检索结果-内蒙古大学图书馆

伪狂犬病病毒gE/gI/TK基因缺失对感染PK-15细胞的差异表达蛋白质组分析

中国兽医学报 2023年第5期43卷 880-886页

作者：张洪亮王凤雪刁志凯李桂梅黄娟温永俊单虎青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室山东青岛266109 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了研究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株3个主要毒力基因gE/gI/TK缺失对感染宿主细胞后蛋白表达的影响,探究PRV与宿主细胞相互作用的分子机制,将PRV SD-2017ΔgE/gI/TK株接种PK-15细胞,运用串联质谱标签(tandem mass tags,... 详细信息

为了研究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株3个主要毒力基因gE/gI/TK缺失对感染宿主细胞后蛋白表达的影响,探究PRV与宿主细胞相互作用的分子机制,将PRV SD-2017ΔgE/gI/TK株接种PK-15细胞,运用串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)标记定量蛋白质组学技术,开展PRV感染细胞后差异表达蛋白分析,并通过Western blot进行数据验证。通过生物信息学分析发现,与亲本毒株PRV SD-2017感染组比较,SD-2017ΔgE/gI/TK感染组共鉴定到19个差异表达蛋白,其中7个蛋白上调,12个蛋白下调;与传统疫苗株Bartha-K/61比较,SD-2017ΔgE/gI/TK感染组共鉴定到176个差异表达蛋白,其中157个蛋白上调,19个蛋白下调。这些差异蛋白主要与紧密连接、RNA降解途径、核糖体生物发生、B细胞受体等信号通路有关,其中ATP2A1、KDM8、Eri1、XRCC6、DNM2和PYCR2等差异蛋白参与细胞凋亡、免疫反应和自噬相关功能。通过Western blot验证了MYLPF、ERI1、XRCC6和GAMT的表达情况与TMT比率一致,证明了该数据的可靠性。本研究为进一步探讨PRV变异株的致病和免疫机制奠定了理论基础。

关键词：伪狂犬病病毒变异株毒力基因 TMT 差异表达蛋白

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前列腺素D_(2)-DP_(1)受体途径对细菌性奶牛子宫内膜炎炎症介质表达的影响

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动物医学进展 2023年第2期44卷 51-55页

作者：杨效林包海霞毛伟刘博曹金山内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了阐明前列腺素D 2(prostaglandin D2,PGD 2)/DP 1受体途径参与大肠埃希氏菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)所致奶牛子宫内膜炎炎症反应的作用机制,以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,用浓度1×10^(-6) mol/L的DP 1受体激动剂(BW... 详细信息

为了阐明前列腺素D 2(prostaglandin D2,PGD 2)/DP 1受体途径参与大肠埃希氏菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)所致奶牛子宫内膜炎炎症反应的作用机制,以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,用浓度1×10^(-6) mol/L的DP 1受体激动剂(BW-245C,15d-PGJ2)或DP 1受体抑制剂(S5751,MK-0524)处理***与***感染体外培养的奶牛子宫内膜组织12 h,用RT-qPCR检测IL-6、TNF-α和NOS-2表达变化;ELISA检测培养液上清中IL-6、TNF-α分泌变化;免疫荧光法检测组织中NOS-2蛋白表达情况。结果显示,与空白对照组相比,***和***感染奶牛子宫内膜组织中IL-6、TNF-α和NOS-2的表达显著升高(P<0.05);DP 1受体激动剂与***和***共孵育奶牛子宫内膜组织,显著抑制组织中IL-6、TNF-α和NOS-2的表达(P<0.05);而DP 1受体抑制剂、***和***共同处理体外培养的奶牛子宫内膜组织后,组织中IL-6、TNF-α和NOS-2的表达显著高于细菌感染组(P<0.05)。表明PGD 2/DP 1途径在细菌诱导的奶牛子宫内膜炎症中发挥着重要的调控作用。

关键词：奶牛子宫内膜组织大肠埃希氏菌金黄色葡萄球菌白介素-6 肿瘤坏死因子-α 一氧化氮合酶-2

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自然感染绵羊肺腺瘤病毒病肺组织中凋亡相关因子的表达分析

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中国兽医学报 2023年第6期43卷 1263-1269,1296页

