检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2009年第12期39卷 1057-1061页

作者：陈晓丹张云王钰郭冬春李永锋王君伟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院传染病研究室黑龙江哈尔滨150030

根据已发表的1型鸭肝炎病毒（DHV-1）基因组序列设计并合成引物,通过RT-PCR方法对DHV-1 E53株和HP-1株的基因组序列进行分段扩增并测序。BLAST分析确定为DHV-1型基因组序列,GenBank登录号分别为EF151313和EF151312。E53株与已发表的参... 详细信息

根据已发表的1型鸭肝炎病毒（DHV-1）基因组序列设计并合成引物,通过RT-PCR方法对DHV-1 E53株和HP-1株的基因组序列进行分段扩增并测序。BLAST分析确定为DHV-1型基因组序列,GenBank登录号分别为EF151313和EF151312。E53株与已发表的参考毒株的核苷酸同源性为94.6%~99.4% HP-1株与已发表的参考毒株的核苷酸同源性为94.4%~99.6%。系统进化树分析结果表明,E53株与北京BJ株进化关系最近 HP-1株与R85952株进化关系最近。

关键词： 1型鸭肝炎病毒全基因组序列分析

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O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及生物学特性分析

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黑龙江畜牧兽医 2009年第4期 1-4页

作者：于永忠赵磊周国辉徐香玲于力哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨150025 兽医生物技术国家重点实验室／中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001

以纯化的O型口蹄疫泛亚毒株O／YS／CHA／05抗原免疫BALB／c小鼠，在加强免疫3d后，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经间接ELISA法和间接免疫荧光法（IFA）筛选，获得2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为4A8和1F6，同时... 详细信息

以纯化的O型口蹄疫泛亚毒株O／YS／CHA／05抗原免疫BALB／c小鼠，在加强免疫3d后，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经间接ELISA法和间接免疫荧光法（IFA）筛选，获得2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为4A8和1F6，同时确定二者均为O型口蹄疫病毒特异性单克隆抗体。中和试验和Western—blot分析结果表明，4A8和1F6均识别线性表位，无中和活性。亚类鉴定结果显示：4A8和1F6重链类型分别为IgG1和IgG2b；轻链类型均为κ。相加ELISA分析结果表明，两者针对的抗原位点相同或相近。

关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体鉴定

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猪戊型肝炎病毒基因ORF2片段克隆及其原核表达

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中国兽医杂志 2009年第3期45卷 17-19页

作者：李丹丹张馨心于婧赵立平相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

猪戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是一种无包膜的正义链RNA病毒,直径为27－32nm,表面粗糙,呈不规则球型。由于HEV组织培养困难,难以研制减毒或灭活疫苗,因此,利用基因工程技术制备重组抗原,研制多肽疫苗成为戊型肝炎研究的热点。... 详细信息

猪戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是一种无包膜的正义链RNA病毒,直径为27－32nm,表面粗糙,呈不规则球型。由于HEV组织培养困难,难以研制减毒或灭活疫苗,因此,利用基因工程技术制备重组抗原,研制多肽疫苗成为戊型肝炎研究的热点。鉴于我国猪戊型肝炎病毒的研究处于开始阶段,用于猪戊型肝炎的血清学检测方法还没有确立,我们对猪戊型肝炎病毒株ORF2片段进行了原核表达,并对其抗原性进行了初步鉴定,以期获得可作为诊断用重组蛋白,为进一步建立诊断方法和病毒结构蛋白抗原表位的筛选奠定基础。[第一段]

关键词：戊型肝炎病毒原核表达 ORF2 病毒基因猪克隆基因工程技术病毒结构蛋白

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胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2009年第11期31卷 874-877页

作者：赵海玲刘慧芳杜艳芬司微王春来刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

为建立胎儿弯杆菌(***)定量检测方法,本研究根据***毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测***的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究,结果显... 详细信息

为建立胎儿弯杆菌(***)定量检测方法,本研究根据***毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测***的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究,结果显示,该方法检测***结果均为阳性,而非***均为阴性;对带有SapA基因的阳性质粒的检测敏感性为108拷贝～102拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,可敏感地检测到模板中13个拷贝的细菌DNA,其灵敏度是常规PCR方法的100倍。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。该方法为***快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。

关键词： C.fetus 表面蛋白基因SapA 实时荧光PCR TaqMan水解探针

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胎儿弯杆菌表面蛋白SapA抗原单克隆抗体的制备

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中国预防兽医学报 2009年第5期31卷 409-411页

作者：赵海玲林靖凯杜艳芬刘慧芳司微王春来王聃赫明雷彭玮杨金国刘思国内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

用原核表达的重组胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(rSapA-N)免疫小鼠,采用细胞融合技术,共获得2株抗rSapA-N的单克隆抗体(MAb),经Ig亚类鉴定,均为IgG1,轻链为κ链;Western blot证实这2株MAb均能与rSapA-N发生特异性反应,而与其它蛋白则不发... 详细信息

用原核表达的重组胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(rSapA-N)免疫小鼠,采用细胞融合技术,共获得2株抗rSapA-N的单克隆抗体(MAb),经Ig亚类鉴定,均为IgG1,轻链为κ链;Western blot证实这2株MAb均能与rSapA-N发生特异性反应,而与其它蛋白则不发生反应;以这2株MAb的杂交瘤细胞制备腹水,效价达到1∶100 000和1∶60 000。本研究制备的MAb,为研究和检测胎儿弯杆菌提供了一种重要的手段。

关键词：胎儿弯杆菌表面蛋白SapA 免疫单克隆抗体

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载牛冠状病毒N蛋白壳聚糖微球的免疫效果评价

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中国预防兽医学报 2009年第11期31卷 882-886页

