检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 345-353页

作者：孙连阳崔浩董晓楠康佳美丁玉林习娟杨洋贺志雄刘永宏赵丽内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010000 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010000 内蒙古自治区市场监督管理局综合保障中心呼和浩特010000 内蒙古自治区鄂尔多斯市检验检测中心鄂尔多斯017010 内蒙古自治区呼和浩特市回民区动物疫病防疫检疫中心呼和浩特010000

目的对采自内蒙古的全沟硬蜱进行形态学和分子生物学鉴定,并通过人工饲养了解全沟硬蜱的发育生活史和生物学特性。方法采集自内蒙古自治区东北部的蜱,利用3D超景深显微系统进行形态学鉴定。提取蜱DNA,PCR扩增线粒体12S rDNA和16S rDN... 详细信息

目的对采自内蒙古的全沟硬蜱进行形态学和分子生物学鉴定,并通过人工饲养了解全沟硬蜱的发育生活史和生物学特性。方法采集自内蒙古自治区东北部的蜱,利用3D超景深显微系统进行形态学鉴定。提取蜱DNA,PCR扩增线粒体12S rDNA和16S rDNA序列。取阳性扩增产物测序后进行BLAST比对,采用邻接法构建蜱线粒体12S rDNA和16S rDNA的系统进化树。以昆明小鼠为供血动物,在温度(25±3)℃、相对湿度70%~90%条件下对蜱进行人工饲养,观察蜱生活史各阶段的时间等生物学特性。卵孵化实验随机选取10只饱血雌成蜱所产的卵各30枚,观察其孵化情况,并计算孵化率。幼蜱蜕皮实验随机选取饱血幼蜱200只,记录其蜕皮情况,并计算蜕皮率。若蜱蜕皮实验随机选取饱血若蜱100只,分为10组,每组10只,观察其蜕皮情况,并计算蜕皮率。将各阶段发育成功率统计后计算得出其综合发育率。结果形态学鉴定结果显示,采集的雌性和雄性硬蜱均符合硬蜱属的形态。PCR扩增和测序结果显示,硬蜱DNA扩增出长度为320 bp的12S rDNA序列和长度为455 bp的16S rDNA序列。BLAST序列比对分析显示,雌蜱和雄蜱线粒体12S rDNA序列与全沟硬蜱(GenBank:MF095801.1和JF758624.1)序列相似性最高,分别为99.69%和99.09%。雌蜱和雄蜱线粒体16S rDNA序列与全沟硬蜱(GenBank:MH790201.1和MH790200.1)的序列相似性最高,分别为99.75%和99.50%。进化树分析结果显示,雌蜱和雄蜱均与全沟硬蜱序列聚于同一分支上。人工饲养全沟硬蜱的生活史观察结果显示,饱血雌蜱产卵期为12~17 d,平均产卵期为14.6 d,总计产卵数约1 510~1 970枚/只,平均产卵数约1 817枚/只,日均产卵量约124枚/只;卵经21~28 d孵化为幼蜱,平均孵化期为24.8 d,孵化率为89.7%(269/300);幼蜱吸血期为3~5 d,平均吸血期为4.5 d,饱血幼蜱经18~25 d蜕皮为若蜱,平均蜕皮期为22.7 d,蜕皮率为86.5%(173/200);若蜱吸血期为5~8 d,平均吸血期为6.3 d,饱血若蜱经120~170 d蜕皮为成蜱,平均蜕皮期为157.2 d,蜕皮率为92.0%(92/100);从饱血雌成蜱开始产卵,发育至下一代成蜱平均需要241.6 d,综合发育率为71.4%。结论通过形态学和分子生物学鉴定,采自内蒙古的硬蜱为全沟硬蜱。人工饲养获得全沟硬蜱从卵、幼蜱、若蜱、成蜱的生活史及其生物学特征。

关键词：全沟硬蜱形态学鉴定分子生物学鉴定人工饲养生活史

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内蒙古草原革蜱的鉴定、人工饲养及生活史观察

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西北农业学报 2023年第6期32卷 835-843页

作者：马懿敏周文凯杨波韩文雄贺泓凯王扬孙晶张媛赵维宏张占胜柴海亮王利峰刘永宏赵丽内蒙古农业大学兽医学院家畜病理学实验室呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017000 内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司呼和浩特011517