作者：张良黄家荣孙志伟李慧萍刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的慢性、接触传染性肺脏肿瘤疾病。为了探究细胞凋亡在OPA发展过程中的作用,本研究利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹... 详细信息

绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的慢性、接触传染性肺脏肿瘤疾病。为了探究细胞凋亡在OPA发展过程中的作用,本研究利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等方法检测了凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3及其对应的凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3在健康和自然感染JSRV绵羊肺组织中的表达情况。结果显示:与对照组相比,OPA肺组织中Bcl-2基因和蛋白表达量均显著上调,而Bax和Caspase-3基因和蛋白表达量均显著下调。此外,免疫组织化学显示,Bcl-2、Bax、Caspase-3主要表达于腺瘤灶内增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞中。结果表明,细胞凋亡在OPA肺组织中的活动受到抑制,提示绵羊肺腺瘤病毒可能通过调节细胞凋亡活动影响OPA的发生发展。

关键词：绵羊绵羊肺腺瘤绵羊肺腺瘤病毒细胞凋亡 Bcl-2

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前列腺素D2在大肠杆菌诱导的奶牛子宫内膜炎性反应中的双重调控作用

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中国兽医科学 2025年

作者：杨效林龚鹏飞郭莉莉吴敬泽于嘉辉钱英红张双翼刘博包海霞内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室巴彦淖尔市疾病预防控制中心内蒙古自治区农牧业科学院

本研究采用体外培养的奶牛子宫内膜组织（endometrial tissues，ETs）模型，旨在阐明前列腺素D?（prostaglandin D?，PGD?）在大肠杆菌（Escherichia coli，E. coli）引发的子宫内膜炎发病过程中的作用机制。通过分析不同感染时间，研... 详细信息

本研究采用体外培养的奶牛子宫内膜组织（endometrial tissues，ETs）模型，旨在阐明前列腺素D?（prostaglandin D?，PGD?）在大肠杆菌（Escherichia coli，E. coli）引发的子宫内膜炎发病过程中的作用机制。通过分析不同感染时间，研究内源性PGD?在E. coli感染过程中对ETs损伤及其相关分子表达调控的作用，并进一步研究其对炎症因子（IL-1β、IL-10、IL-8）分泌的调节作用，从而揭示PGD?在奶牛子宫内膜炎发生与进展中的潜在作用机制。结果显示，PGD2合成酶抑制剂（H-PGDS inhibitor 1和HQL-79）显著抑制了E. coli感染9 h和24 h奶牛ETs中PGD2的分泌（P＜0.000 1）。E. coli感染9 h，抑制PGD2合成显著减轻了E. coli对奶牛ETs的损伤，并且明显降低了损伤相关因子HABP-2的表达（P＜0.01）。同时，抑制PGD2合成还减少了IL-1β和IL-8的分泌，并显著增加了IL-10的分泌。然而，E. coli感染24 h，出现了截然相反的结果，PGD2合成的抑制在一定程度上导致了炎症反应的进一步加剧。这些结果表明，内源性PGD2在E. coli感染过程中对奶牛ETs的影响表现出明显的时间依赖性，其免疫调节功能随感染进程而呈现阶段性差异。

关键词：前列腺素D E. coli 子宫内膜炎双重调节作用

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不同体型双峰驼血浆外泌体的分离及其蛋白质组学分析

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内蒙古农业大学学报(自然科学版) 2025年

作者：温馨爱东阿拉腾苏布德牛雅如贺星川于雯李子怡白浩宇么宏强内蒙古农业大学兽医学院阿拉善盟农牧局锡林郭勒盟阿巴嘎旗农牧技术推广中心农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

为探究两种不同体型的双峰驼血浆外泌体在蛋白质表达方面的差异。本研究采用超速离心法分离双峰驼血浆外泌体，并利用透射电子显微镜（TEM）和纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。基于蛋白质组学技术，对... 详细信息

为探究两种不同体型的双峰驼血浆外泌体在蛋白质表达方面的差异。本研究采用超速离心法分离双峰驼血浆外泌体，并利用透射电子显微镜（TEM）和纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。基于蛋白质组学技术，对消瘦体型与正常体型双峰驼的血浆外泌体进行了差异表达蛋白（DEPs）的筛选，并对DEPs进行GO功能注释、KEGG信号通路富集分析以及亚细胞定位等生物信息学分析。结果显示，超速离心法分离的双峰驼血浆外泌体呈杯状或圆形形态，直径约为100 nm，总体尺寸分布范围为30 ～150 nm之间。利用串联质谱标签（TMT）结合液相色谱串联质谱（LC－MS/MS）技术共标记了4903个肽段，筛选出172个DEPs。生物信息学分析结果表明，这些DEPs可能与脂质代谢相关的信号通路相关，并存在蛋白之间互作关系。本研究结果为进一步探讨双峰驼血浆外泌体的生物功能提供了新的方向和重要资料。

