检索结果-内蒙古大学图书馆

黑龙江畜牧兽医 2021年第19期 84-89,152页

作者：彭雪松温永俊关平原徐晓静希尼尼根张志丹张七斤周伟光内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)和区分不同基因型的BVDV,试验根据GenBank中BVDV的3种基因型5′端非翻译区(UTR)设计2对特异性引物和3个探针,优化引物和探针浓度,建立BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-... 详细信息

为了快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)和区分不同基因型的BVDV,试验根据GenBank中BVDV的3种基因型5′端非翻译区(UTR)设计2对特异性引物和3个探针,优化引物和探针浓度,建立BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。采集28份犊牛鼻拭子和40份粪便拭子样品,应用建立的方法进行检测,并与普通RT-PCR方法进行比较。结果表明:扩增体系经优化,BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3的最佳引物浓度分别为350,350,200 nmol/L,最佳探针浓度分别为400,550,350 nmol/L,试验建立的三重实时实光定量RT-PCR方法从多种致牛腹泻和呼吸系统疾病的病原中只检测到BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3;同时检测到的BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3的最低检出量分别为1.0×10^(1),1.0×10^(2),1.0×10^(1) copies/μL,而普通RT-PCR方法的最低检出量分别为1.0×10^(2),1.0×10^(5),1.0×10^(3) copies/μL;组内变异系数和组间变异系数均小于5.0%。应用该方法从采集的68份临床样品中检出17份BVDV-1阳性样品,而普通RT-PCR只检测出12份BVDV-1阳性样品。说明试验建立的BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高和稳定性好等优点,可用于BVDV的3种基因型的快速鉴别。

关键词：牛病毒性腹泻病毒基因分型敏感性特异性稳定性

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厚垣普可尼亚菌发酵液中胞外酶的活性分析及其杀虫毒力测定

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中国兽医科学 2023年第9期53卷 1158-1165页

作者：郝陆瑶焦万明尹衍峰马园张艳妮李倩楠符江涛贾晓晴訾星月马俊杰郭志凯丁玉林杜山陆静王瑞内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010010 内蒙古阿拉善盟额济纳旗动物疫病预防控制中心内蒙古额济纳旗735400 济南市长清区畜牧兽医事业发展中心山东济南250399

为研究卵寄生性真菌——厚垣普可尼亚菌(***)发酵液中胞外酶的活性及其杀虫作用,使用不同营养成分组成的液体培养基及诱导物对***进行培养和诱导,测定***发酵液中蛋白质含量、胞外水解酶活性及发酵液对秀丽新杆线虫及马副蛔虫卵的毒性作... 详细信息

为研究卵寄生性真菌——厚垣普可尼亚菌(***)发酵液中胞外酶的活性及其杀虫作用,使用不同营养成分组成的液体培养基及诱导物对***进行培养和诱导,测定***发酵液中蛋白质含量、胞外水解酶活性及发酵液对秀丽新杆线虫及马副蛔虫卵的毒性作用,确定产生胞外蛋白质和具杀虫作用物质的最适液体培养基与诱导物种类。结果显示,马副蛔虫卵诱导的枸橼酸培养基发酵液中蛋白质种类最丰富且质量浓度最高,可达3.37±0.03 g/L,蛋白酶活性(2.00±0.06 U/m L)与磷酸酶活性[酸性磷酸酶(28.58±1.30 U/L)、碱性磷酸酶(12.68±1.57 U/L)]均较强,对秀丽新杆线虫的致死率为73.91%±1.72%,同时对马副蛔虫卵的孵化也具有一定抑制作用,相对孵化抑制率可达64.06%±2.46%,均显著高于对照组。结果表明,不同培养基及诱导物对***的代谢过程产生显著影响,导致其分泌的蛋白质种类不同,其质量浓度和酶活性均有显著区别(P<0.05)。发酵液不仅具有杀线虫活性,还有良好的抑制虫卵孵化作用。上述结果为进一步研究卵寄生性真菌的杀虫作用与机理提供了重要参考依据。