作者：孙庆申李鑫车小琼常继涛杨勇博于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江大学生命科学学院/微生物黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080

为了对壳聚糖分子作为佐剂的缓释效果进行免疫学评价,本研究合成了牛冠状病毒DB2毒株N蛋白基因的3'端第487位～1287位碱基,用大肠杆菌对其进行了高效表达,通过SDS-PAGE电泳分离、电洗脱纯化该牛冠状病毒N蛋白(BCVN)。以戊二醛为交联... 详细信息

为了对壳聚糖分子作为佐剂的缓释效果进行免疫学评价,本研究合成了牛冠状病毒DB2毒株N蛋白基因的3'端第487位～1287位碱基,用大肠杆菌对其进行了高效表达,通过SDS-PAGE电泳分离、电洗脱纯化该牛冠状病毒N蛋白(BCVN)。以戊二醛为交联剂,采用乳化交联的方法制备空白壳聚糖微球。利用吸附法制备载BCVN蛋白的壳聚糖微球,通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测免疫鼠血清中的抗体水平,由此评价壳聚糖微球对BCVN的缓释作用和佐剂效应。结果表明,壳聚糖微球的形态较好、表面光滑、分散性较好,平均粒径为6.50±1.77μm,电势分布在36mV,吸附BCVN蛋白的壳聚糖微球在体内所产生的免疫效果明显优于唯N蛋白组,说明载BCVN蛋白的壳聚糖微球在体内具有一定的缓释效果,使N蛋白在体内缓慢释放而长时间诱导抗体的产生,该研究结果为以壳聚糖微球作为疫苗佐剂积累了实验数据。

关键词：壳聚糖牛冠状病毒核衣壳蛋白吸附动物接种缓释作用

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一株鹅Ⅰ型副粘病毒全基因克隆与序列分析

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中国畜牧兽医 2009年第4期36卷 80-86页

作者：宋翠平周键王晓娇崔尚金中国动物卫生与流行病学中心青岛266032 山东省安丘市畜牧局安丘262103 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

本研究分离了一株鹅I型副粘病毒(ZQ042),应用RT-PCR技术对其编码的核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)、融合蛋白(F)和巨蛋白(L)6种主要结构蛋白分别进行扩增,然后将其克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和拼... 详细信息

本研究分离了一株鹅I型副粘病毒(ZQ042),应用RT-PCR技术对其编码的核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)、融合蛋白(F)和巨蛋白(L)6种主要结构蛋白分别进行扩增,然后将其克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和拼接;并将克隆到的6个基因片段与国内外已报道的I型副粘病毒基因序列进行比较分析。分析结果表明,鹅副粘病毒分离株ZQ042F基因与La Sota株同源性最高,同源率为99.1%,与其它各毒株各基因同源性均较低。

关键词：副粘病毒基因克隆序列测定

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Asial型和O型口蹄疫病毒中和性单克隆抗体的免疫保护性

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中国预防兽医学报 2009年第4期31卷 300-304页

作者：周国辉于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

本研究用微量中和试验鉴定具有中和活性的口蹄疫病毒（FMDV）单克隆抗体，进而用乳鼠保护试验在体内验证单克隆抗体对FMDV感染的免疫保护作用。结果表明，针对Asial型和O型FMDV的单克隆抗体3E11和8E8腹水的半数保护量（PD50）分别为1995... 详细信息

本研究用微量中和试验鉴定具有中和活性的口蹄疫病毒（FMDV）单克隆抗体，进而用乳鼠保护试验在体内验证单克隆抗体对FMDV感染的免疫保护作用。结果表明，针对Asial型和O型FMDV的单克隆抗体3E11和8E8腹水的半数保护量（PD50）分别为1995和2371；仅用8PD50单抗3E11和1IPD50单抗8E8，就可完全保护乳鼠耐受致死剂量Asial型和O型FMDV的攻击。被动免疫的乳鼠在攻毒后体重增长的百分率随单抗腹水浓度的升高而增加，而且随着单抗腹水浓度的升高，乳鼠的起始死亡时刻后延、终点死亡时刻前移。

关键词：口蹄疫病毒中和性单克隆抗体保护性免疫

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重组鸡白细胞介素18对不同基因型新城疫病毒HN基因表达蛋白免疫活性的影响

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黑龙江畜牧兽医 2009年第6期 85-86页

作者：张立娜华彦柴洪亮贾竞波东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

白细胞介素18（IL-18）是被广泛研究的细胞因子佐剂之一。研究选择了IL-18作为纯化蛋白多肽的佐剂，观察其对多肽疫苗的免疫应答作用，从而为研制新型的多肽疫苗奠定一定的理论基础。

关键词：鸡白细胞介素18 蛋白多肽新城疫病毒免疫活性基因表达基因型重组 IL-18

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Asia 1型口蹄疫病毒空衣壳在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

Asia 1型口蹄疫病毒空衣壳在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：王芳王海伟于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是偶蹄动物的烈性传染病,严重危害畜牧业的发展。传统的病毒灭活疫苗预防口蹄疫虽然有效,但存在病毒从工厂逃逸以及灭活不彻底的,安全性隐患。因此,研制安全、有效、而且廉价的新型口蹄疫疫苗,对于... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是偶蹄动物的烈性传染病,严重危害畜牧业的发展。传统的病毒灭活疫苗预防口蹄疫虽然有效,但存在病毒从工厂逃逸以及灭活不彻底的,安全性隐患。因此,研制安全、有效、而且廉价的新型口蹄疫疫苗,对于采用免疫预防策略防制口蹄疫的国家尤为重要。毕赤酵母表达系统作为一种新型酵母表达系统,它既有原核生物的特点,又有真核生物的特性,可

关键词：口蹄疫病毒空衣壳 Asia 1 免疫原性分析毕赤酵母

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