检索结果-内蒙古大学图书馆

福建农业学报 2023年第7期38卷 851-856页

作者：赵润涛特木尔巴根郭宇武娅楠王旭芬侯琳张贺赵洋张志丹周伟光内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心内蒙古呼和浩特010020

【目的】建立一种快速、准确且能定量分析牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的检测方法。【方法】根据GenBank上发布的牛嵴病毒3D基因序列设计合成一对特异性引物和一条探针,通过优化反应体系建立牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法... 详细信息

【目的】建立一种快速、准确且能定量分析牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的检测方法。【方法】根据GenBank上发布的牛嵴病毒3D基因序列设计合成一对特异性引物和一条探针,通过优化反应体系建立牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,并对临床样品进行检测。【结果】该方法最佳上下游引物浓度均为300nmol·L^(-1),探针浓度为400 nmol·L^(-1),在1×10^(1)~1×10^(8)copies·μL^(-1)呈现良好的线性关系,线性相关系数R^(2)=0.999,扩增效率为103%;特异性较强,在多个犊牛腹泻相关病原中,只检测出牛嵴病毒;敏感性较高,对BKoV质粒标准品最低检测下限为1×10^(1)copies·μL^(-1),而普通RT-PCR对BKoV质粒标准品最低检测下限为1×10^(2)copies·μL^(-1);重复性较好,组内变异系数和组间变异系数均小于3%。2021年3~5月采自内蒙古地区牧场的37份犊牛粪样中BKoV的检出率为24.3%,通过标准曲线计算其病毒载量,其中腹泻粪样平均病毒载量为3.7×10^(5)copies·μL^(-1),健康犊牛粪样平均病毒载量为8.65×10^(3)copies·μL^(-1)。【结论】建立的牛嵴病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、稳定性好、灵敏度高,为BKoV的检测和分子流行病学调查提供了有力的手段。

关键词：牛嵴病毒荧光定量RT-PCR 犊牛腹泻特异性敏感性重复性

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BHV-1感染牛巨噬细胞对CD300a转录的影响

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中国兽医学报 2023年第2期43卷 253-259页

作者：王旭芬安冬侯琳赵润涛张贺赵洋张志丹周伟光内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 呼伦贝尔市海拉尔区疫病预防控制中心内蒙古呼伦贝尔021000

为探究抑制性受体CD300a在牛Ⅰ型疱疹病毒(bovine herpesvirus 1,BHV-1)免疫调控机制中的作用,分离鉴定了1株BHV-1内蒙古株,并建立CD300a基因的荧光定量PCR方法,检测BHV-1感染牛单核巨噬细胞后0,6,12,24,48,72 h 6个时间点以及空白对照... 详细信息

为探究抑制性受体CD300a在牛Ⅰ型疱疹病毒(bovine herpesvirus 1,BHV-1)免疫调控机制中的作用,分离鉴定了1株BHV-1内蒙古株,并建立CD300a基因的荧光定量PCR方法,检测BHV-1感染牛单核巨噬细胞后0,6,12,24,48,72 h 6个时间点以及空白对照组CD300a基因的转录变化。将β-actin基因作为内参,使用双标准曲线法计算攻毒组与对照组CD300a基因各时间段的相对表达量,分析CD300a在攻毒前、后的表达差异。结果显示,BHV-1分离株在MDBK细胞上出现典型细胞病变效应,测得其病毒滴度为107.23TCID50/mL。本研究建立的CD300a基因荧光定量PCR检测方法,CD300a基因和β-actin基因标准品的Ct值与模板浓度之间均具有良好的线性关系,溶解曲线均为特异单峰,最低检测限均为10拷贝/μL,具有良好的灵敏性,可以准确检测出BHV-1攻毒后巨噬细胞内的CD300a基因表达量。经计算,攻毒组CD300a表达量均高于对照组,其中,6,12,24 h的表达差异倍数显著高于0,72 h(P<0.05),表达差异倍数在12 h时达到最高,且显著高于其他各组(P<0.05),表达差异倍数从6 h时开始巨幅增长,12 h达到最大,48 h开始趋于稳定。结果表明CD300a基因作为巨噬细胞表面的抑制性受体,表达量在BHV-1入侵时会显著变化,推测CD300a基因为协助病毒进入宿主细胞或免疫逃逸也相应增多,在抗病毒免疫机制中起到一定作用。

