准参考物、测序技术要求、序列多态STR等位基因命名规则等方面,梳理国外法医学二代测序标准化工作进展,并总结国内二代测序检测行业标准现状,希冀为我国法医学二代测序的标准建设提供思路和参考。

关键词：法医遗传学二代测序标准化

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基于ITS2条形码序列对新型“香料”毒品植物成分的研究

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刑事技术 2015年第1期40卷 71-73页

作者：杨雪莹曹海丹裴黎徐鹏公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 长春理工大学长春130022

目的应用DNA条形码片段ITS2对新型毒品样品中的植物成分进行分析。方法提取可疑毒品样本"spike99","K2","7号"中的植物基因组DNA,用ITS2通用引物进行扩增,对扩增产物进行测序,对序列校对拼接,应用BLAST... 详细信息

目的应用DNA条形码片段ITS2对新型毒品样品中的植物成分进行分析。方法提取可疑毒品样本"spike99","K2","7号"中的植物基因组DNA,用ITS2通用引物进行扩增,对扩增产物进行测序,对序列校对拼接,应用BLAST方法在NCBI数据库中比对。结果 "spike 99"、"7号"各得到1条ITS2基因序列,"K2"得到2条ITS2基因序列,分别与紫花苜蓿、大麻、啤酒花、黄蜀葵的ITS2基因序列的同源性为100%。结论应用条形码技术可以成功分析新型毒品中的植物种属,为案件中植物样本的种属鉴定提供方法。

关键词：法医遗传学 ITS2基因毒品植物种属鉴定

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线粒体全基因组测序在法医学中的应用

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刑事技术 2015年第5期40卷 368-372页

作者：姚岚李万水胡兰徐珍公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 重庆医科大学重庆400016

线粒体DNA检测是法医DNA检验的重要手段之一。随着分子生物学和计算机技术的发展,二代测序技术的出现,使得线粒体DNA检测从传统的部分测序进入到全基因组测序时代。相对于部分测序,线粒体全基因组测序能够提供更全面的序列信息,提高线粒... 详细信息

线粒体DNA检测是法医DNA检验的重要手段之一。随着分子生物学和计算机技术的发展,二代测序技术的出现,使得线粒体DNA检测从传统的部分测序进入到全基因组测序时代。相对于部分测序,线粒体全基因组测序能够提供更全面的序列信息,提高线粒体DNA检测的识别率;同时也能够通过对全基因组信息的深入分析,获得样本来源信息。本文介绍了经典以及新出现的线粒体DNA测序策略,简述了各种测序策略的优缺点,在此基础上重点介绍了线粒体全基因组测序在法医遗传学、线粒体相关疾病、衰老机制等方面的研究和应用,最后探讨了线粒体全基因组序列分析在法医遗传学实践中应用的可能性以及可能面临的一些问题。

关键词：法医遗传学线粒体DNA 二代测序

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基于二代测序技术的多源遗传标记检测体系的构建与验证

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刑事技术 2023年第2期48卷 111-120页

作者：郭江玲尚蕾汤真丁光树李万水余政梁袁丽萍孙敬孙辉公安部鉴定中心北京市现场物证检验工程技术研究中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 复旦大学生命科学学院人类遗传学与人类学系上海200438

近年来,法医实践中对复杂亲缘关系的鉴定需求越来越多,需要联合多种遗传标记进行判断,如STR、X/Y遗传标记、SNP、线粒体DNA等。二代测序技术可以将多种遗传标记纳入一个检测体系中。本文报道了开发出的一套包含29个常染色体STR、36个Y-... 详细信息