关键词：卵寄生性真菌厚垣普可尼亚菌胞外蛋白质胞外水解酶活性杀虫作用

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布鲁菌S2疫苗株GL_0002189基因原核表达及生物信息学分析

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当代畜禽养殖业 2023年第3期43卷 17-22页

作者：王文龙红梅呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010010

为区分羊种布鲁菌S2疫苗株为疫苗免疫还是自然感染,本课题组对布鲁菌S2疫苗株进行了测序,将测序得到的基因与已在NCBI数据库中提交的布鲁菌基因组进行比对,找出了布鲁菌S2(猪种)疫苗株特有的GL_0002189基因,再对GL_0002189基因进行克隆... 详细信息

为区分羊种布鲁菌S2疫苗株为疫苗免疫还是自然感染,本课题组对布鲁菌S2疫苗株进行了测序,将测序得到的基因与已在NCBI数据库中提交的布鲁菌基因组进行比对,找出了布鲁菌S2(猪种)疫苗株特有的GL_0002189基因,再对GL_0002189基因进行克隆﹑表达及验证,并采用布鲁菌BP26基因当作阳性对照。同时对GL_0002189基因进行了生物信息学分析。结果发现,以绵羊S2疫苗免疫的血清当作抗体检测,重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)与空菌BL21(DE3)比较,分别在32 kDa和29 kDa处出现条带。结果表明重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)能够与布鲁菌S2免疫血清中的抗体特异性结合,且具有很好的免疫原性。另外,重组蛋白BP26与自然感染的血清发生特异性反应,而重组蛋白GL_0002189与自然感染的血清不发生特异性反应,因此GL_0002189基因在布鲁菌S2疫苗株中存在,而在羊种布鲁菌自然流行株中不存在。通过生物信息学分析发现,GL_0002189基因编码蛋白分子量约为24.1 kDa,含有1个660 bp的完整的开放阅读框,编码219个氨基酸,无跨膜区,有5个抗原表位。由此表明,本研究中的GL_0002189抗原可用于布鲁菌S2疫苗免疫与羊种布鲁菌自然感染的鉴别诊断,为布鲁菌病的诊断提供了理论支持。

关键词：布鲁氏菌 GL_0002189基因原核表达鉴别诊断

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基于网络药理学与分子对接方法探讨附子治疗大肠杆菌感染型犊牛腹泻的作用机制

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中国畜禽种业 2024年第6期20卷 94-102页

作者：钱英红张静赵俊利刘向敏吉鹏华王超张兴夫内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010010 内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

该文通过TCMSP数据库对附子的主要化学成分进行筛选并确定其主要成分的潜在靶点,于GeneCard和Dis-GeNET查找犊牛腹泻的相关靶点取交集,得到附子防治奶牛子宫内膜炎的关键靶点,并构建蛋白互作(PPI)网络;通过DAVDE数据库对核心靶点进行GO... 详细信息

该文通过TCMSP数据库对附子的主要化学成分进行筛选并确定其主要成分的潜在靶点,于GeneCard和Dis-GeNET查找犊牛腹泻的相关靶点取交集,得到附子防治奶牛子宫内膜炎的关键靶点,并构建蛋白互作(PPI)网络;通过DAVDE数据库对核心靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析;通过AutoDock软件对分子和靶点对接,并运用Py MOL对分子结果进行可视化处理。结果表明:从该中药复方中筛选出有效活性成分主要包括石防风素、苯甲酰萘普林、新糖尿酸B、 11,14-二十碳二烯酸等,这些药物成分主要作用靶点426个,犊牛腹泻的相关靶点1330个。附子防治奶牛乳房炎有136个预测靶点,主要包括白细胞介素6、胱天蛋白酶3、表皮生长因子受体、核激素受体、基质金属蛋白激酶9等。对上述136个靶点进行富集分析,发现与炎症反应、血管内皮生长因子、 ERK1和ERK2级联的正调控等生物过程;一氧化氮合酶活性、类固醇的结合、锌离子结合等细胞组分;细胞外基质、胞浆和细胞核等分子功能,以及PI3K-Akt信号通路、内分泌失调、 TNF信号通路、 IL-17信号通路和癌症等通路相关。分子对接结果表明复方双黄连主要活性成分Deltoin和Benzoylnapelline均与关键靶点IL-6、CASP3具有良好的连接活性。可见,附子可通过多成分、多靶点和多通路共同来防治大肠杆菌引起的犊牛腹泻。