关键词：传染性鼻气管炎牛Ⅰ型疱疹病毒 CD300a 荧光定量PCR 单核巨噬细胞

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内蒙古牛羊消化道线虫的流行、耐药及其防治情况

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中国兽医杂志 2024年第10期60卷 112-117页

作者：布音布和玛丽雅其其格侯斌哈斯苏荣乌审旗动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017300 鄂尔多斯生态环境职业学院内蒙古鄂尔多斯017010 内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010018

内蒙古自治区是我国重要的畜牧业生产基地,牛羊消化道线虫病对该地区草原畜牧业的影响十分严重。本文对内蒙古自治区十余年关于牛羊消化道线虫流行情况、优势虫种耐药情况和针对性防治方法的研究进行了综述,并对防治中存在的问题加以分... 详细信息

内蒙古自治区是我国重要的畜牧业生产基地,牛羊消化道线虫病对该地区草原畜牧业的影响十分严重。本文对内蒙古自治区十余年关于牛羊消化道线虫流行情况、优势虫种耐药情况和针对性防治方法的研究进行了综述,并对防治中存在的问题加以分析,以期为内蒙古地区牛羊消化道线虫病的防治提供参考依据,并为我国畜牧业的可持续发展提供保障。

关键词：牛羊内蒙古自治区消化道线虫流行耐药防治

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牛磺鹅去氧胆酸对AA大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌激素的影响

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畜牧与兽医 2022年第8期54卷 51-55页

作者：何秀玲石琳琳孙苗李培锋关红毛伟内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

旨在探讨牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)轴的影响。试验采用完全弗氏佐剂(CFA)法制备了AA大鼠,并将其分为5组,即模型组、TCDCA低剂量(0.1 g/kg)预防组和治疗组、TC... 详细信息

旨在探讨牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)轴的影响。试验采用完全弗氏佐剂(CFA)法制备了AA大鼠,并将其分为5组,即模型组、TCDCA低剂量(0.1 g/kg)预防组和治疗组、TCDCA高剂量(0.2 g/kg)预防组和治疗组,并以正常的Wistar大鼠作为对照组,每组8只。给药方案:预防组于致炎前3 d,按照相应的药物剂量进行灌胃给药,1次/d,连续31 d。治疗组于致炎后第14天,按照相应的药物剂量进行灌胃给药,1次/d,连续14 d。通过外观观察对AA大鼠模型进行评价,并采用ELISA法检测大鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)的含量。结果显示:与正常组大鼠相比较,造模后14 d左右,模型组大鼠对侧足跖肿胀,造模后18~21 d,模型组大鼠尾部出现明显结节,提示AA大鼠模型制备成功。与正常对照组相比,模型组大鼠血清中ACTH、CORT含量显著升高(P<0.05),TCDCA低剂量治疗组可显著提高AA大鼠血清中CRH含量(P<0.05),预防用药或治疗用药后,TCDCA低、高剂量组均能显著或极显著提高AA大鼠血清中ACTH、CORT含量(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,TCDCA低剂量治疗组能显著提高AA大鼠血清中ACTH含量(P<0.05),TCDCA低剂量预防组和治疗组、高剂量治疗组均能提高AA大鼠血清中CRH含量,TCDCA低剂量预防组能提高AA大鼠血清中ACTH、CORT含量,而TCDCA高剂量预防组和治疗组均能降低AA大鼠血清中ACTH、CORT含量,但差异均不显著(P>0.05)。研究表明,TCDCA能调节机体HPA轴分泌CRH、ACTH、CORT水平,该结果可为进一步研究TCDCA抗炎免疫调节分子机制提供参考依据。

关键词：牛磺鹅去氧胆酸 AA大鼠促肾上腺皮质激素释放激素促肾上腺皮质激素皮质醇

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肠道寄生虫与肠道微生物相互作用研究进展

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中国畜牧兽医 2024年第1期51卷 330-337页

作者：李思瑶侯斌玛丽雅其其格哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心呼和浩特010018 乌审旗动物疫病预防控制中心鄂尔多斯017300

在脊椎动物的肠道内,存在着数量庞大、结构多样、动态变化的微生物群,它们对肠道的生理、代谢、免疫等具有重要的作用。在自然条件下,这些微生物和真核生物(如蠕虫、原生动物、真菌等)共同存在于脊椎动物肠道内。寄生虫与微生物群均可... 详细信息