关键词：双峰驼血浆外泌体蛋白组学分析生物信息学分析

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芦丁对奶牛瘤胃体外发酵参数、微生物区系、乳酸代谢产物含量及酶活性的影响

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动物营养学报 2023年第4期35卷 2369-2382页

作者：乔林慧邢杰徐子萱高民刘大程胡红莲内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院动物营养与饲料研究所呼和浩特010031

本试验旨在研究高精料底物条件下添加芦丁对奶牛瘤胃体外发酵参数、微生物区系、乳酸代谢产物含量及酶活性的影响。采用体外批次培养法及单因素试验设计,以精粗比为7∶3的0.7 g混合精料(玉米∶豆粕=4∶1)和0.3 g混合干草(苜蓿∶燕麦=1... 详细信息

本试验旨在研究高精料底物条件下添加芦丁对奶牛瘤胃体外发酵参数、微生物区系、乳酸代谢产物含量及酶活性的影响。采用体外批次培养法及单因素试验设计,以精粗比为7∶3的0.7 g混合精料(玉米∶豆粕=4∶1)和0.3 g混合干草(苜蓿∶燕麦=1∶1)为发酵底物,按芦丁的添加水平[0(对照)、1.5%、3.0%和4.5%]分为4组,每组设3个平行;同时,选取4头体况相近的健康荷斯坦奶牛,晨饲前采集瘤胃液,制备人工瘤胃培养液,于39℃下进行厌氧发酵,并分别于培养3、6、9、12、18和24 h时取样测定相应指标。结果表明:1)在高精料底物条件下,瘤胃发酵液pH<5.80的时间长达6 h,表明成功建立了亚急性瘤胃酸中毒(SARA)模型;且与对照组相比,添加1.5%和3.0%芦丁能显著提高18~24 h瘤胃发酵液pH(P<0.05),显著降低24 h丙酸、异丁酸、戊酸及乳酸含量(P<0.05),显著降低24 h甲烷产量(P<0.05)。多项指标综合指数(MFAEI)结果表明,芦丁添加水平为4.5%时,对瘤胃液体外发酵参数产生了正组合效应,具有较好的体外发酵效果。2)与对照组相比,添加1.5%和3.0%芦丁能显著降低6~12 h产甲烷菌、6 h乳酸杆菌和6~12 h牛链球菌数量(P<0.05),添加3.0%芦丁能显著降低6~24 h乳酸杆菌(P<0.05),而添加4.5%芦丁能显著提高12 h反刍兽月形单胞菌和埃氏巨型球菌数量(P<0.05)。3)与对照组相比,添加1.5%芦丁能显著降低12 h丙酮酸含量(P<0.05),添加1.5%和4.5%芦丁能显著降低6 h乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸激酶(PK)及淀粉酶(AMS)活性(P<0.05)。4)与对照组相比,添加芦丁能显著降低6~12 h脂多糖(LPS)含量(P<0.05)。综上所述,在高精料条件下添加芦丁能改善奶牛体外发酵,抑制甲烷产生,以4.5%为适宜添加水平;且芦丁能通过降低LPS含量、抑制乳酸产生菌和乳酸代谢相关酶活性减少乳酸产生,减缓瘤胃发酵液pH的下降,缓解高精料诱导的SARA。

关键词：芦丁奶牛体外发酵微生物区系 SARA

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内蒙古地区羊源副结核分枝杆菌的分离与基因分型

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中国农业科学 2023年第6期56卷 1204-1214页

作者：赵维宏韩文雄杨波孟维康柴海亮马懿敏张占胜王利峰王艳王明圆张姗丁玉林王金玲吉林台王凤龙赵丽刘永宏内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心

【目的】副结核病被世界动物卫生组织（OIE）列入必须报告的《OIE疫病、感染及侵染名录》，我国将其列为二类动物疫病，引起多种反刍动物慢性、增生性肠炎，感染动物通过肠道间歇性排菌而成为养殖场的持续传染源，给养殖业带来了巨大经... 详细信息

