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PGD_(2)/DP_(1)途径对细菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达的影响

中国畜牧兽医 2021年第6期48卷 2169-2176页

作者：杨效林韩润林毛伟包海霞刘昆吴金迪曹金山刘博内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了研究前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2)/DP1受体途径对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染奶牛子宫内膜组织中炎症介质HMGB-1和PAFR的表达及对组织损伤程度的影响,试验以体外培养奶牛子宫内... 详细信息

为了研究前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2)/DP1受体途径对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染奶牛子宫内膜组织中炎症介质HMGB-1和PAFR的表达及对组织损伤程度的影响,试验以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,应用1×10-6 mol/L DP1受体激动剂(BW-245C和15d-PGJ2)和等量(1×106 CFU/mL)大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织,采用实时荧光定量PCR、免疫组化和HE染色法检测奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR的表达并评价组织损伤情况。结果显示,与空白对照组相比,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达量显著升高(P<0.05),而DP1受体激动剂与大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共处理奶牛子宫内膜组织中DP1受体激动剂显著抑制奶牛子宫组织中HMGB-1和PAFR的表达(P<0.05)。HE染色结果显示,大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织上皮细胞和腺上皮细胞完全脱落、坏死、崩解;而DP1受体激动剂、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织中,DP1受体激动剂的加入显著减轻奶牛子宫内膜组织的损伤程度(P<0.05)。免疫组化染色法结果与以上两种方法结果一致。结果表明,PGD2能够抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织中损伤相关因子HMGB-1、PAFR的表达,减轻组织损伤程度,这一作用可能是由DP1受体所介导的。

关键词：奶牛子宫内膜组织大肠杆菌金黄色葡萄球菌炎症 HMGB-1 PAFR

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骆驼乳清蛋白对热应激大鼠肝脏炎症及高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路的调节

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动物营养学报 2021年第10期33卷 5809-5816页

作者：乌恩吉雅杜冬华马雪妮哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 河北北方学院动物科技学院张家口075131 内蒙古骆驼研究院阿拉善750300

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白(CWP)对热应激(HS)所致大鼠肝脏炎症及相关信号通路的调节作用。选取6周龄SD大鼠,适应性饲养2周后随机分为6组,每组设置5个重复,每个重复6只,试验期22 d。正常对照组(Control组)饲喂基础饲粮;CWP对照组(CWP组... 详细信息

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白(CWP)对热应激(HS)所致大鼠肝脏炎症及相关信号通路的调节作用。选取6周龄SD大鼠,适应性饲养2周后随机分为6组,每组设置5个重复,每个重复6只,试验期22 d。正常对照组(Control组)饲喂基础饲粮;CWP对照组(CWP组)每天灌服400 mg/kg BW CWP;HS致肝脏损伤组(HS组)饲喂基础饲粮并从第15天开始每天进行2 h HS处理,连续8 d;CWP低、中、高剂量干预组(L、M和H组)每天灌服100、200和400 mg/kg BW CWP,且从第15天开始每天进行2 h HS处理,连续8 d。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)含量,免疫组织化学及免疫印迹(Western blotting)方法检测肝脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)和磷酸化核转录因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果表明:1)与HS组相比,400 mg/kg的CWP干预显著降低了HS大鼠肝脏TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8含量(P<0.05),显著提高了IL-10含量(P<0.05)。2)与HS组相比,CWP以剂量依赖方式极显著降低了HS大鼠肝脏HMGB1蛋白核转位(P<0.01),但对其总蛋白表达水平没有显著影响(P>0.05),同时极其显著降低了TLR4蛋白表达水平(P<0.001),极显著降低了p-NF-κB p65蛋白水平(P<0.01)及核转位。与Control组相比,400 mg/kg的CWP干预效果最好。由此可见,HS前灌服400 mg/kg的CWP可调节HS大鼠肝脏HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路并缓解炎症反应。

关键词：骆驼乳清蛋白大鼠肝脏炎症反应信号通路热应激

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捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药株和敏感株转录组水平下差异基因分析

