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酿酒酵母甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(S BD-1)表达的影响

中国预防兽医学报 2018年第12期40卷 1117-1121页

作者：金鑫张曼王云鹤魏方温婧怡杨银凤内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为探究酿酒酵母菌细胞壁成分甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(RECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本研究用不同浓度的甘露聚糖刺激RECs 8 h后,利用荧光定量PCR (qPCR)和ELISA方法分别检测RECsSBD-1 mRNA的转录水平和蛋白表达变化,确定甘露... 详细信息

为探究酿酒酵母菌细胞壁成分甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(RECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本研究用不同浓度的甘露聚糖刺激RECs 8 h后,利用荧光定量PCR (qPCR)和ELISA方法分别检测RECsSBD-1 mRNA的转录水平和蛋白表达变化,确定甘露聚糖诱导SBD-1表达量最高的刺激浓度。然后用该浓度甘露聚糖对RECs进行不同时间的刺激,同样利用qPCR和ELISA方法对SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达变化进行检测,确定甘露聚糖诱导SBD-1表达的最佳时间。qPCR和ELISA结果显示:不同浓度甘露聚糖刺激RECs8 h后,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达量均有所增加,但随着甘露聚糖浓度的增加,SBD-1表达量呈现先升高后降低的趋势,且当甘露聚糖浓度为50μg/mL时SBD-1表达量达到最大,并与对照组相比差异极显著(p<0.01)。当用50μg/mL的甘露聚糖分别刺激RECs不同时间后,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势,刺激时间为4 h时SBD-1表达量达到峰值,且极显著高于对照组(p<0.01),之后呈下降趋势。结果表明甘露聚糖能够提高绵羊RECs SBD-1的表达,且甘露聚糖浓度为50μg/mL刺激RECs 4h时,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白表达量达到最高。本研究为甘露聚糖在体内如何发挥先天性免疫提供了一种新解释,也为更好的开发利用甘露聚糖制剂提供实践指导。

关键词：甘露聚糖绵羊瘤胃上皮细胞 β-防御素-1 荧光定量PCR ELISA

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基于动物福利的羊捻转血矛线虫病防控技术研究进展

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动物医学进展 2019年第6期40卷 69-72页

作者：罗晓平李军燕杨祥树张家琰赵小超 Khan Sawar 杨晓野萨日娜萨茹拉冯新港中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 上海师范大学上海200234 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区呼伦贝尔市新巴尔虎右旗动物疫控中心内蒙古呼伦贝尔021300

捻转血矛线虫是牛羊等反刍动物常见的寄生蠕虫,该虫寄生在牛羊等宿主体内,可导致宿主贫血,给畜牧业生产带来巨大的损失。近年来,随着国内对动物福利理念的普及,基于动物福利的疫病防控技术受到越来越多的重视,然而却未见基于此的相关论... 详细信息

捻转血矛线虫是牛羊等反刍动物常见的寄生蠕虫,该虫寄生在牛羊等宿主体内,可导致宿主贫血,给畜牧业生产带来巨大的损失。近年来,随着国内对动物福利理念的普及,基于动物福利的疫病防控技术受到越来越多的重视,然而却未见基于此的相关论述。论文就现有羊捻转血矛线虫病防控技术,包括药物防控、生物防控、疫苗预防等进行综述,为今后研发基于动物福利的羊捻转血矛线虫病防控技术提供参考。

关键词：羊动物福利捻转血矛线虫病防控技术

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分离乳酸菌SQ0048菌株作用奶牛阴道上皮细胞的转录组学测序及差异表达基因分析

分离乳酸菌SQ0048菌株作用奶牛阴道上皮细胞的转录组学测序及差异...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：牛春宇程超李培锋农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室(内蒙古农业大学兽医学院) 内蒙古双奇药业股份有限公司

[目的]奶牛阴道炎是引起不孕、流产和产后子宫疾病的重要原因之一,给养殖业造成巨大的经济损失。乳酸菌是人和动物体内最普遍且在数量上占主导地位的微生物,存在于健康奶牛阴道内的乳酸菌是生殖道致病菌感染的主要微生物屏障。乳酸菌在... 详细信息