【目的】副结核病被世界动物卫生组织（OIE）列入必须报告的《OIE疫病、感染及侵染名录》，我国将其列为二类动物疫病，引起多种反刍动物慢性、增生性肠炎，感染动物通过肠道间歇性排菌而成为养殖场的持续传染源，给养殖业带来了巨大经济损失。其病原体副结核分枝杆菌（MAP）属于胞内寄生的革兰氏阳性菌，为三类动物病原微生物，包括S型（羊型，细分为Ⅰ型、Ⅲ型和骆驼型）和C型（牛型、Ⅱ型，包括B型（野牛型））。有研究表明，各亚型MAP无宿主特异性，但具有地域性，内蒙古作为国内该病的首发地区，获得并准确鉴定内蒙古地区MAP菌株亚型及基因特征，对副结核病的预防控制意义重大。【方法】对内蒙古地区来源的28份MAP阳性的羊源病料进行MAP分离培养，菌落Ziehl-Neelsen染色，染色阳性菌扩繁，提取扩繁菌液基因组DNA，进行IS900基因、IS1311基因和DMC基因扩增、测序和序列分析，同时IS1311基因PCR产物进行Hinf I和Mse I双酶切鉴定。【结果】28份样品经过7—12周培养，共有9支培养基长出菌落，菌落半透明乳白色、表面光滑。挑取单菌落进行抗酸染色，在显微镜下观察到呈不规则（单个或分枝状）、红染的细短杆菌，符合分枝杆菌的形态学特征及抗酸染色特性。9株分离菌IS900、IS1311和DMC基因PCR扩增产物均与目的基因片段预期大小一致。确定了本研究9株分离株均为MAP菌株，分别命名为MAP-NM1至MAP-NM9。DMC基因扩增产物大小为310bp，符合Ⅱ型MAP特征；IS1311基因扩增产物经HinfⅠ和MseⅠ双酶切，本研究9株MAP均得到4条目的条带，与Ⅱ型MAP一致；IS1311基因测序结果与S型、C型、印度野牛型和美国野牛型MAP代表株对照分析显示，9株MAP IS1311基因片段的64、65、68、223、236、422、527、628位碱基位点符合C型和B型MAP特征；IS900基因测序结果序列分析显示，9株MAP IS900基因片段第169位及第216位碱基分别为C（胞嘧啶）和A（腺嘌呤），符合Ⅱ型和Ⅲ型MAP特征；17株来自GenBank数据库的MAP IS900基因参考序列与本研究9株分离株IS900基因系统进化树显示，本研究9株MAP均划分于Ⅱ型MAP分支；3个基因测序结果进行Blast在线分析，与本研究所得分离株同源性最高的参考序列均为Ⅱ型MAP，且同源性均高于98%。综上所述，本研究9株MAP分离株均为Ⅱ型MAP。【结论】首次分离得到内蒙古地区羊源Ⅱ型MAP菌株。

关键词：副结核分枝杆菌分离培养亚型鉴定羊内蒙古

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蜱实验室人工饲养技术研究进展

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中国人兽共患病学报 2025年第1期41卷 67-74页

作者：董晓楠孙连阳崔浩康佳美丁玉林刘永宏赵丽内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010000 内蒙古自治区呼伦贝尔市扎兰屯市动物疫病预防控制中心呼伦贝尔021000 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱... 详细信息

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱传病原体的研究及为研制抗蜱药物及防蜱疫苗提供充足实验材料。目前实验室饲养蜱的方法大致可分为两类,一类为使用宿主动物的饲养方法,另一类为使用人工膜的饲养方法,饲养方法的选择需根据蜱的种类、吸血习性、生活环境等多方面综合考虑,现就两种方法的发展过程及各自存在的优弊进行阐述与讨论,以期为实验室开展蜱的人工饲养提供一定的帮助。

关键词：蜱人工饲养生活史

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片形吸虫病诊断技术研究概况

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动物医学进展 2024年第10期45卷 101-104页

作者：乌日力格李娜海鹰哈斯毕力格侯斌格日勒格拉巴哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010018 乌审旗动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017300