为了解内蒙古草原革蜱的发育生活史,同时为草原革蜱及其蜱传病的研究提供可控、充足的试验材料。对采自内蒙古地区的蜱进行形态学和分子生物学鉴定,以小鼠为唯一供血动物,在实验室自然光照条件下进行人工饲养,观察记录该蜱的生活史周期... 详细信息

为了解内蒙古草原革蜱的发育生活史,同时为草原革蜱及其蜱传病的研究提供可控、充足的试验材料。对采自内蒙古地区的蜱进行形态学和分子生物学鉴定,以小鼠为唯一供血动物,在实验室自然光照条件下进行人工饲养,观察记录该蜱的生活史周期及生物学特性。结果表明,形态学结合分子生物学方法鉴定为草原革蜱;饱血雌蜱产卵期为13~18 d,日均产卵量约219枚,总产卵量达2680~4050枚;蜱卵经25~29 d孵化为幼蜱,孵化率达到93.33%;幼蜱吸血期为4~6 d,蜕化期为4~15 d,蜕化率达到80.89%;若蜱吸血期为4~8 d,蜕化期为12~21 d,蜕化率达到68.10%。说明成功建立内蒙古草原革蜱实验室人工饲养方法,明确从饱血雌蜱产卵至下一代成蜱平均需90.66 d。

关键词：草原革蜱形态学鉴定分子生物学鉴定人工饲养生活史

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一例羊驼肺炎型巴氏杆菌病的诊断

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黑龙江畜牧兽医 2023年第8期 86-88,138页

作者：冯心如智宇郑秉武高雅黄金田付胜丁玉林王金玲内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院呼和浩特010031 呼和浩特市动物园呼和浩特010050

2021年8月27日内蒙古自治区大青山野生动物园1只成年雌性羊驼突然发病,口鼻流出少量泡沫样液体,呼吸困难,体温高达41℃,于发病1 d后死亡。死亡羊驼尸体角弓反张,剖检可见浆液纤维素性胸膜炎,胸腔积有大量淡黄色透明胸水,肺胸膜和胸壁胸... 详细信息

2021年8月27日内蒙古自治区大青山野生动物园1只成年雌性羊驼突然发病,口鼻流出少量泡沫样液体,呼吸困难,体温高达41℃,于发病1 d后死亡。死亡羊驼尸体角弓反张,剖检可见浆液纤维素性胸膜炎,胸腔积有大量淡黄色透明胸水,肺胸膜和胸壁胸膜表面附着较多丝网状、片状黄白色的纤维素性渗出物;肺尖叶、心叶和副叶严重实变,表面呈暗红色,肺小叶间质轻度增宽,肺脏切面呈现红白相间的大理石样纹理;其他器官组织表现以出血斑点为特征的败血症变化。特征性病理组织学变化为典型的纤维素性肺炎、出血性淋巴结炎。通过细菌的分离培养,在血琼脂培养基上生长出较多的银白色圆形小菌落,革兰氏染色可见单一、两极浓染的革兰氏阴性小杆菌,与巴氏杆菌的形态一致。分离菌株16S rRNA基因PCR扩增获得大小为1414 bp的目的片段,与GenBank中的多杀性巴氏杆菌败血亚种(Pasteurella multocida *** strain CCUG 17977,GenBank登录号为AF294411)核苷酸相似性最高,为90.6%。说明该羊驼感染了巴氏杆菌。

关键词：羊驼病理组织学巴氏杆菌纤维素性肺炎 16S rRNA

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内蒙古地区神经致病型马疱疹病毒1型的分离与鉴定

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中国预防兽医学报 2024年第6期46卷 636-640页

作者：冯心如刘佳利李静丁玉林王文龙高娃张迪王金玲内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010010 内蒙古自治区科学技术厅内蒙古呼和浩特010000 河套学院医学系/内蒙古自治区蜱媒人畜共患传染病重点实验室内蒙古巴彦淖尔015000 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站内蒙古通辽028000

为调查内蒙古四子王旗某马场马流产是否由马疱疹病毒1型(EHV-1)感染导致,本研究采集该场马流产胎儿肝、脾等组织,将组织研磨上清液接种MDBK细胞,盲传5代,待出现细胞病变时收集细胞及培养上清,通过gB基因的PCR及透射电镜对分离病毒进行鉴... 详细信息