关键词：中药网络药理学分子对接犊牛腹泻作用机制

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1株阿尔巴斯绒山羊源产气荚膜梭菌的毒素型鉴定和16S rRNA基因的遗传进化分析

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黑龙江畜牧兽医 2022年第6期 68-71,76页

作者：李琦白伟琴李杰李宏赵利军孟克訾占飞格日勒图吉林台王金玲卡楚拉内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010010 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 伊金霍洛旗动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017200

为了了解1例经诊断为产气荚膜梭菌病而死亡的阿尔巴斯种绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型和16S rRNA基因的遗传进化特性,试验设计5对特异性毒素引物,采用PCR方法进行毒素型的鉴定,对16S rRNA基因扩增和测序,对测序结果进行遗传进化分... 详细信息

为了了解1例经诊断为产气荚膜梭菌病而死亡的阿尔巴斯种绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型和16S rRNA基因的遗传进化特性,试验设计5对特异性毒素引物,采用PCR方法进行毒素型的鉴定,对16S rRNA基因扩增和测序,对测序结果进行遗传进化分析。结果表明:只有α毒素引物扩增出约475 bp长的目的条带,阿尔巴斯绒山羊梭菌性肠炎的致病菌毒素为α毒素,为A型产气荚膜梭菌,其16S rRNA基因序列与天津地区产气荚膜梭菌(登录号为KP944160.1)位于同一分支,亲缘关系最近,核苷酸相似性为98.53%。说明此次阿尔巴斯绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型是A型,且鉴定菌株与天津地区产气荚膜梭菌(登录号为KP944160.1)起源于共同的祖先。

关键词：阿尔巴斯绒山羊产气荚膜梭菌毒素型 16S rRNA基因遗传进化

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内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药种群Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性调查

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动物医学进展 2021年第5期42卷 9-13页

作者：苏倩翟帅孙柯林洋王腾宇呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了解内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性的情况,对来自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区各19条捻转血矛线虫雄虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫后,扩增出Ⅰ型β微管蛋白基因... 详细信息

为了解内蒙古地区捻转血矛线虫阿苯达唑耐药虫株Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性的情况,对来自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区各19条捻转血矛线虫雄虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫后,扩增出Ⅰ型β微管蛋白基因,测序后对耐药相关167、198和200位点突变情况进行调查分析。结果表明,在这3个地区均未发现167位点突变,主要是198和200位点发生突变,总体上看198位点突变频率高于200位点。分析这57条雄虫基因序列发现4种基因型,分别是198纯合耐药型及200纯合敏感型、198纯合敏感型及200纯合耐药型、198纯合敏感型及200杂合耐药型和198及200均杂合耐药型。而耐药基因型频率乌审旗为100%,察右后旗68.42%,科右前旗94.74%,这与粪便虫卵减少试验结果一致。研究结果为捻转血矛线虫病的预防和治疗提供一个新思路,可有效避免耐药性或者减缓耐药性的产生,减少畜牧养殖行业的经济损失。

关键词：捻转血矛线虫 Ⅰ型β微管蛋白基因单核苷酸多态性

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金黄色葡萄球菌体外刺激奶牛外周血中性粒细胞对炎性因子分泌的影响

