检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2024年第12期51卷 5479-5488页

作者：莘若兰周祉玉张嘉雯杜吉革印春生王凤雪陈小云温永俊朱真内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000 中国兽医药品监察所北京100081

【目的】筛选可高效率表达重组牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)的不同启动子/细胞组合,据此构建携带增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组LSDV,并探究其生长特性,为后续抗病毒药物的开发以及病毒复制和作用机制的研究... 详细信息

【目的】筛选可高效率表达重组牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)的不同启动子/细胞组合,据此构建携带增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组LSDV,并探究其生长特性,为后续抗病毒药物的开发以及病毒复制和作用机制的研究奠定基础。【方法】利用融合PCR方法分别将羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)启动子、LSDV启动子与eGFP基因进行连接,用以替换LSDV 005基因,构建同源重组片段,并将其分别转染至感染LSDV的非洲绿猴肾细胞(Vero)、非洲绿猴肾细胞衍生株(Vero-E6)、牛肾细胞(MDBK)、仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)、羊睾丸细胞(LT)和原代羊睾丸细胞(PLT)6种细胞中,通过荧光显微镜观察转染效果,并使用ImageJ软件统计荧光面积百分比,筛选出最优启动子/细胞组合。以筛选出的最优组合进行重组病毒转染,并检测病毒纯化效果,进一步探究重组病毒的生长特性和稳定性。【结果】在6种细胞中LSDV启动子的转染效果均优于ORFV启动子,且在PLT细胞中,LSDV启动子的荧光面积百分比最高(8.38%),与其他组细胞相比差异显著(P<0.05)。使用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组病毒LSDV-Δ005/eGFP,纯化后在倒置荧光显微镜下观察到所有病变部位均带有绿色荧光,荧光面积百分比约为50.8%。病毒的生长特性和稳定性分析结果显示,重组病毒LSDV-Δ005/eGFP在6种细胞中的病变效应以及病毒滴度随时间变化的趋势与野生毒株LSDV/Heilongjiang/2022相似,且在PLT细胞上连续传代10次eGFP基因稳定表达。【结论】利用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组LSDV时效率最佳,据此构建的重组病毒LSDV-Δ005/eGFP生长特性与LSDV野生毒株一致,经10次传代后遗传稳定性良好。

关键词：牛结节性皮肤病病毒细胞转染重组病毒生长特性

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磷酸二酯酶在金黄色葡萄球菌性乳腺炎中的表达分析

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黑龙江畜牧兽医 2024年第1期 1-9,16页

作者：张良万凯陈灰李慧萍刘淑英内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室呼和浩特010018

为了探究磷酸二酯酶(PDEs)家族成员表达与金黄色葡萄球菌性乳腺炎的关系,试验采用PCR技术检测了PDE家族除PDE6、PDE10和PDE11基因外的各亚型在奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)、小鼠乳腺上皮细胞(mMECs)及小鼠乳腺(mMG)中的表达情况,实时荧光定... 详细信息

为了探究磷酸二酯酶(PDEs)家族成员表达与金黄色葡萄球菌性乳腺炎的关系,试验采用PCR技术检测了PDE家族除PDE6、PDE10和PDE11基因外的各亚型在奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)、小鼠乳腺上皮细胞(mMECs)及小鼠乳腺(mMG)中的表达情况,实时荧光定量PCR技术检测了金黄色葡萄球菌刺激下这些PDE家族亚型的表达差异及PDE4抑制剂RO-20-1724对金黄色葡萄球菌诱导的炎症因子表达的影响。结果表明:在bMECs中,PDE3B、PDE5A、PDE8B、PDE9A基因呈高表达;在mMECs中,PDE2A基因呈高表达;而在mMG中,PDE2A、PDE3A基因呈高表达。金黄色葡萄球菌刺激8 h后bMECs中PDE1C、PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D、PDE5A、PDE8A基因的相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而PDE1B、PDE7A、PDE7B基因相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);mMECs中PDE1B、PDE1C、PDE2A、PDE3A、PDE4A、PDE4C、PDE4D、PDE5A基因相对表达量极显著升高(P<0.01),而PDE7A基因相对表达量极显著降低(P<0.01);mMG中PDE1B、PDE3A、PDE4C、PDE4D、PDE5A、PDE8A、PDE8B基因相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而PDE1C、PDE4B、PDE7B基因相对表达量极显著降低(P<0.01)。加入PDE4抑制剂RO-20-1724孵育8 h后可极显著降低金黄色葡萄球菌诱导的mMECs中IL-1β基因的相对表达量。说明乳腺上皮细胞中PDE家族的一些亚型表达存在种属差异,金黄色葡萄球菌感染后可引起不同PDE亚型表达发生改变。

