检索结果-内蒙古大学图书馆

南方医科大学学报 2025年第2期45卷 313-321页

作者：高俊杰叶开吴竞皖南医学院第二附属医院检验科安徽芜湖241000

目的筛选槲皮素治疗肾透明细胞癌(ccRCC)的潜在分子靶点。方法运用网络药理学方法从多个数据库中筛选槲皮素的治疗靶点,运用孟德尔随机化方法从4907种血浆蛋白中筛选与ccRCC显著相关的靶点,构建药物-疾病网络模型,筛选出潜在的关键靶点... 详细信息

目的筛选槲皮素治疗肾透明细胞癌(ccRCC)的潜在分子靶点。方法运用网络药理学方法从多个数据库中筛选槲皮素的治疗靶点,运用孟德尔随机化方法从4907种血浆蛋白中筛选与ccRCC显著相关的靶点,构建药物-疾病网络模型,筛选出潜在的关键靶点,运用生物信息学技术评估这些靶点的作用,培养ccRCC细胞并用不用浓度槲皮素处理,行CCK-8实验、创伤愈合实验、RT-qPCR和Western blotting对筛选靶点进行验证。结果网络药理学和孟德尔随机化综合分析筛选出了TP53(OR=3.325,95%CI:1.805-6.124,P=0.0001)、ARF4(OR=0.173,95%CI:0.065-0.456,P=0.0003)和DPP4(OR=0.463,95%CI:0.302-0.711,P=0.0004)3个槲皮素治疗ccRCC的核心靶点。生物信息学分析表明TP53在肾透明细胞癌中表达增高(P<0.001);生存分析显示高表达TP53的肾癌患者预后更差(P<0.001);分子对接显示槲皮素与TP53的结合能为-5.83 kcal/mol;CCK-8实验和创伤愈合实验显示槲皮素在体外抑制786-O细胞的增殖和迁移(P<0.05);RT-qPCR和Western blotting显示槲皮素在体外抑制TP53 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论TP53可能是槲皮素治疗ccRCC的关键靶点,为槲皮素治疗肾透明细胞癌的分子机制研究奠定了基础。

关键词：槲皮素肾透明细胞癌网络药理学孟德尔随机化 TP53基因分子靶点

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中国四省入院患者肠道定植肠杆菌目细菌 mcr基因流行及耐药性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2025年第4期45卷 324-331页

作者：丁新颖严泽琳马澜李园园李福飞李庆吕承秀张嵘乔媛媛滨州医学院基础医学院烟台264003 淄博市第一医院检验科淄博255200 浙江大学医学院附属第二医院检验科杭州310009 兰州大学第二医院检验科兰州730000 河南科技大学第一附属医院检验科洛阳471800 淄博市妇幼保健院检验科淄博255022

目的明确2023年中国浙江、河南、甘肃和山东四省多家医院入院患者肠道定植肠杆菌目细菌多黏菌素耐药mcr基因的流行特征。方法收集2023年浙江、河南、甘肃和山东四省多家医院入院患者的粪便样本共667份,采用微生物培养、琼脂糖凝胶电泳... 详细信息

目的明确2023年中国浙江、河南、甘肃和山东四省多家医院入院患者肠道定植肠杆菌目细菌多黏菌素耐药mcr基因的流行特征。方法收集2023年浙江、河南、甘肃和山东四省多家医院入院患者的粪便样本共667份,采用微生物培养、琼脂糖凝胶电泳、耐药基因PCR检测、全基因组测序、生物信息学分析以及诱导耐药等方法对携带mcr基因的肠杆菌目细菌进行流行病学调查,并对数据进行统计学分析。结果在667份入院患者的粪便样本当中,获得5份携带mcr基因的阳性样本,携带率为0.75%(5/667),其中有2份样本各分离出2株不同的携带mcr基因菌株。共检出携带mcr基因的肠杆菌目细菌7株,其中4株携带mcr-1基因,3株携带mcr-9基因。mcr基因阳性菌株包含3株大肠埃希菌、1株布拉克柠檬酸杆菌、1株弗劳地柠檬酸杆菌、1株肺炎克雷伯菌和1株霍氏肠杆菌。7例mcr阳性的肠杆菌目细菌分别分离自浙江省(n=4)和河南省(n=3)样本。全基因组测序后发现,3株mcr-1阳性大肠埃希菌的16S rRNA序列具有高度同源性,3株mcr-9阳性菌株在mcr-9和wbuC区域保持了较高的同源性。经多黏菌素诱导后,ZJ-307、HN-11-1和HN-135菌株相比于诱导前,其生长速率存在显著性差异,同时运动能力降低。结论mcr基因阳性的肠杆菌目细菌在入院患者肠道中定植比例较低,该基因极易被诱导成高最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值耐药株,并且多黏菌素诱导耐药株可能会改变其原始的生长速率和运动能力,还可能会改变其他药物的MIC值,这会增加临床治疗的难度。因此,必须重视针对重点人群的主动筛查,避免质粒介导的多黏菌素耐药性在临床相关革兰阴性细菌病原体中进一步传播。