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动物医学进展 2022年第8期43卷 30-34页

作者：张凯姜雪莹钱英红曹金山刘博张静毛伟内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010018

以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,用瑞氏姬姆萨染色和台盼蓝拒染法对分离培养的奶牛外周血中性粒细胞进行鉴定和活性检测,ELISA检测金黄色葡萄球菌感染体外培养的奶牛外周血中性粒细胞IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-8的分泌情况,West... 详细信息

以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,用瑞氏姬姆萨染色和台盼蓝拒染法对分离培养的奶牛外周血中性粒细胞进行鉴定和活性检测,ELISA检测金黄色葡萄球菌感染体外培养的奶牛外周血中性粒细胞IL-1β、TNF-α、IL-10及IL-8的分泌情况,Western blot检测金黄色葡萄球菌感染体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中NF-κB的激活效应。结果显示,体外分离培养的奶牛外周血中性粒细胞纯度达99%,随着培养时间增加奶牛外周血中性粒细胞活性逐渐降低。ELISA检测结果显示,在3 h~24 h刺激时间范围内,随着金黄色葡萄球菌刺激时间的增加,与空白对照组相比体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中IL-10、TNF-α、IL-1β和IL-8的分泌量均显著升高(P<0.001)。Western blot检测结果显示,在15 min~120 min刺激时间范围内,随着SA113感染时间的增加,与空白对照组相比体外培养的奶牛外周血中性粒细胞中IκBα磷酸化水平显著升高(P<0.001)。研究结果表明,成功分离培养了奶牛外周血中性粒细胞;金黄色葡萄球菌(SA113株)刺激体外分离培养的奶牛外周血中性粒细胞过程中细胞因子IL-10、TNF-α、IL-1β和IL-8的分泌量随着刺激时间的增加逐渐升高,这一促进作用可能与NF-κB的激活有关,在金黄色葡萄球菌感染奶牛外周血中性粒细胞引发的炎症反应过程中产生调控作用。

关键词：金黄色葡萄球菌外周血中性粒细胞核因子-κB 细胞因子奶牛

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骆驼乳清蛋白对热应激大鼠肝脏炎症及高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路的调节

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动物营养学报 2021年第10期33卷 5809-5816页

作者：乌恩吉雅杜冬华马雪妮哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 河北北方学院动物科技学院张家口075131 内蒙古骆驼研究院阿拉善750300

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白(CWP)对热应激(HS)所致大鼠肝脏炎症及相关信号通路的调节作用。选取6周龄SD大鼠,适应性饲养2周后随机分为6组,每组设置5个重复,每个重复6只,试验期22 d。正常对照组(Control组)饲喂基础饲粮;CWP对照组(CWP组... 详细信息

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白(CWP)对热应激(HS)所致大鼠肝脏炎症及相关信号通路的调节作用。选取6周龄SD大鼠,适应性饲养2周后随机分为6组,每组设置5个重复,每个重复6只,试验期22 d。正常对照组(Control组)饲喂基础饲粮;CWP对照组(CWP组)每天灌服400 mg/kg BW CWP;HS致肝脏损伤组(HS组)饲喂基础饲粮并从第15天开始每天进行2 h HS处理,连续8 d;CWP低、中、高剂量干预组(L、M和H组)每天灌服100、200和400 mg/kg BW CWP,且从第15天开始每天进行2 h HS处理,连续8 d。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)含量,免疫组织化学及免疫印迹(Western blotting)方法检测肝脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)和磷酸化核转录因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果表明:1)与HS组相比,400 mg/kg的CWP干预显著降低了HS大鼠肝脏TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8含量(P<0.05),显著提高了IL-10含量(P<0.05)。2)与HS组相比,CWP以剂量依赖方式极显著降低了HS大鼠肝脏HMGB1蛋白核转位(P<0.01),但对其总蛋白表达水平没有显著影响(P>0.05),同时极其显著降低了TLR4蛋白表达水平(P<0.001),极显著降低了p-NF-κB p65蛋白水平(P<0.01)及核转位。与Control组相比,400 mg/kg的CWP干预效果最好。由此可见,HS前灌服400 mg/kg的CWP可调节HS大鼠肝脏HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路并缓解炎症反应。

