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中国兽医科学 2025年

作者：包燕玲宋昱庆户鑫兵张格林田占成关贵全罗建勋苟惠天殷宏独军政甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心

旨在获得结节性皮肤病病毒（LSDV）的重组A27L蛋白并制备其多克隆抗体，将密码子优化的A27L基因进行人工合成，随后克隆至pET-28a表达载体中，成功构建重组表达质粒pET-28a-A27L，将其转化入BL21(DE3)感受态细胞中，用0.5 mmol/L IPTG... 详细信息

旨在获得结节性皮肤病病毒（LSDV）的重组A27L蛋白并制备其多克隆抗体，将密码子优化的A27L基因进行人工合成，随后克隆至pET-28a表达载体中，成功构建重组表达质粒pET-28a-A27L，将其转化入BL21(DE3)感受态细胞中，用0.5 mmol/L IPTG进行诱导表达，利用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析。经优化表达条件获得分子质量约为19 kDa的可溶性重组A27L蛋白。采用High Affinity Ni-Charged Resin FF对可溶性表达产物进行纯化，成功获得高纯度的重组A27L蛋白，将其免疫新西兰大白兔4次后收集血清，Western-blot分析和间接免疫荧光鉴定结果表明A27L多克隆抗体可特异识别BHK-21细胞中表达的重组A27L蛋白。本研究利用大肠杆菌成功表达了可溶性重组LSDV A27L蛋白，并制备出特异的A27L多克隆抗体，为深入研究A27L蛋白的生物学功能以及研发结节性皮肤病疫苗和诊断技术提供了基础。

关键词：结节性皮肤病病毒 A27L蛋白可溶性表达多克隆抗体

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IGFBP-3蛋白对重离子辐射损伤小鼠的防护作用研究

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原子核物理评论 2025年第1期42卷 167-178页

作者：周雨萌蔡殊凡白皓王菊芳危文俊杨明俊兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省空间辐射生物学重点实验室中国科学院近代物理研究所兰州大学核科学与技术学院四川大学华西基础医学与法医学院

我国载人航天和核技术应用正处于快速发展阶段,辐射与核安全仍将长期成为国家重大需求,持续开发新的辐射防护分子靶标和相关药物具有重要价值。先前的研究已发现电离辐射暴露后小鼠血液中的胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的水平显... 详细信息

我国载人航天和核技术应用正处于快速发展阶段,辐射与核安全仍将长期成为国家重大需求,持续开发新的辐射防护分子靶标和相关药物具有重要价值。先前的研究已发现电离辐射暴露后小鼠血液中的胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的水平显著上升,但是,IGFBP-3蛋白的功能及其血液水平的变化对小鼠辐射损伤的影响仍不清楚。本研究在小鼠肝脏巨噬细胞(Kupffer细胞,MKC)中建立了Igfbp3基因过表达和敲低细胞模型,利用CCK-8、EdU掺入、克隆形成和微球吞噬实验对碳离子照射后不同细胞模型的增殖活力、DNA复制活性和吞噬能力进行检测;在小鼠模型中,通过在照射前2h尾静脉注射重组IGFBP-3蛋白提前升高血液IGFBP-3蛋白水平,检测致死剂量(5 Gy)碳离子全身照射后小鼠的生存曲线。结果显示,过表达IGFBP-3蛋白显著提高了MKC细胞在辐射暴露后的DNA复制活性、细胞活力、克隆形成率和对微球的吞噬能力,相反地,敲低IGFBP-3蛋白表达则降低了以上检测指标。碳离子辐射暴露前尾静脉注射IGFBP-3蛋白可以显著延缓急性放射损伤小鼠的死亡时间。以上结果从细胞和动物水平表明了IGFBP-3蛋白具有减轻辐射损伤的作用和作为辐射防护药靶的巨大潜力。通过增强小鼠体内Kupffer细胞的辐射抗性和吞噬能力来降低辐射暴露后的感染风险可能是IGFBP-3蛋白发挥辐射防护作用的机制之一。

关键词： IGFBP-3蛋白重离子辐射防护 Kupffer细胞

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O型口蹄疫病毒3D突变毒株的构建及其生物学特性分析

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中国兽医科学 2025年

作者：朱兆宇范许许裴丹诗王一卓何路李熙忠任青峰郑海学李伟伟郜原甘肃农业大学生命科学技术学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室河南农业大学动物医学院

本研究利用反向遗传技术构建O型口蹄疫病毒（FMDV）3D蛋白突变毒株rFMDV-M403A，并分析了其生物学特征。结果表明，重组病毒在传代过程中氨基酸能稳定突变；病毒滴度显示，突变毒株生长速度较野生毒株有所降低，重组病毒毒力显著低于野... 详细信息