片形吸虫病是由肝片吸虫、大片吸虫及其中间型感染引起的全球性人兽共患寄生虫病,不仅对养殖业造成巨大经济损失,还威胁着人类的健康。目前在家畜片形吸虫病的诊断、药物防治方面虽然取得了一定的进展,但尚未有效控制该病的广泛流行,并... 详细信息

片形吸虫病是由肝片吸虫、大片吸虫及其中间型感染引起的全球性人兽共患寄生虫病,不仅对养殖业造成巨大经济损失,还威胁着人类的健康。目前在家畜片形吸虫病的诊断、药物防治方面虽然取得了一定的进展,但尚未有效控制该病的广泛流行,并已认识到控制该病的关键在于实现早期诊断。因此,亟待建立特异性强、灵敏度高的早期诊断技术和检测方法。论文综述了片形吸虫病的病原学诊断、免疫学诊断及分子生物学诊断技术的最新研究进展,为系统了解家畜片形吸虫病的诊断方法及进一步研究开发准确率更高、特异性更强的新型诊断方法提供线索。

关键词：片形吸虫病病原学诊断免疫学诊断分子生物学诊断

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双峰驼NUCB2/Nesfatin-1抗体的制备及其表达分布

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动物学杂志 2022年第3期57卷 401-411页

作者：白兆星么宏强罗雨晨张雅文张光杰斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000

双峰驼(Camelus bactrianus)经过长期的自然选择,具备了许多特殊的生物学特性,比如极强的耐渴、耐饥饿以及适应恶劣气候等能力。Nesfatin-1是一种由82个氨基酸组成的肽,通过其前体物质NUCB2在Lys 83~Arg 84位点的前激素转化酶(PCs)的蛋... 详细信息

双峰驼(Camelus bactrianus)经过长期的自然选择,具备了许多特殊的生物学特性,比如极强的耐渴、耐饥饿以及适应恶劣气候等能力。Nesfatin-1是一种由82个氨基酸组成的肽,通过其前体物质NUCB2在Lys 83~Arg 84位点的前激素转化酶(PCs)的蛋白质水解而来,其可以调节机体的能量代谢效率,对食欲有抑制作用。研究双峰驼体内NUCB2/Nesfatin-1的分布与表达,以探究双峰驼体内是否具有特有的能量代谢方式,是否与其不会发生代谢性疾病有一定的联系。使用化学合成的方法合成双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的半抗原多肽,使用马来酰亚胺法将半抗原与血蓝蛋白(KLH)偶联,通过免疫动物制备针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白单一抗原表位的多克隆抗体,应用Western Blot方法检测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼下丘脑(弓状核、孤束核、腹内侧核)、前峰脂肪、后峰脂肪、胃(胃底腺周围组织)、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、胰腺、肝以及腹部脂肪组织中的表达情况,使用荧光定量PCR技术检测NUCB2/Nesfatin-1 mRNA在双峰驼上述组织中的表达情况。结果采用GraphPad Prism 5.0软件的t检验分析。合成的双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的多肽杂峰很少,经过计算其纯度大于95%。多肽的质荷比[M+4H]^(4+)和[M+3H]^(3+)符合预期。经过间接ELISA法测定制备的针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白的多克隆抗体的效价为5.12×10^(5),成功制备多克隆抗体。使用制备的NUCB2/Nesfatin-1多克隆抗体检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1蛋白的分布,其中,在双峰驼脂肪组织和胰腺组织中表达较为显著。荧光定量PCR检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1 mRNA的分布,在所检测的组织中均有基因表达,其中,在腹部脂肪和肝组织的相对表达量较高。本研究通过分析抗原表位及合成多肽的方式,成功制备了针对双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白的特异性抗体,且该抗体的效价高、特异性强。通过成功制备的特异性抗体在蛋白层次上检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况,再使用荧光定量PCR方法在基因层次检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况。通过对结果的分析后发现,NUCB2/Nesfatin-1可能在双峰驼的耐渴、耐饥饿的机制调节中起到了抑制食欲的作用,使得双峰驼可以忍受长时间的饥饿,在双峰驼的外周脂肪组织中高表达,推测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼体内可能通过抑制脂肪细胞的分化,促进脂肪细胞中脂滴的水解为机体提供能量,其具体在脂肪细胞中的功能有待我们的进一步研究。

关键词： Nesfatin-1 多克隆抗体双峰驼组织分布

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