关键词：骆驼乳清蛋白大鼠肝脏炎症反应信号通路热应激

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捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药相关lncRNA的转录组学测序与分析

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生物工程学报 2020年第2期36卷 250-258页

作者：赵学亮王文龙呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建... 详细信息

分析捻转血矛线虫敏感株和耐药株中长链非编码RNA (Long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探讨lncRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制的关联性,为捻转血矛线虫耐药机理提供依据。文中对捻转血矛线虫敏感株和耐药株进行cDNA测序文库构建,使用Illumina HiSeq 4000平台进行双端测序,筛选出差异的lncRNA,基于顺式调控(cis)和反式调控(trans)对差异显著的lncRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行过Gene Ontology (GO)功能注释和KEGG Pathway富集分析,利用FPKM法估计lncRNA和mRNA的表达水平。结果表明,敏感株和耐药株候选lncRNA分别为6 377和6 356个,两个文库中筛选出168个差异显著的lncRNA,其中在敏感株中表达上调有92个,表达下调76个。筛选得到的差异显著lncRNA候选靶基因416个,这些基因共注释到641条GO terms和92条信号通路;其中富集到耐药性相关的通路有药物代谢-其他酶、药物代谢-细胞色素P450、细胞色素P450对异生素的代谢等。综上表明,部分lncRNA介导的靶基因与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关,lncRNA在捻转血矛线虫耐药性中具有潜在的重要的调节作用。探究了对于敏感虫株和耐药虫株中lncRNA的表达谱,发现了敏感虫株和耐药虫株中差异表达的lncRNA,有助于找出捻转血矛线虫如何抵抗丙硫咪唑的发生机制,为探讨捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制提供科学的依据。

关键词：捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性转录组长链非编码RNA

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烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞炎症因子及前列腺素分泌的影响

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中国畜牧兽医 2021年第11期48卷 4302-4310页

作者：魏泓毓鲍朝霞陈灰曹金山贺鹏飞内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

试验旨在探索α7烟碱乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)的高亲和力激动剂烟碱对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的兔子宫内膜上皮炎症的作用机制。分离发情后期兔的子宫内膜上皮细胞,用100 ng/mL LPS... 详细信息

试验旨在探索α7烟碱乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)的高亲和力激动剂烟碱对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的兔子宫内膜上皮炎症的作用机制。分离发情后期兔的子宫内膜上皮细胞,用100 ng/mL LPS对细胞进行炎性刺激12 h。用CCK8法检测不同浓度烟碱(5、10和20μg/mL)对细胞存活率的影响,筛选合适浓度的烟碱进行后续试验。将细胞分为对照组(CON)、LPS、LPS+烟碱、LPS+烟碱+甲基牛扁碱(MLA)(α7nAChR的特异性颉颃剂)组,通过ELISA法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、前列腺素E2(prostaglandin E_(2),PGE_(2))和前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))的含量。试验成功分离兔子宫内膜上皮细胞,且传至第5代仍保持良好的生长状态。CCK8检测结果显示,20μg/mL烟碱组细胞存活率显著降低(P<0.05),10μg/mL烟碱对细胞存活率无显著影响(P>0.05),所以选择10μg/mL烟碱进行后续试验。ELISA结果显示,与对照组相比,LPS组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE_(2)和PGF_(2α)的含量显著增加(P<0.05);与LPS组相比,LPS+烟碱组显著降低IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE_(2)和PGF_(2α)的含量(P<0.05),LPS+烟碱+MLA组炎性因子和前列腺素的含量差异不显著(P<0.05)。以上结果表明,烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞分泌IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE2和PGF2α具有下调作用,推测烟碱通过α7nAChR介导炎性因子和前列腺素分泌下调而发挥抗炎作用,该结果可为研究α7nAChR作为子宫内膜炎治疗靶点的药物选择提供参考。

关键词： α7nAChR 烟碱炎性细胞因子前列腺素

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