为调查内蒙古四子王旗某马场马流产是否由马疱疹病毒1型(EHV-1)感染导致,本研究采集该场马流产胎儿肝、脾等组织,将组织研磨上清液接种MDBK细胞,盲传5代,待出现细胞病变时收集细胞及培养上清,通过gB基因的PCR及透射电镜对分离病毒进行鉴定,采用2代测序技术对分离病毒全基因组测序,并进行分离病毒gB基因的同源性及遗传进化分析。采用SnapGene6.0.2软件分析分离病毒ORF30基因及其编码氨基酸序列。结果显示,组织上清液接种MDBK细胞并盲传5代后,细胞出现典型的圆缩、融合、脱落和聚堆成葡萄串状等细胞病变特征;EHV-1 gB基因的PCR检测结果呈阳性;电镜观察可见疱疹病毒典型的形态特征,表明分离到1株EHV-1,命名为EHV-1-NM2021。同源性分析结果显示:分离株EHV-1-NM2021 gB基因序列与国内外EHV-1参考株gB基因序列的同源性为97.7%~100%;构建gB基因的系统发育进化树,结果显示该基因与EHV-1德国株(RacL11)、澳大利亚株(438-77)处于同一进化分支,亲缘关系较近。此外,ORF30基因序列及氨基酸序列比对结果显示,EHV-1-NM2021 ORF30基因nt2254为鸟嘌呤(G),aa752为天冬氨酸(D),该分离株为神经致病型病毒。本研究首次在内蒙古鉴定并分离到神经致病型EHV-1,丰富了国内EHV-1的流行病学数据库,为EHV-1感染所导致马流产的防控奠定了研究基础。

关键词：马流产神经致病型马疱疹病毒1型遗传进化

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牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白原核表达及间接ELISA检测方法研究

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中国动物传染病学报 2021年第2期29卷 22-27页

作者：吴倩张建华郝永清内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

本研究以牛传染性鼻气管炎gE基因的原核表达产物为抗原建立检测IBRV抗体间接ELISA检测方法。通过DANStar比对分析牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白序列,通过亲和层析对重组表达产物进行纯化,经Western blot检测证明重组表达产物能被IBRV标准... 详细信息

本研究以牛传染性鼻气管炎gE基因的原核表达产物为抗原建立检测IBRV抗体间接ELISA检测方法。通过DANStar比对分析牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白序列,通过亲和层析对重组表达产物进行纯化,经Western blot检测证明重组表达产物能被IBRV标准性鼻气管炎gE蛋白长度为500 bp的特异性肽序列,随后构建了pCold-TF-gE原核表达体系,并用Ni-IDA进行纯化。以纯化鉴定后的表达产物为抗原(1 μg/mL)包被酶标板制备多克隆抗体血清,并建立检测牛传染性鼻气管炎血清抗体间接gE-ELISA方法。结果显示:阳性OD_(450)值为0.369,组内组间重复性小于5%,敏感性强,与口蹄疫等阳性血清均无交叉反应且特异性达95%。利用建立的gE-ELISA方法,同时和IDEXX(IBR)抗体检测试剂盒对200份临床阳性血清进行检测比较,符合率均达到95%。该方法特异敏感高效,可用于牛传染性鼻气管炎血清抗体的检测。

关键词：牛传染性鼻气管炎 gE基因克隆表达间接ELISA

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BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-PCR方法的建立与应用

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黑龙江畜牧兽医 2021年第19期 84-89,152页

作者：彭雪松温永俊关平原徐晓静希尼尼根张志丹张七斤周伟光内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)和区分不同基因型的BVDV,试验根据GenBank中BVDV的3种基因型5′端非翻译区(UTR)设计2对特异性引物和3个探针,优化引物和探针浓度,建立BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-... 详细信息

为了快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)和区分不同基因型的BVDV,试验根据GenBank中BVDV的3种基因型5′端非翻译区(UTR)设计2对特异性引物和3个探针,优化引物和探针浓度,建立BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。采集28份犊牛鼻拭子和40份粪便拭子样品,应用建立的方法进行检测,并与普通RT-PCR方法进行比较。结果表明:扩增体系经优化,BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3的最佳引物浓度分别为350,350,200 nmol/L,最佳探针浓度分别为400,550,350 nmol/L,试验建立的三重实时实光定量RT-PCR方法从多种致牛腹泻和呼吸系统疾病的病原中只检测到BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3;同时检测到的BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3的最低检出量分别为1.0×10^(1),1.0×10^(2),1.0×10^(1) copies/μL,而普通RT-PCR方法的最低检出量分别为1.0×10^(2),1.0×10^(5),1.0×10^(3) copies/μL;组内变异系数和组间变异系数均小于5.0%。应用该方法从采集的68份临床样品中检出17份BVDV-1阳性样品,而普通RT-PCR只检测出12份BVDV-1阳性样品。说明试验建立的BVDV基因分型三重实时荧光定量RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高和稳定性好等优点,可用于BVDV的3种基因型的快速鉴别。