[目的]奶牛阴道炎是引起不孕、流产和产后子宫疾病的重要原因之一,给养殖业造成巨大的经济损失。乳酸菌是人和动物体内最普遍且在数量上占主导地位的微生物,存在于健康奶牛阴道内的乳酸菌是生殖道致病菌感染的主要微生物屏障。乳酸菌在生殖道发挥益生作用的前提条件是能够在生殖道细胞表面黏附、定植,并通过空间占位,产生抑菌物质等对生殖道致病菌产生抑制作用。奶牛阴道分离乳酸菌SQ0048菌株特异性黏附及抑菌机制的研究将为益生菌产品的开发提供试验基础和理论依据。[方法]采用形态学及免疫荧光法对分离培养的原代奶牛阴道上皮细胞进行了分离鉴定;采用RNA-seq技术对奶牛阴道上皮细胞组和分离乳酸菌SQ0048菌株作用的奶牛阴道上皮细胞组进行转录组测序;采用RT-qPCR法对转录组测序筛选获得的差异表达基因进行了验证。[结果]转录组测序共获得296个差异表达基因,其中170个差异表达基因显著上调(P<0.05),126个差异表达基因显著下调(P<0.05);根据GO和KEGG富集性分析结果显示,差异表达基因成功注释到171个信号通路,其中有23个显著富集的信号通路(P<0.05)。富集差异表达基因较多的信号通路为蛋白质在内质网中加工信号通路、IL-17信号通路及抗原加工和呈递信号通路,分别与乳酸菌的特异性黏附及抗炎免疫调节机制有关;RT-qPCR验证15个差异表达基因,其表达趋势与转录组测序获得的结果相一致且显著上调(P<0.05)。[结论]大多数差异表达基因富集到蛋白质在内质网中加工信号通路,其可能是分离乳酸菌SQ0048菌株发挥黏附作用以及抑制致病菌的主要通路。本研究将为益生菌产品的开发提供试验基础和理论依据。

关键词：奶牛阴道上皮细胞乳酸菌 RNA-seq 基因表达 RT-qPCR

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TCDCA对大鼠脂肪代谢及其相关受体FXR表达量的影响

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中国兽医学报 2018年第7期38卷 1430-1434,1456页

作者：李欣牛春宇毛伟关红何秀玲李培锋内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了探讨牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）对大鼠脂肪代谢相关受体FXR表达量的影响，初步分析TCDCA对脂肪代谢的调节作用。将36只雄性Wistar大鼠，随机分成4组：阴性对照组、低剂量组（3mg／kg）、中剂量组（9mg／kg）及高剂量组（27mg／kg），... 详细信息

为了探讨牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）对大鼠脂肪代谢相关受体FXR表达量的影响，初步分析TCDCA对脂肪代谢的调节作用。将36只雄性Wistar大鼠，随机分成4组：阴性对照组、低剂量组（3mg／kg）、中剂量组（9mg／kg）及高剂量组（27mg／kg），给药持续21d后，收集肝脏。采用HE染色和免疫组化方法检测FXR是否在大鼠肝脏组织中的表达及其表达位置，以及TCDCA对大鼠肝脏组织结构的影响；采用qPCR和Western blot的方法测定大鼠肝脏FXR mRNA以及相应蛋白的表达量。结果表明，阴性对照组与TCDCA各给药组大鼠肝脏细胞核上的FXR均有表达，但TCDCA处理组的表达量明显高于阴性对照组；TCDCA对大鼠肝脏组织结构物无显著影响；低剂量组大鼠肝脏中FXR mRNA表达量极显著高于阴性对照组（P〈0．01），低剂量组FXR蛋白表达量显著高于阴性对照组（P〈0．05）。TCDCA对大鼠脂肪代谢相关受体FXR的表达量呈上调作用。

关键词：牛磺鹅去氧胆酸法尼醇受体脂肪代谢

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猪疾病预防兽医学分类及其针对性有效防治措施的思考

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现代农业 2019年第2期 75-77页

作者：汤君宇智宇内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010010 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010070

随着我国社会经济的快速发展,人民生活质量不断提高,对于猪肉的需求也在不断扩大,但是由于当前我国食品卫生安全问题形势严峻,各种病死猪肉在市场上广为流通,很容易给消费者带来安全隐患,为此必须要加强对于猪病的预防、兽医学分类,并... 详细信息

随着我国社会经济的快速发展,人民生活质量不断提高,对于猪肉的需求也在不断扩大,但是由于当前我国食品卫生安全问题形势严峻,各种病死猪肉在市场上广为流通,很容易给消费者带来安全隐患,为此必须要加强对于猪病的预防、兽医学分类,并且通过针对性的有效防治措施,提高猪肉质量,保障人民群众的健康安全。