关键词：肠杆菌 mcr基因多黏菌素耐药机制

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海南省耐多药结核病的近期传播相关影响因素

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中国热带医学 2024年第4期24卷 443-449,494页

作者：钟业腾王洁莹陈灼霖许玉妮邱文华裴华海南医学院第二附属医院检验科海南海口570216

目的探讨耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的近期传播相关影响因素,以期为海南省MDR-TB防控及临床提供流行病学依据。方法收集2019年7月—2021年6月在海南医学院第二附属医院就诊的MDR-TB患者临床呼吸道标本进行... 详细信息

目的探讨耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的近期传播相关影响因素,以期为海南省MDR-TB防控及临床提供流行病学依据。方法收集2019年7月—2021年6月在海南医学院第二附属医院就诊的MDR-TB患者临床呼吸道标本进行分枝杆菌分离培养,经比例法药敏筛选出耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)菌株进行全基因组测序(whole-genome sequencing,WGS),结合临床流行学资料,分析MDR-TB的近期传播影响因素。结果共有202例MDR-TB患者纳入研究,主要分布在海南省的18个市县(除三沙市),患者以男性为主。MDR-MTB菌株的谱系分析显示,有56.4%(114/202)为Lineage2.2(Beijing)、27.2%(55/202)为Lineage2.1(non-Beijing)、13.4%(27/202)为Lineage4(Euro-American)、3.0%(6/202)为Lineage1(Indo-Oceanic)。通过遗传距离分析,发现了15个簇的42株MDR-MTB菌株,MDR-MTB菌株成簇率为20.8%,存在一定程度的近期传播。近期传播相关因素分析显示,非农民职业、初治、未婚患者与MDR-TB的近期传播有正相关性,而高龄和吸烟史患者则与其负相关。Lineage2.2(Beijing)相较于Lineage2.1(non-Beijing)更易发生MDR-TB传播。多因素Logistic回归模型分析进一步证实初治患者可能为MDR-TB的近期传播的独立危险因素。结论海南省MDR-TB具有独特遗传多样性,但Lineage2.2仍为主要流行株,海南省MDR-TB的近期传播与非农民职业、初治、未婚、Lineage2.2(Beijing)有关,初治患者可能是传播的独立危险因素,为MDR-TB的控制提供了重要线索,有望指导相关防控策略的制定,以减少MDRTB疫情传播。

关键词：耐多药结核病结核分枝杆菌危险因素近期传播全基因组测序

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肉汤微量稀释法对耐多药结核分枝杆菌敏感性检测的评价

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中国感染控制杂志 2024年第7期23卷 840-846页

作者：钟业腾王洁莹陈灼霖许玉妮邱文华裴华海南医学院第二附属医院检验科海南海口570216

目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结... 详细信息

目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结果罗氏比例法和BMD法药敏结果平均判读时间分别为28.0、8.5 d。罗氏比例法检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇、卡那霉素和卷曲霉素的耐药率高于BMD法(均P<0.001);BMD法检测丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的耐药率高于罗氏比例法(均P<0.001)。以罗氏比例法药敏结果为金标准,BMD法检测耐药性的灵敏度和特异度分别为50.00%~100%、95.69%~100%,除EMB(87.39%)、INH(94.96%)外,BMD法检测其他药物的耐药性符合率均≥95%。罗氏比例法药敏结果与WGS总符合率为76.19%(32/42),BMD法药敏结果与WGS总符合率为23.81%(10/42),差异具有统计学意义(χ^(2)=23.048,P<0.001)。两种药敏方法检测结果不一致的MTB共34株,罗氏比例法耐药+BMD法敏感的26株MTB中,22株(84.62%)相关耐药基因发生突变;罗氏比例法敏感+BMD法耐药的11株MTB中,5株(45.45%)相关耐药基因发生突变。结论BMD法是一种准确、快速的MDR-MTB敏感性检测方法,但仍需要进一步改进和优化,耐药性与相关耐药基因的突变密切相关。

