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JSRV-Env诱导转染NIH 3T3细胞后对VEGF和EGFR因子表达的影响

中国兽医学报 2017年第5期37卷 898-904页

作者：骆爽孙丽红于立新么宏强内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

通过探索JSRV Env真核表达质粒诱导转染小鼠NIH 3T3(小鼠成纤维细胞)后对血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,进一步探讨其变化与绵羊肺腺瘤病(OPA)肿瘤发生的关联性。首先体外培养NIH 3T3细胞,设立转染pEGFP-C1... 详细信息

通过探索JSRV Env真核表达质粒诱导转染小鼠NIH 3T3(小鼠成纤维细胞)后对血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,进一步探讨其变化与绵羊肺腺瘤病(OPA)肿瘤发生的关联性。首先体外培养NIH 3T3细胞,设立转染pEGFP-C1-env、pEGFP-C1及未转染细胞组。本研究采用实时荧光定量PCR方法检测VEGF和EGFR mRNA水平上的表达;ELISA方法检测两细胞因子在不同处理的NIH 3T3细胞培养上清中蛋白的表达。结果显示,相比pEGFP-C1和未转染细胞组,转染pEGFP-C1-env细胞组中VEGF和EGFR mRNA的表达量均显著升高(P<0.05);且在该处理组的细胞培养上清中检测到VEGF和EGFR蛋白浓度呈明显上升趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染pEGFP-C1细胞组相比未转染细胞组VEGF和EGFR mRNA和蛋白表达量均差异不明显(P>0.05)。结果表明,JSRV Env在诱导转染小鼠NIH 3T3细胞转化过程中,通过qPCR和ELISA的检测结果均可得知VEGF和EGFR表达量均升高,由两者的过表达变化推测VEGF和EGFR在OPA肿瘤发生过程中可能起关键作用,同时为OPA针对两者进行的基因靶向治疗方法提供理论基础。

关键词： JSRV Env真核表达质粒 NIH 3T3细胞 VEGF因子 EGFR因子

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牛传染性鼻气管炎病毒双重PCR检测方法的建立

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动物医学进展 2017年第12期38卷 5-8页

作者：徐娜杨帆雷宇李平安关平原内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的双重PCR检测方法,根据GenBank中登录的IBRV gE和gB基因序列,设计2对特异性引物。结果表明,建立的方法特异性强,对牛支原体、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、巴氏杆菌、牛和羊布鲁菌进行检测,结... 详细信息

为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的双重PCR检测方法,根据GenBank中登录的IBRV gE和gB基因序列,设计2对特异性引物。结果表明,建立的方法特异性强,对牛支原体、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、巴氏杆菌、牛和羊布鲁菌进行检测,结果均为阴性。研究表明,所建立的双重PCR检测方法具有快速、敏感、准确等优点,可以用于IBRV的检测。

关键词：牛传染性鼻气管炎 gE、gB基因双重PCR

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细胞色素P4503A酶与双峰驼物质代谢的特性

引用

动物医学进展 2017年第2期38卷 102-106页

作者：岳伟东散仁哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

细胞色素P4503A(CYP3A)是细胞色素P450(CYP)酶超家族在动物肝脏中最主要的功能形式,约占肝脏总CYP酶含量的30%,参与45%~60%常用药物在体内的代谢转化过程。人们对各种CYP3A酶开展较为系统的研究,包括CYP3A酶分子结构、遗传多样性、体内... 详细信息

细胞色素P4503A(CYP3A)是细胞色素P450(CYP)酶超家族在动物肝脏中最主要的功能形式,约占肝脏总CYP酶含量的30%,参与45%~60%常用药物在体内的代谢转化过程。人们对各种CYP3A酶开展较为系统的研究,包括CYP3A酶分子结构、遗传多样性、体内外活性及其影响因素等。论文从CYP3A亚家族的生物学特性、对内源性化合物和外源性化学物质代谢的意义、CYP3A基因的表达与调控、CYP3A酶的诱导与抑制及双峰驼CYP3A酶研究进展等方面加以综述。

关键词： CYP3A亚家族基因表达与调控抑制与诱导双峰驼CYP3A酶

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骆驼口蹄疫

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中国兽医杂志 2017年第8期53卷 57-59页

作者：岳伟东散仁哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

口蹄疫（FMD）,俗称＂口疮＂、＂蹄癀＂,是动物的一种急性、热性、直接接触性传染病。动物以口腔黏膜、蹄部发生水疱和溃烂形成烂斑为主要特征。骆驼科动物主要栖息地在非州、中东、东亚以及南美国家,这些地域同时也是FMD流行区域。目... 详细信息

口蹄疫（FMD）,俗称＂口疮＂、＂蹄癀＂,是动物的一种急性、热性、直接接触性传染病。动物以口腔黏膜、蹄部发生水疱和溃烂形成烂斑为主要特征。骆驼科动物主要栖息地在非州、中东、东亚以及南美国家,这些地域同时也是FMD流行区域。目前有报道称,在西非、尼日利亚等地均发现单峰驼感染口蹄疫病毒（FMDV）。

