检索结果-内蒙古大学图书馆

关于红霉素药物残留检测的研究概况

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食品工业 2020年第3期41卷 219-223页

作者：张晓云李培锋孙华毛伟白玉廷何秀玲内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

主要概括了红霉素的特性、残留危害以及目前国内外的检测情况,主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气质联用法、薄层色谱法、微生物检测法、酶联免疫分析法、胶体金免疫层析法、荧光微球免疫层析法、固相微萃取、分子印迹固... 详细信息

主要概括了红霉素的特性、残留危害以及目前国内外的检测情况,主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气质联用法、薄层色谱法、微生物检测法、酶联免疫分析法、胶体金免疫层析法、荧光微球免疫层析法、固相微萃取、分子印迹固相萃取。

关键词：红霉素残留检测

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BVDV、BRV和BCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立

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中国动物检疫 2021年第3期38卷 99-106页

作者：孙亚杰关平原周伟光徐晓静希尼尼根于景丽内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古大学生态与环境学院内蒙古呼和浩特010021

为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛冠状病毒(BCoV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因序列设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,建立了同时检测上述3种病毒的TaqMan三... 详细信息

为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛冠状病毒(BCoV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因序列设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,建立了同时检测上述3种病毒的TaqMan三重RT-qPCR方法。该方法仅对BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因扩增呈阳性,而对牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒、魏氏梭菌(A型、B型和D型)、多杀性巴氏杆菌(A型和B型)等犊牛腹泻相关病原扩增均呈阴性;最低检出限为10拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于2%。利用本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法对29份临床样品进行检测,获得BVDV、BRV、BCoV的4种混合感染型,其中BVDV与BCoV的混合感染率最高(27.6%);与已有单重RT-qPCR方法比较,发现两种方法检测BVDV、BRV和BCoV的符合率分别为100%、96.5%、100%。结果表明,本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好、可行性高等优点,可为今后BVDV、BRV和BCoV共感染引起的牛腹泻性疾病的鉴别诊断和流行病学调查提供新技术手段。

关键词：牛病毒性腹泻病毒牛轮状病毒牛冠状病毒 TaqMan三重RT-qPCR 混合感染

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IBRV特异性噬菌体单域抗体库的构建、筛选及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2020年第7期 1-7页

作者：包福祥徐文博芦婷王莉鑫刘欣秦岭兄李鑫泳刘树弘杜雅楠内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了开发有效的用于治疗和诊断牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)的抗体,试验用牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)免疫双峰驼,构建IBRV特异性噬菌体单域抗体库,并以IBRV gD蛋白为筛选抗原,对其进行筛选,对筛选得到的单域抗体进行诱导表达、纯化及鉴定。结果表明:构建得到的IBRV特异性噬菌体单域抗体库的库容为7×10^7;经3轮富集和筛选,phage-ELISA筛选出14个与gD蛋白结合的阳性克隆,并成功对阳性值较高的重组单域抗体IB68进行表达和纯化;经ELISA和Western-blot鉴定,重组单域抗体IB68可与gD蛋白产生抗原抗体结合反应,具有较高的亲和力。说明制备的IBRV特异性噬菌体单域抗体库具有较高的库容和多样性,且筛选得到的单域抗体具有较高的抗原抗体结合活性和免疫学反应性。

关键词：牛传染性鼻气管炎 gD蛋白单域抗体抗体库原核表达

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捻转血矛线虫ABC转运蛋白的基因克隆、原核表达及纯化

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农业生物技术学报 2020年第10期28卷 1830-1836页

作者：赵学亮王姝懿孙柯呼和巴特尔王文龙刘春霞内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室西北农林科技大学动物医学院内蒙古农业大学生命科学学院

捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）是绵羊（Ovis aries）、山羊（Capra hircus）等反刍动物重要的寄生虫之一,可造成养殖业的巨大经济损失。基于转录组研究,本课题组前期从捻转血矛线虫耐药虫株中鉴定获得耐药基因—ABC （ATP-bindi... 详细信息

捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）是绵羊（Ovis aries）、山羊（Capra hircus）等反刍动物重要的寄生虫之一,可造成养殖业的巨大经济损失。基于转录组研究,本课题组前期从捻转血矛线虫耐药虫株中鉴定获得耐药基因—ABC （ATP-binding cassette）转运蛋白基因（GenBank No. MT478136）。本研究拟分析ABC转运蛋白基因的生物信息学特征,建立ABC转运蛋白的可溶性诱导表达及纯化体系,为进一步探究ABC转运蛋白参与的耐药机制提供参考依据。首先利用在线软件对ABC进行蛋白质结构分析及抗原表位预测,结果显示,ABC分子式为C;H;N;O;S;,属于不含跨膜区和信号肽的亲水性蛋白质,二级结构主要以延伸链为主;ABC转运蛋白的抗原性较高,含有较多的抗原表位。利用反转录PCR （reverse transcription PCR, RT-PCR）扩增ABC转运蛋白基因,经酶切连接构建重组质粒pET30a（+）-ABC,转化大肠杆菌（Escherichia coli） BL21后进行诱导表达条件的优化,以0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷（isopropylβ-D-thiogalactoside, IPTG）于37℃诱导7 h可重组表达1 mg/mL ABC转运蛋白。本研究成功诱导表达并纯化了捻转血矛线虫重组ABC转运蛋白,可为深入开展其潜在耐药机制及免疫原性研究工作提供基础资料。