关键词：乳腺炎磷酸二酯酶金黄色葡萄球菌 mRNA表达上皮细胞

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蓝刺头黄酮对小鼠血清免疫指标和抗氧化指标的影响

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饲料研究 2023年第20期46卷 89-92页

作者：王宇王涵齐雅清肖乾张宇超张馨月李舒涵林定邦内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

试验旨在研究蓝刺头黄酮对小鼠免疫指标和抗氧化指标的影响。选取80只昆明小鼠,随机分为4组,每组20个重复,每个重复1只鼠。低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠分别灌服100、200、400 mg/kg蓝刺头黄酮溶液,空白对照组灌服等量蒸馏水。试验... 详细信息

试验旨在研究蓝刺头黄酮对小鼠免疫指标和抗氧化指标的影响。选取80只昆明小鼠,随机分为4组,每组20个重复,每个重复1只鼠。低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠分别灌服100、200、400 mg/kg蓝刺头黄酮溶液,空白对照组灌服等量蒸馏水。试验期30 d。结果显示,与对照组相比,各剂量组小鼠胸腺、脾脏指数均升高(P>0.05),高剂量组小鼠胸腺指数显著高于对照组(P<0.05)。高剂量组小鼠血清中免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白A(IgA)含量显著高于对照组(P<0.05),免疫球蛋白M(IgM)含量略高于对照组(P>0.05);中剂量组小鼠血清中IgA含量显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,高剂量组、中剂量组小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)含量极显著降低(P<0.01),高剂量组小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05),中剂量组小鼠血清IL-6含量显著降低(P<0.05)。高、中、低剂量组小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著高于对照组(P<0.01);高、低剂量组小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于对照组(P<0.01),高剂量组小鼠血清丙二醛(MDA)含量极显著低于对照组(P<0.01)。研究表明,蓝刺头黄酮能够促进小鼠免疫器官发育,增强小鼠机体抗氧化能力,从而有效改善机体免疫功能,灌服400 mg/kg蓝刺头黄酮溶液效果最佳。

关键词：蓝刺头黄酮小鼠脏器指数抗氧化指标细胞因子免疫指标

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EGFRvⅢ胞外区基因重组腺病毒的构建及单域抗体的制备

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生物工程学报 2022年第9期38卷 3551-3562页

作者：张慧敏徐嘉奇程艺付山刘艳龙胡宇靖杜雅楠包福祥内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

本研究旨在构建能够表达人表皮生长因子EGFRvⅢ胞外区基因的重组腺病毒,并通过免疫骆驼构建噬菌体单域抗体库,筛选和制备EGFRvⅢ胞外区特异性单域抗体并对其进行鉴定。从人前列腺癌细胞系PC-3细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模... 详细信息

本研究旨在构建能够表达人表皮生长因子EGFRvⅢ胞外区基因的重组腺病毒,并通过免疫骆驼构建噬菌体单域抗体库,筛选和制备EGFRvⅢ胞外区特异性单域抗体并对其进行鉴定。从人前列腺癌细胞系PC-3细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增EGFRvⅢ胞外区基因,并连接pAdTrack-CMV质粒载体,转化含有pAdEasy-1的大肠杆菌(Escherichia coli)BJ5183感受态细胞,获得同源重组质粒转染HEK293A细胞,得到表达EGFRvⅢ胞外区蛋白的重组腺病毒。利用重组腺病毒免疫双峰驼,构建EGFRvⅢ胞外区特异性噬菌体单域抗体库,并以EGFRvⅢ蛋白为筛选抗原,对其进行筛选,对筛选得到的单域抗体进行诱导表达、纯化及鉴定。结果表明获得了表达EGFRvⅢ胞外区基因的重组腺病毒。构建得到的EGFRvⅢ特异性噬菌体单域抗体库的库容为1.4×109;经过3轮富集和筛选,通过噬菌体ELISA筛选出31个与EGFRvⅢ胞外区蛋白结合的阳性克隆,并对OD450值较高的重组单域抗体E14进行了表达和纯化。经ELISA鉴定,重组单域抗体E14可与EGFRvⅢ胞外区蛋白产生抗原抗体结合反应,具有较高的亲和力。说明制备的EGFRvⅢ特异性噬菌体单域抗体库具有较高的库容和多样性,且筛选得到的单域抗体具有较高的抗原活性和免疫学反应性,为今后以EGFRvⅢ为靶点的恶性肿瘤的诊断和治疗提供新的实验依据。