关键词：骆驼口蹄疫病毒单峰驼 FMDV 双峰驼南美国家蹄部接触性传染病烂斑口腔黏膜

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一例羊驼肠毒血症的病理学诊断

一例羊驼肠毒血症的病理学诊断

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：丁玉林郑秉武汤君宇王金玲王凤龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特市大青山野生动物园

肠毒血症是由魏氏梭菌在肠道中大量繁殖,产生毒素引起的一种急性毒血症。近年来,在我国许多省区的牛、羊、猪、鹿等动物流行一种以急性死亡为特征的疾病1]。某羊驼养殖场发生了羊驼急性死亡,通过对羊驼的尸体剖检、病理组织学观察、细... 详细信息

肠毒血症是由魏氏梭菌在肠道中大量繁殖,产生毒素引起的一种急性毒血症。近年来,在我国许多省区的牛、羊、猪、鹿等动物流行一种以急性死亡为特征的疾病1]。某羊驼养殖场发生了羊驼急性死亡,通过对羊驼的尸体剖检、病理组织学观察、细菌培养等方法对该病进行诊断,结果证实为羊驼的肠毒血症。1材料与方法 1.1材料1.1.1实验动物:某羊驼养殖场送检的病死羊驼;BALB/c小鼠购自内蒙古医科大学。1.2方法:对送检的羊驼尸体进行尸体剖检,记录各组织器官的病理变化,病理组织取材、固定进行病理组

关键词：肠毒血症病理学诊断

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穴位埋线对运动性疲劳模型大鼠肝肾功能的影响

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中国兽医学报 2017年第3期37卷 501-504页

作者：朱浩姜梦如马晓宇毕凯璇丁菲王雪飞刘艳成杨英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

采用递增跑台训练的方法构建运动性疲劳大鼠模型,将大鼠随机分为埋线Ⅰ组、埋线Ⅱ组、空白组、跑台组、埋线跑台Ⅰ组、埋线跑台Ⅱ组,并对各组大鼠肝脏、肾脏进行采集及相关生化指标的测定。结果显示:对于运动性疲劳大鼠,穴位埋线可抑制... 详细信息

采用递增跑台训练的方法构建运动性疲劳大鼠模型,将大鼠随机分为埋线Ⅰ组、埋线Ⅱ组、空白组、跑台组、埋线跑台Ⅰ组、埋线跑台Ⅱ组,并对各组大鼠肝脏、肾脏进行采集及相关生化指标的测定。结果显示:对于运动性疲劳大鼠,穴位埋线可抑制肾脏指数升高(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平(P<0.01),降低肌酐(CREA)、UREA水平及皮质醇(CORT)浓度(P<0.05)。结果表明:穴位埋线可在不同程度上保护疲劳大鼠肝肾功能免受损害,从而改善机体耐力,使失衡的功能关系趋向正常化和表达最大化。

关键词：穴位埋线运动性疲劳肝肾功能

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布氏杆菌S2疫苗株GL_0002181基因的原核表达

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 62-67页

作者：王文龙红梅呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010059

为了鉴别羊种布氏杆菌自然感染和S2疫苗(猪种)免疫羊,选用布氏杆菌S2疫苗株进行了全基因组测序,预测出的编码基因与已公布的布氏杆菌基因组数据库比对分析,找出S2特有基因GL_0002181,对GL_0002181基因进行原核表达及免疫原性验证,同时用... 详细信息

为了鉴别羊种布氏杆菌自然感染和S2疫苗(猪种)免疫羊,选用布氏杆菌S2疫苗株进行了全基因组测序,预测出的编码基因与已公布的布氏杆菌基因组数据库比对分析,找出S2特有基因GL_0002181,对GL_0002181基因进行原核表达及免疫原性验证,同时用BP26蛋白作为对照组。Western blot结果显示:以S2疫苗免疫绵羊血清作为检测抗体,重组菌BL21(pETGL_0002181)、BL21(pETBP26)与BL21(DE3)空菌比较,分别在31 ku、32 ku处出现了特异性条带,说明重组蛋白能够与S2免疫血清中的抗体发生特异性反应,具有较好的免疫原性;而重组表达菌BL21(pETGL_0002181)菌体蛋白与自然感染血清不反应,重组蛋白BP26与自然感染血清反应,说明GL_0002181基因在S2疫苗株中存在,在羊种自然流行株中不存在。结果表明:GL_0002181抗原可用于布氏杆菌S2疫苗免疫与羊种布氏杆菌自然感染鉴别诊断,为布氏杆菌病有效诊断提供理论依据。

关键词：布氏杆菌 S2疫苗株 GL_0002181基因原核表达鉴别诊断

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Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子优化培养及其杀线虫幼虫剂量研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2017年第9期45卷 39-45页