在脊椎动物的肠道内,存在着数量庞大、结构多样、动态变化的微生物群,它们对肠道的生理、代谢、免疫等具有重要的作用。在自然条件下,这些微生物和真核生物(如蠕虫、原生动物、真菌等)共同存在于脊椎动物肠道内。寄生虫与微生物群均可显著改变机体肠道生理与免疫环境,为它们之间的相互作用创造了机会。肠道微生物与寄生虫之间的相互作用会极大地影响感染的结果,进而对宿主的健康产生重要影响。如寄生虫感染会影响宿主与微生物的相互作用关系,从而促使或保护宿主免受细菌的侵害。另一方面,菌群又会影响寄生虫的定植、繁殖和毒性,使其沿着与宿主寄生性-互惠共生性的生存模式发展。这些相互作用的机理与结果是微生物学与寄生虫学之间交叉研究的前沿课题。笔者对近年来有关肠道寄生虫与肠道微生物间相互作用的最新研究成果进行了总结,并对其可能未考虑到的因素提出了自己的观点,旨在为肠道寄生虫病防控及肠道菌群研究提供参考。

关键词：肠道寄生虫肠道微生物相互作用

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兔子宫内膜上皮细胞α7-nAChR介导MAPK信号通路抑制炎性反应的机制

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中国兽医学报 2022年第3期42卷 582-586页

作者：鲍朝霞魏泓毓陈灰曹金山贺鹏飞内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

子宫内膜上皮细胞可通过自我调控降低过度炎症反应以避免细胞损伤,但调控机制尚不清楚。本研究旨在探讨α7烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)是否介导调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路参与细胞避免炎症过度反应。通过体外培养兔子宫内... 详细信息

子宫内膜上皮细胞可通过自我调控降低过度炎症反应以避免细胞损伤,但调控机制尚不清楚。本研究旨在探讨α7烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)是否介导调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路参与细胞避免炎症过度反应。通过体外培养兔子宫内膜上皮细胞,脂多糖(LPS)刺激细胞炎症反应、α7-nAChR抑制剂和激动剂处理细胞,比较α7-nAChR表达与MAPK信号通路的相关性,探讨α7-nAChR介导细胞炎症自我调控可能的机制。Western blot检测结果表明,兔子宫内膜上皮细胞在100μg/L LPS刺激12 h后,JNK1/2和P38MAPK磷酸化水平明显低于细胞空白对照组,α7-nAChR抑制剂MLA(5μmol/L)与α7-nAChR激动剂共同处理后ERK1/2、JNK1/2及P38MAPK磷酸化水平上升,而α7-nAChR激动剂PNU282987(5μmol/L)和尼古丁(10 mg/L)可明显逆转MLA效应,且MAPK信号通路关键因子磷酸化与α7-nAChR表达呈部分负相关。结果表明,α7-nAChR介导调控MAPK信号通路是细胞避免炎症过度反应自我调控的潜在机制。

关键词：兔子宫内膜上皮细胞 α7-nAChR MAPK LPS 抗炎机制

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捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株给药前后miRNA差异表达谱及网络调控分析

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中国农业大学学报 2022年第11期27卷 140-152页

作者：王腾宇陈昕迪石雅琴毛晓伟闫旭苏娅温海峰刘春霞王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农业大学生命科学院呼和浩特010018

旨在通过miRNA测序技术对捻转血矛线虫阿苯达唑给药前后的耐药虫株差异表达miRNA及网络调控分析,获取其转录本中全miRNA表达谱及耐药相关差异表达基因和miRNA,探究miRNA在捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株给药前后的差异。采用Illumina His... 详细信息