关键词：耐多药结核分枝杆菌罗氏比例法肉汤微量稀释法最低抑菌浓度药物敏感试验

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狼疮性肾炎患者尿液外泌体代谢组学标志物初步分析

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中华检验医学杂志 2025年第5期48卷 650-655页

作者：杨平刘文静严虹南京大学医学院附属鼓楼医院检验科南京210008 南京医科大学第二附属医院检验医学中心南京210011

目的分析狼疮性肾炎患者特征性尿液外泌体代谢物。方法病例对照研究。收集2022年10月20日至2024年3月10日在南京大学医学院附属鼓楼医院风湿科住院的29例狼疮性肾炎患者,其中男性5例,女性24例,年龄(32±12)岁以及20名健康体检志愿... 详细信息

目的分析狼疮性肾炎患者特征性尿液外泌体代谢物。方法病例对照研究。收集2022年10月20日至2024年3月10日在南京大学医学院附属鼓楼医院风湿科住院的29例狼疮性肾炎患者,其中男性5例,女性24例,年龄(32±12)岁以及20名健康体检志愿者的尿液样本,其中男性4例,其中女性16例,年龄(34±11)岁。使用聚乙二醇沉淀法提取外泌体,采用液相色谱质谱技术进行代谢组学分析。采用R语言对预处理后的数据矩阵进行主成分分析(PCA)和正交最小偏二乘判别分析(OPLS-DA)。基于OPLS-DA模型得到的变量权重值(VIP)和student′s t检验P值来筛选差异代谢物。采用受试者工作特征曲线(ROC)对差异代谢物进行诊断效能评估。结果代谢组学分析共筛选出963种代谢物质,根据VIP>1且P<0.05等参数设置,最终筛选得到3种差异外泌体代谢物,分别是L-色氨酸、L-异亮氨酸和L-苯丙氨酸,其ROC曲线下面积分别为0.774、0.783和0.789,三者联合可以达到0.847。结论本研究初步筛选出LN患者特征性的尿液外泌体的代谢物,可为后续狼疮性肾炎标志物的鉴定提供新的思路和策略。

关键词：狼疮肾炎外泌体液质色谱-质谱法尿液生物标志物

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巴戟天寡糖胶囊联合盐酸度洛西汀对抑郁症患者事件相关电位及血清神经递质水平的影响

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新乡医学院学报 2025年第5期42卷 364-368页

作者：王金祥邵咏李惠琳刘蒙新乡医学院第二附属医院临床心理科河南新乡453002 新乡医学院第二附属医院检验科河南新乡453002

目的探讨巴戟天寡糖胶囊联合盐酸度洛西汀对抑郁症患者事件相关电位及血清神经递质水平的影响。方法选择2022年7月至2024年8月新乡医学院第二附属医院收治的105例抑郁症患者为研究对象。根据治疗方法将患者分为对照组(n=51)和观察组(n=5... 详细信息