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中国兽医学报 2021年第7期41卷 1295-1300页

作者：石雅琴苏倩王腾宇毛晓伟陈昕迪穆嘉明王文龙刘春霞内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学生命科学院内蒙古呼和浩特010018

首先筛选捻转血矛线虫丙硫咪唑敏感株和耐药株单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)信息,然后从比较转录组测序数据中筛选出4个丙硫咪唑耐药相关突变基因HCON_00192020、HCON_00037800、HCON_00129090和HCON_00178650,并进行生物信息学分析,最后对差异基因进行PCR扩增并测序。结果显示,共筛选到41个具有SNP位点的基因,选择reads≥10的4个基因进行后续基因扩增和生物信息学分析。扩增后目的条带大小均正确,测序后显示HCON_00192020基因在3个耐药虫株中第266位均由T突变为C,HCON_00037800基因在3个耐药虫株中第179、182、188位均由A突变为G,HCON_00129090基因在3个耐药虫株中第283位由G突变为A,HCON00178650基因在3个耐药虫株中第89位均由C突变为A,突变结果均与转录组测序结果一致。

关键词：捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性单核苷酸多态性

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前列腺素D_(2)对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞中细胞因子分泌及吞噬杀伤功能的影响

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中国兽医学报 2025年第1期45卷 107-114页

作者：龚鹏飞杨效林郭莉莉王钰吴敬泽张双翼刘博毛伟曹金山内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了研究前列腺素D_(2)(prostaglandin D_(2),PGD_(2))对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响,以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象,分析内源性和外源性PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α... 详细信息

为了研究前列腺素D_(2)(prostaglandin D_(2),PGD_(2))对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响,以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象,分析内源性和外源性PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌和吞噬杀伤功能的影响。结果显示,由大肠杆菌诱导的巨噬细胞中PGD_(2)的合成依赖于天然模式识别受体TLR2、TLR4和NLRP3。抑制内源性PGD_(2)能够下调大肠杆菌诱导的巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.001),并可以在一定程度上增强巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。此外,外源性PGD_(2)能够上调大肠杆菌刺激后巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.01),一定浓度范围内的外源性PGD_(2)能够减弱巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。结果表明,PGD_(2)对大肠杆菌诱导的巨噬细胞细胞因子的分泌和吞噬杀伤功能均具有一定的影响。

关键词：大肠杆菌前列腺素D_(2) 奶牛骨髓源巨噬细胞模式识别受体吞噬杀伤

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内源性绵羊肺腺瘤逆转录病毒env基因克隆与生物信息学分析

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基因组学与应用生物学 2022年第3期41卷 524-532页

作者：王宇李建云武健刘淑英内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区农业基因组大数据工程研究中心呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010031

本研究对内源性绵羊肺腺瘤逆转录病毒(endogenous jaagsiekte sheep retrovirus,enJSRV)env基因进行克隆、测序并利用生物信息学方法分析enJSRV Env蛋白的相似性、遗传进化、理化性质、糖基化位点、磷酸化位点、B细胞抗原表位及其二级... 详细信息

本研究对内源性绵羊肺腺瘤逆转录病毒(endogenous jaagsiekte sheep retrovirus,enJSRV)env基因进行克隆、测序并利用生物信息学方法分析enJSRV Env蛋白的相似性、遗传进化、理化性质、糖基化位点、磷酸化位点、B细胞抗原表位及其二级、三级结构。实验获得了完整的enJSRV env基因序列,其全长1836 bp,编码611个氨基酸。在env基因编码的TM区没有发现exJSRV所特有的“YXXM”基序,env基因属高度保守的基因。env基因序列与GenBank中已登录的enJSRV env基因序列相似性为98.7%~99.5%,推导氨基酸序列相似性为98.0%~99.5%。enJSRV env基因与GenBank中已登录的exJSRV env基因序列相似性88.3%~95.2%,推导氨基酸序列相似性为92.3%~93.8%。生物信息学分析结果显示,enJSRV Env蛋白表现为弱碱、亲水、不稳定蛋白;其二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲结构为主,三级结构同源建模成功,主要是螺旋和无规则卷曲;亚细胞定位Env蛋白主要分布在细胞内质网中,无信号肽,存在跨膜结构域;Env蛋白序列中存在25个丝氨酸磷酸化,21个潜在苏氨酸磷酸化位点和5个酪氨酸磷酸化位点以及4个糖基化位点;抗原表位预测显示,该蛋白含有多个B细胞优势抗原表位和多个优势CTL表位。本研究结果为进一步阐释enJSRV Env蛋白在绵羊(Ovis aries)体内的生物学作用的研究提供新的思路。