本研究利用反向遗传技术构建O型口蹄疫病毒（FMDV）3D蛋白突变毒株rFMDV-M403A，并分析了其生物学特征。结果表明，重组病毒在传代过程中氨基酸能稳定突变；病毒滴度显示，突变毒株生长速度较野生毒株有所降低，重组病毒毒力显著低于野生毒株；乳鼠感染试验结果显示，突变毒株会使乳鼠存活率提高，肝中病毒载量和组织病变显著降低。该研究对口蹄疫病毒致病机理的认识及制定防控措施具有重要意义，同时，也为后续开发口蹄疫基因工程疫苗奠定了坚实的理论基础。

关键词： O型口蹄疫病毒反向遗传操作 3D蛋白突变生物学特性

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口蹄疫病毒非结构蛋白3D的研究进展

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中国兽医科学 2025年第2期55卷 247-254页

作者：翟凤格聂振宇张涵张钊裴晶晶郑海学河南农业大学动物医学院河南郑州450046 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种在偶蹄动物间感染与传播的急性、热性、高度传染性疾病,动物死亡率高,严重影响农业生产,造成巨大的经济损失。FMDV 3D^(pol)蛋白不仅在基因组复制中发挥至关重要的作用,还参与调节宿主细胞生... 详细信息

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种在偶蹄动物间感染与传播的急性、热性、高度传染性疾病,动物死亡率高,严重影响农业生产,造成巨大的经济损失。FMDV 3D^(pol)蛋白不仅在基因组复制中发挥至关重要的作用,还参与调节宿主细胞生物学过程,包括病毒复制复合体的组装和定位以及先天免疫反应。本文对FMDV 3D^(pol)与宿主的相互作用、抗病毒靶点研究以及病毒检测应用等内容进行了系统综述,旨在为疫病防控提供新思路。

关键词：口蹄疫病毒 3D^(pol) 宿主病毒相互作用药物靶点

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不同IgM水平的原发性胆汁性胆管炎患者治疗应答及预后特点分析

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胃肠病学和肝病学杂志 2025年第2期34卷 250-253页

作者：张玉婷李嘉泰宋晓静丁方回岳平闫少林李俊峰张立婷李汛兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730099 兰州大学第一医院普外科兰州大学第一医院肝病科兰州大学第一医院普通外科国家临床重点专科兰州大学医学院肿瘤防治中心兰州大学第一医院精准医学实验室甘肃省生物治疗与再生医学重点实验室甘肃省肝胆胰外科研究所甘肃省普通外科临床医学研究中心

目的探讨基线不同血清IgM水平的原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者的临床特点,探索基线IgM水平评估PBC患者对熊去氧胆酸(ursodexycholic acid,UDCA)生化应答及预后的价值。方法回顾性队列研究分析经UDCA治疗1年... 详细信息

目的探讨基线不同血清IgM水平的原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者的临床特点,探索基线IgM水平评估PBC患者对熊去氧胆酸(ursodexycholic acid,UDCA)生化应答及预后的价值。方法回顾性队列研究分析经UDCA治疗1年及以上资料完整的109例PBC患者,收集其基线时和治疗后的数据;UDCA应答情况采用巴塞罗那标准进行评价,根据基线时IgM值是否高于正常上限(15.0%),将患者分为IgM升高组和IgM对照组,分析比较两组患者实验室特征,分析基线IgM水平与PBC患者肝功能指标之间的相关性,并使用Mayo风险评分、UK-PBC评分、GLOBE评分评估两组预后的差异。统计学方法采用t检验、Mann-Whitney检验、χ^(2)检验和Spearman秩相关分析。结果109例PBC患者中,IgM水平升高组50例,IgM对照组患者59例,IgM对照组患者与IgM升高组患者相比,ALB较高(P=0.003),TBIL、DBIL、ALP、GGT、TBA较低,差异有统计学意义(P均<0.05)。IgM水平与PBC患者AST、ALP、GGT、TBIL、DBIL、TBA呈正相关(P<0.05),IgM水平与PBC患者ALB呈负相关(P<0.05)。IgM对照组患者与IgM升高组患者相比,Mayo风险评分较低(P<0.05)。UDCA规律治疗1年后,IgM升高组患者对UDCA生物化学应答率较低,5、10、15年肝移植率风险更高(P均<0.05)。结论基线时IgM升高的PBC患者生化异常更明显,对UDCA治疗的应答及预后较差。

关键词：熊去氧胆酸原发性胆汁性胆管炎血清免疫球蛋白M 生物化学应答

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轻度创伤性脑损伤后认知障碍及焦虑症状的早期脑功能改变

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重庆医学 2025年第4期54卷 868-873页

作者：王云玲袁文欢渠倬然罗琳内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院医学影像科/包头医学院医学影像研究所内蒙古包头014000 兰州大学第二医院核磁共振科兰州730030