目的探讨巴戟天寡糖胶囊联合盐酸度洛西汀对抑郁症患者事件相关电位及血清神经递质水平的影响。方法选择2022年7月至2024年8月新乡医学院第二附属医院收治的105例抑郁症患者为研究对象。根据治疗方法将患者分为对照组(n=51)和观察组(n=54),对照组患者给予盐酸度洛西汀治疗,观察组给予巴戟天寡糖胶囊联合盐酸度洛西汀治疗,2组患者均治疗8周。比较2组患者的临床疗效;治疗前、治疗8周后分别采用汉密尔顿抑郁量表-17项(HAMD-17)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、健康调查简表(SF-36)评估2组患者的抑郁程度、认知功能及生存质量;治疗前、治疗8周时,采用诱发电位仪检测2组患者的事件相关电位P300潜伏期及波幅,高效液相色谱法检测血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)水平,酶联免疫吸附法检测血清脑源性神经营养因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平。结果观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(χ^(2)=5.820,P<0.05)。治疗前2组患者HAMD-17、MoCA、SF-36评分比较差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗8周后2组患者的HAMD-17评分显著下降,MoCA、SF-36评分显著上升(P<0.05);治疗8周后,观察组患者的HAMD-17评分显著低于对照组,MoCA、SF-36评分显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者事件相关电位P300潜伏期、波幅比较差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗8周后2组患者事件相关电位P300潜伏期均显著降低(P<0.05),P300波幅均显著升高(P<0.05);治疗8周后,观察组患者的P300潜伏期显著低于对照组,P300波幅显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者血清5-HT、NE、BDNF、NSE水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗8周后2组患者血清5-HT、NE、BDNF水平均显著升高,NSE水平均显著降低(P<0.05);治疗8周后,观察组患者血清5-HT、NE、BDNF水平显著高于对照组,NSE水平显著低于对照组(P<0.05)。结论巴戟天寡糖胶囊联合盐酸度洛西汀可有效提高抑郁症患者临床疗效,减轻抑郁程度,提高认知功能及生存质量,同时改善事件相关电位及神经递质水平。

关键词：抑郁症巴戟天寡糖胶囊度洛西汀相关电位神经递质

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纳米氧化铈对OGD/R小胶质细胞保护的作用机制

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中国稀土学报 2024年

作者：郭丽娜李宜格李裕林赵继军王艳芳包头医学院基础医学与法医学院包头医学院第二附属医院检验科包头医学院第一附属医院关节运动一科

目的研究纳米氧化铈对OGD/R小胶质细胞保护的作用机制。方法将小鼠小胶质细胞系，分为对照组和8个剂量纳米氧化铈（0.4μg /mL、1μg /mL、2.5μg /mL、5μg /mL、10μg /mL、20 μg/mL、60μg/mL、100μg/mL）处理组，CCK8法检测纳... 详细信息

目的研究纳米氧化铈对OGD/R小胶质细胞保护的作用机制。方法将小鼠小胶质细胞系，分为对照组和8个剂量纳米氧化铈（0.4μg /mL、1μg /mL、2.5μg /mL、5μg /mL、10μg /mL、20 μg/mL、60μg/mL、100μg/mL）处理组，CCK8法检测纳米氧化铈不同剂量对细胞活力的影响，从而确定细胞最佳给药剂量。建立小鼠小胶质细胞（BV2）系糖-氧剥夺/复氧模型（Oxygen-glucosedeprivation/reoxygenation，OGD/R），将细胞分为OGD/R对照组、OGD/R+低剂量（0.4μg/mL）组、OGD/R+中剂量（1μg/mL）组、OGD/R+高剂量（2.5μg /mL）组。CCK8法检测低、中、高剂量纳米氧化铈作用于OGD/R处理后24h和48h小胶质细胞对细胞活力影响。Western-blot检测细胞凋亡信号通路相关蛋白BCL2、BAX、Caspase-3、P53表达量。结果 0.4μg /mL、1μg/mL、2.5μg/mLCeO2NPs处理后细胞活力无显著差异，5μg/mL-100μg/mL纳米氧化铈剂量组处理后细胞活力显著下降，且呈剂量依赖性。分别用0.4μg/mL、1μg/mL、2.5μg/mL纳米氧化铈处理OGD/R小胶质细胞后，细胞活力均显著提高，且呈剂量依赖性，高剂量处理后细胞活力最好，三种剂量均呈现出48h时细胞活力高于24h。Western-blot检测显示：相比于对照组，OGD-R处理后，小胶质细胞中BAX、Caspase-3、P53蛋白表达量显著升高，BCL2蛋白表达量显著降低，纳米氧化铈处理后，BAX、Caspase-3、P53表达量显著降低，BCL2表达量显著升高，随着纳米氧化铈剂量的增加，表达量也发生变化，呈剂量依赖性，具有统计学意义。说明纳米氧化铈处理抑制了OGD/R导致的BV2细胞的凋亡，且随着CeO2NPs剂量增加，抑制作用增强。结论纳米氧化铈可以通过调节细胞凋亡通路对OGD/R小胶质细胞起保护作用。