关键词：内源性绵羊肺腺瘤病毒 env基因克隆生物信息学

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一例山羊副结核病的诊断

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当代畜禽养殖业 2024年第3期44卷 55-57页

作者：纪爽李静杨树城毛伟曹贵方王宇胜乌仁塔娜贾军丁玉林王金玲内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区科学技术厅内蒙古呼和浩特010000 杭锦旗农牧技术推广中心内蒙古鄂尔多斯017400

本研究通过临床症状、尸体剖检、组织病理学和抗酸染色法综合诊断1例山羊副结核病。发病羊表现渐进性消瘦和持续性腹泻,最终消瘦死亡,病程26个月。剖检可见尸体极度消瘦,全身脂肪完全萎缩消失,大部分肌肉萎缩;肠系膜淋巴结肿大明显,其... 详细信息

本研究通过临床症状、尸体剖检、组织病理学和抗酸染色法综合诊断1例山羊副结核病。发病羊表现渐进性消瘦和持续性腹泻,最终消瘦死亡,病程26个月。剖检可见尸体极度消瘦,全身脂肪完全萎缩消失,大部分肌肉萎缩;肠系膜淋巴结肿大明显,其表面和切面散在灰白色大小不等的结节状病灶,结节中央为部分钙化的干酪样坏死;回肠、盲肠和大结肠壁增厚,肠黏膜向上形成粟粒大小扁平隆起,如大脑沟回样纹理;肝、脾、心脏和小肠等组织器官萎缩,体积缩小;组织病理学表现伴上皮样细胞大量增生的增生性肠炎、增生性肠系膜淋巴结炎和肉芽肿性肝炎及其他组织或器官萎缩;经抗酸染色,淋巴结和肠组织石蜡切片内增生的上皮样细胞胞浆内充满大量红染细小副结核分枝杆菌。本研究确诊了1例山羊副结核病,并阐明了典型的临床症状和病理变化,为山羊副结核病的诊断提供参考。

关键词：山羊副结核病病理学抗酸染色副结核分枝杆菌

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内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药种群Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性调查

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动物医学进展 2021年第5期42卷 9-13页

作者：苏倩翟帅孙柯林洋王腾宇呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了解内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性的情况,对来自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区各19条捻转血矛线虫雄虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫后,扩增出Ⅰ型β微管蛋白基因... 详细信息

为了解内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性的情况,对来自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区各19条捻转血矛线虫雄虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫后,扩增出Ⅰ型β微管蛋白基因,测序后对耐药相关167、198和200位点突变情况进行调查分析。结果表明,在这3个地区均未发现167位点突变,主要是198和200位点发生突变,总体上看198位点突变频率高于200位点。分析这57条雄虫基因序列发现4种基因型,分别是198纯合耐药型及200纯合敏感型、198纯合敏感型及200纯合耐药型、198纯合敏感型及200杂合耐药型和198及200均杂合耐药型。而耐药基因型频率乌审旗为100%,察右后旗68.42%,科右前旗94.74%,这与粪便虫卵减少试验结果一致。研究结果为捻转血矛线虫病的预防和治疗提供一个新思路,可有效避免耐药性或者减缓耐药性的产生,减少畜牧养殖行业的经济损失。

关键词：捻转血矛线虫 Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性

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动物药学专业实践教学模式的探索

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山东畜牧兽医 2022年第2期43卷 31-33,37页