目的观察轻度创伤性脑损伤(mTBI)急性期患者的局部自发脑活动特点,并探讨急性期的发病机制。方法选取2021年7月至2022年6月就诊于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院急诊科和蒙医骨伤科的38例急性期mTBI患者作为mTBI组,选取同期社区... 详细信息

目的观察轻度创伤性脑损伤(mTBI)急性期患者的局部自发脑活动特点,并探讨急性期的发病机制。方法选取2021年7月至2022年6月就诊于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院急诊科和蒙医骨伤科的38例急性期mTBI患者作为mTBI组,选取同期社区性别、年龄相匹配的39例健康者作为对照组。采集磁共振数据及收集临床评估量表数据,比较两组间大脑活动低频振幅(ALFF)及局部一致性(ReHo)差异,提取组间明显差异脑区的ALFF值及ReHo值分别与临床量表分数进行相关性分析,通过受试者工作特征(ROC)曲线评估明显差异脑区的ALFF值及ReHo值用于鉴别二者的诊断效能。结果mTBI组右侧尾状核及右侧补充运动区ALFF值明显降低,左背外侧额上回ReHo值升高,右眶部额下回ReHo值降低(P<0.05)。mTBI组左背外侧额上回ReHo值与患者创伤后焦虑自评量表(SAS)得分呈负相关,与抽象及定向得分呈正相关(P<0.05),而右侧补充运动区的ALFF值与命名得分呈正相关(P<0.05)。右侧尾状核及右侧补充运动区ALFF值,左背外侧额上回及右眶部额下回ReHo值鉴别二者的效能较高,ROC曲线下面积分别为0.749、0.760、0.794、0.798(P<0.05)。结论右侧尾状核、右侧补充运动区、左背外侧额上回及右眶部额下回的局部自发脑活动异常改变可能与mTBI早期患者认知障碍及焦虑症状的神经病理机制有关。

关键词：轻度创伤性脑损伤急性期静息态功能磁共振低频振幅局部一致性

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靶向蛋白翻译后修饰的药物化学生物学研究

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中国科学:化学 2025年第4期55卷 777-784页

作者：陶泓儒张元元陈文韬陈子墨徐颖李昊周璐韩记昌邓贤明李林陈国强罗成国科大杭州高等研究院药物科学与技术学院杭州310024 中国科学院上海药物研究所化学生物学中心上海201203 上海交通大学医学院病理生理学系上海200025 复旦大学附属儿科医院神经外科上海201210 复旦大学药学院药物化学系上海201203 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心上海200031 厦门大学生命科学学院天然产物源靶向药物国家地方联合工程实验室厦门361102 上海交通大学医学院附属仁济医院衰老与组织修复研究院上海200127

蛋白质作为生命活动的核心执行者,其功能多样性主要源于翻译后修饰(PTMs)的动态变化.PTMs如甲基化、磷酸化和SUMO化等,是分子间相互作用、信号传导和网络调控的关键靶点,几乎涉及细胞生长、存活和免疫应答等所有生命活动.这些修饰的异... 详细信息

蛋白质作为生命活动的核心执行者,其功能多样性主要源于翻译后修饰(PTMs)的动态变化.PTMs如甲基化、磷酸化和SUMO化等,是分子间相互作用、信号传导和网络调控的关键靶点,几乎涉及细胞生长、存活和免疫应答等所有生命活动.这些修饰的异常会导致蛋白质功能失调,进而引发多种疾病.随着多组学技术的发展,与重大疾病相关的蛋白质修饰及其调控酶不断被发现,这不仅拓展了PTMs在重大疾病中的功能解析,也推动了靶向PTMs的小分子药物开发.研究PTMs机制并鉴定相关靶标,可加速基础研究向药物开发转化,为重大疾病的诊疗提供理论基础.本综述旨在:(1)总结PTMs及其调控酶在肿瘤生长、转移和免疫逃逸中的功能和分子机制;(2)概括PTMs位点功能预测的前沿技术和新方法;(3)综述靶向PTMs机制的先导化合物发现策略和研究进展.本综述将为靶向PTMs开发抗肿瘤药物提供新的干预靶点、创新策略、研究技术和经验参考.