近年来,法医实践中对复杂亲缘关系的鉴定需求越来越多,需要联合多种遗传标记进行判断,如STR、X/Y遗传标记、SNP、线粒体DNA等。二代测序技术可以将多种遗传标记纳入一个检测体系中。本文报道了开发出的一套包含29个常染色体STR、36个Y-STR、32个X-STR、71个Y-SNP以及mtDNA全基因组的检测体系DNATyperTMNGSPanel v1.0。根据DNA分析方法科学工作组(SWGDAM)的验证指南,对该体系的重复性、准确性、一致性、灵敏度、混合样本、物种特异性等指标进行了评估。结果表明,该体系分型结果与毛细管电泳的一致性为99.72%,与ForenSeq™DNA Signature Prep Kit试剂盒相重合的基因座结果均完全一致。在0.5~10 ng DNA模板量范围内无等位基因丢失,而在0.25、0.125 ng时分别出现2、9个基因座的丢失。在男女混合比例为2:1时女性成分开始出现等位基因丢失,混合比例为9:1、4:1、2:1、1:1时,检出率分别为54.72%、81.13%、98.11%、100%,若男女混合比例为1:4则男性成分开始出现等位基因丢失,当混合比例为1:1、1:2、1:4、1:9时检出率分别为100%、100%、90.24%、82.93%。该体系对猪、牛、鼠、食蟹猴、恒河猴的DNA几乎没有扩增发生。因此,本体系的检测通量高,灵敏度和稳定性高,分型准确性和重复性好,对混合样本的检出能力较强。通过单次检测就可同时获得父系、母系相关的遗传信息,能有效提高个体识别能力和亲权鉴定效能。

关键词：法医遗传学体系构建与验证二代测序技术多源遗传标记亲缘关系鉴定

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应用微生物菌群鉴定阴道分泌液

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法医学杂志 2016年第4期32卷 254-256,260页

作者：邹凯南胡萌黄江平周怀谷上海市公安局物证鉴定中心法医物证学现场应用技术公安部重点实验室上海市现场物证重点实验室上海200083 铁道警察学院河南郑州450053

目的探究特异性存在于阴道分泌液中的微生物菌群。方法收集阴道分泌液16份、唾液样本16份、粪便样本16份、精液样本8份、外周血样本8份、尿液样本5份及鼻腔分泌液样本4份,对卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、惰性乳杆菌和阿托波氏菌... 详细信息

目的探究特异性存在于阴道分泌液中的微生物菌群。方法收集阴道分泌液16份、唾液样本16份、粪便样本16份、精液样本8份、外周血样本8份、尿液样本5份及鼻腔分泌液样本4份,对卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、惰性乳杆菌和阿托波氏菌的16S r RNA基因进行扩增,PCR产物采用3130xl型遗传分析仪进行检测。结果卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、惰性乳杆菌和阿托波氏菌在阴道分泌液中的检出份数分别为15、5、8、14和3份。卷曲乳杆菌和詹氏乳杆菌特异性存在于阴道分泌液中。结论检测卷曲乳杆菌和詹氏乳杆菌对鉴定阴道分泌液具有潜在的应用价值。

关键词：法医遗传学微生物学遗传标记阴道分泌液

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保存温度及保存时间对AmpFlSTR~ Identifiler~ Plus Kit PCR Reagents试剂盒PCR混合液效能影响的研究

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刑事技术 2014年第5期39卷 24-26页

作者：赵伟于子辉王静叶健唐晖北京市公安局刑事侦查总队 100192 公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038

目的探讨AmpFlSTRIdentifiler Plus Kit PCR Reagents混合液使用时间和温度的影响因素。方法试剂盒PCR混合液依次在4℃、室温、-20℃下保存1周、2周至15周不等,用于样品STR分型检验。结果4℃保存的PCR混合液在15周之内可以检验出标... 详细信息

目的探讨AmpFlSTRIdentifiler Plus Kit PCR Reagents混合液使用时间和温度的影响因素。方法试剂盒PCR混合液依次在4℃、室温、-20℃下保存1周、2周至15周不等,用于样品STR分型检验。结果4℃保存的PCR混合液在15周之内可以检验出标准品9947A的STR分型;室温保存在6周之内可以检出;-20℃保存至少在15周内可以检出。结论由AmpFlSTR Identifiler Plus Kit PCR Reagents试剂盒各组分组成的试剂盒PCR混合液在一定的保存条件下使用是可行的,符合法庭科学人类荧光标记STR技术要求。

关键词： DNA检验试剂盒保存条件

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