关键词：纳米氧化铈糖-氧剥夺/复氧模型小鼠小胶质细胞细胞凋亡

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去甲泽拉木醛通过抑制AKT/CREB信号通路抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 280-288页

作者：韩齐齐叶梦然金齐力蚌埠医科大学检验医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学第二附属医院检验科安徽蚌埠233080

目的探讨去甲泽拉木醛抑制非小细胞肺癌细胞A549和H1299增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡的作用机制。方法镜下初步观察不同浓度的去甲泽拉木醛(0、1、3、10、30μmol/L)对A549和H1299细胞形态及细胞数量的影响。通过克隆形成、CCK-8、... 详细信息

目的探讨去甲泽拉木醛抑制非小细胞肺癌细胞A549和H1299增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡的作用机制。方法镜下初步观察不同浓度的去甲泽拉木醛(0、1、3、10、30μmol/L)对A549和H1299细胞形态及细胞数量的影响。通过克隆形成、CCK-8、细胞划痕、Transwell和流式细胞实验检测去甲泽拉木醛对A549和H1299细胞增殖、细胞活力、细胞迁移和侵袭、细胞凋亡的影响以及SC79处理后对细胞凋亡的影响。通过Western blotting检测不同浓度的去甲泽拉木醛对A549和H1299细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase 3表达和AKT/CREB磷酸化水平变化的影响,SC79处理后对凋亡蛋白表达的影响。结果镜下观察药物作用后,细胞形态由饱满变为细长,细胞间隙增宽。CCK-8实验和克隆形成实验结果显示去甲泽拉木醛能抑制A549和H1299细胞活力并且抑制细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术结果表明,去甲泽拉木醛诱导A549和H1299细胞的凋亡,而SC79处理后逆转了促凋亡作用(P<0.05)。划痕和Transwell实验结果说明,去甲泽拉木醛抑制了A549和H1299细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。Western blotting实验结果表明,去甲泽拉木醛处理后A549和H299细胞中Bax、clevaed-caspase3蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平下调,而SC79的使用逆转了凋亡蛋白的表达趋势,E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调,AKT/CREB磷酸化水平也被显著抑制(P<0.05)。结论去甲泽拉木醛能够抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制AKT/CREB信号通路有关。

关键词：非小细胞肺癌去甲泽拉木醛 AKT CREB

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初诊单克隆丙种球蛋白合并贫血患者的临床及实验室特征分析

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中国实验血液学杂志 2025年第2期33卷 587-592页

作者：钱晗伍月霞杨敏虎玉婷孔玉洁刘倩许颖成都医学院第一附属医院检验科四川成都610500 双流区第二人民医院检验科四川成都610200

目的:研究单克隆丙种球蛋白(MG)合并贫血患者的临床及实验室特征,探究单克隆丙种球蛋白合并贫血的危险因素。方法:回顾性分析2016年1月至2024年2月在成都医学院第一附属医院就诊并进行免疫固定电泳的5539例患者,最终筛选出初诊M蛋白阳... 详细信息

目的:研究单克隆丙种球蛋白(MG)合并贫血患者的临床及实验室特征,探究单克隆丙种球蛋白合并贫血的危险因素。方法:回顾性分析2016年1月至2024年2月在成都医学院第一附属医院就诊并进行免疫固定电泳的5539例患者,最终筛选出初诊M蛋白阳性患者351例作为研究对象,其中贫血组270例、非贫血组81例,比较两组患者的实验室检验结果,Logistic回归模型分析贫血的危险因素。ROC曲线评价危险因素在单克隆免疫球蛋白合并贫血中的预测价值。结果:非贫血患者占比23.1%(81/351),中位年龄67(60-75)岁;贫血患者占比76.9%(270/351),中位年龄70(63-75)岁。贫血组的TP、GLB、UREA、CREA、UA、β_(2)-MG、CER水平均明显高于非贫血组(P<0.05),而ALB、ANC、ALC、AMC、补体C3、补体C4、HP、TRF水平均明显低于非贫血组(P<0.05)。校正后多因素Logistic回归分析,结果显示,GLB升高、β_(2)-MG升高、ANC降低、补体C3水平降低是单克隆丙种球蛋白发生贫血的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,GLB、β_(2)-MG、ANC、补体C3水平对单克隆丙种球蛋白发生贫血具有较好的预测价值。结论:GLB升高、β_(2)-MG升高、ANC降低、补体C3降低是单克隆丙种球蛋白患者发生贫血的独立危险因素(P<0.05),四者联合评价对单克隆丙种球蛋白发生贫血具有较好的预测价值。