关键词： EGFRvⅢ EGFRvⅢ胞外区蛋白重组腺病毒单域抗体抗体库

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基于转录组学分析自然感染绵羊肺腺瘤病毒患羊肺肿瘤组织中转录差异基因及病毒致瘤机制的研究

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 185-194页

作者：段续接杨惠孙志伟杜晓悦张培梁浚哲刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高... 详细信息

绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台进行转录组学测序(RNA-Seq),采用DESeqR筛选健康绵羊与患病绵羊肺组织中的转录差异基因,并以P<0.05和log2(Fold change)≥1筛选转录显著差异基因。通过GO和KEGG数据库对转录显著差异基因进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析,并采用RT-qPCR对随机选择的10个转录显著差异基因进行验证。结果显示,与对照组相比,OPA羊肺肿瘤组织中共筛选到1 360个转录上调基因和783个转录下调基因,其中154个转录显著上调基因,212个转录显著下调基因。GO功能分析显示,转录显著差异基因显著富集在178个GO条目中,包括114个生物过程(BP)、19个细胞成分(CC)和45个分子功能(MF),主要涉及生长因子活性、复制后修复、NAD^(+)二磷酸酶活性、核苷代谢过程和鸟苷核苷酸交换因子活性等生物学功能。KEGG分析显示转录显著差异基因主要富集在细胞增殖、分化和肿瘤生成,如PI3K/Akt、MAPK和Hippo等信号通路。RT-qPCR结果显示,10个转录显著差异基因与RNA-Seq筛选结果均一致。本研究进一步通过RT-qPCR、western blot检测Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2 (MST1/2)、大肿瘤抑制因子1/2 (LATS1/2)、YES相关蛋白1/2 (YAP1)在两组绵羊肺组织样品中的转录及表达水平和YAP1的磷酸化水平(p-YAP1);采用免疫组化试验(IHC)检测Hippo信号通路中上述核心蛋白在两组绵羊肺组织中的表达及定位。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,OPA羊肺组织中MST1和YAP1 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.01、P<0.001),LATS1 mRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。Western blot结果显示,MST1/2蛋白在59 ku、YAP1和p-YAP1蛋白在65 ku、LATS1/2蛋白在140 ku处分别出现特异性条带;与对照组相比,OPA绵羊肺肿瘤组织中MST1/2和p-YAP1的表达水平显著上调(P<0.05),LATS1/2和YAP1的表达水平极显著上调(P<0.01)。IHC结果显示,在OPA组和对照组羊肺组织中MST1/2、LATS1/2及p-YAP1均定位于肺组织细胞质中,且与对照组相比,OPA组羊肺组织中上述分子均呈强阳性表达。YAP1主要定位于对照组羊肺组织细胞的胞质中,而在OPA组中YAP1主要定位于细胞核中(少量定位于细胞质中)。上述结果表明,OPA组绵羊肺组织中存在转录显著差异基因,主要参与细胞增殖、肿瘤发生和转移等过程,且主要富集在PI3K/Akt、MAPK、Hippo等信号通路,尤其是Hippo信号通路中的YAP蛋白可能通过核异位促进肿瘤的发生与发展。本研究为JSRV致瘤机制提供了新的研究基础与研究思路和方向。

关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒转录组学分析 Hippo信号通路

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捕食性真菌与植物单宁联合制剂对绵羊消化道线虫的杀灭效果

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动物医学进展 2024年第4期45卷 137-140页

作者：李倩楠马园郝陆瑶张艳妮郭志凯丁玉林杜山王瑞内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010018

为了测试捕食线虫性真菌(Duddingtonia flagrans)及植物单宁对绵羊消化道线虫的杀灭效果,在制备伊维菌素、捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans及植物单宁片剂与联合制剂的基础上,进行了绵羊消化道线虫的防控试验,并通过EPG的计数评测... 详细信息

为了测试捕食线虫性真菌(Duddingtonia flagrans)及植物单宁对绵羊消化道线虫的杀灭效果,在制备伊维菌素、捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans及植物单宁片剂与联合制剂的基础上,进行了绵羊消化道线虫的防控试验,并通过EPG的计数评测驱虫效果。结果表明,成功制备了生物制剂与药物的联合制剂,动物试验表明该制剂具有一定杀虫效果。试验发现单宁酸有一定驱线虫作用;植物单宁、驱虫药与捕食性真菌联合制剂的防治效果优于单一组分组。试验结果为绵羊消化道线虫防治提供了新方法,为植物源杀虫活性物质研究提供了参考数据。