关键词：牛病毒性腹泻病毒基因分型敏感性特异性稳定性

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厚垣普可尼亚菌发酵液中胞外酶的活性分析及其杀虫毒力测定

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中国兽医科学 2023年第9期53卷 1158-1165页

作者：郝陆瑶焦万明尹衍峰马园张艳妮李倩楠符江涛贾晓晴訾星月马俊杰郭志凯丁玉林杜山陆静王瑞内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010010 内蒙古阿拉善盟额济纳旗动物疫病预防控制中心内蒙古额济纳旗735400 济南市长清区畜牧兽医事业发展中心山东济南250399

为研究卵寄生性真菌——厚垣普可尼亚菌(***)发酵液中胞外酶的活性及其杀虫作用,使用不同营养成分组成的液体培养基及诱导物对***进行培养和诱导,测定***发酵液中蛋白质含量、胞外水解酶活性及发酵液对秀丽新杆线虫及马副蛔虫卵的毒性作... 详细信息

为研究卵寄生性真菌——厚垣普可尼亚菌(***)发酵液中胞外酶的活性及其杀虫作用,使用不同营养成分组成的液体培养基及诱导物对***进行培养和诱导,测定***发酵液中蛋白质含量、胞外水解酶活性及发酵液对秀丽新杆线虫及马副蛔虫卵的毒性作用,确定产生胞外蛋白质和具杀虫作用物质的最适液体培养基与诱导物种类。结果显示,马副蛔虫卵诱导的枸橼酸培养基发酵液中蛋白质种类最丰富且质量浓度最高,可达3.37±0.03 g/L,蛋白酶活性(2.00±0.06 U/m L)与磷酸酶活性[酸性磷酸酶(28.58±1.30 U/L)、碱性磷酸酶(12.68±1.57 U/L)]均较强,对秀丽新杆线虫的致死率为73.91%±1.72%,同时对马副蛔虫卵的孵化也具有一定抑制作用,相对孵化抑制率可达64.06%±2.46%,均显著高于对照组。结果表明,不同培养基及诱导物对***的代谢过程产生显著影响,导致其分泌的蛋白质种类不同,其质量浓度和酶活性均有显著区别(P<0.05)。发酵液不仅具有杀线虫活性,还有良好的抑制虫卵孵化作用。上述结果为进一步研究卵寄生性真菌的杀虫作用与机理提供了重要参考依据。

关键词：卵寄生性真菌厚垣普可尼亚菌胞外蛋白质胞外水解酶活性杀虫作用

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布鲁菌S2疫苗株GL_0002189基因原核表达及生物信息学分析

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当代畜禽养殖业 2023年第3期43卷 17-22页

作者：王文龙红梅呼和巴特尔内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010010

为区分羊种布鲁菌S2疫苗株为疫苗免疫还是自然感染,本课题组对布鲁菌S2疫苗株进行了测序,将测序得到的基因与已在NCBI数据库中提交的布鲁菌基因组进行比对,找出了布鲁菌S2(猪种)疫苗株特有的GL_0002189基因,再对GL_0002189基因进行克隆... 详细信息

为区分羊种布鲁菌S2疫苗株为疫苗免疫还是自然感染,本课题组对布鲁菌S2疫苗株进行了测序,将测序得到的基因与已在NCBI数据库中提交的布鲁菌基因组进行比对,找出了布鲁菌S2(猪种)疫苗株特有的GL_0002189基因,再对GL_0002189基因进行克隆﹑表达及验证,并采用布鲁菌BP26基因当作阳性对照。同时对GL_0002189基因进行了生物信息学分析。结果发现,以绵羊S2疫苗免疫的血清当作抗体检测,重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)与空菌BL21(DE3)比较,分别在32 kDa和29 kDa处出现条带。结果表明重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)能够与布鲁菌S2免疫血清中的抗体特异性结合,且具有很好的免疫原性。另外,重组蛋白BP26与自然感染的血清发生特异性反应,而重组蛋白GL_0002189与自然感染的血清不发生特异性反应,因此GL_0002189基因在布鲁菌S2疫苗株中存在,而在羊种布鲁菌自然流行株中不存在。通过生物信息学分析发现,GL_0002189基因编码蛋白分子量约为24.1 kDa,含有1个660 bp的完整的开放阅读框,编码219个氨基酸,无跨膜区,有5个抗原表位。由此表明,本研究中的GL_0002189抗原可用于布鲁菌S2疫苗免疫与羊种布鲁菌自然感染的鉴别诊断,为布鲁菌病的诊断提供了理论支持。