关键词：猪疾病预防兽医学分类防治措施

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阿拉善双峰驼阴道蝇蛆的形态结构观察

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动物医学进展 2019年第1期40卷 47-52页

作者：安希文额尔敦木图崔阿拉腾乌拉布仁巴依尔萨日娜支立康王超宝山内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 阿拉善左旗巴润别立动物卫生监督所内蒙古巴彦浩特750308 阿拉善左旗动物卫生监督所内蒙古巴彦浩特750300 阿拉善盟动物卫生监督所内蒙古巴彦浩特750306 巴彦淖尔市家畜改良工作站内蒙古巴彦淖尔015000

阿拉善双峰驼阴道蝇蛆病是由黑须污蝇(Wohlfahrtia magnifica)幼虫寄生而引起的一种疾病,论文对阿拉善双峰驼阴道蝇蛆形态结构进行了观察。一期幼虫为从野外捕捉的黑须污雌蝇体内获得或从双峰驼阴门附近采集雌蝇刚排出的一期幼虫;在患... 详细信息

阿拉善双峰驼阴道蝇蛆病是由黑须污蝇(Wohlfahrtia magnifica)幼虫寄生而引起的一种疾病,论文对阿拉善双峰驼阴道蝇蛆形态结构进行了观察。一期幼虫为从野外捕捉的黑须污雌蝇体内获得或从双峰驼阴门附近采集雌蝇刚排出的一期幼虫;在患病驼阴道病灶处可以捕捉到二期、三期幼虫,采用扫描电子显微镜、一体式解剖显微镜、超景深成像仪等进行观察并描述。在解剖镜下看到蝇蛆具有12段体节,分别为1段双叶伪头、3段胸节、7段腹节和肛部。扫描电子显微镜下观察到一期幼虫双叶伪头上具有很多感受器和一对口钩,口钩附在头骨架上,蝇蛆体表有很多硬刺,每一体节上刺的数量与排列方式不同。黑须污蝇二期、三期幼虫前呼吸孔呈扇形,由5个分支组成。肛部为最后一体节,呈半球型,后呼吸孔隐藏在气门腔内。

关键词：阿拉善双峰驼阴道蝇蛆病黑须污蝇幼虫形态学扫描电子显微镜

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穴位埋线对非酒精性脂肪肝模型大鼠脂质代谢及AdipoR2-PPARα-CPT1a信号通路mRNA表达水平的影响

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中国兽医学报 2018年第10期38卷 1989-1993页

作者：杨茜雯王岩杨英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

试验选用48只雌性Wistar大鼠,随机分为对照组和模型组。高脂饲料饲喂8周诱导非酒精性脂肪肝模型。模型验证后,将大鼠分为空白对照组、空白埋线A组、空白埋线B组、模型组、模型埋线A组、模型埋线B组,每组6只。埋线组进行穴位埋线,A组：... 详细信息

试验选用48只雌性Wistar大鼠,随机分为对照组和模型组。高脂饲料饲喂8周诱导非酒精性脂肪肝模型。模型验证后,将大鼠分为空白对照组、空白埋线A组、空白埋线B组、模型组、模型埋线A组、模型埋线B组,每组6只。埋线组进行穴位埋线,A组：肝俞、胆俞、后海;B组：肝俞、胆俞、后海、后三里。2周后检测血清TG、TC、FFA、LDL-C、HDL-C、ADPN含量及肝脏TG、TC、FFA、ACC、FAS含量;RT-PCR检测肝脏AdipoR2、PPARα、CPT-1a mRNA表达水平。结果显示：与模型组相比,模型埋线A、B组血清HDL-C、ADPN含量显著升高,TC/HDL-C、TG/HDL-C比值显著降低;模型埋线A、B组肝脏TG含量显著降低;模型埋线B组肝脏FFA、FAS含量显著降低;模型埋线A、B组肝脏PPARαmRNA表达水平显著升高（P〈0.05）。结果表明：穴位埋线对非酒精性脂肪肝模型大鼠血脂指标有一定的改善作用,能有效降低肝脏TG、FAS含量,调节肝脏脂质的合成,其机理可能与其参与PPAR通路调节有关。