作者：何秀玲毛伟李浩波关红内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特

为了提高动物药学专业实践教学质量,缩短动物药学专业培养与我国兽药企业工业化生产和科研院所研究的差距,以培养“既有专业技能又有研究能力”的复合应用型人才为宗旨,不断提高本科生的综合实践能力,应继续深化动物药学专业实践教学改... 详细信息

为了提高动物药学专业实践教学质量,缩短动物药学专业培养与我国兽药企业工业化生产和科研院所研究的差距,以培养“既有专业技能又有研究能力”的复合应用型人才为宗旨,不断提高本科生的综合实践能力,应继续深化动物药学专业实践教学改革。本文提出了实践教学方法是线上线下混合式实验教学模式+以“学生为主体”的开放式实验教学模式+实验操作考试,实践教学理念是互动教学和竞争意识,从而在提高学生自信的前提下,使学生将知识转化为应用。

关键词：动物药学专业实践教学探索

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1例猫瘟热自然病例的诊断

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兽医导刊 2024年第2期 8-10页

作者：李怡潞李新跃米腾腾冯心如张迪李彦军康德玛丁玉林王金玲内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站内蒙古通辽028000 内蒙古阿拉善右旗动物疫病预防控制中心内蒙古阿拉善737300

本研究采用临床病史、尸体剖检、组织病理学及聚合酶链式反应(PCR)方法确诊了1例猫瘟热。发病猫临床表现体温升高、精神沉郁、食欲废绝;后期频繁呕吐,排血便。尸体剖检见腹腔内积有大量深红色半透明的血样腹水,整个小肠浆膜呈黑红色,肠... 详细信息

本研究采用临床病史、尸体剖检、组织病理学及聚合酶链式反应(PCR)方法确诊了1例猫瘟热。发病猫临床表现体温升高、精神沉郁、食欲废绝;后期频繁呕吐,排血便。尸体剖检见腹腔内积有大量深红色半透明的血样腹水,整个小肠浆膜呈黑红色,肠壁增厚,肠腔内有大量黑红色液状内容物;脾脏表面有大面积的黑红色病灶;肺脏有弥漫性暗红色实变区。组织病理学见出血性坏死性肠炎、出血性坏死性脾炎、轻度坏死性胃炎、出血性脑炎和局部肺水肿。用猫瘟热病毒特异性引物进行PCR,获得1935 bp目的基因片段,测序后基因序列在GenBank数据库中进行比对,与Feline panleukopenia virus strain FPV DGPV01毒株(登录号:OP313105.1)同源性最高,达99.31%。

关键词：猫瘟热病理学 PCR 诊断

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捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药相关lncRNA的转录组学测序与分析

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生物工程学报 2020年第2期36卷 250-258页

作者：赵学亮王文龙呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建... 详细信息

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建,使用Illumina HiSeq 4000平台进行双端测序,筛选出差异的lncRNA,基于顺式调控(cis)和反式调控(trans)对差异显著的lncRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行过Gene Ontology (GO)功能注释和KEGG Pathway富集分析,利用FPKM法估计lncRNA和mRNA的表达水平。结果表明,敏感株和耐药株候选lncRNA分别为6 377和6 356个,两个文库中筛选出168个差异显著的lncRNA,其中在敏感株中表达上调有92个,表达下调76个。筛选得到的差异显著lncRNA候选靶基因416个,这些基因共注释到641条GO terms和92条信号通路;其中富集到耐药性相关的通路有药物代谢-其他酶、药物代谢-细胞色素P450、细胞色素P450对异生素的代谢等。综上表明,部分lncRNA介导的靶基因与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关,lncRNA在捻转血矛线虫耐药性中具有潜在的重要的调节作用。探究了对于敏感虫株和耐药虫株中lncRNA的表达谱,发现了敏感虫株和耐药虫株中差异表达的lncRNA,有助于找出捻转血矛线虫如何抵抗丙硫咪唑的发生机制,为探讨捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制提供科学的依据。

关键词：捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性转录组长链非编码RNA

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