关键词：单克隆丙种球蛋白贫血特征性分析危险因素

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MBD2对Th2/Th17细胞平衡的调控及其在哮喘中的作用研究

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中国免疫学杂志 2023年第1期39卷 27-33页

作者：马乙云郑亚妹许玉妮海南省人民医院海南医学院附属海南医院检验科海口570311 海南医学院第二附属医院检验科海口570311

目的:探究甲基CpG结合区域蛋白2(MBD2)在哮喘中的作用及其对Th2/Th17分化的影响。方法:在条件性敲除CD4+T细胞中MBD2表达的小鼠构建以中性粒细胞浸润为主的哮喘模型,并将小鼠分为4组:WT生理盐水组(A组)、WT哮喘组(B组)、CD4CreMBD2fl/f... 详细信息

目的:探究甲基CpG结合区域蛋白2(MBD2)在哮喘中的作用及其对Th2/Th17分化的影响。方法:在条件性敲除CD4+T细胞中MBD2表达的小鼠构建以中性粒细胞浸润为主的哮喘模型,并将小鼠分为4组:WT生理盐水组(A组)、WT哮喘组(B组)、CD4CreMBD2fl/fl生理盐水组(C组)、CD4CreMBD2fl/fl哮喘组(D组),每组10只。应用RT-PCR和Western blot实验检测MBD2在各组小鼠脾脏组织中的表达;使用乙酰胆碱(Mch)激发试验检测各组小鼠的气道高反应;收集小鼠肺泡灌洗液(BALF),使用血细胞计数法计算其中的细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞数量,ELISA法检测细胞因子IL-4与IL-17的表达,HE染色观察各组小鼠肺组织的病理学改变;免疫磁珠分选各组小鼠脾脏中的CD4+T细胞,流式细胞术、RT-PCR及ELISA分别检测Th2、Th17细胞比例及其相关细胞因子的表达水平;分离并培养小鼠na?ve CD4+T细胞,通过慢病毒载体以靶向沉默细胞中MBD2基因表达,流式细胞术检测其对na?ve CD4+T细胞Th2与Th17分化的影响。结果:与A、B组小鼠相比,C组与D组小鼠脾脏组织中MBD2的mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01);A组与C组小鼠肺组织结构正常,而B组小鼠肺组织中支气管黏膜充血水肿,管腔狭窄,黏膜上皮细胞出现大量坏死脱落,大量炎症细胞浸润,D组介于A组与B组之间;与A组小鼠相比,B组与D组小鼠的气道反应性显著增高(P<0.05),且BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、IL-4及IL-17均显著增加(P<0.05),C组中仅有嗜酸性粒细胞及IL-4明显增加(P<0.01);而与B组相比,D组小鼠中嗜酸性粒细胞及IL-4表达均明显增加(P<0.05)。在脾脏淋巴细胞中,B组与D组小鼠的Th2、Th17细胞比例、GATA3和RORγt mRNA及IL-4与IL-17表达水平均较A、C组小鼠显著增加(P<0.01),与B组相比,D组小鼠中以Th2细胞及相关细胞因子占主导地位(P<0.05);成功利用慢病毒载体沉默小鼠na?ve CD4+T细胞MBD2的表达,且沉默其表达后能显著促进Th2细胞的分化比例(P<0.05),而Th17细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:敲除CD4+T细胞中MBD2基因表达可通过促进Th2细胞及IL-4细胞因子表达,而抑制Th17细胞及IL-17表达从而改善以中性粒细胞浸润为主的重症哮喘。

关键词：哮喘甲基CpG结合区域蛋白2 中性粒细胞辅助性T细胞

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