作者：陈林军刘省段杨晓野王瑞李莹莹李军燕罗晓平内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院兽医研究所内蒙古呼和浩特010031

【目的】探究捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子的批量培养方法及其对线虫幼虫的毒杀剂量。【方法】通过玉米粒或大麦粒培养基的单步培养法,以及先在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养7d后继而转接到玉... 详细信息

【目的】探究捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子的批量培养方法及其对线虫幼虫的毒杀剂量。【方法】通过玉米粒或大麦粒培养基的单步培养法,以及先在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养7d后继而转接到玉米粒或大麦粒培养基的双步培养法,以培养3~5周后洗脱的每克固体培养基中的厚壁孢子数为依据,对***的最优培养方法进行筛选;然后使用最优培养法培养***厚壁孢子并将其冻干后用于体外杀线虫幼虫试验,研究***冻干制剂的杀线虫幼虫剂量。【结果】培养基质不同时,***的菌落颜色有一定差异,玉米粒培养基中的菌落颜色呈微黄色,而大麦粒培养基中的菌落呈白色;***的适宜培养时间为3周。采用单步培养法时,玉米粒培养基培养的厚壁孢子数量为2.4×10~5个/g,大麦粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.2×10~5个/g;而采用双步培养法时,玉米粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.0×10~5个/g,大麦粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.5×10~5个/g。***冻干制剂杀线虫幼虫剂量的阈值为每克粪便4×10~5个***厚壁孢子,相应对线虫幼虫的杀虫率为95.2%。【结论】采用双步培养法培养厚壁孢子并将其制备成冻干制剂,在***生物防治寄生性线虫病方面有较好的应用前景。

关键词： Duddingtonia flagrans 厚壁孢子培养优化线虫幼虫毒杀剂量

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捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组DNA的提取及基因组survey分析

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中国兽医学报 2017年第11期37卷 2090-2094页

作者：张伟王瑞杨晓野祝晓蕊王新芳梁萌杨莲茹李军燕罗晓平内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031

采用透析膜培养法结合DNA柱式提取法进行基因组DNA提取,同时利用第2代高通量测序技术,分析了捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组概况。结果显示:透析膜培养结合DNA柱式提取法所提取的基因组DNA质量及浓度均能达到测序标准;捕食性真... 详细信息

采用透析膜培养法结合DNA柱式提取法进行基因组DNA提取,同时利用第2代高通量测序技术,分析了捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组概况。结果显示:透析膜培养结合DNA柱式提取法所提取的基因组DNA质量及浓度均能达到测序标准;捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组约为37.6 Mb,GC含量为44.95%,基因组杂合度较低。结果表明:透析膜培养法结合柱式法提取其基因组DNA的方法简便可行,为丝状真菌DNA提取,提供了新的思路;基因组survey分析为捕食性真菌Duddingtonia flagrans全基因组精细图谱的绘制奠定了基础。

关键词：捕食性真菌 Duddingtonia flagrans 13NA提取基因组测序 GC含量杂合度

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内蒙古地区羊源大肠杆菌耐药性研究

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中国畜牧兽医 2017年第3期44卷 839-846页

作者：刘正明李金泉黄德浩郝欣蔚郝普国吴莉芩吴烨挺杨奇妙赵红霞内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018

为确定内蒙古地区羊源大肠杆菌的耐药表型及其耐药基因的流行情况,本研究采用微量稀释法测定了内蒙古地区108株羊源大肠杆菌对13种临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示,分离菌株对阿莫西林、头孢噻吩、磺胺甲唑、黏菌素的耐药率最... 详细信息

为确定内蒙古地区羊源大肠杆菌的耐药表型及其耐药基因的流行情况,本研究采用微量稀释法测定了内蒙古地区108株羊源大肠杆菌对13种临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示,分离菌株对阿莫西林、头孢噻吩、磺胺甲唑、黏菌素的耐药率最高,均达100.0%,对阿莫西林/克拉维酸、四环素、环丙沙星的耐药率在50%~80%之间,对头孢噻肟、美洛培南、新霉素的耐药率均低于10%,较为敏感。108株羊源大肠杆菌中耐7种以上药物的菌株占94.4%,其中15.6%菌株对13种抗菌药物耐药,只有1株菌对所有抗菌药物敏感。采用PCR方法对羊源大肠杆菌分离株所携带的6种相关耐药基因进行检测,结果显示,6种耐药基因中的4种耐药基因blaTEM、proP-2、sul-Ⅰ、ampG检出率超过50%,耐药基因aph(3′)-Ⅰ携带率达40%,只有耐药基因aac(3)-Ⅱ检出率仅为5.5%。由此可见,内蒙古地区羊源大肠杆菌对13种抗菌药物产生了不同程度的耐药性,且存在严重的多重耐药情况,羊源大肠杆菌分离株携带aph(3′)-Ⅰ、sul-Ⅰ、ampG、blaTEM、proP-2、aac(3)-Ⅱ耐药基因。

关键词：羊大肠杆菌耐药性耐药基因

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