关键词：穴位埋线非酒精性脂肪肝肝俞胆俞后海后三里 FAS PPARα

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蓝刺头多糖B对H_2O_2诱导INS-1细胞凋亡研究

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动物医学进展 2018年第11期39卷 66-70页

作者：王岩杨茜雯杨英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

探究蓝刺头多糖B(ETPB)对由H2O2造成INS-1细胞凋亡的影响。采用ETPB分别作用于INS-1细胞24h、48h后,使用H2O2作用24h,MTT检测细胞存活率,ETPB组与阳性对照组相比可显著提高细胞存活率(P<0.05)。使用ETPB与阳性药物VC进行AO/EB染色试... 详细信息

探究蓝刺头多糖B(ETPB)对由H2O2造成INS-1细胞凋亡的影响。采用ETPB分别作用于INS-1细胞24h、48h后,使用H2O2作用24h,MTT检测细胞存活率,ETPB组与阳性对照组相比可显著提高细胞存活率(P<0.05)。使用ETPB与阳性药物VC进行AO/EB染色试验,ETPB、VC各组凋亡细胞少于阳性对照组,提示ETPB对H2O2引起的INS-1细胞凋亡有保护作用,效果与VC相近。检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA表达量,ETPB各组与阳性对照组相比能显著提高Bcl-2表达量(P<0.05),显著降低Bax表达量(P<0.05);Western blot检查Bcl-2和Bax蛋白表达量,结果与mRNA检测结果一致。说明ETPB可显著改善由H2O2造成的细胞凋亡,这种作用可能与Bcl-2和Bax基因有关。

关键词：蓝刺头多糖B INS-1细胞凋亡 Bcl-2 Bax

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骆驼斯氏副柔线虫NCC基因原核表达载体的构建及生物信息学分析

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动物医学进展 2018年第10期39卷 24-30页

作者：赵学亮冯陈晨孙柯王梦雅王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018

本试验旨在构建原核表达载体pET30a(+)-NCC,对斯氏副柔线虫NCC基因特性进行生物信息学分析。应用RT-PCR技术扩增斯氏副柔线虫NCC基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+),利用生物信息学软件对序列结构与抗原表位进行分析。结果显示,NCC... 详细信息

本试验旨在构建原核表达载体pET30a(+)-NCC,对斯氏副柔线虫NCC基因特性进行生物信息学分析。应用RT-PCR技术扩增斯氏副柔线虫NCC基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+),利用生物信息学软件对序列结构与抗原表位进行分析。结果显示,NCC基因全长711bp,编码237个氨基酸,蛋白质理论大小值为25.252ku,理论等电点为6.33,蛋白质不稳定指数为40.08;跨膜结构和信号肽分析表明NCC蛋白存在1个跨膜区,无信号肽区域,其磷酸化位点分布位于丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)残基上。NCC蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,既含有较多潜在的B细胞抗原表位又存在较多的T细胞抗原表位,本试验为斯氏副柔线虫诊断方法的建立及免疫防控提供参考。

关键词：斯氏副柔线虫 NCC基因原核表达生物信息学分析

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斯氏副柔线虫免疫相关基因CSY原核表达载体的构建及生物信息学分析

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中国兽医学报 2018年第10期38卷 1901-1907页

作者：赵学亮孙柯王梦雅白丽艳冯陈晨王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018

采用RT-PCR克隆斯氏副柔线虫CSY基因的CDS区,限制性内切酶对目的片段与pET30a（＋）原核表达载体进行双酶切,构建重组表达载体,利用生物信息学软件对该基因理化性质、结构特点进行分析。结果显示：CSY基因全长774bp,编码255个氨基酸,蛋... 详细信息

采用RT-PCR克隆斯氏副柔线虫CSY基因的CDS区,限制性内切酶对目的片段与pET30a（＋）原核表达载体进行双酶切,构建重组表达载体,利用生物信息学软件对该基因理化性质、结构特点进行分析。结果显示：CSY基因全长774bp,编码255个氨基酸,蛋白质理论大小值为29 240,理论等电点为7.53,蛋白质不稳定指数为40.09;跨膜结构和信号肽分析表明CSY蛋白无跨膜区,无信号肽区域。结果表明：成功构建了pET-30a（＋）-CSY重组表达载体;生物信息学分析表明CSY蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,可能有7个B细胞抗原表位和8个T细胞抗原表位,有望用于斯氏副柔线虫的免疫诊断抗原和疫苗候选抗原。

关键词：斯氏副柔线虫 CSY基因抗原表位生物信息学分析

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