关键词：捻转血矛线虫 ABC (ATP-binding cassette)转运蛋白基因生物信息学分析原核表达蛋白纯化

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捻转血矛线虫P糖蛋白基因的表达与耐伊维菌素药物相关性

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中国兽医学报 2020年第4期40卷 713-718页

作者：方变变李军燕罗晓平王鹏龙刘阳杨晓野内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031

为了解P糖蛋白(Pgp)与捻转血矛线虫(Haemonchus contortus,Hco)耐伊维菌素(IVM)药物的相关性,分别从山西榆次和内蒙古乌审旗分离得到伊维菌素敏感和耐药虫株,并运用RT-qPCR法,检测比较Hco-Pgp-2和Hco-Pgp-9在捻转血矛线虫乌审旗耐药株(W... 详细信息

为了解P糖蛋白(Pgp)与捻转血矛线虫(Haemonchus contortus,Hco)耐伊维菌素(IVM)药物的相关性,分别从山西榆次和内蒙古乌审旗分离得到伊维菌素敏感和耐药虫株,并运用RT-qPCR法,检测比较Hco-Pgp-2和Hco-Pgp-9在捻转血矛线虫乌审旗耐药株(WS-R)和山西敏感株(SX-S)之间的表达差异性。结果显示,Hco-Pgp-2和Hco-Pgp-9在耐药株WS-R中,雌虫的表达量均低于雄虫;而在敏感株SX-S中,雌虫的表达量均高于雄虫。雌虫Hco-Pgp-2和Hco-Pgp-9表达量,均是耐药株WS-R低于敏感株SX-S,而雄虫则相反。由此推断,这种性别间的表达差异可能与虫体耐药性相关,可以作为耐药性监测的依据之一。

关键词：捻转血矛线虫伊维菌素 RT-qPCR 耐药性 P糖蛋白(Pgp)

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牛源多杀性巴氏杆菌PlpE蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

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中国动物检疫 2021年第1期38卷 94-99页

作者：张智刘泽乌吉斯古楞刘重阳权璞宏任旭荣宋庆庆关平原内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 金宇保灵生物药品有限公司兽用疫苗国家工程实验室内蒙古呼和浩特010020

为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质... 详细信息

为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG进行诱导,对诱导蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定;使用纯化蛋白PlpE免疫北京大耳白兔,制备多克隆抗体,并进行间接ELISA和Western Blot分析。结果显示,扩增的PlpE基因大小为1050 bp,在原核细胞中诱导表达的PlpE蛋白约56 kDa。间接ELISA结果显示,所制备多克隆抗体效价可达1:512000;Western Blot结果显示,所制备多克隆抗体反应性良好。PlpE蛋白的成功表达和多克隆抗体的成功制备,为下一步多杀性巴氏杆菌诊断方法的建立和疫苗研发奠定了基础。

关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达 PlpE基因多克隆抗体

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三株美洲驼源狂犬病病毒N基因遗传进化分析

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野生动物学报 2021年第1期42卷 120-123页

作者：王金玲郑秉武曹霞杨龙峰葛金英卢爱桃内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010010 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 呼和浩特市园林管理局动物园管理处呼和浩特010050 北京市延庆区动物疫病预防控制中心北京102100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010031

为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析。结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100%,且都与201... 详细信息

为阐明2015年在内蒙古呼和浩特地区3株美洲驼源狂犬病病毒(RABV)流行株的遗传进化情况,经基因扩增和测序获得3株美洲驼源RABV N基因序列,并进行遗传进化分析。结果显示3株RABV之间N基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为100%,且都与2011年呼和浩特奶牛源和犬源毒株、2013年内蒙古牛源毒株、2007年湖北犬源毒株、2016和2018年北京犬源毒株、2006年天津犬源毒株和2009年福建犬源毒株的亲缘性最高,同源率为100%。这些毒株位于同一个遗传进化群内,均属于CTN-1(Asian谱系)。研究结果说明3株美洲驼源RABV的N基因与参考的内蒙古、湖北、北京、福建和天津毒株起源于共同的祖先。

关键词：美洲驼狂犬病病毒 N基因遗传进化

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群体感应与群体淬灭控制病原菌的研究进展

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中国兽医科学 2020年第1期50卷 72-83页

作者：李胜利孙海洲金鹿桑丹张崇志张春华郝永清内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院动物营养与饲料研究所内蒙古自治区草食动物营养科学重点实验室内蒙古呼和浩特010031