关键词：布鲁氏菌 GL_0002189基因原核表达鉴别诊断

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基于网络药理学与分子对接方法探讨附子治疗大肠杆菌感染型犊牛腹泻的作用机制

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中国畜禽种业 2024年第6期20卷 94-102页

作者：钱英红张静赵俊利刘向敏吉鹏华王超张兴夫内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010010 内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

该文通过TCMSP数据库对附子的主要化学成分进行筛选并确定其主要成分的潜在靶点,于GeneCard和Dis-GeNET查找犊牛腹泻的相关靶点取交集,得到附子防治奶牛子宫内膜炎的关键靶点,并构建蛋白互作(PPI)网络;通过DAVDE数据库对核心靶点进行GO... 详细信息

该文通过TCMSP数据库对附子的主要化学成分进行筛选并确定其主要成分的潜在靶点,于GeneCard和Dis-GeNET查找犊牛腹泻的相关靶点取交集,得到附子防治奶牛子宫内膜炎的关键靶点,并构建蛋白互作(PPI)网络;通过DAVDE数据库对核心靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析;通过AutoDock软件对分子和靶点对接,并运用Py MOL对分子结果进行可视化处理。结果表明:从该中药复方中筛选出有效活性成分主要包括石防风素、苯甲酰萘普林、新糖尿酸B、 11,14-二十碳二烯酸等,这些药物成分主要作用靶点426个,犊牛腹泻的相关靶点1330个。附子防治奶牛乳房炎有136个预测靶点,主要包括白细胞介素6、胱天蛋白酶3、表皮生长因子受体、核激素受体、基质金属蛋白激酶9等。对上述136个靶点进行富集分析,发现与炎症反应、血管内皮生长因子、 ERK1和ERK2级联的正调控等生物过程;一氧化氮合酶活性、类固醇的结合、锌离子结合等细胞组分;细胞外基质、胞浆和细胞核等分子功能,以及PI3K-Akt信号通路、内分泌失调、 TNF信号通路、 IL-17信号通路和癌症等通路相关。分子对接结果表明复方双黄连主要活性成分Deltoin和Benzoylnapelline均与关键靶点IL-6、CASP3具有良好的连接活性。可见,附子可通过多成分、多靶点和多通路共同来防治大肠杆菌引起的犊牛腹泻。

关键词：中药网络药理学分子对接犊牛腹泻作用机制

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1株阿尔巴斯绒山羊源产气荚膜梭菌的毒素型鉴定和16S rRNA基因的遗传进化分析

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黑龙江畜牧兽医 2022年第6期 68-71,76页

作者：李琦白伟琴李杰李宏赵利军孟克訾占飞格日勒图吉林台王金玲卡楚拉内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010010 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 伊金霍洛旗动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017200

为了了解1例经诊断为产气荚膜梭菌病而死亡的阿尔巴斯种绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型和16S rRNA基因的遗传进化特性,试验设计5对特异性毒素引物,采用PCR方法进行毒素型的鉴定,对16S rRNA基因扩增和测序,对测序结果进行遗传进化分... 详细信息

为了了解1例经诊断为产气荚膜梭菌病而死亡的阿尔巴斯种绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型和16S rRNA基因的遗传进化特性,试验设计5对特异性毒素引物,采用PCR方法进行毒素型的鉴定,对16S rRNA基因扩增和测序,对测序结果进行遗传进化分析。结果表明:只有α毒素引物扩增出约475 bp长的目的条带,阿尔巴斯绒山羊梭菌性肠炎的致病菌毒素为α毒素,为A型产气荚膜梭菌,其16S rRNA基因序列与天津地区产气荚膜梭菌(登录号为KP944160.1)位于同一分支,亲缘关系最近,核苷酸相似性为98.53%。说明此次阿尔巴斯绒山羊感染的产气荚膜梭菌的毒素型是A型,且鉴定菌株与天津地区产气荚膜梭菌(登录号为KP944160.1)起源于共同的祖先。

关键词：阿尔巴斯绒山羊产气荚膜梭菌毒素型 16S rRNA基因遗传进化

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