旨在通过miRNA测序技术对捻转血矛线虫阿苯达唑给药前后的耐药虫株差异表达miRNA及网络调控分析,获取其转录本中全miRNA表达谱及耐药相关差异表达基因和miRNA,探究miRNA在捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株给药前后的差异。采用Illumina Hiseq2000平台对捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株给药前和给药后的虫体进行Small RNA-seq测序,将Raw Data与参考基因组和miRBase数据库进行比对分析,使用RNAhybrid、Miranda和TargetScan对miRNA靶基因进行预测,筛选捻转血矛线虫耐药虫株给药前后表达量显著差异的miRNA并通过Stem-loop qRT-PCR验证,同时对差异显著的miRNA-mRNA调控关系采用Cytoscape软件进行可视化分析。将靶基因向KEGG和GO两大权威数据库映射,预测和分析靶基因功能注释情况和参与调控的通路情况。结果显示:1)捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株给药前和给药后共筛选出显著差异表达的miRNA 188个,其中125个上调,63个下调,且qRT-PCR结果与转录组测序结果表达情况一致。2)显著差异表达的144个miRNA共关联到353个miRNA-mRNA负调控关系,注释到46条GO功能条目以及代谢,运输和降解等327条通路。3)筛选出的候选靶基因主要富集在ABC转运蛋白,HIF-1信号通路,cGMP-PKG信号通路以及P450药物代谢通路,证实在药物胁迫的影响下捻转血矛线虫主要通过代谢和转运的方式参与耐药性调控。本研究为捻转血矛线虫耐药性诊断辅助分子标记的筛选和虫体耐药性调控因素及作用机制的研究提供参考。

关键词：捻转血矛线虫阿苯达唑耐药性转录组 miRNA

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胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎性因子及PPARα和LXRα表达与分布的影响

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中国兽医学报 2022年第6期42卷 1241-1248页

作者：何秀玲孙苗石琳琳李培锋关红郭凤英内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010011 内蒙古农业大学职业技术学院内蒙古包头014109

为了探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎症的影响,揭示其调控机理,从而为宠物新型抗代谢性炎症药物的研究提供试验基础,试验用饲喂高脂饲料60 d的SD大鼠建立代谢性炎症模型。将大鼠随机分为5组,即模型组,胆酸高、中、低剂量组,阴性对照组,... 详细信息

为了探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎症的影响,揭示其调控机理,从而为宠物新型抗代谢性炎症药物的研究提供试验基础,试验用饲喂高脂饲料60 d的SD大鼠建立代谢性炎症模型。将大鼠随机分为5组,即模型组,胆酸高、中、低剂量组,阴性对照组,连续灌胃给药30 d后处死大鼠,采用HE染色法,观察肝脏组织病理学变化;采用ELISA试剂盒检测单核细胞趋化因子1(MCP-1)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)的含量;采用实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、白介素10(IL-10)、白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达量;采用免疫组化法检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及肝X受体α(LXRα)的分布及表达。结果显示,与阴性对照组相比,模型组大鼠的肝脏组织中出现脂肪空泡以及以巨噬细胞为主的炎性细胞聚集;而给予胆酸治疗的高、中、低剂量组大鼠的肝脏细胞中细胞形态和大小均正常,且炎性细胞减少以及脂肪蓄积得到改善。与阴性对照组相比,模型组的MIP-1α及IL-8的表达量极显著升高(P<0.01),MCP-1的含量、TNF-α的表达量显著升高(P<0.05);与模型组相比,胆酸高剂量组MIP-1α、IL-10及IL-8表达量极显著降低(P<0.01),胆酸中、低剂量组的IL-10表达量显著降低(P<0.05),MIP-1α及IL-8表达量极显著降低(P<0.01),胆酸中剂量组的TNF-α的表达量显著降低(P<0.05)。PPARα及LXRα受体均分布在肝脏细胞核,模型组PPARα表达量较阴性对照组极显著下降(P<0.01),胆酸高、中剂量组PPARα表达量较模型组极显著上调(P<0.01)、低剂量组显著上调(P<0.05),胆酸高、中、低剂量组较模型组LXRα表达量极显著下调(P<0.01)。结果表明,胆酸能够通过上调PPARα、下调LXRα的表达,抑制脂肪生成,从而降低代谢性炎症模型大鼠的炎症反应。

关键词：大鼠胆酸代谢性炎症 PPARα LXRα

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牛种与非牛种布鲁氏菌ELISA鉴别检测方法的建立

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动物医学进展 2023年第3期44卷 26-31页

作者：王姝懿赵学亮孙珂呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心内蒙古呼和浩特010031 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为建立鉴别不同种布鲁氏菌的ELISA检测方法,筛选出牛种和非牛种布鲁氏菌差异基因NC-017250,并将其克隆至原核表达载体pET-30a中,并诱导表达。以纯化的NC-017250重组蛋白为包被抗原,通过优化反应条件建立NC-017250重组蛋白的间接ELISA检... 详细信息