关键词：捕食线虫性真菌 Duddingtonia flagrans 单宁酸联合制剂线虫

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捻转血矛线虫伊维菌素耐药相关长链非编码RNA及其调控功能分析

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中国农业大学学报 2023年第1期28卷 190-202页

作者：陈昕迪王腾宇刘春霞王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010010

为探究捻转血矛线虫伊维菌素耐药分子标记和关键调控元件,通过高质量的长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)表达谱对捻转血矛线虫敏感与耐药虫株lncRNA的顺式调控(Cis-regulation,cis)和竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA,... 详细信息

为探究捻转血矛线虫伊维菌素耐药分子标记和关键调控元件,通过高质量的长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)表达谱对捻转血矛线虫敏感与耐药虫株lncRNA的顺式调控(Cis-regulation,cis)和竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA,ceRNA)调控进行分析,筛选影响虫体伊维菌素耐药机制的微小调控分子。本研究利用RNA-seq技术对捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株和耐药虫株进行测序,根据生物学软件预测结果,筛选出位于蛋白编码基因上下游10 kb以内的lncRNA作为顺式调控作用的元件。对差异lncRNA进行GO和KEGG富集分析,并将显著差异的lncRNA和miRNA通过Target finder和Cytoscape v3.7.1软件建立lncRNA-miRNA调控网络和可视化分析。根据miRNA调控元件对lncRNA-circRNA-miRNA-mRNA调控网络进行连通性分析,结合耐药相关信号通路的富集结果构建lncRNA-miRNA-mRNA可视化网络,同时对随机选取的10个差异lncRNA进行qRT-PCR验证。结果显示:1)捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株和耐药虫株中筛选出5374条转录本,共预测到858个新lncRNA中有474个靶向到mRNA,且有205个lncRNA差异表达显著。其中,102个上调、103个下调。预测结果中723个lncRNA通过顺式调控作用靶向到1320个上下游基因,共匹配1566组调控关系。2)GO和KEGG富集结果显示,大量靶基因涉及到催化活性、转运活动、代谢过程、细胞膜以及代谢途径、内吞作用、甘油磷脂代谢、转运等信号通路。3)根据lncRNA-miRNA调控网络分析显示,205个显著差异lncRNA靶向结合371个miRNA,进而组成3227组调控关系且连通性较高。4)qRT-PCR验证结果显示,10个差异表达的lncRNA与RNA-seq结果表达趋势一致。综上,该研究成功获取lncRNA表达谱并构建部分耐药相关通路的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,为进一步探究lncRNA在捻转血矛线虫伊维菌素耐药调节机制中的作用提供理论依据。

关键词：捻转血矛线虫伊维菌素耐药性长链非编码RNA 竞争性内源RNA

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基于CA-TM融合蛋白的梅迪-维斯纳病毒胶体金免疫层析检测方法的建立与应用

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中国兽医科学 2024年第8期54卷 1002-1009页

作者：陈思旭包磊李慧萍张良刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白(r CA-TM)标记检测线,以鸡Ig Y抗体标记质控线,以重组链球菌蛋白(r-SPG)与鸡Ig Y用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶... 详细信息

旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒(MVV)抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白(r CA-TM)标记检测线,以鸡Ig Y抗体标记质控线,以重组链球菌蛋白(r-SPG)与鸡Ig Y用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶体金免疫层析快速检测方法,并通过特异性、敏感性、稳定性以及临床应用对其检测效果进行评价。结果显示,成功表达、纯化并获得了r CA-TM;成功建立的胶体金免疫层析法特异性试验结果显示不能检测除MVV以外的如口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体、布鲁菌等绵羊常见病原;敏感性试验结果显示最低可检出2400倍稀释的MVV阳性血清;稳定性试验结果显示在模拟6个月避光常温密封保存后的试纸条仍具有良好的检测性能。利用建立的MVV胶体金检测法和广泛应用于MVV检测的进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒对40份疑似病例血清样品进行对比检测,结果显示:用胶体金检测方法检出MVV抗体阳性血清17份,阴性血清23份;用进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出阳性血清16份,阴性血清24份,二者相比整体符合率为97.5%。综上,成功建立了MVV胶体金免疫层析快速检测方法,该方法研制的检测试纸条性能良好、便于储存、适合现场快速检测和批量检测,对MVV的监测、防控有重要意义,为内蒙古地区MVV的净化提供了新的检测方案。