当前,随着病原菌抗生素耐药性不断增强,开发防控病原菌的新方法是全球面临的主要挑战之一。许多重要的动物病原菌通过"群体感应"作用来调控病原菌毒力。因此,对病原菌的群体感应进行干扰即"群体淬灭",从而开发控制... 详细信息

当前,随着病原菌抗生素耐药性不断增强,开发防控病原菌的新方法是全球面临的主要挑战之一。许多重要的动物病原菌通过"群体感应"作用来调控病原菌毒力。因此,对病原菌的群体感应进行干扰即"群体淬灭",从而开发控制疾病的新疗法已经成为新兴的研究热点。本文综述了病原菌群体感应,群体感应对病原菌致病性和肠道健康影响,以及利用群体淬灭开发药物等方面最近进展。

关键词：病原菌群体感应群体淬灭群体感应抑制剂

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内蒙古部分地区绵羊胃肠道线虫感染率及驱虫效果比较研究

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东北农业大学学报 2020年第10期51卷 63-69页

作者：何秀玲贡庆扎布其力木格海鹰额叶勒德格哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 鄂尔多斯市乌审旗动物疫病控制中心内蒙古鄂尔多斯017300

为研究内蒙古典型牧业旗县绵羊胃肠道线虫病流行特点和耐药性,分别在鄂尔多斯乌审旗和锡林郭勒西乌珠穆沁旗开展绵羊主要线虫病流行病学调查,比较常用抗蠕虫药驱虫效果。采集新鲜粪样,定性和定量检查粪便虫卵,给予不同抗蠕虫药开展驱虫... 详细信息

为研究内蒙古典型牧业旗县绵羊胃肠道线虫病流行特点和耐药性,分别在鄂尔多斯乌审旗和锡林郭勒西乌珠穆沁旗开展绵羊主要线虫病流行病学调查,比较常用抗蠕虫药驱虫效果。采集新鲜粪样,定性和定量检查粪便虫卵,给予不同抗蠕虫药开展驱虫效果比较试验。结果表明,连续两年鄂尔多斯细毛羊胃肠道线虫总感染率分别为84.4%和36.9%,乌珠穆沁羊胃肠道线虫感染率分别为70.9%和48.0%。两个地区优势虫种均为捻转血矛线虫和细颈线虫,且伊维菌素和多拉菌素已完全失去对绵羊消化道线虫的驱杀作用,阿苯达唑和噻嘧啶驱虫效果亦较差。左旋咪唑在鄂尔多斯细毛羊体内驱虫效果较差,但在乌珠穆沁羊体内驱虫效果较好。碘硝酚、氯氰碘柳胺钠和硝碘酚腈对优势线虫具有强大驱杀作用,给药后虫卵减少率(FECR)均超过97%。因此,研究发现试验区域绵羊胃肠道线虫感染较严重,且优势虫种已对目前广泛应用的伊维菌素、多拉菌素和阿苯达唑等多种驱虫药均产生强抗药性。研究结果为试验区域制定合理驱虫方案提供科学依据。

关键词：绵羊线虫病流行病学调查抗药性驱虫效果

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捕食性真菌生物制剂对绵羊的安全性试验

捕食性真菌生物制剂对绵羊的安全性试验

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2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛

作者：侯斌段可欣牛杰康马亚囡杜山丁玉林王瑞内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心

在新兽药开发过程中,兽药的安全性评价占据着举足轻重的作用,主要是通过不同倍数剂量药物的投喂发现新兽药的对靶动物产生的不良反应和毒副作用。根据国内外的相关报道,一般认为捕食性真菌对人、动物和环境是安全的,但鲜有专门捕食线虫... 详细信息

在新兽药开发过程中,兽药的安全性评价占据着举足轻重的作用,主要是通过不同倍数剂量药物的投喂发现新兽药的对靶动物产生的不良反应和毒副作用。根据国内外的相关报道,一般认为捕食性真菌对人、动物和环境是安全的,但鲜有专门捕食线虫性真***生物制剂对动物安全性的检测。为检测捕食线虫性真菌对羊的安全性,进而研究捕食线虫性真菌对羊的不良反应和毒副作用,本试验制备了捕食线虫性真菌冻干生物制剂,对各组羊进行不同倍数的灌服,尔后对各组绵羊进行血液指标的测量和主要组织器官病变及病理切片的观察。结果表明:在靶动物绵羊口服5倍、10倍剂量的生物制剂后,制剂对各组绵羊的呼吸、精神、食饮欲和排粪等临床观察指标无影响,体温到正常。血常规和血液生化指标在给药前和给药后的第15和30 d均在正常范围内;剖检结果表明,主要器官与组织无异常变化,各组绵羊脏器系数无明显差异,且病理切片结果亦正常。这些数据说明捕食线虫性真菌***冻干生物制剂对靶动物绵羊是安全的,可在临床中应用。

关键词：捕食线虫性真菌生物制剂安全性绵羊

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