为建立鉴别不同种布鲁氏菌的ELISA检测方法,筛选出牛种和非牛种布鲁氏菌差异基因NC-017250,并将其克隆至原核表达载体pET-30a中,并诱导表达。以纯化的NC-017250重组蛋白为包被抗原,通过优化反应条件建立NC-017250重组蛋白的间接ELISA检测方法。结果优化后最适血清稀释度为1∶100,兔抗牛HRP-IgG酶标二抗的最佳稀释度1∶5000,阴、阳性临界值为0.390。用该方法对布鲁氏菌S2免疫血清、A19免疫血清、PPD、FMD、BVD及IBR等阳性血清样品进行检测,除了布鲁氏菌S2免疫血清检出阳性外,其他均为阴性,特异性良好;该方法检测S2和A19免疫血清,并用SPSS软件分析敏感性达95.2%,敏感性较高。重复性试验结果显示,批内变异系数和批间变异系数均<5%。用该方法检测80份牛源临床布鲁氏菌血清样品,结果阳性率为21.3%(17/80)。建立的ELISA方法可用于区分牛种和非牛种布鲁氏菌抗体,为布鲁氏菌不同种鉴定试剂盒的研发奠定了基础。

关键词：布鲁氏菌布鲁氏菌A19疫苗株 NC-017250基因间接ELISA 鉴别检测

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捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株与耐药虫株差异miRNA的转录组学分析

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中国预防兽医学报 2023年第3期45卷 245-252页

作者：温海峰张艳敏张海龙石雅琴毛晓伟寇慧琳于宇李峥陈昕迪王腾宇高娃王文龙刘春霞内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古乌兰察布市凉城县畜牧工作站内蒙古乌兰察布013750 河套学院医学系/内蒙古自治区蜱媒人畜共患传染病重点实验室内蒙古巴彦淖尔015000 内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010018

为探究捻转血矛线虫的伊维菌素(IVM)敏感虫株与耐药虫株显著差异的microRNA(miRNA)转录谱,发掘其耐药相关的miRNA,本实验采用Illumina Hiseq2000平台分别对捻转血矛线虫IVM敏感虫株与耐药虫株测序,构建cDNA文库,通过质控后采用生物信息... 详细信息

为探究捻转血矛线虫的伊维菌素(IVM)敏感虫株与耐药虫株显著差异的microRNA(miRNA)转录谱,发掘其耐药相关的miRNA,本实验采用Illumina Hiseq2000平台分别对捻转血矛线虫IVM敏感虫株与耐药虫株测序,构建cDNA文库,通过质控后采用生物信息学软件筛选捻转血矛线虫IVM敏感与耐药虫株的差异mi RNA。结果显示,捻转血矛线虫的IVM敏感与耐药虫株筛选出转录显著差异的miRNA共375个,其中253个转录上调,122个转录下调。利用RNAhybrid(V6.01)、Miranda(V3.3a)、TargetScan(V7.0)软件对筛选到的mi RNA靶基因进行预测,并取交集作为mi RNA靶基因预测结果,将筛选出显著差异的靶基因通过perl脚本与显著差异的miRNA进行关联分析,结果显示共关联到2106对miRNA-mRNA为负调控关系,其中涉及到477个差异的m RNA和603个差异的miRNA。对显著差异的miRNA靶基因进行GO富集分析,结果显示其中有492个GO terms,包括生物过程(BP)322个、细胞组分(CC)47个、分子功能(MF)123个。按照q值由小到大的顺序排列,被显著富集的有肌细胞发育分化及内肽酶活性等功能;按照富集基因数目由多到少排列,被显著富集的为有机物代谢、细胞代谢等功能。对显著差异的miRNA靶基因进行KEGG信号通路富集分析,按照q值由小到大的顺序排列,被显著富集到的有抗原处理与递呈等信号通路,其中显著差异靶基因也被富集到药物代谢-其他酶等与药物代谢相关的信号通路,以及一些在捻转血矛线虫耐IVM中起重要作用的通路,如:药物代谢细胞色素P450、细胞色素P450对外源药物代谢通路、ABC转运蛋白等。随机从差异miRNA中选10个进行RT-q PCR的验证,结果显示,相对转录水平结果与测序结果一致。本研究上述结果首次证实,捻转血矛线虫对IVM耐药性的产生与其代谢过程、肌细胞的分化发育过程及免疫过程中的某个或多个环节有一定的联系,本研究为进一步探究捻转血矛线虫耐药机制提供了科学依据。

关键词：捻转血矛线虫伊维菌素耐药性转录组 mi RNA

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