关键词：梅迪-维斯纳病毒原核表达融合蛋白胶体金免疫层析

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基于DIA技术的多药耐药性捻转血矛线虫蛋白质组学分析

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中国兽医杂志 2025年第5期61卷 65-72页

作者：李炎夫贾晓晴马梅清杜山焦万明马园郝陆瑶张艳妮李倩楠郭志凯丁玉林陆静王瑞内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010010 内蒙古阿拉善盟额济纳旗动物疫病预防控制中心内蒙古额济纳旗735400

为探索驱虫药耐药性产生的机制,本试验对捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的第3期幼虫(L3)以伊维菌素、阿苯达唑和左旋咪唑药物进行处理,采用数据非依赖性采集(DIA)蛋白质组测序技术对捻转血矛线虫L3经药物作用前后的蛋白质进行差异... 详细信息

为探索驱虫药耐药性产生的机制,本试验对捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的第3期幼虫(L3)以伊维菌素、阿苯达唑和左旋咪唑药物进行处理,采用数据非依赖性采集(DIA)蛋白质组测序技术对捻转血矛线虫L3经药物作用前后的蛋白质进行差异表达分析,以筛选表达差异的多药耐药性相关蛋白质。结果显示,共鉴定出1 888个差异表达蛋白质,其中63个与多药耐药性相关;进一步的深入分析揭示,有36个蛋白质的表达差异显著(P <0.05),而25个是捻转血矛线虫特有的、与耐药性相关的差异表达蛋白质。基因本体论(GO)分析结果显示,共有60个差异表达耐药性蛋白质被归类于生物学领域的76个分支中;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析结果显示,有46个表达水平不同的蛋白质富集到脂质代谢和内分泌系统等75条信号通路中。综合分析发现,有5个捻转血矛线虫特有的耐药性蛋白质表达水平差异显著,分别为含有UDP-葡萄糖醛基转移酶结构域的部分蛋白质、抗原H11、免疫球蛋白v组和i组、含有酪氨酸蛋白激酶(PTK)结构域的蛋白质及含有致命巨幼虫同源结构域2的蛋白质,这些蛋白质均参与重要的生物学过程和关键代谢通路。本试验所获结果为揭示差异表达蛋白质与捻转血矛线虫脂类代谢、内分泌系统和多药耐药性的关系提供了基础数据,对探明捻转血矛线虫多药耐药性产生的机制具有重要意义。

关键词：多药耐药性捻转血矛线虫数据非依赖性采集(DIA) 蛋白质组学耐药性相关蛋白质

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山羊副结核病的诊断和分型鉴定

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中国兽医杂志 2024年第5期60卷 56-62页

作者：孟维康赵维宏李梦园马薇丁玉林吉林台赵丽刘永宏内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010000 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010000 国家乳业技术创新中心内蒙古呼和浩特010000

为了对1起山羊感染副结核分枝杆菌(MAP)的病例进行诊断,并对其感染的MAP菌株进行分型鉴定,本试验通过病史调查、尸体剖检观察和组织病理学检查对其进行初步诊断,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增MAP特异性IS900和IS1311基因,并在测序后进行... 详细信息

为了对1起山羊感染副结核分枝杆菌(MAP)的病例进行诊断,并对其感染的MAP菌株进行分型鉴定,本试验通过病史调查、尸体剖检观察和组织病理学检查对其进行初步诊断,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增MAP特异性IS900和IS1311基因,并在测序后进行菌株鉴定、序列分析和IS900基因系统进化树构建。结果显示,病羊极度消瘦,血液稀薄;空肠和回肠肠壁增厚、黏膜面形成皱襞呈脑回样;肠系膜淋巴结肿大,呈灰黄色,切面可见灰白色病灶。肠道组织苏木素-伊红染色可见空肠、回肠黏膜固有层和黏膜下层有大量的上皮样细胞和淋巴细胞增生;肠系膜淋巴结皮质区可见大量上皮样细胞增生,副皮质区有淋巴细胞增生;抗酸染色可见聚集在上皮样细胞内红染的小杆菌。PCR扩增IS900和IS1311基因产物均与目的基因片段预期大小一致;基因序列分析和IS900基因系统进化树显示,与本试验所得分离株同源性最高的参考序列均为Ⅱ型MAP,且同源性均高于98%。综上所述,该羊场发病羊确诊患副结核病,感染菌株为Ⅱ型MAP。本试验为副结核病的诊断和防治提供了参考。

关键词：副结核病山羊诊断基因分型

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