关键词：肿瘤蛋白翻译后修饰功能干预靶点药物研发

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阿尔茨海默病中缺氧相关机制的研究进展

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重庆医学 2025年

作者：黎静陈曦乐卫东电子科技大学医学院四川省医学科学院.四川省人民医院神经病学研究所

阿尔茨海默病（AD）是一种常见的逐渐恶化的中枢神经系统退行性疾病，其主要特征是记忆丧失和认知能力的逐步下降。目前AD的发病机制尚不清楚，但已知的证据表明遗传、环境和生活方式等多种因素的综合作用将导致AD的发生发展。缺氧可能... 详细信息

阿尔茨海默病（AD）是一种常见的逐渐恶化的中枢神经系统退行性疾病，其主要特征是记忆丧失和认知能力的逐步下降。目前AD的发病机制尚不清楚，但已知的证据表明遗传、环境和生活方式等多种因素的综合作用将导致AD的发生发展。缺氧可能是诱发AD的一个重要危险因素，在低氧环境下大脑内的β-淀粉样蛋白（Aβ）和tau蛋白会出现异常积累；缺氧还会促进炎症介质的释放，加剧大脑的炎症反应并损伤神经细胞；缺氧还可能影响脑部的血流和营养物质供应，从而损害脑部的血管健康，加速神经退行性的过程。该文集中讨论了AD中与缺氧相关的分子机制，希冀进一步加深对缺氧与AD 之间关系的认知，而有助于开发新的疾病治疗策略。

关键词：阿尔茨海默病缺氧 Aβ tau HIF 神经炎症线粒体功能障碍氧化应激

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脑衰反应调节蛋白在视神经损伤中的作用

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基础医学与临床 2025年第1期45卷 102-106页

作者：朱裕椿席鑫源杨珍冯东福上海交通大学附属第六人民医院南院神经外科上海201499 上海交通大学医学院创伤医学研究所上海201999

脑衰反应调节蛋白(CRMPs),也被称为二氢嘧啶酶样蛋白,包含5个家族成员(CRMP1、CRMP2、CRMP3、CRMP4、CRMP5)。在中枢神经系统中,CRMPs主要参与神经元的分化迁移、突触可塑性和神经突的生长发育、导向延伸等多种生理过程。近期研究发现... 详细信息

脑衰反应调节蛋白(CRMPs),也被称为二氢嘧啶酶样蛋白,包含5个家族成员(CRMP1、CRMP2、CRMP3、CRMP4、CRMP5)。在中枢神经系统中,CRMPs主要参与神经元的分化迁移、突触可塑性和神经突的生长发育、导向延伸等多种生理过程。近期研究发现视神经损伤后,通过抑制或降低CRMPs的磷酸化可以影响视网膜神经节细胞(RGCs)的存活及其轴突再生,这可能会为未来视神经损伤治疗提供新的思路。

关键词：脑衰反应调节蛋白视神经损伤视网膜神经节细胞轴突再生

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远志皂苷元缓解脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞炎症反应的机制

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解放军医学杂志 2025年第2期50卷 188-196页

作者：穆秉桃郭敏芳于婧文曹佳蕾杨凤君贾思玮苏琴孟涛马存根尉杰忠宋丽娟山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室山西大同037009 山西大同大学医学院山西大同037009 山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心山西晋中030619 大同市第五人民医院神经内科山西大同037009

目的探究远志皂苷元(SEN)通过核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路缓解小鼠小胶质细胞炎症反应的机制。方法将BV2小鼠小胶质细胞随机分为对照组、模型组、SEN组与MCC950组。对照组细胞不做处理,模型组细胞加入1μg/m... 详细信息

目的探究远志皂苷元(SEN)通过核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路缓解小鼠小胶质细胞炎症反应的机制。方法将BV2小鼠小胶质细胞随机分为对照组、模型组、SEN组与MCC950组。对照组细胞不做处理,模型组细胞加入1μg/ml脂多糖(LPS),SEN组细胞加入1μg/ml LPS+4μmol/L SEN,MCC950组加入1μg/ml LPS+10μmol/L MCC950,作用24 h。采用CCK-8法检测不同浓度SEN对BV2细胞活力的影响。采用Griess法测定上清液一氧化氮(NO)释放量;实时荧光定量PCR测定NLRP3、淋巴细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18 mRNA的表达水平;免疫荧光染色检测ASC、IL-1β、Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达水平;Western blotting检测NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18、Nrf2、HO-1及核因子κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,2~20μmol/L SEN处理的BV2细胞活力与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组BV2细胞活力明显下降(P<0.05);与模型组比较,4μmol/L SEN组BV2细胞活力明显恢复(P<0.05)。Griess法检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞NO释放量明显增加(P<0.01);实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达水平均明显增高(P<0.05);免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,模型组细胞iNOS、NF-κB蛋白表达水平增高,Nrf2和HO-1表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,SEN组和MCC950组细胞NO释放量减少,NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);SEN组iNOS和NF-κB表达水平降低,免疫荧光染色显示Nrf2易位到核内,Nrf2和HO-1蛋白表达明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SEN可缓解LPS诱导的小鼠小胶质细胞炎症反应,抑制NLRP3炎性小体的活化和表达,效果与炎性小体抑制剂MCC950相当;其机制可能与调控上游因子Nrf2和HO-1的表达有关。

关键词：远志皂苷元脂多糖小胶质细胞 NLRP3炎性小体炎症反应

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